[논문]잔대 추출물들의 항돌연변이 및 항종양 효과

함영안; 최현진; 김수현; 정미자; 함승시

doi:10.3746/jkfn.2009.38.1.025

잔대 추출물들의 항돌연변이 및 항종양 효과
Antimutagenic and Antitumor Effects of Adenophora triphylla Extracts 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.38 no.1, 2009년, pp.25 - 31

함영안 (강원대학교 생명공학부) , 최현진 (강원대학교 생명공학부) , 김수현 (강원대학교 생명공학부) , 정미자 (강원대학교 BK21 사업단(뉴트라슈티컬 바이오)) , 함승시 (강원대학교 생명공학부)

초록
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본 연구는 잔대의 돌연변이원성, 항돌연변이원성, 세포독성, 항종양 효과를 조사하기 위해서 수행되었다. 잔대를 70% 에탄올로 추출하여 추출용매에 따라 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올과 물층으로 분획하였다. Ames test, SRB assay와 종양 억제실험 방법을 사용하여 실험하였다. Ames test결과, 잔대 에탄올 추출물과 그 분획물들은 돌연변이원성을 나타내지 않았을 뿐만 아니라, MNNG와 4NQO로 돌연변이를 일으켰을 때 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 잔대 에틸아세테이트 분획물은 S. Typhimurium TA98를 4NQO로 돌연변이를 유도하였을 때 66.5%의 억제율을 나타내었으며, S. Typhimurium TA100에서 MNNG와 4NQO로 돌연변이를 유도했을 때는 83.3%와 75.1%의 억제율을 나타내었다. 잔대 추출물 및 그 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 살펴보기 위해 인간 자궁암세포 (HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 사용하였다. 잔대 에틸아세테이트 분획물을 1 mg/mL를 처리하였을 때 각각 79.9%(HeLa), 74.9% (Hep3B), 66.0%(MCF-7), 71.0%(AGS)와 74.3%(A549)의 가장 높은 억제활성을 나타내었다. 반면에 인간 정상 신장세포에서는 $3{\sim}36%$의 세포독성을 나타내었다. In vivo에서 잔대 추출물의 항암효과를 시험하기 위하여 Balb/c 마우스에 sarcoma-180 종양세포로 고형암을 유발시켰다. 그 결과 잔대 에틸아세테이트 층의 최고농도 50 mg/kg에서 37.2%의 고형암 성장 억제효과를 나타내었고, 이는 모든 처리군 중가장 높은 억제율이었다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study was carried out to investigate the mutagenic, antimutagenic, cytotoxicity and antitumor effects of Adenophora triphylla (AT). AT was extracted with 70% ethanol and then further fractionated to hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. Antimutagenic, cytotoxicity and antitumor effects of AT extracts were measured by using Ames test, SRB method, and the tumor growth inhibition test. AT extracts did not show any mutagenicity in the Ames test; however, 70% ethanol extracts and its fractions had strong antimutagenic effects against mutation induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) and 4-nitroquinoline-1-oxide (4NQO). The ethyl acetate fraction of AT (200 ${\mu}g$/plate) showed approximately 66.5% inhibitory effect on the mutagenesis induced by 4NQO against TA98 strain, whereas 83.3% and 75.1% inhibitions were observed on the mutagenesis induced by MNNG and 4NQO against TA100 strain. In anticancer effects, the cytotoxicity of AT extract and its fractions against cancer cell lines including human cervical adenocarcinoma (HeLa), human hepatocellular carcinoma (Hep3B), human breast adenocarcinoma (MCF-7), human gastric carcinoma (AGS), human lung carcinoma (A549) and transformed primary human embryo kidney (293) were investigated. The treatment of 1 mg/mL AT ethyl acetate faction had the highest cytotoxicity of 79.9%, 74.9%, 66.0%, 71.0% and 74.3% against HeLa, Hep3B, MCF-7, AGS and A549 cells, respectively. In contrast, the extract and its fractions showed only $3{\sim}36%$ cytotoxicity for a normal human kidney cell line (293). In vivo anti-cancer effect of Adenophora triphylla extract was tested using Balb/c mice transplanted sarcoma-180 cells. Adenophora triphylla ethyl acetate fraction showed the highest inhibition rate of 37.2% at the 50 mg/kg concentration.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서는 잔대에 대한 기능성 검토의 일환으로 in vitro에서의 항돌연변이원성 및 항암활성 효과 등을 규명하고, in vivo에서 sarcoma-180 cell에 대한 항종양 효과를 검색함으로써 잔대를 가공하여 기능성을 가진 천연 고부가가치 식품으로 활용할 수 있을지에 대한 가능성을 제시하고자 하였다.
본 연구는 잔대의 돌연변이원성, 항돌연변이원성, 세포독성, 항종양 효과를 조사하기 위해서 수행되었다. 잔대를 70% 에탄올로 추출하여 추출용매에 따라 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올과 물층으로 분획하였다.

