[논문]주요 식용버섯 추출물의 생리활성 효과

최세진; 이연실; 김진경; 김진규; 임순성

doi:10.3746/jkfn.2010.39.8.1087

주요 식용버섯 추출물의 생리활성 효과
Physiological Activities of Extract from Edible Mushrooms 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.39 no.8, 2010년, pp.1087 - 1096

최세진 (한림대학교 식품영양학과) , 이연실 (한림대학교 식의약품 효능평가 및 기능성 소재개발 센터) , 김진경 (한림대학교 식의약품 효능평가 및 기능성 소재개발 센터) , 김진규 (한림대학교 천연의약연구소) , 임순성 (한림대학교 식품영양학과)

초록
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본 연구는 예로부터 식용 및 약용으로 널리 이용되어지는 버섯의 기능성 소재로서의 타당성을 검증하기 위하여 버섯 추출물의 유효성분 함량(polyphenol, $\beta$-glucan)과 저분자 및 고분자 분획물의 항산화 활성, 혈전용해 활성, 면역증강 및 항염증 활성 등을 측정하였다. 그 결과 전체 수율은 식용버섯이 약용버섯보다 높게 나타났으며, $\beta$-glucan의 함량은 표고버섯(33.5%)이 가장 높게 나타났다. Polyphenol 함량은 약용버섯인 상황버섯(LMW)이 233.23 mg/g로 가장 높게 나타났으며, 애느타리버섯(LMW) 12.18 mg/g, 송이버섯(LMW) 11.72 mg/g 순으로 확인되었다. 버섯 추출물의 항산화 능력을 측정하기 위한 전자공여능 측정 결과는 ascorbic acid 0.5 mg/mL에서 95.91%의 저해율을 나타낸 것에 비하여 상황버섯(LMW, 10 mg/mL)이 80.74%의 억제활성을 나타내었다. SOD 유사활성 측정에서는 대부분의 버섯 추출물에서 큰 차이를 나타내지 않았으며, 아질산염 소거능 측정에서는 pH의 감소에 따라 소거능이 증가하였고, 상황버섯(LMW)이 가장 높은 소거능을 나타내었다. 이처럼 버섯 추출물의 항산화능력 측정에서 phenol성 물질을 많이 함유하고 약용버섯으로 사용되는 상황버섯이 식용버섯(송이버섯, 새송이버섯, 양송이버섯, 느타리버섯, 애느타리버섯, 표고버섯, 팽이버섯) 보다 LMW 분획에서 우수한 항산화 능력을 갖는 것을 알 수 있었다. 그러나 혈전용해 활성을 측정한 결과에서 대부분의 LMW 분획물들은 혈전용해 활성을 갖지 않았으며, 송이 버섯(HMW, 50 mg/mL)이 60.4%의 가장 높은 혈전용해 활성을 나타내었다. 또한 RAW 264.7 cell을 이용한 대식세포 활성능(NO 생성)을 측정한 결과 LMW 분획에서는 대식세포 활성능력이 거의 없는 것으로 조사되었으며, 대조군인 LPS 500 ng/mL를 첨가한 상태에서 $32.9\;{\mu}M$의 NO를 생성하는 것과 비교하여, 표고버섯(HMW, $500\;{\mu}g/mL$) $39.86\;{\mu}M$, 송이버섯 $35.17\;{\mu}M$의 NO 생성능을 나타내었다. 또한 약용버섯인 상황버섯(HMW)은 NO 생성능력이 거의 나타나지 않았다. 반면에 RAW 264.7 cell로부터 LPS에 의해 유도된 NO 생성 저해활성을 측정한 결과 상황버섯(LMW) $500\;{\mu}g/mL$의 농도에서 NO의 생성을 100% 저해하였고, 새송이버섯(LMW)은 $50\;{\mu}g/mL$에서 58.14%, $500\;{\mu}g/mL$에서 67.79%의 저해활성을 나타내었다. 이상의 결과로부터 phenol 성분을 다량 함유하고 있는 상황버섯(LMW)은 일반적인 식용버섯에 비해 항산화능이 우수함을 알 수 있었으며, 혈전용해능력(송이버섯, I)과 면역증강(표고버섯, VII) 그리고 항염증(새송이버섯, II)에서는 식용버섯의 HMW 분획물이 우수한 활성을 나타내는 것을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study was conducted to investigate the physiological activity of extracts of fresh mushrooms. The components were extracted by hot water; subsequently, the hot-water extract was subjected to 60% ethanol precipitation to yield high-molecular-weight (HMW) and low-molecular-weight (LMW) fractions. Total polyphenol contents, $\beta$-glucan contents, electron-donating ability (EDA), superoxide dismutase (SOD)-like activity, nitrite-scavenging activity, fibrinolytic activity, nitric oxide (NO) production, and inhibition of NO production of the mushroom extracts were measured using lipopolysaccharide (LPS)-stimulated murine macrophages, RAW 264.7 cells. The extracts of Lentinus edodes (Berk.) Singer and Pleurotus ostreatus (Fr.) Kummer contained the highest levels of $\beta$-glucan (33.5% and 25.57%, respectively). Further, the LMW fractions of the Phellinus linteus contained the highest levels of polyphenols (233.23 mg/g). The EDA of LMW fractions (10 mg/mL) of the Phellinus linteus and Agaricus bisporus were 80.74% and 51.35%, respectively. Further, SOD-like activities of the LMW fractions were high as compared to those of the HMW fractions. Nitrite-scavenging activities of the LMW fractions (pH 1.2; concentration, 10 mg/mL) of the Phellinus linteus and Pleurotus ostreatus (Fr.) Kummer were 75.95% and 41.05%, respectively. The fibrinolytic activity of the LMW fractions of all mushrooms showed no enzyme activity by fibrin plate assay. The fibrinolytic activity of the extracts of Tricholoma matsutake was the greatest inhibitory activity at 60.4%. Further study revealed that the mushroom extracts exhibited anti-inflammatory effects on RAW 264.7 cells. The LMW fraction ($500\;{\mu}g/mL$) of the Phellinus linteus considerably inhibited NO production (100%).

