[논문]전탕 조건에 따른 쌍화탕 전탕액 비교 연구

김정훈; 서창섭; 신현규

제안 방법

1). 각 지표성분을 methanol(HPLC grade, J.T.Baker, U.S.A.)에 녹여 stock solution을 만든 후 각 성분별로 일정 범위의 농도로 희석하여 검량선을 작성하였다(Table 2).
무압 조건인 경우 증기 배출에 따른 수분 손실이 발생하므로 총 파우치 30±3개를 얻기 위해서 60분 전탕 시 물의 양은 5250mL(1제 분량의 7배수에 해당하는 물의 양), 120분 전탕 시에는 7500mL(1제 분량의 10배수에 해당하는 물의 양), 180분 전탕 시에는 9000mL(1제 분량의 12배에 해당하는 물의 양)로 설정하여 전탕을 진행하였다.
설문 항목은 응답자의 성별, 연령, 한약 복용여부와 복용 횟수, 전탕액 기호도 등으로 설정하였고, 동일한 전탕 시간 내(각각 60분, 120분, 180분)에서 압력/무압력 방법으로 추출한 전탕액을 임의로 A 또는 B로 배정하여 응답자와 실험자 모두 확인할 수 없게 한 후 응답자의 시음을 통해 기호도를 조사하였다. 각 전탕시간별 전탕방법의 기호도 조사 결과에 대한 통계 분석은 SPSS V.
실제 한방의료기관에서의 전탕 조건과 비슷하게 하기 위한 전탕의 공통조건으로 약재 무게는 1제 분량(750g), 1파우치 당 포장되는 전탕액의 양은 120±10mL, 전탕 온도는 100℃으로 하였고, 포장되는 총 파우치의 개수는 최종 전탕액의 추출 농도를 일정하게 유지하기 위해 30±3개로 설정하였으며, 이 때 필요한 물의 양을 알아보기 위해 예비실험을 실시하였다.
예비 실험 결과, 가압 조건인 경우 증기를 배출하지 않아 수분 손실량이 없기 때문에 총 파우치 30±3개를 얻기 위해서 필요한 물의 양인 4500mL(1제 분량의 6배수에 해당하는 물의 양)를 투입하여 각각 60분, 120분, 180분 동안 전탕하였다.
0mL/min, 시료 주입량은 10μL이었다. 이동상 조성은 water(1.0% acetic acid 포함, A)와 acetonitrile(1.0% acetic acid 포함, B)로 기울기 용리를 이용하여 0-40분(B, 5-70%), 40-45분(B, 70-100%), 45-50분(B, 100%), 50-55분(100-5%), 55-70분(B, 5%)의 조성으로 용리를 진행하였고, 검출파장은 각 분석 성분의 최대 흡수 파장을 적용하여 230, 254, 280, 320nm로 설정하였다.
이에 본 연구에서는 한방의료기관에서 비교적 많이 사용되고 있는⁸⁾ 쌍화탕을 이용하여 동일 시간 조건에서의 가압조건과 무압조건 전탕액에 대한 기호도 설문조사와 전탕액의 수득률, 당도, pH, 지표물질 함량 변화 분석 등을 실시하여 가압과 무압에 따른 전탕액의 차이를 비교하였다.
전탕 방법에 따라 쌍화탕 구성 약재 중 백작약의 지표성분인 paeoniflorin과 albiflorin, 숙지황의 지표성분인 5-HMF, 천궁의 지표성분인 ferulic acid, 육계의 지표성분인 cinnamic acid와 cinnamaldehyde, 감초의 지표성분인 liquiritin과 glycyrrhizin 등의 함량 변화를 분석한 결과는 다음과 같다.
전탕 후 상온에서 하루정도 보관한 전탕액 파우치 중 임의로 3봉지를 선택하여 각각 파우치의 내용물을 혼합한 뒤 Refractometer(Pal-α, ATAGO, Japan)를 사용하여 당도를 측정하였으며, pH는 pH meter(672 pH/Ion meter, Metrohm, Switzerland)를 사용하여 측정하였다.
전탕 후 상온에서 하루정도 보관한 전탕액 파우치 중 임의로 3봉지를 선택하여 각각 파우치의 내용물을 혼합한 뒤 회전증발감압농축기인 Rotary evaporator(Büchi, Switzerland)를 사용하여 농축한 후 농축물 무게를 전체 약재 무게에 대해 환산하여 수율을 측정하였다.