가설 설정

2)NS: not significant.
2)Values not sharing common superscript letter in column were significantly different at p<0.05.
2)Values not sharing common superscript letter in the same concentration were significantly different at p<0.05.

제안 방법

10% fetal bovine serum 및 각각의 암세포들인 인간 자궁경부암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 함유하는 RPMI 1640 및 DMEM 배지를 5×104 cells/mL 농도로 100 μL씩 각 well에 첨가하여 24시간 동안 배양(37℃, 5% CO2 incubator)시킨 후 0.2 M 이하의 DMSO로 녹인 시료를 0.25, 0.5, 0.75, 1.0 mg/mL 농도로 100 μL씩 첨가하여 48시간 동안 다시 배양하였다.
감압여과 장치에서 뜨거운 상태로 여과한 후 감압농축기를 사용하여 추출용매를 제거한 다음 농축물을 얻었다. 70% 에탄올로 추출하여 얻은 농축물을 용매의 극성 차이에 따라 분리를 행하여 hexane, chloroform, ethyl acetate, butane 및 aqueous의 순서로 다섯 가지 분획물을 조제하였다. 분리된 각각의 용매 추출물은 감압 농축하여 용매를 제거한 후 동결하여 생리활성 측정용 시료로 사용하였다.
After implantation of S-180 cells (6×106 cells/mouse), all mice were injected with PBS (phosphate buffered solution, control) or AT ethanol extract, hexane fraction, chloroform fraction, ethyl acetate fraction, butanol fraction and aqueous fraction, respectively every day for 20 days.
잔대를 70% 에탄올로 추출하여 추출용매에 따라 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올과 물층으로 분획하였다. Ames test, SRB assay와 종양 억제실험 방법을 사용하여 실험하였다. Ames test결과, 잔대 에탄올 추출물과 그 분획물들은 돌연변이원성을 나타내지 않았을 뿐만 아니라, MNNG와 4NQO로 돌연변이를 일으켰을 때 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다.
실험에 사용한 암세포주인 인간 자궁경부암세포 HeLa(cervical adenocarcinoma, human), 인간 간암 세포 Hep3B(hepatocellular carcinoma, human), 인간 유방암세포 MCF-7(breast adenocarcinoma, human), 인간 위암 세포 AGS(stomach adenocarcinoma, human), 인간 폐암세포 A549(lung carcinoma, human), 인간 신장정상세포인 293(human transformed primary embryonal kidney) 그리고 mouse sarcoma cell line(sarcoma-180)은 Korea Cell Line Bank(KCLB)로부터 구입하여 사용하였다. HeLa, Hep3B, MCF-7 및 293 세포주는 DMEM 배지를 AGS 및 A549 세포주는 RPMI 1640 배지를 이용하여 10% fetal bovine serum, 37℃, 5% CO₂에 적응시켜 각각 배양시켰다.
반면에 인간 정상 신장세포에서는 3～36%의 세포독성을 나타내었다. In vivo에서 잔대 추출물의 항암효과를 시험하기 위하여 Balb/c 마우스에 sarcoma-180 종양세포로 고형암을 유발시켰다. 그 결과 잔대 에틸아세테이트 층의 최고농도 50 mg/kg에서 37.
분말상태인 잔대에 시료 중량의 10배인 70% 에탄올을 첨가하고 80℃에서 8시간 동안 3회 추출하였다. 감압여과 장치에서 뜨거운 상태로 여과한 후 감압농축기를 사용하여 추출용매를 제거한 다음 농축물을 얻었다. 70% 에탄올로 추출하여 얻은 농축물을 용매의 극성 차이에 따라 분리를 행하여 hexane, chloroform, ethyl acetate, butane 및 aqueous의 순서로 다섯 가지 분획물을 조제하였다.