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서는 식용으로 많이 이용되고 있는 버섯(송이버섯, 새송이버섯, 양송이버섯, 느타리버섯, 애느타리 버섯, 팽이버섯, 표고버섯)과 약용버섯으로 널리 알려진 상황버섯을 대상으로 유효성분 함량 비교를 위하여 β-glucan, 총 폴리페놀 함량을 측정하고, 저분자와 고분자로 분획하여 이들 각각의 생리활성을 비교 분석하였다.
본 연구는 예로부터 식용 및 약용으로 널리 이용되어지는 버섯의 기능성 소재로서의 타당성을 검증하기 위하여 버섯 추출물의 유효성분 함량(polyphenol, β-glucan)과 저분자및 고분자 분획물의 항산화 활성, 혈전용해 활성, 면역증강및 항염증 활성 등을 측정하였다.
7 cell을 이용하여 대식세포 활성능 및 항염증 효능을 확인하였으며, 혈전용해 능력 측정을 위하여 fibrinolytic 활성을 비교하였다. 이와 같이 상황버섯을 포함한 일반적으로 식용하고 있는 버섯류들로부터 다양한 생리활성을 측정함으로써 기능성 소재로의 이용 가능성에 대해 검토하고자 하였다.

가설 설정

2)Concentration of mushroom extracts was 50 mg/mL. Plasmin (2.
2)Values in the column with different superscripts are significantly different at p<0.05.
3)All values are expressed as mean±SD of triplicate determinations.
3)Values in the column with different superscripts are significantly different at p<0.05.
4)Values in the column with different superscripts are significantly different at p<0.05.

