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문제 정의
- 본 연구는 우리나라에서 상업적으로 중요한 균근성 버섯 중 하나인 싸리버섯을 소나무에 접종하여 외생균근의 형성을 시도한 것이다.
제안 방법
- 외생균근의 해부학적 특징은 동결마이크톰(Leica CM1900)을 이용하여 12-20 μm 크기를 자른 후 프레파라트를 만들어 광학현미경 200배 및 400배에서 관찰하였다.
- 분리된 균은 potato dextrose agar (PDA) 배지에 보존하면서 본 실험에 이용하였다. 싸리버섯 균주의 온도별 생장실험은 PDA 배지 15, 20, 25, 30℃ 항온기에서 5반복 60일 배양 후 조사하였다. 그리고 외생균근을 형성하기 위한 배지조건 및 배양법은 가 등(2008)이 보고한 방법에 따랐다.
- 소나무 종자는 과산화수소수 원액에 20분간 처리 후 PDA 배지에서 무균적으로 발아된 씨앗을 토양배지에 병당 2개씩 이식하였다. 소나무 종자가 정상적으로 자란 배양병은 MMN 액체배지에서 자란 균사체를 4 ml 씩 접종하였고, 배양병은 23℃ 항온기, 24시간 빛 조건에서 6개월과 14개월 배양하였다.
- 소나무 종자는 과산화수소수 원액에 20분간 처리 후 PDA 배지에서 무균적으로 발아된 씨앗을 토양배지에 병당 2개씩 이식하였다. 소나무 종자가 정상적으로 자란 배양병은 MMN 액체배지에서 자란 균사체를 4 ml 씩 접종하였고, 배양병은 23℃ 항온기, 24시간 빛 조건에서 6개월과 14개월 배양하였다. 6개월간 배양한 것은 5반복 하였고, 14개월 배양한 것은 2반복하였다.
- 6개월간 배양한 것은 5반복 하였고, 14개월 배양한 것은 2반복하였다. 각 시기별 균근형성 유무는 해부현미경(Leica S8APO)과 광학현미경(Leica DMRE)으로 관찰하였다. 외생균근의 해부학적 특징은 동결마이크톰(Leica CM1900)을 이용하여 12-20 μm 크기를 자른 후 프레파라트를 만들어 광학현미경 200배 및 400배에서 관찰하였다.
- 외생균근의 해부학적 특징은 동결마이크톰(Leica CM1900)을 이용하여 12-20 μm 크기를 자른 후 프레파라트를 만들어 광학현미경 200배 및 400배에서 관찰하였다. 외생균근의 형성율은 소나무 유묘의 뿌리직경 1 mm 이하 것을 0.5 cm 길이로 잘라서 슬라이드글라스 위에 놓고 해부현미경 하에서 20배로 관찰하였다. 외생균근 형성율은 전체 뿌리 조각 당 외생균근이 만들어진 개수를 가지고 계산하였다.
- 5 cm 길이로 잘라서 슬라이드글라스 위에 놓고 해부현미경 하에서 20배로 관찰하였다. 외생균근 형성율은 전체 뿌리 조각 당 외생균근이 만들어진 개수를 가지고 계산하였다.
- 싸리버섯은 한국에서 상업적으로 중요한 외생균근성 버섯중 하나로 자연채취하고 있다. 본 연구는 소나무 유묘에 싸리버섯균을 접종하여 균근형성을 시도하였다. 소나무 유묘에 형성된 싸리버섯 균의 외생균근은 단순형과 차상분지형이였다.
대상 데이터
- 싸리버섯의 균주는 2007년 가을철에 강원도 홍천군 동면 노천리의 소나무와 참나무 혼효림에서 채취한 버섯에서 분리하였다(KFRI 1018). 분리된 균은 potato dextrose agar (PDA) 배지에 보존하면서 본 실험에 이용하였다.
- 싸리버섯의 균주는 2007년 가을철에 강원도 홍천군 동면 노천리의 소나무와 참나무 혼효림에서 채취한 버섯에서 분리하였다(KFRI 1018). 분리된 균은 potato dextrose agar (PDA) 배지에 보존하면서 본 실험에 이용하였다. 싸리버섯 균주의 온도별 생장실험은 PDA 배지 15, 20, 25, 30℃ 항온기에서 5반복 60일 배양 후 조사하였다.
이론/모형
- 싸리버섯 균주의 온도별 생장실험은 PDA 배지 15, 20, 25, 30℃ 항온기에서 5반복 60일 배양 후 조사하였다. 그리고 외생균근을 형성하기 위한 배지조건 및 배양법은 가 등(2008)이 보고한 방법에 따랐다. 이때 배지량은 PDMP 배지를 증류수로 4배 희석하여 배양병 당 100 ml씩 넣었다.
성능/효과
- 소나무 종자가 정상적으로 자란 배양병은 MMN 액체배지에서 자란 균사체를 4 ml 씩 접종하였고, 배양병은 23℃ 항온기, 24시간 빛 조건에서 6개월과 14개월 배양하였다. 6개월간 배양한 것은 5반복 하였고, 14개월 배양한 것은 2반복하였다. 각 시기별 균근형성 유무는 해부현미경(Leica S8APO)과 광학현미경(Leica DMRE)으로 관찰하였다.
- 싸리버섯의 균사는 25℃에서 가장 잘 자랐고, PDA 배지에서 60일간 5 cm 정도 생장하였다(Fig. 1). 싸리버섯 균사는 PDA 배지에서 매우 촘촘히 자라며, 시간이 경과할수록 매우 옅은 황색이 감돌았다.
- 1). 싸리버섯 균사는 PDA 배지에서 매우 촘촘히 자라며, 시간이 경과할수록 매우 옅은 황색이 감돌았다. 균사의 크기는 1-2 μm로 반투명이며, 기중균사는 백색의 솜털모양이었다.
- 하티그망(Hartig-net)은 외생균근에서 잘 발달되었다. 하티그망은 뿌리 선단부분은 발달되지 않았고, 뿌리 끝의 생장과 더불어 바로 아랫부분부터 발달되는 것으로 나타났다. 본 실험에서 싸리버섯은 소나무 뿌리에 전형적인 외생균근을 형성하였고, 잘 발달된 외생균근을 얻기 위해서는 6개월보다는 더 많은 시간이 필요한 것을 알 수 있었다.
- 하티그망은 뿌리 선단부분은 발달되지 않았고, 뿌리 끝의 생장과 더불어 바로 아랫부분부터 발달되는 것으로 나타났다. 본 실험에서 싸리버섯은 소나무 뿌리에 전형적인 외생균근을 형성하였고, 잘 발달된 외생균근을 얻기 위해서는 6개월보다는 더 많은 시간이 필요한 것을 알 수 있었다.
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