[논문]계혈등 물추출물의 항산화 및 간보호효과

이재준; 최홍식; 김승모

doi:10.6116/kjh.2011.26.3.047

계혈등 물추출물의 항산화 및 간보호효과
Antioxidant Effect and Liver Protection Effect of Spatholobi Caulis Water Extract 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.26 no.3, 2011년, pp.47 - 56

이재준 (대구한의대학교 한의학과 간계내과학교실) , 최홍식 (대구한의대학교 한의학과 간계내과학교실) , 김승모 (대구한의대학교 한의학과 간계내과학교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : This study investigated whether the water extract of Spatholobi Caulis (SCE) has the ability to protect hepatocyte against oxidative stress induced by tert-butylhydroperoxide (tBHP) in vitro and $CCl_4$ in vivo. Methods : In vitro, HepG2 cells pre-treated with Spatholobi Caulis water extract (1, 3, 10, $30{\mu}g$/ml) for 12h and further incubated with tBHP ($100{\mu}M$) for the next 12h. Cell viability was assessed by MTT assay. In vivo, rats were orally administrated with the aqueous extract of Spatholobi Caulis (SCE; 50, 100 mg/kg) for 4 days and then, injected with $CCl_4$ 1 mg/kg body weight to induce acute liver damage. Results : Treatment with SCE inhibited cell death induced by tBHP, as evidenced by alterations in the levels of the proteins associated with apoptosis:SCE prevented a decrease in $Bcl_2$, and cleavage of poly(ADP-ribose)polymerase and pro-caspase-3. Moreover, SCE inhibited the ability of tBHP to generate $H_2O_2$ production, thereby restoring GSH content. Moreover, SCE treatments in rats effectively decreased liver injuries induced by a single dose of $CCl_4$, as evidenced by decreases in hepatic degeneration and inflammation as well as plasma alanine aminotransferase and lactate dehydrogenase activities. Consistently, treatments of SCE also protected liver in rats stimulated by $CCl_4$, as indicated by restoration GSH and prevention of MDA in the liver. Conclusions : SCE has the ability 1) to protect hepatocyte against oxidative stress induced by tBHP and 2) to prevent $CCl_4$-inducible acute liver toxicity. Present findings may be informative not only in elucidating the pharmacological mechanism of Spatholobi Caulis, but in determining its potential application for oxidative cellular damage in the liver.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구는 Reactive oxygen species (ROS)에 의한 간독성에 대한 계혈 등 물추출물 (SCE; Spatholobi Caulis Water Extract)의 항산화 및 간보호 효과를 평가하기 위하여, HepG2 cell과 tert-butylhydroperoxide (tBHP)를 활용한 in vitro 모델과 rat와 CCl₄를 이용한 급성 간손상 in vivo 모델에서 효능을 평가하였다.
본 연구에서는 SCE가 tBHP, CCl₄와 같은 강력한 산화물에 대해 간세포의 보호 작용이 있다는 것을 알수 있었다. 특히 Fig.
본 연구에서는 계혈등의 물추출물 (SCE; Spatholobi Caulis Water Extract)의 산화적 스트레스에 의해 유도되는 간독성에 대한 세포보호효과를 평가하고자, in vitro 모델에서 HepG2 cell의 tert-butylhydroperoxide (tBHP)로 유도되는 세포독성에 대한 SCE의 억제효과를 평가하였고, in vivo 모델에서 carbon tetrachloride (CCl₄)로 유발되는 rat의 급성 간손상에 대한 SCE의 간보호효과를 평가해 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

