[논문]계혈등(鷄血藤)이 Rat의 말초신경 재생에 미치는 효과

임승민; 안정조; 조현경; 유호룡; 김윤식; 설인찬

계혈등(鷄血藤)이 Rat의 말초신경 재생에 미치는 효과
Effect of Gyehyuldeung Treatments in Peripheral Nerve Regeneration of Rat 원문보기

대한한방내과학회지 = The journal of internal Korean medicine, v.30 no.2, 2009년, pp.375 - 387

임승민 (대전대학교 한의과대학 심계내과학교실) , 안정조 (대전대학교 한의과대학 심계내과학교실) , 조현경 (대전대학교 한의과대학 심계내과학교실) , 유호룡 (대전대학교 한의과대학 심계내과학교실) , 김윤식 (대전대학교 한의과대학 심계내과학교실) , 설인찬 (대전대학교 한의과대학 심계내과학교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objective : Gyehyuldeung (GHD) has been widely used in oriental medicine for the treatments of cardiovascular and neurological disorders. Thus, its potential facilitatory activity on axonal regeneration was investigated in the rats. Methods: Sprague-Dawley rats were given crush injury at the sciatic nerve and the changes of axon growth after nerve injury on each nerve injury model were investigated with anti-NF-200 antibody, DiI, GAP-43 protein and Cdc2 protein Results : GHD-mediated enhancement of axonal regeneration after crush injury was measured in both qualitative and quantitative ways by immunofluorescence staining with anti-NF-200 antibody and retrograde tracing of fluorescence dye DiI. GAP-43 protein levels were elevated by GHD treatments in the distal injured sciatic nerve and DRG sensory neurons. The neurite outgrowth of DRG sensory neurons was facilitated by GHD treatment when co-cultured with Schwann cells and astrocytes prepared from injured sciatic nerves and injured spinal cord tissues, respectively. It was observed that Cdc2 protein was up-regulated in co-cultured Schwann cells or astrocytes and Cdc2 protein signals were co-localized to a certain extent with those of phospho-vimentin protein. Conclusions : These results suggest that GHD may play a facilitatory role in axonal regeneration by acting on the injured axons and adjacent non-neuronal cells. The current findings may be useful for the development of therapeutic targets through more specific explorations on molecular interactions between herbal components and endogenous factors.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

등이 있으나 신경 재생에 관한 연구는 보고된 바 없다. 이에 저자는 손상 말초신경에 鷄血藤을 처리하고 westernblot분석, 면역형광염색 분석, 역주행 형광추적, 후근절 감각신경에서 Schwann cell 및 성상교세포의 동시배양을 통해 신경재생을 관찰한 결과 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