대상 데이터

각 전탕시간 및 전탕방법별 쌍화탕 전탕액(평균 약 20000 ppm)을 0.2μm syringe filter(SmartPor®, Woongki science, Korea)로 여과하여 검액으로 사용하였다.
분석에 사용한 컬럼은 Luna C18 (4.6×250mm, 5μm, Phenomenex, U.S.A.)이었고, 컬럼 온도는 40℃, 유속은 1.0mL/min, 시료 주입량은 10μL이었다.
분석에는 5-hydroxymethyl-furaldehyde(5-HMF, 99.0%), ferulic acid(99.0%) (이상 aldrich, U.S.A.), albiflorin(98.0%), paeoniflorin(99.0%) liquiritin(98.0%), cinnamic acid(99.5%), cinnamaldehyde(98.0%), glycyrrhizin(99.0%) (이상 Wako, Japan) 등을 지표물질로 사용하였다(Fig. 1). 각 지표성분을 methanol(HPLC grade, J.
실험에 사용된 쌍화탕의 개별 약재는 (주)옴니허브와 사단법인 한국생약협회에서 구입하였으며, 1첩 구성은 다음과 같다(Table 1).
전탕 방법에 따른 기호도를 조사하기 위해 2010년 5월 12부터 19일까지 한국한의학연구원 일원에서 일반인을 대상으로 설문조사를 시행하였다.
처방 내 지표성분을 정량하기 위해서 solvent delivery unit(LC-20AT), auto sampler(SIL-20AC), column oven(CTO-20A), photo-diode array detector(SPD-M20A), degasser(DGU-20A3) 등으로 구성된 HPLC system(LC-20A, Shimadzu, Japan)을 사용하였다. 분석에 사용한 컬럼은 Luna C₁₈ (4.

데이터처리

설문 항목은 응답자의 성별, 연령, 한약 복용여부와 복용 횟수, 전탕액 기호도 등으로 설정하였고, 동일한 전탕 시간 내(각각 60분, 120분, 180분)에서 압력/무압력 방법으로 추출한 전탕액을 임의로 A 또는 B로 배정하여 응답자와 실험자 모두 확인할 수 없게 한 후 응답자의 시음을 통해 기호도를 조사하였다. 각 전탕시간별 전탕방법의 기호도 조사 결과에 대한 통계 분석은 SPSS V. 12를 이용하여 상관관계 및 유의확률(p-value)를 계산하였고, p-value는 0.05 미만인 것을 통계적 유의성이 있는 것으로 인정하였다.