제안 방법

SCE는 50 mg/kg와 100 mg/kg의 농도로 총 4일 동안 경구투여 하였다. 3일 동안은 하루 1회씩 식이를 자유롭게 공급하는 상황에서 SCE를 경구투여하였고, 4일 째에는 SCE 투여 2시간 전부터 사료섭취를 중지시킨 후에 SCE를 경구투여 하였다. 또한 4일 째에는 SCE 투여 후 2시간이 더 지난 다음에 CCl₄(1 mg/kg, i.
정량하여 얻은 protein 20 µg을 10% sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis로 전기영동시킨 후 nitrocellulose membrane으로 gel의 단백질을 transfer시켰다. Blocking 후 pro-caspase-3 antibody와 반응시킨 후 secondary antibody로 반응시키고 ECL chemiluminescence detection kit (Amersham Biosciences Corp., Piscataway, NJ, USA)를 사용하여 단백질의 발현 정도를 확인하였다. Densitometric analysis를 위해 Image analyzing system (Ultra-Violet Products Ltd.
)를 투여하여 급성 간독성을 유발하였다. CCl₄ 투여 24시간 후에 모든 실험동물을 희생하여 혈액과 장기를 적출하여 혈액학적 및 조직병리학적 분석에 사용하였다.(Scheme 2)
투여 전 4일간 50, 100 mg/kg로 구강 투여하였다. CCl₄투여 후 24시간 후에 실험동물을 희생시키고, 혈액학적 평가, 조직학적 평가, pro-caspase-3, MDA, GSH를 평가하였다.
, Piscataway, NJ, USA)를 사용하여 단백질의 발현 정도를 확인하였다. Densitometric analysis를 위해 Image analyzing system (Ultra-Violet Products Ltd., Upland, CA, USA)을 사용하였다.
Densitometric analysis를 위해 Image analyzing system (Ultra-Violet Products Ltd., Upland, CA, USA)을 사용하였다.
SCE 단독처리에 대한 독성은 HepG2 cell을 24 well plate에 1×105 cells/well로 분주하여 FBS가 10% 함유된 DMEM 배지로 24 h 동안 배양하고 FBS가 고갈된 배지로 12 h 동안 더 배양한 후에 SCE를 1, 3, 10, 30 µg/ml의 농도로 처치하고 12시간 후에 MTT assay로 측정하였다(Scheme 1).
SCE가 tBHP로 유발되는 세포독성에 대한 효과를 MTT assay로 관찰하고자 12시간 동안 serum을 제거한 배지에서 cell을 배양한 후, SCE를 1시간 농도별로 처치하고, 이후 tBHP를 100 µM로 12시간 처치하였다.
SCE가 tBHP에 의해 유도되는 apoptosis에 미치는 효과를 살펴보기 위해 apoptosis의 표지단백질인 pro-caspase-3, BCl₂ 및 PARP의 발현변화를 확인하였다. 그 결과, tBHP가 유도하는 BCl₂의 감소를 SCE가 10, 30 µg/ml의 농도에서 증가시켰으며, pro-caspase-3는 tBHP에 의하여 현저하게 감소되었으나, SCE 10, 30 µg/ml의 농도에서 pro-caspase-3의 발현을 증가시켰다.
SCE는 50 mg/kg와 100 mg/kg의 농도로 총 4일 동안 경구투여 하였다. 3일 동안은 하루 1회씩 식이를 자유롭게 공급하는 상황에서 SCE를 경구투여하였고, 4일 째에는 SCE 투여 2시간 전부터 사료섭취를 중지시킨 후에 SCE를 경구투여 하였다.
각 실험군은 5마리로 배정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 군을 Normal군으로 하고 간손상을 유도하는 CCl₄(1 mg/kg, i.p.)만을 투여한 군을 CCl₄군으로 하였으며, CCl₄(1 mg/kg, i.p.)와 SCE를 50 mg/kg로 투여한 50 mg/kg SCE군, CCl₄(1 mg/kg, i.p.)와 SCE를 100 mg/kg로 투여한 100 mg/kg SCE군으로 나누어 실시하였다.
간 실질조직의 일부를 채취하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 일반적인 방법으로 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3~4 µm의 절편을 제작하여 hematoxylin-eosin 염색을 실시한 후 광학현미경 (Nikon, Japan) 하에서 관찰하였다. 간 실질 중 변성부위의 비율 (%/mm² of hepatic parenchyma) 및 변성 간세포의 수 (N/1000 hepatocytes)를 자동영상분석장치 (DMI-300 Image Processing; DMI, Korea)를 이용하여 각각 평가하였다.
간 실질조직의 일부를 채취하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 일반적인 방법으로 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3~4 µm의 절편을 제작하여 hematoxylin-eosin 염색을 실시한 후 광학현미경 (Nikon, Japan) 하에서 관찰하였다.
그러나, 위의 연구들에서도 산화적 스트레스에 의해 유도된 간손상에 미치는 계혈등의 연구결과는 아직 보고 된 것이 없기에 계혈등의 간보호효과를 평가하기 위해 in vitro에서 HepG2 cell에 tBHP를 처리하여 유도된 세포독성 모델에 대해 SCE의 효과를 평가하였고, 또한 in vivo에서 CCl₄에 의해 유발되는 rat의 급성 간손상 모델에 대한 SCE의 간보호효과를 평가하게 되었다.
3일 동안은 하루 1회씩 식이를 자유롭게 공급하는 상황에서 SCE를 경구투여하였고, 4일 째에는 SCE 투여 2시간 전부터 사료섭취를 중지시킨 후에 SCE를 경구투여 하였다. 또한 4일 째에는 SCE 투여 후 2시간이 더 지난 다음에 CCl₄(1 mg/kg, i.p.)를 투여하여 급성 간독성을 유발하였다. CCl₄ 투여 24시간 후에 모든 실험동물을 희생하여 혈액과 장기를 적출하여 혈액학적 및 조직병리학적 분석에 사용하였다.
배양 후 수거한 HepG2 cell의 pellet에 5% MPA buffer 500 µl를 넣고 glass homogenizer로 마쇄하여 균질화시킨 후 GSH determination kit (Oxis International, Portland, OR, USA)를 사용하여 측정하였다.
본 실험에서는 ROS 생성에 대한 SCE의 효과를 규명하기 위하여, SCE를 30 µg/ml의 농도로 12시간 동안 배양하고 tBHP 100 µM을 1시간 동안 처리하여 산화적 스트레스를 유발하였다.
본 연구에서는 SCE가 tBHP에 의한 독성에 대해 세포보호작용을 할 수 있는지, SCE 단독으로는 세포생존율에 어떠한 영향을 미치는 지를 MTT assay로 평가하였고, 또한 SCE가 tBHP가 유도하는 apoptosis에 대하여 어떠한 연관성을 가지는 지를 western blot으로 확인하였으며, SCE의 항산화작용을 평가하기 위하여 DCFH-DA 및 GSH를 평가하였다.
본 연구에서는 rat의 급성 간독성을 유발하기 위하여 CCl₄를 1 mg/kg로 1회 복강 주사하였으며, SCE는 CCl₄투여 전 4일간 50, 100 mg/kg로 구강 투여하였다. CCl₄투여 후 24시간 후에 실험동물을 희생시키고, 혈액학적 평가, 조직학적 평가, pro-caspase-3, MDA, GSH를 평가하였다.
분리한 간 조직 0.1 g에 1ml의 total lysis buffer를 넣고 균질화시킨 후 4℃에서 20분 동안 15,000×g로 원심분리하여 얻은 상층액을 bicinchoninic acid assay로 정량하여 실험에 사용하였다.
세포 생존율은 MTT (1 mg/ml in PBS)를 300 µl 씩 넣어 4시간 배양한 후에 MTT를 완전히 제거시킨 다음, 살아있는 세포에 의해 생성된 formazan crystals을 DMSO에 녹여 Titertek Multiskan Automatic ELISA microplate reader (Model MCC/340, Huntsville, AL)를 사용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.
1% Tween 20을 함유한 PBST 용액으로 세척한 다음, secondary antibody로 반응시켰다. 이어서 ECL chemiluminescence detection kit (Amersham Biosciences Corp., Piscataway, NJ, USA)를 사용하여 단백질의 발현 정도를 확인하였다. Densitometric analysis를 위해 Image analyzing system (Ultra-Violet Products Ltd.
혈청중 alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) lactate dehydrogenase (LDH)는 Analysis kits (Pointe Scientific Inc., Canton, MI, USA)와 Automated blood chemistry analyzer (Photometer 5010, Robert Riele GmbH & Co KG, Berlin, Germany)를 사용하여 분석하였다.