건열멸균시킨 glass cap tube에 추출물들을 각각의 농도 별로 50 μL씩 첨가하고 변이원 물질을 각각 50 μL씩 첨가하였다.
결합되지 않은 SRB 염색액은 1%(v/v) acetic acid 용액으로 네 번 정도 헹구어, 다시 건조시킨 후 10 mM tris buffer 100 μL로 염색제를 충분히 녹인 후 540 nm에서 ELISA reader로 흡광도를 측정하였으며, 실험은 3회 반복하여 평균값을 결과에 이용하였다.
고형암 성장저지 실험은 각 군당 6마리 마우스의 왼쪽 서혜부(left groin)에 sarcoma-180 종양세포 부유액 0.2 mL(6×106 cell/mouse)씩을 피하 이식하고, 24시간 후부터 20일간 매일 1회씩 시료 용액 200 μL를 복강으로 투여하였다.
70% 에탄올로 추출하여 얻은 농축물을 용매의 극성 차이에 따라 분리를 행하여 hexane, chloroform, ethyl acetate, butane 및 aqueous의 순서로 다섯 가지 분획물을 조제하였다. 분리된 각각의 용매 추출물은 감압 농축하여 용매를 제거한 후 동결하여 생리활성 측정용 시료로 사용하였다.
2 M sodium phosphate buffer를 가하여 최종 부피가 700 μL가 되도록 하였다. 이것을 37℃에서 20분간 진탕 배양한 다음 상기의 돌연변이원성 실험과 같은 방법으로 실험하여 생성된 복귀돌연변이 colony수를 측정하여 항돌연변이원성 유무를 판정하였다. 잔대 추출물과 변이원물질의 농도는 예비실험을 통하여 결정하였으며 항돌연변이 활성은 변이원물질의 활성에 대한 시료의 억제율(inhibition,%)로 나타내었다.
4)로 전체량이 700 μL가 되도록 하였다. 이것을 37℃에서 30분간 preincubation한 다음 histidine/biotin이 첨가된 top를 2 mL씩 가하여 잘 혼합한 후에 미리 조제해 놓은 minimal glucose agar plate상에 도말하고 평판 고화시켜 37℃에서 48시간 배양하여 생긴 복귀돌연변이(His+ revertant colony)수를 측정하여 돌연변이원성의 유무를 판정하였다.
이것을 37℃에서 20분간 진탕 배양한 다음 상기의 돌연변이원성 실험과 같은 방법으로 실험하여 생성된 복귀돌연변이 colony수를 측정하여 항돌연변이원성 유무를 판정하였다. 잔대 추출물과 변이원물질의 농도는 예비실험을 통하여 결정하였으며 항돌연변이 활성은 변이원물질의 활성에 대한 시료의 억제율(inhibition,%)로 나타내었다.
본 연구는 잔대의 돌연변이원성, 항돌연변이원성, 세포독성, 항종양 효과를 조사하기 위해서 수행되었다. 잔대를 70% 에탄올로 추출하여 추출용매에 따라 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올과 물층으로 분획하였다. Ames test, SRB assay와 종양 억제실험 방법을 사용하여 실험하였다.
2 mL(6×10⁶ cell/mouse)씩을 피하 이식하고, 24시간 후부터 20일간 매일 1회씩 시료 용액 200 μL를 복강으로 투여하였다. 종양세포 이식 26～30일째 되는 날 치사시켜 생성된 고형암을 적출하고 그 무게를 측정한 후 다음 식에 따라 종양성장 저지 백분율(tumor growth inhibition ratio, I.R: %)을 계산하였다.
추출물을 미리 건열 멸균 시킨 glass cap tube에 각각 50 μL씩 가하고 여기에 전배양시킨 균액 100 μL를 가한 다음 0.2 M sodium phosphate buffer(pH 7.4)로 전체량이 700 μL가 되도록 하였다.
항돌연변이원성을 검토하기 위하여 Ames test에서 양성반응을 나타내며, 직접변이원물질로 알려진 MNNG와 4NQO를 사용하여 각각의 농도에 따른 항돌연변이원성을 검토하였다. MNNG는 직접 돌연변이원으로 체내에서 alkyldiazo hydroxide와 같은 높은 reactive electrophiles로 분해된 후 alkylcation을 생성하여 DNA 염기의 nucleophilic site를 공격하여 alklation을 일으킨다.