이론/모형

3. The contents of reference compounds in Ssanghwa-tang(Shuanghe-tang) by extraction method (pressure/non-pressure).

성능/효과

1. 설문조사 결과, 60분 전탕액을 제외한 120분, 180분 전탕 시 가압조건에서의 전탕액이 무압 조건에서의 전탕액보다 높은 선호도를 보였지만, 각 결과에서 통계적인 유의성을 확인할 수 없었다.
60분 전탕 시 5-HMF와 cinnamic acid는 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde 등은 가압조건에서 더 많은 함량을 보였으며, albiflorin, paeoniflorin, glycyrrhizin 등은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다. 120분 전탕 시 cinnamic acid와 glycyrrhizin은 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, 5-HMF, albiflorin, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde 등은 가압 조건에서 더 많은 함량을 보였으며, paeoniflorin은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다. 180분 전탕시 ferulic acid는 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, 5-HMF, albiflorin, cinnamic acid, cinnamaldehyde, glycyrrhizin 등은 가압조건에서 더 많은 함량을 보였으며, paeoniflorin, liquiritin 등은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다.
120분 전탕 시 cinnamic acid와 glycyrrhizin은 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, 5-HMF, albiflorin, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde 등은 가압 조건에서 더 많은 함량을 보였으며, paeoniflorin은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다. 180분 전탕시 ferulic acid는 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, 5-HMF, albiflorin, cinnamic acid, cinnamaldehyde, glycyrrhizin 등은 가압조건에서 더 많은 함량을 보였으며, paeoniflorin, liquiritin 등은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다. 8가지 지표성분 중 paeoniflorin은 각 전탕 시간 모두 무압 조건에서 더 많은 함량을 보였고, cinnamaldehyde 는 각 전탕 시간 모두 가압조건에서 더 많은 함량을 보였다(Fig.
2. 추출 수율과 당도를 분석한 결과, 가압조건과 무압조건에서 모두 시간에 따라 추출률과 당도가 증가하였고, 전탕시간이 길어질수록 가압조건에서의 추출률과 당도가 증가하였다.
3. pH 측정 결과, 가압조건과 무압조건에서 모두 시간이 갈수록 pH가 감소하였고 각 전탕시간마다 가압조건이 무압조건보다 더 낮은 pH를 보였다.
4. HPLC를 이용한 지표성분 함량 변화 분석 결과, 전탕조건과 전탕시간에 따라 성분 함량의 변화에서 일정한 경향성을 확인할 수는 없었지만, 가압조건과 무압조건에서 paeoniflorin과 cinnamaldehyde 등 특정 성분의 함량 차이가 나타나는 것을 확인할 수 있었다.
각 전탕 시간과 전탕 조건에서 paeoniflorin 함량이 가장 높게 나타났고, cinnamic acid 함량이 가장 낮게 나타났다. 60분 전탕 시 5-HMF와 cinnamic acid는 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde 등은 가압조건에서 더 많은 함량을 보였으며, albiflorin, paeoniflorin, glycyrrhizin 등은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다. 120분 전탕 시 cinnamic acid와 glycyrrhizin은 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, 5-HMF, albiflorin, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde 등은 가압 조건에서 더 많은 함량을 보였으며, paeoniflorin은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다.
60분 전탕 시 가압 조건에서는 17.2%, 무압 조건에서는 18.9%의 수율을 보였고, 120분 전탕 시 가압 조건에서는 19.72%, 무압 조건에서는 36.27%로 두 전탕 시간 동안에는 무압 조건에서 전탕한 경우가 가압 조건에서 전탕한 경우에서보다 추출 수율이 높은 것으로 나타났다. 그러나 180분 전탕 시에는 가압 조건에서 28.
60분 전탕 시 가압 조건에서는 4.07°Bx, 무압 조건에서는 4.57°Bx를 나타내어 무압 조건에서의 당도가 높게 나타났으나, 120분 전탕 시 가압 조건에서 5.2°Bx, 무압 조건에서 4.4°Bx를 나타냈고, 180분 전탕 시 가압 조건에서 5.6°Bx, 무압 조건에서 5.1°Bx를 나타내어 120분 이상 전탕시에는 가압 조건의 당도가 무압 조건의 당도보다 높게 나타났다.
60분 전탕 시 가압 조건에서는 5.171, 무압 조건에서는 5.223을 보였고, 120분 전탕 시 가압 조건에서 4.983, 무압 조건에서 5.138을 보였으며, 180분 전탕 시 가압 조건에서 4.879, 무압 조건에서 5.096을 보여 전체적으로 동일 시간동안 전탕 시 가압 조건보다 무압 조건 전탕한 전탕액에서 pH가 증가하였다. 그리고 가압 조건과 무압 조건 모두 전탕 시간에 비례하여 pH가 감소하였다(Table 6).
