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문제 정의
- 토마토 시설재배에서 증가하는 토마토 잎곰팡이병을 방제할 미생물 제제를 병원균 Fulvia "Jva에 길항력이 강한 미생물 Bacillus amyloliquefaciens A-2 균주를 이용하여 개발하기 위해 본 연구를 수행하였다. 미생물 A-2 균주를 현미유가 첨가된 배지에서 대량 발효배양하고 각종 전달 매체와 첨가제를 혼합하고 건조하여 제조된 미생물제제들의 효과를 검정하였다.
- 본 연구에서는 타피오카 전분, 옥수수 전분, 썬크리미, 당, 오일류를 이용하여 제제를 만들고, 토마토 잎곰팡이 병을 대상으로 방제 실험을 한 결과 비교적 높은 방제 효과를 보이는 제제를 선발할 수 있었다. 구슬형 타피오카 전분을 이용한 A-2H 제제가 우수하였으나 분무가 어려운 문제로 인하여 이를 개량하기 위한 연구를 수행하였다. 끓인 타피오카 전분으로 만든 A2-M 제제의 경우 방제효과는 좋았으나 전분을 끓여야 하기 때문에 제제에 번거로움이 있었다.
- 따라서 본 연구에서는 토마토 잎곰팡이병에 대한 길항력이 우수한 균주로 선발되어 16S rRNA 유전자와 DNA gyrase 유전자의 염기서열로 동정된 B. amyloliquefaciens A-2균주(전, 2005)를 이용하여 제제화하고 생육상에서 우수한방제효과를 보인 미생물 제제를 선발하였다. 또한 선발된 미생물 제제를 플라스틱 하우스 내 토경재배지와 자연 발생 농가에서 토마토 잎곰팡이병에 대한 방제효과를 검정하였다.
- 방제효과가 가장 우수하여 최종 선발된 A2-MP 제제를 희석배수별로 처리하여 가장 적합한 처리농도를 선발하고자 하였다. 그 결과 100배, 500배, 1000배에서 각각 84.
제안 방법
- 대조 구인 무처리구는 수돗물만 분무하였고 화학농약 트리후미졸(Triflumizole)(상품명: 트리후민 수화제, 원제(active ingredient, 30% w/w)) 대조구는 3, 000배 희석액을 분무기로 분무처리하였다. 2차로 준비된 A-2M, A-2MP, A-2O의 처리도 동일한 방법으로 수행하였다. 처리된 식물체는 생육상에서 유지하면서 24시간 후 준비된 병원균을 전술한 바와 같이 분무접종하였다.
- 2% 와도 유의차가 없었다(Table 2). A2-M 제제의 제제화시 첨가되는 기존의 구슬형의 타피오카 대신 분말형태의 타피오카를 이용하여 제조한 A2-MP 제제를 A2-M 제제 및 A2-0 제제와 방제효과를 비교하였다. 그 결과, A2-M과 A2-MP 제제의 방제가는 각각 88.
- 본 연구에서는 길항력이 우수한 것으로 인정된 3. amyloliquefaciens A-2 균주를 이용하여 토마토 잎곰팡이병 방제를 위한 미생물 제제를 개 발하였다. 본 연구에서는 이미 길항세균 B.
- 각 처리구는 평균면적(25 cmx56 cm) 6주씩 3반복, 완전임의배치법으로 실시하였다. 이때 사용된 화학농약은 등록 고시된 트리후미졸 3, 000배를 사용하였다(한국농약공업협회, 2007).
- 수화제형으로 제조하였다. 그러나 구슬형의 타피오카 전분이 물에 대한 용해성이 떨어지고 살포기의 입구를 막는 등의 단점이 있어 이를 보완하기 위해 물에 대한 용해도도 높고 증량제의 효과도 있는 가루형의 타피오카와 썬크리미, 설탕 등을 혼합하여 제형화를 시도하였다. 본 연구의 제제화 기술에 사용된 변성전분과 타피오카 전분은 가격 면에서도 저렴하고 산업경쟁력이 있으며, 자외선 차단 및 부착정도와 증량제로서의 기능도 있어 이를 전달매체로 선발하였다.