대상 데이터

(Tokyo, Japan)에서 구입하였다. BCl₂ antibody는 Cell signaling Technology (Danvers, MA, USA)에서 구입하였고, Poly ADP ribose polymerase (PARP), pro-caspase-3 및 actin antibody는 Santacruz Biotechnology Inc. (Santacruz, CA, USA)에서 구입하였다. Nitrocellulose transfer membrane (NC membrane)은 Schleicher & Schuell (Dassel, Germany)에서 구입하였다.
DMEM, fetal bovine serum (FBS), penicillin 및 streptomycin은 Gibco/BRL (Eggenstein, Germany)에서 구입하였다.
Louis, MO, USA)로부터 구입하여 사용하였다. Dimethyl sulfoxide (DMSO)는 Junsei Chemical Co., Ltd. (Tokyo, Japan)에서 구입하였다. BCl₂ antibody는 Cell signaling Technology (Danvers, MA, USA)에서 구입하였고, Poly ADP ribose polymerase (PARP), pro-caspase-3 및 actin antibody는 Santacruz Biotechnology Inc.
Nitrocellulose transfer membrane (NC membrane)은 Schleicher & Schuell (Dassel, Germany)에서 구입하였다.
SCE의 수율은 7.68 %였으며 in vitro 처치시에는 배지 (DMEM; Dulbecco's modified eagle's medium)에 녹여 사용하였으며, in vivo실험에서는 H2O에 녹여 사용하였다.
tBHP, metaphosphoric acid (MPA), -(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoleum (MTT), 2',7'-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA), CCl4 및 olive oil은 Sigma (St. Louis, MO, USA)로부터 구입하여 사용하였다.
사람 간암 세포 유래 hepatocyte cell line인 HepG2 cell은 American Type Culture Collection (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였으며, DMEM에 10% FBS, 100 U/ml penicillin 및 100 µg/ml streptomycin을 혼합한 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2의 환경이 유지되는 incubator (Sanyo, Japan)에서 배양하였다.
실험동물은 6주령 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐 (180-200 g)를 효창사이언스 (대구, 한국)로부터 공급받아 1주일 동안 동물실험실환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였으며, 사육실 환경은 온도 20-23℃, 습도 60%, 12시간 light/dark cycle을 유지하고, 사료 (Nestle Purina Petcare Korea, Seoul, Korea)와 음료는 자유롭게 섭취하도록 하였다.

데이터처리

실험 결과는 mean ± S.D.로 나타내었으며, 처치군간의 유의성은 one way analysis of varience (ANOVA)로 검정한 후 Newman-Kleuls test로 검정하였다.

이론/모형

HepG2 cells were treated with SCE alone for 12 h (B). Cell viability was assessed by MTT assay. Data represent the mean ± SD of eight separate experiments.

