[논문]느타리버섯 균상재배 중 배지내 미생물상의 변화 및 분포양상

이찬중; 윤형식; 전창성; 정종천; 한혜수

doi:10.4489/kjm.2009.37.2.150

느타리버섯 균상재배 중 배지내 미생물상의 변화 및 분포양상
Changes and Distributional Pattern of Microflora in Cotton Waste Media of Oyster Mushroom Cultivation 원문보기

한국균학회지 = The Korean journal of mycology, v.37 no.2, 2009년, pp.150 - 154

이찬중 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) , 윤형식 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) , 전창성 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) , 정종천 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) , 한혜수 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과)

Abstract ▼ AI-Helper

The diversity of microflora according to growth stage of Pleurotus ostreatus and the correlation between microbe and medium fermentation were investigated. In farmhouse I, the aerobic bacteria and fungi as longer of growing period were increased. And, thermophilic bacteria and fluorescent Pseudomonas sp. showed high density at the early stage of spawn inoculation. The thermophilic actinomycetes were distributed evenly during all the growing period, but mesophilic actinomycetes were not observed. In farmhouse II, thermophilic actinomycetes were not observed in fermented medium and density of fungi were suddenly increased at 60 days after spawn inoculation. And also, mushrooms can hardly be harvested due to Penicillium spp. After medium fermentation, density of aerobic bacteria, thermophilic bacteria, and fluorescent Pseudomonas sp. was higher at farmhouse I than those of farmhouse II. In farmhouse I, Bacillus sp. and Pseudomonas sp. dominated at early stage of mushroom growth but as time goes by, density of Bacillus sp. was higher than the others. And also, the kind of microbe showed a few at early stage of mushroom growth but increased as time goes by. In farmhouse II, Bacillus sp. was dominated at early stage of mushroom growth. And the growth of Bacillus sp. and Pseudomonas sp. showed intersect aspect each other in the farmhouse I but Bacillus sp. dominated during all growth periods in the farmhouse II.

주제어

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문제 정의

따라서 본 시험은 정상적으로 버섯재배를 한 농가(농가I)와 버섯재배에 실패한 농가(농가n> 선정하여 균싱내 미생물 상의 다양^을 구명하고 이들 미생물과 배지발효와의 연관 관계를 구명하고자 수행하였다.
있다. 따라서 본 시험은 정상적으로 수확을 하는 농가 (농가I)와 수확을 거의 하지 못하는 농가(농가II)를 선택하여 이들 농가의 재배과정 중 균상내 미생물상의 변화와 분리 미생물의 특성을 조사함으로써 버섯 발이와 생육의 문제점을 밝히고자 실험을 수행하였다. 농가I의 경우 균상내 배지의 미생물상은 생육기간이 길어질수록 호기세균 및 사상균의 수가 증가흐}였고, 내열성세균 및 형광성 Pseudomonas 속은 종균 접종 초기에 높은 밀도를 보였다.

제안 방법

폐상퇴비내 존해하는 미생물 수는 3개의 평판배지에 나타난 colony를 계수한 후 평균값을 콜로니형성단위 (colony forming unit, cfu)로 표시하였다. 배양은 세균과 곰팡이는 28℃항온기에서 2~7일간 배양하면서 계수하였고, 방선균의 경우 중온성 (28℃) 과고온성 (45℃)으로 나누어 항온기에서 7일간 배양하면서 계수하였다.
조사하였다(RDA, 2000). 시료 10 g을 멸균수 90 ml에 첨가하여 진탕배양기에서 200rpm으로 30분간 진탕한 후 102~107 배가 되도록 희석액을 만들어 이를 미생물수 측정에 사용하였다. 호기성 세균은 R2A agattKim and Whang, 2002), 사상균은 Streptomycin-rose bengal agar (Martin, 1950), 중온성 방선균은 Starch casein agar (Ktister and Williams, 1966)을 사용하였고, 고온성 빙성균은 1/2 Nutrient aga배지 (1/2 NA, 0.