- 희석은 수화제 분말 1g을 100 m/의 수돗물에 현탁한 후 포트에 파종후 5주된 토마토 잎의 앞, 뒷면에 30 m/씩 분무기로 골고루 살포하였다. 대조 구인 무처리구는 수돗물만 분무하였고 화학농약 트리후미졸(Triflumizole)(상품명: 트리후민 수화제, 원제(active ingredient, 30% w/w)) 대조구는 3, 000배 희석액을 분무기로 분무처리하였다. 2차로 준비된 A-2M, A-2MP, A-2O의 처리도 동일한 방법으로 수행하였다.
- 수화제제 A2-MP 제제를 각각 100, 500, 1000배로, 화학농약 트리후민 수화제는 3, 000배로 희석하여 포트 재배한 7주된 토마토 잎의 앞 . 뒷면에 1주당 30 ml씩 골고루 처리하고 전술한 바와 동일하게 방제효과를 검정하였다.
- 있었다. 때문에 A2-H 제제의 주재료인 구슬형 타피오카를 끓여 A2-M 제제를 추가 제제화하고, A2-H 제제와 화학농약인트리후민을 대조구로하여 방제효과를 비교 검정하였다.
- 조사하여 미생물농약의 안정성을 조사하였다. 또한 4℃ 와 실온에서 보관 중이던 A2-MP 제제를 토마토 포트 상에서 잎곰팡이병에 대한 방제효과 실험을 실시하였다.
- amyloliquefaciens A-2균주(전, 2005)를 이용하여 제제화하고 생육상에서 우수한방제효과를 보인 미생물 제제를 선발하였다. 또한 선발된 미생물 제제를 플라스틱 하우스 내 토경재배지와 자연 발생 농가에서 토마토 잎곰팡이병에 대한 방제효과를 검정하였다.
- 따라 수행하였다(전, 2005). 먼저, PDA배지에서 전 배양한 F. fiilva TF13 균주의 균사절편(직경 1 mm) 12개를 300 m/의 PDB배지에 접종하여 4일간 진탕배양(25℃, 150 rpm)한 후 균사를 걸러내어 세척 후, 이를 분쇄기로 10초간 균사를 마쇄한 후 현탁액 의 농도를 A550=0.4이 되도록 PDB배지로 조정하여 이용하였다. 준비된 접종 원은 파종 후 5주된 토마토 성체식물에 골고루 분무살포한 후 100% 상대습도의 생육실에 보관하였으며, 각 처리구는 5 주씩 3반복으로 수행하였다.
- 미생물 Bacillus amyloliquefaciens A-2 균주를 이용하여 개발하기 위해 본 연구를 수행하였다. 미생물 A-2 균주를 현미유가 첨가된 배지에서 대량 발효배양하고 각종 전달 매체와 첨가제를 혼합하고 건조하여 제조된 미생물제제들의 효과를 검정하였다. 제조된 제제 A-2H가 방제 효과가 가장 우수하였으나 처리에서 단점으로 인해 이를 보완하며 효과가 동일한 제형인 A-2MP를 선발하였다.
- 종균 배양은 동일한 배지에서 밤새 배양한 길항세균 A-2균주를 400 m/을 접종하였다. 배양 시 발생되는 거품을 제거하기 위해 10배 희석한 antiform용액 (DB-110A, Dowcoming)을 10m/(0.25%) 첨가하여 배양(35℃, 350 rpm, 1.5 atm, pH 6~7)하면서, 24시간 간격으로 72시간까지 희석평판법으로 생균수를 측정하였다. 이 배양액에 각종 전분을 전달매체로 첨가하고 영양원으로 설탕과 오일을 첨가하고 혼합하여 수화제형 제제들을 제조에 이용하였다(Table 1).