성능/효과

AST는 Normal에서는 100.00 ± 26.23%였으나, CCl4로 간손상을 유도한 경우는 912.28 ± 134.16%로 유의하게 증가하였으며, 이러한 증가는 SCE 50, 100 mg/kg의 투여로 각각 343.33 ± 134.38, 133.89 ± 31.03 (%)로 유의하게 감소하였다 (Fig. 5B).
CCl4로 유도된 간세포 apoptosis에 미치는 SCE의 효과를 살펴보기 위하여 Immunoblot analysis를 통해 pro-caspase-3의 양을 관찰한 결과, CCl4에 의해 유도된 pro-caspase-3는 Normal과 비교시 33.51 ± 5.19%로서 유의한 감소를 나타내었다.
CCl₄에 의해 유도된 간독성에 미치는 SCE의 효과를 평가하기 위하여 조직학적 평가를 한 결과, CCl₄를 투여한 경우 간세포의 공포화, 지방소적의 간세포내 축적 및 염증세포 침윤과 같은 소엽중심성 괴사 소견이 관찰되었으나, 이들 CCl₄ 투여에 의한 간 손상은 SCE의 투여에 의해 현저하게 감소되었다 (Fig. 6).
LDH는 Normal에서는 100.00 ± 23.00%였으나, CCl4로 간손상을 유도한 경우는 335.15 ± 74.77%로 유의하게 증가하였으며, 이러한 증가는 SCE 50, 100 mg/kg의 투여로 각각 138.98 ± 50.09, 110.21 ± 39.65 (%)로 유의하게 감소하였다 (Fig. 5C).
SCE가 CCl4로 유도된 급성 간손상에 대한 간세포 보호효과를 평가하기 위하여 혈액학적인 변화를 관찰한 결과, ALT는 Normal에서는 100.00 ± 8.46%였으나, CCl4로 간손상을 유도한 경우는 564.04 ± 122.41%로 유의하게 증가하였다.
SCE가 CCl4로 유도된 지질 과산화에 대한 효과를 관찰하기 위하여 MDA의 발현을 통해 살펴 본 결과, 1 mg/kg의 CCl4는 간조직내의 MDA양을 224.03 ± 18.33%로 현저히 증가시키는 것을 관찰할 수 있었고, 50, 100 mg/kg의 SCE 전처치는 이렇게 증가된 MDA양을 132.15 ± 20.42, 123.76 ± 5.06 (%)로 유의하게 감소시켰다.
SCE의 in vivo 수준에서의 항산화 효능을 측정하기 위하여, 간 조직내의 GSH 함량을 관찰한 결과, CCl4의 처치에 의해 58.39 ± 5.76%로 감소된 GSH가 50과 100 mg/kg SCE의 전처리에 의해 119.71 ± 7.31, 122.08 ± 6.26 (%)로 회복되는 것을 관찰할 수 있었다.
SCE의 항산화 효과를 관찰하기 위해서 세포내의 GSH 함량을 측정한 결과, tBHP의 처치에 의해 GSH가 61.21 ± 2.57%로 현저하게 감소한 반면, SCE를 처치하였을 때 감소된 GSH가 103.00 ± 1.48%로 회복되었다.
그 결과 계혈등 물추출물(SCE)의 병행투여로 in vitro 모델에서는 세포생존율 증가, apoptosis 억제, hydrogen peroxide의 감소, GSH의 함량의 증가를 보였으며, in vivo 모델에서는 혈청중 ALT, AST, LDH 수치의 유의한 감소, rat 간조직내 손상 및 염증의 억제, 간세포 apoptosis 억제, 肝內 GSH의 유의한 증가, MDA의 유의한 감소가 나타났다.
그 결과, normal에 비해 tBHP 처리에 의해 241.37 ± 14.44%로 형광도가 증가하였으나, SCE 전처리에 의해서 60.77 ± 6.30%로 억제되어 SCE에 의한 활성산소 감소효과를 확인할 수 있었다.
그 결과, tBHP가 유도하는 BCl2의 감소를 SCE가 10, 30 µg/ml의 농도에서 증가시켰으며, pro-caspase-3는 tBHP에 의하여 현저하게 감소되었으나, SCE 10, 30 µg/ml의 농도에서 pro-caspase-3의 발현을 증가시켰다.