대상 데이터

본 실험에 사용한 잔대 시료는 정선군 농업기술센터로부터 잔대뿌리를 동결 건조하여 분말로 제조된 시료를 구입하여 실험에 이용하였다. 분말상태인 잔대에 시료 중량의 10배인 70% 에탄올을 첨가하고 80℃에서 8시간 동안 3회 추출하였다.
본 실험에서는 암세포로 인간 자궁암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포 (AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간의 정상신장세포(293)를 이용하였다. 인간 자궁암 세포 HeLa에 대한 잔대 추출물 및 분획물들의 억제 효과를 검토한 결과 1 mg/mL 첨가 시 핵산 분획물은 80%, 에틸 아세테이트 분획물은 79.
세포배양에 필요한 배지로 RPMI 1640과 Dulbecco's modified eagle's medium(DMEM) 및 Hepes buffer, fetal bovine serum(FBS), trypsin-EDTA는 Hyclone사(USA)로부터 구입하였다.
실험에 사용된 동물은 웅성 Balb/c mice로 5주령의 체중 22∼22 g인 개체를 샘타코(주) 구입하여 환경이 조절된 사육장(온도 23±2℃, 습도 50±5%, lighting cycle은 12시간 주기)에서 표준 사료를 주어 일주일 동안 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
그 외 추출 용매인 ethanol, hexane, ethyl acetate 및 butanol 등의 유기 용매는 특급시약을 사용하였다. 실험에 사용한 암세포주인 인간 자궁경부암세포 HeLa(cervical adenocarcinoma, human), 인간 간암 세포 Hep3B(hepatocellular carcinoma, human), 인간 유방암세포 MCF-7(breast adenocarcinoma, human), 인간 위암 세포 AGS(stomach adenocarcinoma, human), 인간 폐암세포 A549(lung carcinoma, human), 인간 신장정상세포인 293(human transformed primary embryonal kidney) 그리고 mouse sarcoma cell line(sarcoma-180)은 Korea Cell Line Bank(KCLB)로부터 구입하여 사용하였다. HeLa, Hep3B, MCF-7 및 293 세포주는 DMEM 배지를 AGS 및 A549 세포주는 RPMI 1640 배지를 이용하여 10% fetal bovine serum, 37℃, 5% CO₂에 적응시켜 각각 배양시켰다.
실험에 이용한 sarcoma-180 종양세포는 Balb/c mouse의 복강 내에 7～10일 간격으로 계대배양 하여 보존하면서 사용하였다. 즉 실험동물의 복강 내에서 7～10일간 배양된 sarcoma-180 세포를 복수와 함께 취하고 phosphate buffered saline(PBS)와 함께 원심분리(1,200 rpm, 10 min)하여 종양세포를 분리하였다.
1%의 억제율을 나타내었다. 잔대 추출물 및 그 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 살펴보기 위해 인간 자궁암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 사용하였다. 잔대 에틸아세테이트 분획물을 1 mg/mL를 처리하였을 때 각각 79.
직접 돌연변이원(direct mutagen)으로서 4-introquinoline-1-oxide(4NQO), N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG)은 미국 Sigma사에서 구입하여 사용하였고, 이들 변이원 물질은 dimethyl sulfoxide(DMSO)에 녹여 실험에 사용하였다.