- 준비된 접종 원은 파종 후 5주된 토마토 성체식물에 골고루 분무살포한 후 100% 상대습도의 생육실에 보관하였으며, 각 처리구는 5 주씩 3반복으로 수행하였다. 병원균 접종 5일 후 이병엽률을 조사하여 방제가로 환산하였다. 이병엽률은 농약의 등록시험 기준과 방법에 따라 다음과 같이 환산하였다.
- 본 연구에 사용하였다. 병원균 접종원 제조는 앞서 명시한 생육실 포트재배에서의 잎곰팡이병 방제효과 검정과 동일하였으며, 준비된 토마토 식물체에 병원균 TF13 균주의 접종원을 60 m/을 처리하였다. 실험은 처리구당 12주 씩, 3반복, 완전임의배치법으로 실시하였다.
- amyloliquefaciens A-2 균주를 이용하여 토마토 잎곰팡이병 방제를 위한 미생물 제제를 개 발하였다. 본 연구에서는 이미 길항세균 B. amyloliquefaciens A-2 균주의 대량배양용 배지로 기초배지에 현미유 3.0% 와 yeast extract 0.5%를 첨가한 현미유배지를 이용하였는 데 이는 이전 연구를 통해 미생물의 생균수 및 방제효과를 고려하여 선발하였다(전, 2005). 이때, yeast extract를 0.
- 면류 및 제과, 제빵에 적용 시 품질개선이 될 수 있으며, 그밖에 식품의 부형제 및 결착제로 사용되는 우수한 천연전분이다(안, 2005). 본연구에서 사용된 분말형과 끓인 타피오카는 기존의 구슬형의 타피오카로 만든 A2-H의 침전물이 남는 결점을 보안하기 위해 사용하였으며 분말형을 이용하여 만든 제제 A2-MP가 다른 전분을 이용하여 만든 제제에 비하여 위에서 언급된 효과 뿐만 아니라 제제화 과정에서의 편리함과 제제 완료 후의 회수율에서 보다 더 유용하였다.
-
생육상에서의 미생물 제제 방제효과 검정.
- 생육실 포트 검정에서 최종 선발된 B. amyloliquefaciens A-2 균주의 수화 제제 A2-MP 제제를 공시하여 온실 내 토경 재배한 토마토에서 잎곰팡이병에 대한 방제효과를 검정하였다. 그 결과, A2-MP 제제의 100배 희석 처리구가 각각 79.
- 생육실 포트검정과 하우스 내 토경재배 검정을 통하여 선발된 수화제제 A2-MP 제제를 화학농약과 비교하여 토마토 잎곰팡이병 자연발생 농가에서 방제효과를 검정 하였다. 처리방법은 미생물농약 수화제제 A2-MP 제제를 농도별과 처리 횟수별로 나누어서 실험을 실시하였다.
- 선발된 미생물 제제의 저장 안정성을 조사하기 위해 제제 A2-MP를 실온과 4℃에서 각각 보관하면서 매달 동일한 날짜에 제제에 포함되어 있는 A-2균주의 생균수를 NA배지에서 희석평판법으로 조사하여 미생물농약의 안정성을 조사하였다. 또한 4℃ 와 실온에서 보관 중이던 A2-MP 제제를 토마토 포트 상에서 잎곰팡이병에 대한 방제효과 실험을 실시하였다.
- 병원균 접종원 제조는 앞서 명시한 생육실 포트재배에서의 잎곰팡이병 방제효과 검정과 동일하였으며, 준비된 토마토 식물체에 병원균 TF13 균주의 접종원을 60 m/을 처리하였다. 실험은 처리구당 12주 씩, 3반복, 완전임의배치법으로 실시하였다. 약제 처리는 1주일 간격으로 총 3회 처리하였으며, 마지막 약제 처리 후 1주일 뒤 발병엽률을 조사하여 방제가로 환산하였다.
- 실험은 처리구당 12주 씩, 3반복, 완전임의배치법으로 실시하였다. 약제 처리는 1주일 간격으로 총 3회 처리하였으며, 마지막 약제 처리 후 1주일 뒤 발병엽률을 조사하여 방제가로 환산하였다.
