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제안 방법
- 이에 본 연구에서는 한방의료기관에서 비교적 많이 사용되고 있는8) 쌍화탕을 이용하여 동일 시간 조건에서의 가압조건과 무압조건 전탕액에 대한 기호도 설문조사와 전탕액의 수득률, 당도, pH, 지표물질 함량 변화 분석 등을 실시하여 가압과 무압에 따른 전탕액의 차이를 비교하였다.
- 실제 한방의료기관에서의 전탕 조건과 비슷하게 하기 위한 전탕의 공통조건으로 약재 무게는 1제 분량(750g), 1파우치 당 포장되는 전탕액의 양은 120±10mL, 전탕 온도는 100℃으로 하였고, 포장되는 총 파우치의 개수는 최종 전탕액의 추출 농도를 일정하게 유지하기 위해 30±3개로 설정하였으며, 이 때 필요한 물의 양을 알아보기 위해 예비실험을 실시하였다.
- 무압 조건인 경우 증기 배출에 따른 수분 손실이 발생하므로 총 파우치 30±3개를 얻기 위해서 60분 전탕 시 물의 양은 5250mL(1제 분량의 7배수에 해당하는 물의 양), 120분 전탕 시에는 7500mL(1제 분량의 10배수에 해당하는 물의 양), 180분 전탕 시에는 9000mL(1제 분량의 12배에 해당하는 물의 양)로 설정하여 전탕을 진행하였다.
- 예비 실험 결과, 가압 조건인 경우 증기를 배출하지 않아 수분 손실량이 없기 때문에 총 파우치 30±3개를 얻기 위해서 필요한 물의 양인 4500mL(1제 분량의 6배수에 해당하는 물의 양)를 투입하여 각각 60분, 120분, 180분 동안 전탕하였다.
- 설문 항목은 응답자의 성별, 연령, 한약 복용여부와 복용 횟수, 전탕액 기호도 등으로 설정하였고, 동일한 전탕 시간 내(각각 60분, 120분, 180분)에서 압력/무압력 방법으로 추출한 전탕액을 임의로 A 또는 B로 배정하여 응답자와 실험자 모두 확인할 수 없게 한 후 응답자의 시음을 통해 기호도를 조사하였다. 각 전탕시간별 전탕방법의 기호도 조사 결과에 대한 통계 분석은 SPSS V.
- 전탕 후 상온에서 하루정도 보관한 전탕액 파우치 중 임의로 3봉지를 선택하여 각각 파우치의 내용물을 혼합한 뒤 회전증발감압농축기인 Rotary evaporator(Büchi, Switzerland)를 사용하여 농축한 후 농축물 무게를 전체 약재 무게에 대해 환산하여 수율을 측정하였다.
- 전탕 후 상온에서 하루정도 보관한 전탕액 파우치 중 임의로 3봉지를 선택하여 각각 파우치의 내용물을 혼합한 뒤 Refractometer(Pal-α, ATAGO, Japan)를 사용하여 당도를 측정하였으며, pH는 pH meter(672 pH/Ion meter, Metrohm, Switzerland)를 사용하여 측정하였다.
- 1). 각 지표성분을 methanol(HPLC grade, J.T.Baker, U.S.A.)에 녹여 stock solution을 만든 후 각 성분별로 일정 범위의 농도로 희석하여 검량선을 작성하였다(Table 2).
- 0mL/min, 시료 주입량은 10μL이었다. 이동상 조성은 water(1.0% acetic acid 포함, A)와 acetonitrile(1.0% acetic acid 포함, B)로 기울기 용리를 이용하여 0-40분(B, 5-70%), 40-45분(B, 70-100%), 45-50분(B, 100%), 50-55분(100-5%), 55-70분(B, 5%)의 조성으로 용리를 진행하였고, 검출파장은 각 분석 성분의 최대 흡수 파장을 적용하여 230, 254, 280, 320nm로 설정하였다.
- 전탕 방법에 따라 쌍화탕 구성 약재 중 백작약의 지표성분인 paeoniflorin과 albiflorin, 숙지황의 지표성분인 5-HMF, 천궁의 지표성분인 ferulic acid, 육계의 지표성분인 cinnamic acid와 cinnamaldehyde, 감초의 지표성분인 liquiritin과 glycyrrhizin 등의 함량 변화를 분석한 결과는 다음과 같다.
대상 데이터
- 실험에 사용된 쌍화탕의 개별 약재는 (주)옴니허브와 사단법인 한국생약협회에서 구입하였으며, 1첩 구성은 다음과 같다(Table 1).
- 전탕 방법에 따른 기호도를 조사하기 위해 2010년 5월 12부터 19일까지 한국한의학연구원 일원에서 일반인을 대상으로 설문조사를 시행하였다.
- 분석에는 5-hydroxymethyl-furaldehyde(5-HMF, 99.0%), ferulic acid(99.0%) (이상 aldrich, U.S.A.), albiflorin(98.0%), paeoniflorin(99.0%) liquiritin(98.0%), cinnamic acid(99.5%), cinnamaldehyde(98.0%), glycyrrhizin(99.0%) (이상 Wako, Japan) 등을 지표물질로 사용하였다(Fig. 1). 각 지표성분을 methanol(HPLC grade, J.
- 각 전탕시간 및 전탕방법별 쌍화탕 전탕액(평균 약 20000 ppm)을 0.2μm syringe filter(SmartPor®, Woongki science, Korea)로 여과하여 검액으로 사용하였다.
- 분석에 사용한 컬럼은 Luna C18 (4.6×250mm, 5μm, Phenomenex, U.S.A.)이었고, 컬럼 온도는 40℃, 유속은 1.0mL/min, 시료 주입량은 10μL이었다.
- 처방 내 지표성분을 정량하기 위해서 solvent delivery unit(LC-20AT), auto sampler(SIL-20AC), column oven(CTO-20A), photo-diode array detector(SPD-M20A), degasser(DGU-20A3) 등으로 구성된 HPLC system(LC-20A, Shimadzu, Japan)을 사용하였다. 분석에 사용한 컬럼은 Luna C18 (4.
데이터처리
- 설문 항목은 응답자의 성별, 연령, 한약 복용여부와 복용 횟수, 전탕액 기호도 등으로 설정하였고, 동일한 전탕 시간 내(각각 60분, 120분, 180분)에서 압력/무압력 방법으로 추출한 전탕액을 임의로 A 또는 B로 배정하여 응답자와 실험자 모두 확인할 수 없게 한 후 응답자의 시음을 통해 기호도를 조사하였다. 각 전탕시간별 전탕방법의 기호도 조사 결과에 대한 통계 분석은 SPSS V. 12를 이용하여 상관관계 및 유의확률(p-value)를 계산하였고, p-value는 0.05 미만인 것을 통계적 유의성이 있는 것으로 인정하였다.
이론/모형
- 3. The contents of reference compounds in Ssanghwa-tang(Shuanghe-tang) by extraction method (pressure/non-pressure).
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