대상 데이터

2% casein, 10 g agar)를 사용하였다. Pseudomonas 속은 P-1 agar(Kato and Itho, 1983)를 각각 선택배지로 사용하였다. Bacillus속 검줄을 위해서는 희석액을 80℃ 열수에서 1Q분간 처리 후 Yeast glucose agar배지(James, 1958)에 접종하여 배양하였다.
시험재료는 균상 느타리버섯(Frez/mZas ostreatus)을 재배하는 농가 중 버섯을 정상적으로 재배한 농가(농가!)와 버섯재배에 실패한 농가(농가II)로부터 버섯생육시기별 균상 내 배지를 채취하여 실험에 이용하였다.
시료 10 g을 멸균수 90 ml에 첨가하여 진탕배양기에서 200rpm으로 30분간 진탕한 후 102~107 배가 되도록 희석액을 만들어 이를 미생물수 측정에 사용하였다. 호기성 세균은 R2A agattKim and Whang, 2002), 사상균은 Streptomycin-rose bengal agar (Martin, 1950), 중온성 방선균은 Starch casein agar (Ktister and Williams, 1966)을 사용하였고, 고온성 빙성균은 1/2 Nutrient aga배지 (1/2 NA, 0.2% casein, 10 g agar)를 사용하였다. Pseudomonas 속은 P-1 agar(Kato and Itho, 1983)를 각각 선택배지로 사용하였다.

이론/모형

세균의 동정을 위해서는 16S rRNA 유전자 염기서열분석을 이용하였다 (Lane, 1991). 16S rRNA 유전자는 범용적인 프라이머 fDl과 rP2 (William et al., 1991)를 이용하여 증폭하였다.
느타리버섯 균상배지내 미생물의 밀도는 희석평판법으로 조사하였다(RDA, 2000). 시료 10 g을 멸균수 90 ml에 첨가하여 진탕배양기에서 200rpm으로 30분간 진탕한 후 102~107 배가 되도록 희석액을 만들어 이를 미생물수 측정에 사용하였다.
순수분리한 미생물은 R2A배지에서 2일 동안 배양한 후 균체를 모아서 20%(v/v) 글리세롤을 포함하는 -70℃에 보존하면서 검정용 시료로 사용하였다. 세균의 동정을 위해서는 16S rRNA 유전자 염기서열분석을 이용하였다 (Lane, 1991). 16S rRNA 유전자는 범용적인 프라이머 fDl과 rP2 (William et al.