-
온실내 토경재배에서의 방제효과 검정.
- 5 atm, pH 6~7)하면서, 24시간 간격으로 72시간까지 희석평판법으로 생균수를 측정하였다. 이 배양액에 각종 전분을 전달매체로 첨가하고 영양원으로 설탕과 오일을 첨가하고 혼합하여 수화제형 제제들을 제조에 이용하였다(Table 1). 혼합물을 55*>C건조기에서 3 일간 건조한 후 분쇄기에서 분쇄하여 200 mesh 체로 거른 수화제형의 제제를 최종 제제화하고 4℃에 보관하면서 방제실험에 이용하였다.
- 미생물 A-2 균주를 현미유가 첨가된 배지에서 대량 발효배양하고 각종 전달 매체와 첨가제를 혼합하고 건조하여 제조된 미생물제제들의 효과를 검정하였다. 제조된 제제 A-2H가 방제 효과가 가장 우수하였으나 처리에서 단점으로 인해 이를 보완하며 효과가 동일한 제형인 A-2MP를 선발하였다. 선발된 A-2MP는 100배, 500배 희석처리 후 생육상에서 토마토에 처리한 경우 화학농약과 대등한 방제효과를 나타내었다.
- 제형화 선발을 위한 전달매체로써 구슬형의 타피오카 전분, 옥수수 전분, 변성전분, 썬크리미, 썬사이즈, 썬슈퍼젤, 썬프리젤 등을 사용하여 수화제형으로 제조하였다. 그러나 구슬형의 타피오카 전분이 물에 대한 용해성이 떨어지고 살포기의 입구를 막는 등의 단점이 있어 이를 보완하기 위해 물에 대한 용해도도 높고 증량제의 효과도 있는 가루형의 타피오카와 썬크리미, 설탕 등을 혼합하여 제형화를 시도하였다.
- 준비된 수 화제형 12종(A2-A, A2-L)을 1차로 100배 희석하여 방제 효과를 검정하였다. 희석은 수화제 분말 1g을 100 m/의 수돗물에 현탁한 후 포트에 파종후 5주된 토마토 잎의 앞, 뒷면에 30 m/씩 분무기로 골고루 살포하였다.
- 4이 되도록 PDB배지로 조정하여 이용하였다. 준비된 접종 원은 파종 후 5주된 토마토 성체식물에 골고루 분무살포한 후 100% 상대습도의 생육실에 보관하였으며, 각 처리구는 5 주씩 3반복으로 수행하였다. 병원균 접종 5일 후 이병엽률을 조사하여 방제가로 환산하였다.
- 2차로 준비된 A-2M, A-2MP, A-2O의 처리도 동일한 방법으로 수행하였다. 처리된 식물체는 생육상에서 유지하면서 24시간 후 준비된 병원균을 전술한 바와 같이 분무접종하였다. 이후 식물체는 상대습도 90%, 온도 20±2℃의 생육실에 유지하면서 병원균 접종 5일 후에 이병엽률을 조사하고 방제가로 환산하여 방제가가 가장 높은 제제를 선발하였다.
- 생육실 포트검정과 하우스 내 토경재배 검정을 통하여 선발된 수화제제 A2-MP 제제를 화학농약과 비교하여 토마토 잎곰팡이병 자연발생 농가에서 방제효과를 검정 하였다. 처리방법은 미생물농약 수화제제 A2-MP 제제를 농도별과 처리 횟수별로 나누어서 실험을 실시하였다. 최초 약제는 2007년 2월 2일에 살포하였고, 최종 살포 1주일 후인 2007년 2월 23일에 발병률을 다음과 같이 발병 도로 계산하여 방제가로 환산하였다.