180분 전탕시 ferulic acid는 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, 5-HMF, albiflorin, cinnamic acid, cinnamaldehyde, glycyrrhizin 등은 가압조건에서 더 많은 함량을 보였으며, paeoniflorin, liquiritin 등은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다. 8가지 지표성분 중 paeoniflorin은 각 전탕 시간 모두 무압 조건에서 더 많은 함량을 보였고, cinnamaldehyde 는 각 전탕 시간 모두 가압조건에서 더 많은 함량을 보였다(Fig. 3).
각 전탕 시간과 전탕 조건에서 paeoniflorin 함량이 가장 높게 나타났고, cinnamic acid 함량이 가장 낮게 나타났다. 60분 전탕 시 5-HMF와 cinnamic acid는 가압조건과 무압조건에서 비슷한 함량을 보였고, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde 등은 가압조건에서 더 많은 함량을 보였으며, albiflorin, paeoniflorin, glycyrrhizin 등은 무압조건에서 더 많은 함량을 보였다.
각 전탕 시간별로 전탕 방법에 대한 기호도 조사 결과, 60분 전탕 시에는 무압조건이 가압조건보다 1명 많은 응답수를 보였으나, 120분 전탕 시에는 가압조건 46(51%)명, 무압조건 31(34%)명으로 나타났고, 180분 전탕 시에는 가압조건 61명(57%), 무압조건 36명(33%)으로 나타났다. 기호도 결과를 볼 때 전탕시간이 증가할수록 가압조건을 선호하는 사람의 수가 증가하는 경향이 나타나는 것으로 확인할 수 있었지만, 각 전탕시간별 전탕액 선호도에 대한 통계적인 유의성은 없었다(Fig.
096을 보여 전체적으로 동일 시간동안 전탕 시 가압 조건보다 무압 조건 전탕한 전탕액에서 pH가 증가하였다. 그리고 가압 조건과 무압 조건 모두 전탕 시간에 비례하여 pH가 감소하였다(Table 6).
그리고 가압 조건으로 전탕한 경우 60분, 120분, 180분 전탕시 각각 17.2%, 19.72%, 28.4%의 수율을 보여 전탕시간에 비례하여 추출 수율이 증가하였고, 무압 조건에서 전탕한 경우 60분과 120분 전탕 시 18.9%, 36.27%로 전탕시간에 비례하여 추출 수율이 증가하였으나, 180분 전탕 시 24.36%로 감소하였다(Table 4).
그리고 가압 조건으로 전탕한 경우 시간에 비례하여 당도가 4.07, 5.2, 5.6°Bx로 증가하는 경향을 보였으나, 무압 조건으로 전탕한 경우 4.57, 4.4, 5.1°Bx로 60분과 180분 전탕 시에는 증가하였으나 120분 전탕 시에는 60분 전탕보다 감소하였다(Table 5).
각 전탕 시간별로 전탕 방법에 대한 기호도 조사 결과, 60분 전탕 시에는 무압조건이 가압조건보다 1명 많은 응답수를 보였으나, 120분 전탕 시에는 가압조건 46(51%)명, 무압조건 31(34%)명으로 나타났고, 180분 전탕 시에는 가압조건 61명(57%), 무압조건 36명(33%)으로 나타났다. 기호도 결과를 볼 때 전탕시간이 증가할수록 가압조건을 선호하는 사람의 수가 증가하는 경향이 나타나는 것으로 확인할 수 있었지만, 각 전탕시간별 전탕액 선호도에 대한 통계적인 유의성은 없었다(Fig. 2).
또한 가압조건의 경우 cinnamaldehyde를 제외하고 60분 전탕보다는 120분과 180분 전탕에서 전체적인 성분 함량이 높게 나타났고, 이 중 5-HMF, cinnamic acid, glycyrrhizin은 180분 전탕에서, 그리고 albiflorin, paeoniflorin, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde는 120분 전탕에서 함량이 높게 나타난 것을 확인할 수 있었다. 무압조건의 경우, 5-HMF, paeoniflorin, liquiritin, ferulic acid 등은 180분 전탕 시 가장 높은 함량을 보였고, cinnamic acid와 glycyrrhizin은 120분에서 가장 높은 함량을 보였다.
또한 가압조건의 경우 cinnamaldehyde를 제외하고 60분 전탕보다는 120분과 180분 전탕에서 전체적인 성분 함량이 높게 나타났고, 이 중 5-HMF, cinnamic acid, glycyrrhizin은 180분 전탕에서, 그리고 albiflorin, paeoniflorin, liquiritin, ferulic acid, cinnamaldehyde는 120분 전탕에서 함량이 높게 나타난 것을 확인할 수 있었다. 무압조건의 경우, 5-HMF, paeoniflorin, liquiritin, ferulic acid 등은 180분 전탕 시 가장 높은 함량을 보였고, cinnamic acid와 glycyrrhizin은 120분에서 가장 높은 함량을 보였다. 하지만 albiflorin과 cinnamaldehyde는 위의 경우와는 다르게 60분에서 가장 높은 함량를 보인 뒤 시간이 지날수록 함량이 감소하는 경향을나타냈다(Fig.
비록 무압조건에서 120분 전탕 시 60분과 180분 전탕보다 추출 수율이 많았지만, 가압조건이나 무압조건 모두 전탕 시간에 따라 추출 수율이 증가하는 것으로 볼 수 있었다.
수율 결과와 마찬가지로 무압조건에서 120분 전탕 시 60분, 180분 전탕 보다 당도가 감소하였으나, 가압조건과 무압조건에서 모두 전탕 시간에 따라 당도가 증가하는 경향으로 확인할 수 있었다. 이는 추출시간이 길어질수록 추출되는 물질의 용질의 양이 증가하고 그에 따라 단위 농도당 용액의 굴절율이 증가하여 당도 역시 증가하는 것으로 볼 수 있다.
이상의 결과를 볼 때, 전탕방법과 전탕시간이 처방 전탕액에 영향을 미치기는 하지만 이를 바탕으로 특정한 전탕조건을 확립하는 데에는 어려움이 있었다. 따라서 추가적인 효능 실험이나 타 처방 분석을 통해 한약 처방의 적절한 전탕방법과 전탕시간을 모색할 필요가 있을 것으로 보인다.
전탕방법과 전탕시간에 따른 쌍화탕 전탕액을 비교 분석한 결과, 동일한 전탕시간에서는 무압조건보다 가압조건에서, 그리고 동일 전탕방법에서는 전탕시간이 증가할수록 전탕액 내에 추출되는 물질이 증가하여 추출 수율, 당도, pH 변화에 어느 정도 경향성을 보이는 것으로 볼 수 있었지만, 성분 함량 분석 결과에서는 이와 부합하는 성분함량의 경향성이 나타나지 않아서 특정한 전탕조건을 확립하는 데에는 어려움이 있었다. 그리고 시음을 통한 기호도 조사에서도 어느 정도의 경향성을 보였으나 통계적 유의성을 찾기는 힘든 것으로 나타났다.