데이터처리

2)Means with the different letters are significantly different (p<0.05) by Duncan's multiple range test.
실험에서 얻어진 결과의 통계적 유의성은 SPSS(Statistical Package for the Social Sciences) program을 이용하여 실험군당 평균±표준편차로 표시하였고, 각 농도의 평균차의 통계적 유의성을 p<0.05 수준에서 Duncan's multiple range test에 의해 검정하였다.

이론/모형

돌연변이원성 실험은 Salmonella Typhimurium의 변이 주인 TA98과 TA100을 이용하여 Ames test를 개량한 preincubation(23)법으로 실시하였다. 추출물을 미리 건열 멸균 시킨 glass cap tube에 각각 50 μL씩 가하고 여기에 전배양시킨 균액 100 μL를 가한 다음 0.
세포 단백질 염색을 이용하여 세포 증식이나 독성을 측정 하는 SRB(sulforhodamine B) assay(24)를 이용하여 항암 활성을 알아보았다. 10% fetal bovine serum 및 각각의 암세포들인 인간 자궁경부암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 함유하는 RPMI 1640 및 DMEM 배지를 5×10⁴ cells/mL 농도로 100 μL씩 각 well에 첨가하여 24시간 동안 배양(37℃, 5% CO₂ incubator)시킨 후 0.