그러나, 이러한 tBHP의 세포독성은 SCE 1, 3, 10, 30 μg/ml의 농도에서 각각 81.30 ± 2.49, 97.49 ± 1.73, 101.36 ± 5.76, 102.37 ± 2.08 (%)로서 모두 유의한 세포독성의 억제를 나타내었다.
3에서 보듯이 SCE가 세포 독성의 원인인 ROS 생성을 억제하는 것이 확인되었으며, 이는 tBHP가 유도한 산화적 스트레스에 의해 발생한 apoptosis를 SCE가 유효하게 억제함을 의미한다. 그리고 Fig. 4에서 보듯이 tBHP에 의해 현저하게 감소된 GSH의 함량을 SCE가 유의하게 증가시키는 것이 확인되었으며 이는 SCE가 tBHP에 의한 세포 독성을 방어하는 데에 있어서 항산화 효과가 기여한다는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 종합하면 SCE는 산화적 스트레스에 의해 유발된 간세포의 자멸사에 대해 ROS 생성억제와 항산화 효과를 통해 세포보호작용을 나타낸다는 것을 알 수 있다.
2에서 세포사멸의 표지단백질인 Caspase-3, Bcl₂ 및 PARP의 발현변화를 관찰한 결과에서도 tBHP가 apoptosis를 유도하고 SCE는 이를 유효하게 억제함을 확인하였다. 또한 DCFH-DA를 관찰한 결과, Fig. 3에서 보듯이 SCE가 세포 독성의 원인인 ROS 생성을 억제하는 것이 확인되었으며, 이는 tBHP가 유도한 산화적 스트레스에 의해 발생한 apoptosis를 SCE가 유효하게 억제함을 의미한다. 그리고 Fig.
10에서 MDA의 발현변화를 통해 살펴보았고, MDA의 조직내 증가도 SCE에 의해 억제되는 것을 확인하였다. 또한 Fig. 8에서 SCE는 CCl₄로 저하된 pro-caspase-3의 발현을 유의하게 증가시켰으며, 이는 CCl₄가 apoptosis를 유도하고 SCE는 이를 유효하게 억제함을 의미한다. 또한 Fig.
연구결과 Fig. 5에서 보듯이 SCE는 CCl₄로 유도한 간독성 모델에서 혈액학적 지표인 ALT, AST, LDH를 개선하였고, Fig. 6과 Fig. 7에서와 같이 조직학적 지표인 간세포의 변성 및 염증세포의 침윤을 억제하였다. 이러한 간독성의 유발이 산화적 스트레스에 의한 것임을 Fig.
연구결과 MTT assay를 통한 세포 생존율 측정에서 Fig. 1A에서 보듯이 SCE는 tBHP에 의해 유도한 세포사멸을 유의하게 억제함을 확인할 수 있었으며, Fig. 2에서 세포사멸의 표지단백질인 Caspase-3, Bcl₂ 및 PARP의 발현변화를 관찰한 결과에서도 tBHP가 apoptosis를 유도하고 SCE는 이를 유효하게 억제함을 확인하였다. 또한 DCFH-DA를 관찰한 결과, Fig.
7에서와 같이 조직학적 지표인 간세포의 변성 및 염증세포의 침윤을 억제하였다. 이러한 간독성의 유발이 산화적 스트레스에 의한 것임을 Fig. 10에서 MDA의 발현변화를 통해 살펴보았고, MDA의 조직내 증가도 SCE에 의해 억제되는 것을 확인하였다. 또한 Fig.
4에서 보듯이 tBHP에 의해 현저하게 감소된 GSH의 함량을 SCE가 유의하게 증가시키는 것이 확인되었으며 이는 SCE가 tBHP에 의한 세포 독성을 방어하는 데에 있어서 항산화 효과가 기여한다는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 종합하면 SCE는 산화적 스트레스에 의해 유발된 간세포의 자멸사에 대해 ROS 생성억제와 항산화 효과를 통해 세포보호작용을 나타낸다는 것을 알 수 있다.
이러한 증가는 SCE 50, 100 mg/kg의 투여로 각각 188.46 ± 59.52, 149.51 ± 15.81 (%)로 유의하게 감소하였다 (Fig. 5A).
9에서 GSH의 증가는 SCE의 항산화 효능을 보여준다. 즉, SCE는 CCl₄에 의해 유도된 산화적 스트레스에 의한 간조직내 손상 및 이로 인한 염증을 억제하였고, 항산화 효능과 apoptosis의 억제를 통해 간세포의 보호작용을 나타내었다.