후속연구

이상의 결과를 볼 때, 전탕방법과 전탕시간이 처방 전탕액에 영향을 미치기는 하지만 이를 바탕으로 특정한 전탕조건을 확립하는 데에는 어려움이 있었다. 따라서 추가적인 효능 실험이나 타 처방 분석을 통해 한약 처방의 적절한 전탕방법과 전탕시간을 모색할 필요가 있을 것으로 보인다.

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	전통적인 옹기 전탕의 방법은 어떤 어려움을 가지고 있는가?	전통적인 옹기 전탕의 방법이 번거로움과 불편함, 대량 전탕 및 전탕 공간 확보의 어려움 등으로 인해 그 자리를 잃어가는 대신, 기술의 발달에 힘입어 전탕 과정이 비교적 간단하고 대량 전탕이 가능한 고온․고압 전기 전탕기가 거의 모든 한방의료기관에서 사용되고 있어 현재 한약 전탕 방법의 대부분을 차지하고 있다1). 2008년 한국한의학 연구원 조사에 의하면, 한의원에서 한약 전탕에 사용하는 전탕기기로는 무압식 전탕기기와 가압식 전탕기기로 나눌 수 있는데 무압식 전탕기기(56.
	전탕 방법에 따른 기호도를 조사하기 위한 설문조사의 항목은 어떻게 설정하였는가?	설문 항목은 응답자의 성별, 연령, 한약 복용여부와 복용 횟수, 전탕액 기호도 등으로 설정하였고, 동일한 전탕 시간 내(각각 60분, 120분, 180분) 에서 압력/무압력 방법으로 추출한 전탕액을 임의로 A 또는 B로 배정하여 응답자와 실험자 모두 확인할 수 없게 한 후 응답자의 시음을 통해 기호도를 조사하였다. 각 전탕시간별 전탕방법의 기호도 조사 결과에 대한 통계 분석은 SPSS V.
	2008년 한국한의학 연구원 조사에 의하면 무압식 전탕기기와 가압식 전탕기기의 사용비율은 어떠하였는가?	전통적인 옹기 전탕의 방법이 번거로움과 불편함, 대량 전탕 및 전탕 공간 확보의 어려움 등으로 인해 그 자리를 잃어가는 대신, 기술의 발달에 힘입어 전탕 과정이 비교적 간단하고 대량 전탕이 가능한 고온․고압 전기 전탕기가 거의 모든 한방의료기관에서 사용되고 있어 현재 한약 전탕 방법의 대부분을 차지하고 있다1). 2008년 한국한의학 연구원 조사에 의하면, 한의원에서 한약 전탕에 사용하는 전탕기기로는 무압식 전탕기기와 가압식 전탕기기로 나눌 수 있는데 무압식 전탕기기(56.6%) 가 가압식 전탕기기(39.5%)보다 더 많이 쓰이는 것으로 나타났고, 전탕 시간으로는 60분, 90분, 120분 및 120분 초과 중 120분을 초과하여 전탕한다는 한의원 비율이 75.1%로 가장 높게 나타났다2).

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