- 처리방법은 미생물농약 수화제제 A2-MP 제제를 농도별과 처리 횟수별로 나누어서 실험을 실시하였다. 최초 약제는 2007년 2월 2일에 살포하였고, 최종 살포 1주일 후인 2007년 2월 23일에 발병률을 다음과 같이 발병 도로 계산하여 방제가로 환산하였다.
- 토마토 잎곰팡이병 방제용으로 최종 선발된 수화 제제인 A2-MP 제제인 경우에는 생육실 포트재배에서의 방제 효과를 희석배수별로 검정하였다. 수화제제 A2-MP 제제를 각각 100, 500, 1000배로, 화학농약 트리후민 수화제는 3, 000배로 희석하여 포트 재배한 7주된 토마토 잎의 앞 .
대상 데이터
- 2007년 1월 말경 토마토 잎곰팡이병이 자연 발생하기 시작한 경상남도 김해시 대저동 소재의 농가의 플라스틱 하우스를 임대하였으며, 품종은 서건을 2006년 9월 15일에 파종하고 45일 후인 11월 1일에 재식하였으며 130~140일 후에 첫 수확 하였다. 생육실 포트검정과 하우스 내 토경재배 검정을 통하여 선발된 수화제제 A2-MP 제제를 화학농약과 비교하여 토마토 잎곰팡이병 자연발생 농가에서 방제효과를 검정 하였다.
- 본 연구의 병원 진균인 F. fidva TF13 균주 (전, 2005)는 통상 25℃의 온도에 potato dextrose broth (PDB)나 potato dextrose agar(PDA) 배지에 배양하여 연구에 이용하였다. 길항미생물인 B.
- 그러나 구슬형의 타피오카 전분이 물에 대한 용해성이 떨어지고 살포기의 입구를 막는 등의 단점이 있어 이를 보완하기 위해 물에 대한 용해도도 높고 증량제의 효과도 있는 가루형의 타피오카와 썬크리미, 설탕 등을 혼합하여 제형화를 시도하였다. 본 연구의 제제화 기술에 사용된 변성전분과 타피오카 전분은 가격 면에서도 저렴하고 산업경쟁력이 있으며, 자외선 차단 및 부착정도와 증량제로서의 기능도 있어 이를 전달매체로 선발하였다.
- 선발된 제제의 방제 효과를 검정하기 위해 공시된 토마토 품종(서광)을 플러그 포트에 파종하여 4주 된 유묘를 하우스 내에 한 주당 간격을 20 cm로 하여 재식한지 15주된 토마토 식물체를 본 연구에 사용하였다. 병원균 접종원 제조는 앞서 명시한 생육실 포트재배에서의 잎곰팡이병 방제효과 검정과 동일하였으며, 준비된 토마토 식물체에 병원균 TF13 균주의 접종원을 60 m/을 처리하였다.
- 토마토 잎곰팡이 병에 대해 감수성품종으로 알려진 서광(상품명: 주이코 102) 품종을 공시하여 플러그포트에 파종한 후 3~4엽이 되었을 때 지름 10 cm 포트에 정식하여 온실(25±50(2)에서 키운 뒤 1화방이 형성되기 직전의 식물체를 생육실과 온 실내 포트 검정을 통한 병 방제 검점에 사용하였다.
데이터처리
- YMeans in the same column followed by the same letter are not significantly different (F<0.05) based on Duncan's multiple range test.
- YMeans in the same column followed by the same letter are not significantly different (P<0.05) based on Duncan's multiple range test. Table 3.
- 이병엽률은 농약의 등록시험 기준과 방법에 따라 다음과 같이 환산하였다. 본 연구에서 실시된 실험은 반복수별 방제효과를 평균하여 통계분석을 실행하였다. 통계분석은 유의수준 P=0.
- 본 연구에서 실시된 실험은 반복수별 방제효과를 평균하여 통계분석을 실행하였다. 통계분석은 유의수준 P=0.05 로 던컨의 다중비교검정법을 사용하였다.
이론/모형
- 병원균 접종원을 위해서는 이전에 확립된 접종량 및 방법을 따라 수행하였다(전, 2005). 먼저, PDA배지에서 전 배양한 F.