제안 방법

鷄血藤 투여군 그룹과 생리식염수 투여군 그룹의 쥐들은 ketamine(80㎎/㎏)과 rompun(5㎎/㎏)의 혼합 용액을 복강주입에 의하여 마취시킨 후, 30×20㎝ 해부대 위에 올려놓고 둔부와 대퇴부가 교차하는 지점에 털을 핀셋과 가위를 이용하여 완전히 제거한 뒤 피부를 절개하였다.둔부와 대퇴부 교차지점에 근육을 둘러싸고 있는 근막을 제거 한 후 좌골신경을 도출시켰다.미세 핀셋을 이용하여 도출된 좌골신경의 한 부분을 30초 동안 압박하고, 1분 동안의 휴식 후 다시 30초 동안 압박을 한 후 鷄血藤 투여군 및 생리식염수 대조군의 도출부위에 2㎖의 鷄血藤 추출액과 생리식염수를 점적투여 하였다.
둔부와 대퇴부 교차지점에 근육을 둘러싸고 있는 근막을 제거 한 후 좌골신경을 도출시켰다.미세 핀셋을 이용하여 도출된 좌골신경의 한 부분을 30초 동안 압박하고, 1분 동안의 휴식 후 다시 30초 동안 압박을 한 후 鷄血藤 투여군 및 생리식염수 대조군의 도출부위에 2㎖의 鷄血藤 추출액과 생리식염수를 점적투여 하였다.실험동물의 손상 부위를 봉합하고 마취가 깰 때까지 37℃에 유지한 후 다음 동물 사육실에 보존하였다.
실험동물의 손상 부위를 봉합하고 마취가 깰 때까지 37℃에 유지한 후 다음 동물 사육실에 보존하였다. 수술 5일 후 말초신경이나 후근신경절(dorsalrootganglia,DRG)조직을 실험동물로 부터 적출하였다. 정상군(intactcontrol;N = 6),식염수 대조군(Saline; N = 13),鷄血藤 처리군(GHD,N = 13)등이 사용되었으며,후근신경절 감각신경과 Schwanncell및 척수비신경세포의 동시배양을 위하여 8마리의 흰쥐가 이용되어 전체 40마리의 성체 흰쥐가 본 연구에 이용되었다.
,Korea)를 실험대상으로 하였다.실험동물은 실험 전 일주일 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 사육 및 실험을 실시하였다.실험동물은 전 실험기간을 통하여 고형 사료와 물을 어떠한 제약 없이 섭취하도록 하였으며,온도는 22-24℃,습도는 50±10%가 유지되도록 하고,조명은 밤낮주기(12시간 주/야)가 조절되는 실험실 환경에서 사육하였다.
실험동물은 전 실험기간을 통하여 고형 사료와 물을 어떠한 제약 없이 섭취하도록 하였으며,온도는 22-24℃,습도는 50±10%가 유지되도록 하고,조명은 밤낮주기(12시간 주/야)가 조절되는 실험실 환경에서 사육하였다.
최근 천연약물을 통한 신경재생 연구는 紫河車⁵,鹿茸⁵,鎖陽⁵,白何首烏⁵,蟬退5,附子⁵,熟地黃⁶ 등의 단일약제 및 六味地黃湯⁷,生脈散⁸ 등의 복합처방 등으로 다양하게 보고되고 있으며 대부분 補血補陰하는 약물에서 말초신경재생 효과가 탁월한 것으로 나타났다. 이에 補血 및 祛瘀의 효능이 있는 鷄血藤을 이용하여 연구를 수행 하였다.

대상 데이터

대전대 한방병원에서 구입한 건조 상태의 鷄血藤(SpatholobiCaulis)40g을 증류수 1,000㎖를 가하여 열탕 추출기에서 3시간 추출하여 얻은 액을 흡입 여과하여 이를 감압 증류장치(Rotaryevaporator, BuchiB-480,Switzerland)로 농축한 후 동결 건조기(Freezedryer,EyelaFDU-540,Japan)를 이용하여 완전 건조한 추출물 3.7g을 얻었으며 (수율;9.1%), 냉동(-84℃)보관하면서 鷄血藤(10㎎/㎖)을 생리식염수와 희석하여 사용하였다.
본 연구의 실험동물은 친자교배 시킨 생후 7-8주령 된 Sprague-Dawley(SD)계열 수컷 흰쥐 (Samtago Co.,Korea)를 실험대상으로 하였다.실험동물은 실험 전 일주일 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 사육 및 실험을 실시하였다.
수술 5일 후 말초신경이나 후근신경절(dorsalrootganglia,DRG)조직을 실험동물로 부터 적출하였다. 정상군(intactcontrol;N = 6),식염수 대조군(Saline; N = 13),鷄血藤 처리군(GHD,N = 13)등이 사용되었으며,후근신경절 감각신경과 Schwanncell및 척수비신경세포의 동시배양을 위하여 8마리의 흰쥐가 이용되어 전체 40마리의 성체 흰쥐가 본 연구에 이용되었다.

후속연구

반면 Schwann cell이 없는 척수와 뇌를 포함한 중추신경계는 신경 손상시 영구적인 기능 마비가 된다^1-2. 최근 신경 재생에 중요한 역할을 하는 Schwann cell에 신경성장인자의 분비를 유도시켜 신경재생을 촉진시키려는 연구3가 계속되고 있으며 이러한 연구는 향후 자연재생이 불가능한 중추신경의 재생유도에 응용 가능할 것으로 사료된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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