후속연구

따라서, GCL의 catalytic (GCLC) 및 modifier (GCLM) 소단위의 유전자 발현을 조절하는 것은 산화적 스트레스에 대한 세포 방어 기전에 중요한 역할을 한다. 그러므로 SCE가 GSH 합성에 필요한 유전자 발현에는 어떠한 영향을 미치는지에 대해서도 앞으로 연구가 필요하다고 하겠다.
이러한 결과는 SCE가 in vivo와 in vitro 모델에서 산화적 손상에 대해 세포 보호 효능과 간보호 효과가 있음을 나타낸 것으로, 향후, 항산화 효과와 더불어 간을 보호하는 유효한 약물 후보로서 계혈등에 대한 지속적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	계혈등이란?	계혈등 (Spatholobi Caulis)은 콩과 (Leguminosae)에 속한 落葉木質大藤本인 密花豆 (Spatholobus suberectus DUNN)의 등경(藤莖)을 건조한 것으로, 일부 연구에서 항산화 효과가 보고되어 있지만 산화적 스트레스에 의한 간세포의 손상에 대한 효과 연구 보고가 아직 없는 상태이다.
	Reactive oxygen species (ROS)에 의한 간독성에 대한 계혈등 물추출물의 항산화 및 간보호 효과를 평가하기 위하여, HepG2 cell과 tert-butylhydroperoxide (tBHP)를 활용한 in vitro 모델과 rat와 CCl4를 이용한 급성 간손상 in vivo 모델에서 효능을 평가한 결과는?	그 결과 계혈등 물추출물(SCE)의 병행투여로 in vitro 모델에서는 세포생존율 증가, apoptosis 억제, hydrogen peroxide의 감소, GSH의 함량의 증가를 보였으며, in vivo 모델에서는 혈청중 ALT, AST, LDH 수치의 유의한 감소, rat 간조직내 손상 및 염증의 억제, 간세포 apoptosis 억제, 肝內 GSH의 유의한 증가, MDA의 유의한 감소가 나타났다.
	간의 특징은?	간은 단백질 합성과 해독 기능을 포함하여 말초기관과 생체 에너지 대사를 균형있게 통합 조절하는 인체대사의 중심 기관으로, 간의 기능은 전사인자의 활성화 내지 불활성화를 매개한 유전자의 발현을 통해 조절된다2-4). 간이 약물이나 독성물질을 해독하는 과정에서 반응성이 높은 중간물질 및 활성산소 (ROS：reactive oxygen species)가 생성되어 단백질 및 DNA의 변형을 유도하고 독성에 대한 감수성을 증가시킨다.