성능/효과
- 2007년 1월 말경 잎곰팡이병이 자연발생하기 시작한 경상남도 김해시 토마토재배 포장에서 선발제제인 수화제 A2-MP 제제를 각각 3 주 동안 매1주마다 살포횟수별로 처리하고 화학농약 트리 후미 졸(Triflumizole)과 방제효과를 비교 검정한 결과, 평균 병발병율 62.2%일 때 A2-MP 제제의 경우 1회와 2 회 처리에서는 각각 25.1%, 22.8%로 유의차가 없이 낮았으나, 지속적인 3회 처리에서는 60.0%로 화학농약 트리 후미 졸 처리구의 81.6%와 유의차가 있었으나 화학농약 대비 73% 이상의 방제가가 인정되었다. 따라서 매주 1회씩 3주간 처리하는 것이 화학농약과 동일하지는 않으나 미생물 제제로서 활용할 만한 방제가를 보여 효과적인 처리 횟수로 밝혀졌다(Table 5).
- 2). 4℃와 실온에서 보관 중이던 A2- MP 제제를 잎곰팡이병에 대한 토마토 포트상에서 방제 효과를 검정한 결과, 4P와 실온보관 제제를 100배 희석 후 처리한 결과 각각의 방제가는 83.0%와 83.1%로 높게 나왔으며, 서로간의 유의차는 없었다(data not shown). 따라서 제제를 장기간 보관하여도 안정성이 매우 높음을 확 인하였다.
- 6%의 방제 효과와 차이가 없었다. A-2MP 제제를 62.2%의 자연발병한 농가의 온실에서 방제효과 검정한 결과 100배 희석액을 일주일 간격으로 3회 처리한 경우 60%의 방제가로 화학농약 방제가 81.6%보다 낮았으나 화학농약 효과의 73% 수준으로 나타났다. 한편, A-2MP제제를 4℃나 25℃ 보관한 경우 모두 10개월동안 생균수 및 방제효과가 안정적으로 유지되었다.
- 개발된 미생물농약을 이용하여 포트재배의 토마토 잎곰팡이병에 대해 방제 검정한 결과 A2-MP가 선발되었고, 이는 화학농약에 3, 000배 희석에 비해 100배나 500배 희석에서 방제효과가 유지되었는데 이는 다른 미생물 제제들이 공통적으로 가지고 있는 문제로서 1,000배 이상 희석하여 방제효과를 확보하는 것은 어려웠다. 본 연구에서는 실증 농가에서 토마토 잎곰팡이병이 자연발생한 하우스를 대상으로 실험을 실시하였는데 A-2MP를 1주 간격으로 3회 처리하면 60% 수준의 방제가 가능한 것으로 나타났다.
- 6%보다 월등히 우수하였다. 결론적으로 대조구인 화학농약과 유의차 없이 방제가가 높고 제제화의 효율성을 고려하여 A2-MP 제제를 최종 우수제제로 선발하였다(Table 3).
- 하였다. 그 결과 100배, 500배, 1000배에서 각각 84.3%, 79.4%, 72.0%로 희석배수가 높아질수록 방제가가 다소 감소하였으나 서로간의 유의차는 없었으며, 특히, 100배와 500배 처리구에서는 화학농약 처리구인 90.8% 에 비해 방제가가 낮기는 하나 유의차가 없이 매우 효과가 우수하였다(data not shown). 따라서 경제성을 고려해볼 때 500배의 농도로 살포되어도 적합할 것으로 조사되었다.
- 그 결과, A2-H 제제와 A2-M 제제의 방제가는 각각 80.1%, 77.8%로 유의차 없이 높았으며, 대조구인 화학농약의 70.2% 와도 유의차가 없었다(Table 2). A2-M 제제의 제제화시 첨가되는 기존의 구슬형의 타피오카 대신 분말형태의 타피오카를 이용하여 제조한 A2-MP 제제를 A2-M 제제 및 A2-0 제제와 방제효과를 비교하였다.