성능/효과

고온성 방선균 은전 생육기간 고른 분포를 보였지만 중온성 방선균은 재배과정 중 존재하지 않았다 (Table 1). 그러나 농가Ⅱ의 경우 발효 후 고온성 방선균은 거의 없었고, 종균 접종 60일 후 사상균의 밀도가 급격히 급증하였으며, 특히 푸른곰팡이 병의 발생에 의해 버섯 수확을 거의 할 수 없었다 (Table 2). 배지 발효 후 두 농가의 재배배지에서 호기성세균, 고온성세균, 형광성 Pseudomonas속의 밀도는 농가II에서보다 농가 I에서 훨씬 높았다.
. 그러나 실패한 농가(농가 II)의 경우 생육초기에 Pseudomonas속은 거의 없었고, 대부분 Bacillus속이 우점하였으며, 후기로 갈수록 Dyellae 과 Chitinophage속 등이 우점하였다. 미생물의 종류도 농가I 과 달리 생육초기부터 다양한 종류의 균이 분포하였다.
따라서 본 시험은 정상적으로 수확을 하는 농가 (농가I)와 수확을 거의 하지 못하는 농가(농가II)를 선택하여 이들 농가의 재배과정 중 균상내 미생물상의 변화와 분리 미생물의 특성을 조사함으로써 버섯 발이와 생육의 문제점을 밝히고자 실험을 수행하였다. 농가I의 경우 균상내 배지의 미생물상은 생육기간이 길어질수록 호기세균 및 사상균의 수가 증가흐}였고, 내열성세균 및 형광성 Pseudomonas 속은 종균 접종 초기에 높은 밀도를 보였다. 고온성 방선균 은전 생육기간 고른 분포를 보였지만 중온성 방선균은 재배과정 중 존재하지 않았다 (Table 1).
그러나 농가Ⅱ의 경우 발효 후 고온성 방선균은 거의 없었고, 종균 접종 60일 후 사상균의 밀도가 급격히 급증하였으며, 특히 푸른곰팡이 병의 발생에 의해 버섯 수확을 거의 할 수 없었다 (Table 2). 배지 발효 후 두 농가의 재배배지에서 호기성세균, 고온성세균, 형광성 Pseudomonas속의 밀도는 농가II에서보다 농가 I에서 훨씬 높았다. 이는 배지가 고온발효과정을 거치면서 유해 미생물이 사멸하고 고온성세균인 Bacillus속 등이 우점하게 되었을 것으로 판단되며, Bacillus속과 형광성 Pseudomonas 속은 식물병원균의 길항균이나 식물의 생장촉진 미생물로 많이 사용되고 있으므로 이들 미생물의 밀도가 높다는 것은 버섯병원균의 억제 및 버섯의 생육에 많은 영향을 줄 것으로 판단된다.
본 시험은 느티리버섯 재배 농가의 균상내 미생물상의 다양성을 구명하고 이들 미생물과 배지발효와의 연관관계를 구명하고자 실시하였디' 정상적으로 수확하는 농가(농가I)의 경우 균상내 배지의 미생물상은 생육기간이 길어질수록 호기 세균 및 사상균의 수가 증가하였고, 내열성세균 및 형광성 Pseudomonas속은 종균 접종 초기에 높은 밀도를 보였다. 고온성 방선균은 전 생육기간 고른 분포를 보였지만 증 온성 방선균은 재배괴정 증 존재하지 않았디, .
배지 발효 후 두 농가의 재배배지에서 호기성세균, 고온성세균, 형광성 Pseudomonas속의 밀도는 농가II에서보다 농가 I에서 훨씬 높았다. 이는 배지가 고온발효과정을 거치면서 유해 미생물이 사멸하고 고온성세균인 Bacillus속 등이 우점하게 되었을 것으로 판단되며, Bacillus속과 형광성 Pseudomonas 속은 식물병원균의 길항균이나 식물의 생장촉진 미생물로 많이 사용되고 있으므로 이들 미생물의 밀도가 높다는 것은 버섯병원균의 억제 및 버섯의 생육에 많은 영향을 줄 것으로 판단된다. 부숙되지 않은 퇴비에서 방선균의 증식속도는 세균이나 균류보다 느리며 중온성 방선균의 수는 퇴비화 과정에서 일정한 경향을 보이지 않고 퇴비더미의 바깥층에 존재하기 때문에 산소공급이 충분치 않거나 잦은 뒤집기로 바깥층이 불안정하면 증식이 억제된다고 하였다(Finstein and Morris, 1975).

후속연구

5, 6). 그러나 Paenibacilhts속은 분포양상에 있어 특 별한 경향을 보이지 않았으며, 버섯의 발이와 생육에 미치는 영향에 대해서는 세밀한 조사가 필요할 것으로 생각된다. Bacillus속과 Psettdomog속으\ 경우 식물병원성균에 대한 길항균이나 생육촉진 미생물로 많이 사용되고 있고, 특히 내열성 균인 Bacillus속은 버섯균의 생육을 강하게 억제하형적인 분포가 버섯균의 생육과 발이에 많은 영향을 미칠 것으로 판단되며, 모든 생육 주기 동안 BaciUtts속이 우점하였을 경우에는 버섯균이 심한 저해를 반아 균사의 활력이 떨어져 병원균의 침입에 의한 버섯 발이와 생육의 저해로 버섯 수확을 거의 하지 못할 것으로 생각된디, .
1985b). 이와 같이 배지내에 존재하는 다양한 미생물의 분류 동정과 버섯균과의 상호작용 등 면밀한 연구가 이루어진디면 버섯 재배의 실패원인을 밝힐 수 있는 방법이 될 수 있을 것으로생각된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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