성능/효과

S. Typhimurium TA100 균주의 경우 에틸 아세테이트 분획물은 시료농도 200 μg/plate에서 75.1%의 억제효과를 나타내었다.
S. Typhimurium TA98과 TA100와 각 돌연변이 물질에 따라 돌연변이 억제효과는 다소간의 차이는 있었으나 잔대 추출물과 그 분획물들은 강한 항돌연변이 활성을 나타났다. 따라서 본 잔대 추출물 및 그 분획물들은 직접돌연변이원에 대한 항돌연변이 효과가 우수하여 항돌연변이 소재로 활용 가능성을 시사하고 있다.
In vivo에서 잔대 추출물의 항암효과를 시험하기 위하여 Balb/c 마우스에 sarcoma-180 종양세포로 고형암을 유발시켰다. 그 결과 잔대 에틸아세테이트 층의 최고농도 50 mg/kg에서 37.2%의 고형암 성장 억제효과를 나타내었고, 이는 모든 처리군 중 가장 높은 억제율이었다.
모든 결과를 종합하여 보면, 잔대 70% 에탄올 추출물과 그 분획물들은 in vitro에서 항돌연변이 효과 및 암세포주 성장억제효과를 확인할 수 있었으며, in vivo 실험에서 고형암 성장 저지효과를 나타내어 항돌연변이 및 항암 기능성 소재로써 활용가능성을 시사했다. 특히 잔대 에틸아세테이트 분획물이 잔대 70% 에탄올 추출물 및 그 분획물들 중가장 높은 항돌연변이 및 항암 활성을 나타내었다.
에탄올 추출물을 50, 100, 150 그리고 200 μg/plate의 여러 농도를 첨가하여 시험한 결과 음성대조군에 비하여 농도 변화에 따른 집락수가 유의적 변화를 나타내지 않으므로 잔대의 에탄올 추출물은 돌연변이원성을 나타내지 않은 것으로 확인되었다.
5%의 억제효과를 나타내었다(Table 2). 인간 간암세포인 Hep3B에 에틸 아세테이트 분획물 0.25, 0.5, 0.75 및 1 mg/mL를 각각 첨가 시 각각 27.1, 43.7, 50.9 및 74.9%로 높은 억제효과를 나타내었으며 모든 분획물에서 농도 의존적으로 암세포 성장저해효과를 나타내었다. 인간 유방암 세포인 MCF-7에서는 시료 농도 1 mg/mL에서 에탄올 추출물과 핵산 분획물에서 50% 전후의 억제효과를 나타낸 반면 부탄올 추출물에서 71.
본 실험에서는 암세포로 인간 자궁암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포 (AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간의 정상신장세포(293)를 이용하였다. 인간 자궁암 세포 HeLa에 대한 잔대 추출물 및 분획물들의 억제 효과를 검토한 결과 1 mg/mL 첨가 시 핵산 분획물은 80%, 에틸 아세테이트 분획물은 79.9% 그리고 에탄올 추출물은 78.5%의 억제효과를 나타내었다(Table 2). 인간 간암세포인 Hep3B에 에틸 아세테이트 분획물 0.
또한 인간 위암세포 AGS의 경우는 에틸 아세테이트 분획물에서 시료 농도 1 mg/mL에서 71% 억제율을 보인 반면 물 추출물에서는 32%의 낮은 억제율을 나타내었다. 인간 폐암세포인 A549에 대한 억제효과는 에틸 아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 에탄올 추출물을 최고 농도 1 mg/mL 처리하였을 때 각각 74.3, 68.1 및 64.6%의 높은 암세포 성장 억제효과를 나타내었다. 그 반면 인간 정상세포 293에 대한 저해효과는 1 mg/mL의 농도에서 모두 40% 이하의 낮은 억제효과를 보였다.
Ames test결과, 잔대 에탄올 추출물과 그 분획물들은 돌연변이원성을 나타내지 않았을 뿐만 아니라, MNNG와 4NQO로 돌연변이를 일으켰을 때 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 잔대 에틸아세테이트 분획물은 S. Typhimurium TA98를 4NQO로 돌연변이를 유도하였을 때 66.5%의 억제율을 나타내었으며, S. Typhimurium TA100에서 MNNG와 4NQO로 돌연변이를 유도했을 때는 83.3%와 75.1%의 억제율을 나타내었다. 잔대 추출물 및 그 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 살펴보기 위해 인간 자궁암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 사용하였다.
잔대 추출물 및 그 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 살펴보기 위해 인간 자궁암세포(HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 사용하였다. 잔대 에틸아세테이트 분획물을 1 mg/mL를 처리하였을 때 각각 79.9%(HeLa), 74.9%(Hep3B), 66.0%(MCF-7), 71.0%(AGS)와 74.3%(A549)의 가장 높은 억제활성을 나타내었다. 반면에 인간 정상 신장세포에서는 3～36%의 세포독성을 나타내었다.
종양세포를 이식한 대조군은 4.24±0.74 g의 고형암 무게를 나타내었고, 잔대 에틸아세테이트 분획물의 농도를 50 mg/kg으로 처리 하였을 경우 고형암의 무게는 2.66±0.64 g으로 대조군과 비교하여 고형암 무게가 유의적인 감소하였고, 잔대 추출물과 이들 분획물들 중 가장 높은 고형암 억제효과를 나타내었다.
모든 결과를 종합하여 보면, 잔대 70% 에탄올 추출물과 그 분획물들은 in vitro에서 항돌연변이 효과 및 암세포주 성장억제효과를 확인할 수 있었으며, in vivo 실험에서 고형암 성장 저지효과를 나타내어 항돌연변이 및 항암 기능성 소재로써 활용가능성을 시사했다. 특히 잔대 에틸아세테이트 분획물이 잔대 70% 에탄올 추출물 및 그 분획물들 중가장 높은 항돌연변이 및 항암 활성을 나타내었다. 따라서 이들 잔대 에틸 아세테이트 추출물은 암을 예방하거나 치료하고자 하는 목적으로 다양한 분야에서 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
한편 다른 직접변이원인 4NQO(0.15 μg/plate)에 대한 억제 효과를 측정한 결과 농도 의존적으로 억제활성을 나타내었으며 S. Typhimurium TA98의 경우 시료 농도 200 μg/ plate에서 에틸 아세테이트 분획물이 66.5%로 다른 시료에 비하여 높은 억제효과를 보였으며 에탄올 추출물 및 물 분획물에서는 각각 65.7%, 57%로 다른 분획물에 비해 높은 항돌연변이원성을 나타내었다.