- amyloliquefaciens A-2 균주의 수화 제제 A2-MP 제제를 공시하여 온실 내 토경 재배한 토마토에서 잎곰팡이병에 대한 방제효과를 검정하였다. 그 결과, A2-MP 제제의 100배 희석 처리구가 각각 79.4%로 우수하였다. 반면, 500배 희석처리구에서는 72.
- A2-M 제제의 제제화시 첨가되는 기존의 구슬형의 타피오카 대신 분말형태의 타피오카를 이용하여 제조한 A2-MP 제제를 A2-M 제제 및 A2-0 제제와 방제효과를 비교하였다. 그 결과, A2-M과 A2-MP 제제의 방제가는 각각 88.4%와 89.0%로 서로 유의차 없이 우수하였으며 특히, A2-MP 제제는 화학농약의 88.8%와도 유의차가 없었고 A2-O 제제의 67.6%보다 월등히 우수하였다. 결론적으로 대조구인 화학농약과 유의차 없이 방제가가 높고 제제화의 효율성을 고려하여 A2-MP 제제를 최종 우수제제로 선발하였다(Table 3).
- 선발된 A-2MP는 100배, 500배 희석처리 후 생육상에서 토마토에 처리한 경우 화학농약과 대등한 방제효과를 나타내었다. 더욱이 1,000배 희석처리에서도 화학농약보다 효과가 감소하였으나 72% 정도의 방제효과를 보였다. 토마토를 토경재배한 온실에서 A-2MP의 방제효과를 검정한 결과 100배 희석 처리구의 경우 79.
- 8% 에 비해 방제가가 낮기는 하나 유의차가 없이 매우 효과가 우수하였다(data not shown). 따라서 경제성을 고려해볼 때 500배의 농도로 살포되어도 적합할 것으로 조사되었다.
- 6%와 유의차가 있었으나 화학농약 대비 73% 이상의 방제가가 인정되었다. 따라서 매주 1회씩 3주간 처리하는 것이 화학농약과 동일하지는 않으나 미생물 제제로서 활용할 만한 방제가를 보여 효과적인 처리 횟수로 밝혀졌다(Table 5).
- 1%로 높게 나왔으며, 서로간의 유의차는 없었다(data not shown). 따라서 제제를 장기간 보관하여도 안정성이 매우 높음을 확 인하였다.
- 4%로 우수하였다. 반면, 500배 희석처리구에서는 72.6%를 보여 100배 처리 구와는 서로간의 유의차는 없지만 방제가가다소 낮아 진 것이 확인되었다. 한편, 화학농약 트리 후미 졸 처리구는 79.
- 따라서 제제에서 미생물의 생존율을 검정하여 저장 안정성 검정을 확인하는 것은 미생물 제제 선택에서 필수적이다. 본 연구결과 개발된 A-2MP는 41에서 보관하면 실온 보관에 비해 저장 안정성이 높은 것으로 나타났으며 방제효과도 잘 유지하는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구 결과가 저렴한 원료를 이용하여 제조한 미생물 제제 A-2MP를 토마토 잎곰팡이병 방제에 활용될 수 있음을 제시한다.
- 한편, A-2MP제제를 4℃나 25℃ 보관한 경우 모두 10개월동안 생균수 및 방제효과가 안정적으로 유지되었다. 본 연구결과는 저렴한 원료와 길항균 B.amyloliquefaciens A-2 균주를 활용한 A2-MP제제가 토마토 잎곰팡이병 방제용으로 쓰일 수 있음을 보여준다.
- 방제효과를 확보하는 것은 어려웠다. 본 연구에서는 실증 농가에서 토마토 잎곰팡이병이 자연발생한 하우스를 대상으로 실험을 실시하였는데 A-2MP를 1주 간격으로 3회 처리하면 60% 수준의 방제가 가능한 것으로 나타났다.