참고문헌 (39)

Korean Central Association of Cancer Registries of Ministry of Health and Welfare. 2006 and 2007 cancer rates.
Ramadori G, Moriconi F, Malik I, Dudas J. Physiology and pathophysiology of liver inflammation, damage and repair. J Physiol Pharmacol. 2008;59 Suppl 1:107-117.
Effendi K, Sakamoto M. Molecular pathology in early hepatocarcinogenesis. Oncology. 2010;78/2:157-160.
Papa S, Bubici C, Zazzeroni F, Franzoso G. Mechanisms of liver disease: cross-talk between the NF-kappaB and JNK pathways. Biol Chem. 2009;390/10:965-976.
Liu J, Qu W, Kadiiska MB. Role of oxidative stress in cadmium toxicity and carcinogenesis. Toxicol Appl Pharmacol. 2009;238/3:209-214.

상세보기
Wu SB, Ma YS, Wu YT, Chen YC, Wei YH. Mitochondrial DNA mutation-elicited oxidative stress, oxidative damage, and altered gene expression in cultured cells of patients with MERRF syndrome. Mol Neurobiol. 2010;41/2-3:256-266.
Reinehr R, Haussinger D. CD95 activation in the liver: ion fluxes and oxidative signaling. Arch Biochem Biophys. 2007;462/2:124-131.

상세보기
Diesen DL, Kuo PC. Nitric oxide and redox regulation in the liver: Part I. General considerations and redox biology in hepatitis. J Surg Res. 2010;162/1:95-109.

상세보기
Wojcik M, Burzynska-Pedziwiatr I, Wozniak LA. A review of natural and synthetic antioxidants important for health and longevity. Curr Med Chem. 2010;17/28:3262-3288.

상세보기
Sies H. Glutathione and its role in cellular functions. Free Radic Biol Med 1999;27:916-921.
Yuan L, Kaplowitz N. Glutathione in liver diseases and hepatotoxicity. Mol Aspects Med. 2009;30/1-2:29-41.
Cesaratto L, Vascotto C, Calligaris S, Tell G. The importance of redox state in liver damage. Ann Hepatol. 2004;3/3:86-92.

상세보기
Irshad M, Chaudhuri PS. Oxidant-antioxidant system: role and significance in human body. Indian J Exp Biol. 2002;40/11:1233-1239.
Murrant CL, Reid MB. Detection of reactive oxygen and reactive nitrogen species in skeletal muscle. Microsc Res Tech. 2001;55/4:236-248.

상세보기
Colleges of Oriental Medicine. Herbology professor's association. Herbology. Herbology. Seoul:Young-Lim Publisher. 1992:445-446.
Hu-Zhan Zheng (鄭虎占). Modern study of traditional chinese medicine (中藥現代硏究與應用). Beijing：xue-yuan Publisher (學苑出版社). 1998:2539-2546.
Wang W, Wang J, Zhao D, Liu H, Zhou W, Chen K. Comparison of Spatholobus suberectus Dunn Euonymus alatus (Thunb.) Sied. and Eupolyphage sinensis Walkeron regulation of plasma lipid. Zhongguo Zhoug Yao Za Zhi. 1991;16:299-301, 320.
Choi HS, Kim YC, Lee JS, Jo MR, Seo CH, Park SI. Antibacterial Activities of Hot-water and Ethyl Alcohol Extracts of Medicinal Herbs on Fish Pathogenic Bacteria. J. Fish Pathol. 2004;17(1):39-55.