후속연구

따라서 본 잔대 추출물 및 그 분획물들은 직접돌연변이원에 대한 항돌연변이 효과가 우수하여 항돌연변이 소재로 활용 가능성을 시사하고 있다. 그러나 S-9 mix를 필요로 하는 간접변이원 물질에도 이들 추출물과 그 분획물들이 직접돌연변이에서 보여준 항돌연변이 효과를 나타나는지에 대한 연구가 수행되어야 할 것이다.
대두 사포닌도 암세포 성장을 효과적으로 억제하는 것으로 알려져 있어(29,30), 본 실험 사용된 잔대 추출물과 그것의 분획물들이 암세포 성장 억제효과를 나타내는 것은 이들 추출물과 분획물들이 사포닌 등과 같은 기능성 활성물질을 함유하고 있기 때문인 것으로 생각되어지고, 높은 암세포 성장 억제능을 가진 잔대 에틸 아세테이트 분획물에는 다량은 사포닌이 함유되어 있을 것으로 추정된다. 따라서 더 진행되어져야 할 연구는 높은 암세포 성장 억제능을 가진 분획물들 안에 어떤 성분이 함유되어 있고, 얼마나 함유되어져 있는지에 대한 정성 및 정량분석이 진행되어져야 할 것이다.
Typhimurium TA98과 TA100와 각 돌연변이 물질에 따라 돌연변이 억제효과는 다소간의 차이는 있었으나 잔대 추출물과 그 분획물들은 강한 항돌연변이 활성을 나타났다. 따라서 본 잔대 추출물 및 그 분획물들은 직접돌연변이원에 대한 항돌연변이 효과가 우수하여 항돌연변이 소재로 활용 가능성을 시사하고 있다. 그러나 S-9 mix를 필요로 하는 간접변이원 물질에도 이들 추출물과 그 분획물들이 직접돌연변이에서 보여준 항돌연변이 효과를 나타나는지에 대한 연구가 수행되어야 할 것이다.
특히 잔대 에틸아세테이트 분획물이 잔대 70% 에탄올 추출물 및 그 분획물들 중가장 높은 항돌연변이 및 항암 활성을 나타내었다. 따라서 이들 잔대 에틸 아세테이트 추출물은 암을 예방하거나 치료하고자 하는 목적으로 다양한 분야에서 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	잔대의 뿌리는 사삼이라 하여 인삼과 비슷한 약효가 있다고 알려져 있는데 이것은 무엇을 함유하고 있는가?	이러한 잔대는 한국·일본·중국·타이완 등지에 널리 분포하며 우리나라에서는 잎이 넓고 털이 많은 것을 털잔대, 꽃의 가지가 적게 갈라지고 꽃이 층층으로 달리는 것을 층층 잔대 등 약 13종이 자생하고 있다. 뿌리는 “사삼”이라 하여 인삼과 비슷한 약효가 있다고 알려져 있으며, β-sitosterol, lupenone, daucosterol, triphyllol, adenophoric acid methyl ester 등을 함유하고 있다(8-11). 한방에서 거담, 진해, 건위, 강장제 등의 약제로 이용하며, 민간약으로도 기관지염이나 기침, 대하증, 복통 등에 거담, 건위, 강장약으로 쓰인다(12).
	우리나라에는 무슨 잔대가 자생하고 있는가?	japonica Hara이며 사삼(沙蔘)·딱주·제니라고도하며 우리나라에서는 7∼9월경 전국 각지의 산과 들에서 자생하는 것으로 알려져 있다(7). 이러한 잔대는 한국·일본·중국·타이완 등지에 널리 분포하며 우리나라에서는 잎이 넓고 털이 많은 것을 털잔대, 꽃의 가지가 적게 갈라지고 꽃이 층층으로 달리는 것을 층층 잔대 등 약 13종이 자생하고 있다. 뿌리는 “사삼”이라 하여 인삼과 비슷한 약효가 있다고 알려져 있으며, β-sitosterol, lupenone, daucosterol, triphyllol, adenophoric acid methyl ester 등을 함유하고 있다(8-11).
	잔대의 학명은 무엇인가?	잔대의 학명은 Adenophora triphylla var. japonica Hara이며 사삼(沙蔘)·딱주·제니라고도하며 우리나라에서는 7∼9월경 전국 각지의 산과 들에서 자생하는 것으로 알려져 있다(7). 이러한 잔대는 한국·일본·중국·타이완 등지에 널리 분포하며 우리나라에서는 잎이 넓고 털이 많은 것을 털잔대, 꽃의 가지가 적게 갈라지고 꽃이 층층으로 달리는 것을 층층 잔대 등 약 13종이 자생하고 있다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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