- 본 연구에서는 타피오카 전분, 옥수수 전분, 썬크리미, 당, 오일류를 이용하여 제제를 만들고, 토마토 잎곰팡이 병을 대상으로 방제 실험을 한 결과 비교적 높은 방제 효과를 보이는 제제를 선발할 수 있었다. 구슬형 타피오카 전분을 이용한 A-2H 제제가 우수하였으나 분무가 어려운 문제로 인하여 이를 개량하기 위한 연구를 수행하였다.
- 끓인 타피오카 전분으로 만든 A2-M 제제의 경우 방제효과는 좋았으나 전분을 끓여야 하기 때문에 제제에 번거로움이 있었다. 분말상의 타피오카 전분으로 만든 A2- MP 제제를 방제효과 검정한 결과 방제효과가 매우 높았고, 변성전분을 첨가하지 않아도 전착제의 역할을 하였으며 전분을 끓이는 등의 2차 제제과정이 생략되어 제제화하기 편리하였다. 타피오카 전분은 열대작물인 타피오카의 뿌리에서 채취한 식용녹말로 천연 타피오카 파우더를 위생적으로 처리한 천연전분이다.
- 미생물 제제의 저장안정성. 선발된 수화제제 미생물농 약 A2-MP제제를 저장온도 및 저장기간에 따른 안정성을 조사한 결과, A2-MP 제제의 2006년 6월의 초기 세균수는 제제 1 g 당 1.6x10s cfu이었으며, 11개월 후인 2007 년 4월의 4℃와 실온에서의 세균밀도는 제제 1g 당 각각 6.0x13 cfb와 1.4x106 cfh이었다. 이는 초기의 생균수 보다는 낮아졌으나 여전히 높은 밀도의 세균수가 유지되고 있었으며, 이때 실온과 4℃ 보관에 따른 세균의 밀도 차이는 없었다(Fig.
- 처리된 식물체는 생육상에서 유지하면서 24시간 후 준비된 병원균을 전술한 바와 같이 분무접종하였다. 이후 식물체는 상대습도 90%, 온도 20±2℃의 생육실에 유지하면서 병원균 접종 5일 후에 이병엽률을 조사하고 방제가로 환산하여 방제가가 가장 높은 제제를 선발하였다. 방제가의 환산은 아래의 방법으로 수행하였다.
- 준비한 12종의 제제를 100배 희석액으로 생육상에서 검정한 결과 토마토 잎곰팡이병 방제효과가 가장 높았던 제제는 A-2 H로 방제 효과가 82.6%로 우수하였으며 A-2G 제제와 A-2B 제제의 방제가가 각각 73.3%, 72.2%로서 서로 유의차가 없이 높았으며, 3, 000배 희석처리한 화학농약 트리후민 수화제의 68.9%와 유사하였다(Fig. 1). 반면 대다수의 전분만을 포함한 제제들은 60% 이하의 방제가를 나타내었다.
- 더욱이 1,000배 희석처리에서도 화학농약보다 효과가 감소하였으나 72% 정도의 방제효과를 보였다. 토마토를 토경재배한 온실에서 A-2MP의 방제효과를 검정한 결과 100배 희석 처리구의 경우 79.4%의 방제효과를 나타내 화학농약 트리후미졸 처리구의 79.6%의 방제 효과와 차이가 없었다. A-2MP 제제를 62.
- 6%보다 낮았으나 화학농약 효과의 73% 수준으로 나타났다. 한편, A-2MP제제를 4℃나 25℃ 보관한 경우 모두 10개월동안 생균수 및 방제효과가 안정적으로 유지되었다. 본 연구결과는 저렴한 원료와 길항균 B.
후속연구
- 본 연구결과 개발된 A-2MP는 41에서 보관하면 실온 보관에 비해 저장 안정성이 높은 것으로 나타났으며 방제효과도 잘 유지하는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구 결과가 저렴한 원료를 이용하여 제조한 미생물 제제 A-2MP를 토마토 잎곰팡이병 방제에 활용될 수 있음을 제시한다.
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