원문보기 상세보기
Lee SL, Choi CH, Baek JU, Youn DH, Jeong SH, Han U, et al. Experimental Study of Patholobi Caulis on the Transient Cerebral Ischemia in Rats. Korean J. Oriental Phyology & Pathology. 2007;21(5):1127-1134.
Choi SI, Park SJ, Byun SH, Lee JR, Park MK, Kim SC. Effects of Spatholobi Caulis MeOH Extract on the Production of NO and Pro-inflammatory Cytokines in LPS-activated Raw264.7 Cells. Korean J. Herbology. 2009;24(2):21-27.
Choi JS, Song TW, Kim DH. A Study on the Effects of Spatholubus suberectus Dunn on the Inhibition of Arthritis Induced by Collagen on the Mouse. Korean J. Herbology. 2003;18(3):79-99.
Cha BC, Lee EH, Noh MA. Antioxidant Activity of Spatholobus suberectus Dunn. Kor. J. Phamacogn 2005;36(1):50-55.
Sim GS, Kim JH, Lee DH, Park SM, Pyo HB, Zhang YH, et al. Effects of the Spatholobi calulis extract on Antioxidation and Inhibition of Matrix Metalloproteinase in Human Skin Fibroblasts. Korean J. Biotechnol. Bioeng. 2005;20(1):40-45.

원문보기 상세보기
Lee SL, Jeong HW. Experimental Effects of SPATHOLOBI CAULIS on the Cerebral Blood Flow and Lactate Dehydrogenase Activity. Korean J. Oriental Phyology & Pathology. 2006;20(1):25-30.
Lee HK, Kim DC, Back SH. The Effect of Millettia Reticulatas on the Proliferation Inhibition of Human Uterine Leiomyoma Cell and Expression of Apoptosis. Korean J. Oriental Obstetrics & Gynecology. 2006;19/3:135-149
Kim BH, Back SH, Kim BH. The effect of the stem of Spatholobus suberectus Dunn on the proliferation and gene expression related apoptosis in human cervical cancer cells. Korean J. Oriental Obstetrics & Gynecology. 2005;18/1:169-180.
Jun YG, Back SH. Growth inhibition and induction of apoptosis in endometrial cancer cell line by Spatholobus suberectus Dunn. Korean J. Oriental Obstetrics & Gynecology. 2005;18/2:40-51.
Kim DC, Ramachandran S, Baek SH, Kwon SH, Kwon KY, Cha SD, Bae I, Cho CH. Induction of growth inhibition and apoptosis in human uterine leiomyoma cells by isoliquiritigenin. Reprod Sci. 2008;15/6:552-558.

상세보기
Park YS, Baek SH. The effect of -sitosterol proliferation and apoptosis in human uterine leiomyoma cells. Korean J. Oriental Obstetrics & Gynecology. 2005;18/1:181-191.
Hwang SG, Lee HC, Kim CK. Kim DG, Song HJ, Park YJ, et al. Spatholobus suberectus Water Extract induces Apoptotic Cell Death via Inhibition of Cell Cycle in p53-Dificient Human Leukemia Cell Line Jurkat. Korean J. Oriental Phyology & Pathology. 2001;15(6):887-892.
Cui YJ, Liu P, Chen RY. Studies on the chemical constituents of Spatholobus suberectus Dunn. Yao Xue Xue Bao. 2002;37/10:784-787.

상세보기
Zhu You Ping. Chinese materia medica. Harwood academic publisher. The Netherlands. 1998. 468-470.
Chen HW, Chiang T, Wang CY, Lii CK. Inhibition of tert-butyl hydroperoxide-induced cell membrane bleb formation by alpha-tocopherol and glutathione. Food Chem Toxicol 2000;38:1089-1096.

상세보기
Alia M, Sonia Ramos S, Mateos R, Bravo L, Goya L. Response of the antioxidant defense system to tert-butyl hydroperoxide and hydrogen peroxide in a human hepatoma cell line (HepG2). J Biochem Mol Toxicol 2005;19:119-128
Kim TH, Kim YW, Shin SM, Kim CW, Yu IJ, Kim SG. Synergistic hepatotoxicity of N,N-dimethylformamide with carbon tetrachloride in association with endoplasmic reticulum stress. Chem Biol Interact 2010;184:492-501.

상세보기
Stadtman ER. Protein oxidation and aging. Science 1992;257:1220-1224.

상세보기
Esposito LA, Melov S, Panov A, Cottrell BA, Wallace DC. Mitochondrial disease in mouse results in increased oxidative stress. Proc Natl Acad Sci USA. 1999;96:4820-4825.

상세보기
Robertson G, Leclercq I, Farrell GC. Nonalcoholic steatosis and steatohepatitis II. Cytochrome P-450 enzymes and oxidative stress. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2001;281:1135-1139.
Dickinson DA, Forman HJ. Cellular glutathione and thiols metabolism. Biochem Pharmacol 2002;64:1019-1026.

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증