제안 방법

β-Glucan의 함량은 beta-glucan assay kit(Megazyme International Ireland Limited, Bray, Ireland)를 사용하여 total glucan과 glucan 이외의 당 함량을 구한 후, α-glucan 과 glucan 이외의 당 함량 간의 차이를 이용하여 구하였다.
이와 같은 혈전형성을 방지하기 위해 항혈소판제제, 즉 혈소판활성화 억제제 등 항혈전제가 요구된다 (30). Kim 등의 연구(31)에서 자생하는 55종의 버섯을 메탄올로 추출한 후 100 mg/mL의 농도로 희석하여 혈전용해 활성을 측정하였다. 그 결과 14종의 버섯에서 혈전용해 활성을 확인하였으며, 그중 흰가시광대버섯이 3.
LPS에 의해 활성화된 RAW 264.7 cell로부터 NO 생성 저해활성에 미치는 작용을 알아보기 위해 RAW 264.7 세포를 24-well에 1×105 cell로 분주하여 18시간 동안 배양한 다음각 well에 LPS를 500 ng/mL을 넣고 20시간 배양한 후에 상등액을 제거하고 PBS로 세척한 후에 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium)으로 교환하고 시료를 50∼500μg/mL의 농도로 가하여 20시간 배양 후, 상징액 100 μL를 회수하고 여기에 동량의 griess reagent를 첨가한 뒤 15분 동안 실온에서 반응시켰으며 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
각 버섯 추출물의 LMW 및 HMW 분획물이 RAW 264.7 cell에서 NO 생성에 미치는 효과를 알아보기 위하여 실험한 결과 LMW 분획에서는 NO 생성능이 거의 없는 것으로 조사되어 HMW 분획물의 NO 생성능만을 Fig. 5에 나타내었다. HMW 분획에서는 농도 의존적으로 대식세포를 활성화시켜 NO 양이 증가됨을 알 수 있었다.
Table 4에는 각 버섯의 혈전용해도를 plasmin과 비교하여 수치화하였다. 각 버섯의 분획물들을 대조군인 plasmin (2.5, 1.25, 0.25 U/mL)과 같이 점적하여 용해면적을 상대 비교하였다. 전체적으로 LMW 분획에서는 혈전용해 활성이 없는 것으로 보였으며, HMW 분획물 50 mg/mL에서 송이버섯(Ⅰ)은 1.
5로 조절된 시료액을 만들었다. 각 추출물 0.2 mL에 tris-HCl buffer(pH 8.5) 3 mL와 7.2 mM pyrogallol 0.2 mL를 가하고 25℃에서 10분간 방치한 후 1 N HCl 1 mL로 반응을 정지시킨 후 분광광도계를 이용하여 420 nm에서의 흡광도를 측정, 시료 첨가 및 무첨가구간의 흡광도 차이를 백분율로 나타내었다.
각종 버섯 추출물과 항산화제인 ascorbic acid를 DPPH를 이용하여 전자공여능을 측정하였다. DPPH는 분자 내 radical을 함유하여 다른 free radical들과 결합하여 안정한 complex를 만들고 있어 항산화 활성이 있는 물질과 만나면 라디칼이 소거되며, 이때 고유의 청남색이 엷어지는 특성을 가지고 있어 이 색차를 비색정량하여 전자공여능력을 측정한다(16).
버섯 추출물의 LMW 분획물과 HMW 분획물이 혈액응고 기전에 미치는 영향을 알아보기 위하여 fibrin plate method를 이용하여 대표물질인 plasmin의 용해환 지름과 비교하였다. Table 4에는 각 버섯의 혈전용해도를 plasmin과 비교하여 수치화하였다.
이들 폴리페놀은 한 분자 내에 2개 이상의 phenolic hydroxyl을 가진 방향족 화합물이며 항암, 항염증 및 항혈전 작용을 지니고 있는 항산화성 생리 활성 물질이다(24,25). 본 실험에서 버섯 추출물의 총 폴리페놀 함량을 구하기 위하여 gallate, tannic acid, catechin의 3가지 표준물질로 함량을 계산하였다. 각각의 표준물질에 따라 버섯의 총 폴리페놀 함량이 차이가 나타났으며, 표준물질을 catechin으로 했을 때 가장 높은 페놀 함량을 가졌고, tannic acid, gallate 순으로 나타났다.
따라서 본 연구에서는 식용으로 많이 이용되고 있는 버섯(송이버섯, 새송이버섯, 양송이버섯, 느타리버섯, 애느타리 버섯, 팽이버섯, 표고버섯)과 약용버섯으로 널리 알려진 상황버섯을 대상으로 유효성분 함량 비교를 위하여 β-glucan, 총 폴리페놀 함량을 측정하고, 저분자와 고분자로 분획하여 이들 각각의 생리활성을 비교 분석하였다. 생리활성에는 전자공여능, SOD 유사활성, 아질산염 소거능력 등의 항산화능력을 비교하였고, 대식세포주인 RAW 264.7 cell을 이용하여 대식세포 활성능 및 항염증 효능을 확인하였으며, 혈전용해 능력 측정을 위하여 fibrinolytic 활성을 비교하였다. 이와 같이 상황버섯을 포함한 일반적으로 식용하고 있는 버섯류들로부터 다양한 생리활성을 측정함으로써 기능성 소재로의 이용 가능성에 대해 검토하고자 하였다.
시료버섯 8종을 물로 추출한 후 저분자 분획(LMW)와 고분자 분획(HMW)으로 나누어 동결건조한 후 추출수율을 조사하였다(Table 1). 각 버섯의 LMW 분획물은 양송이버섯 (Ⅲ)이 32.
7 세포를 24-well에 1×10⁵ cell로 분주하여 18시간 동안 배양한 다음 각 well에 각 버섯 시료 50～500 μg/mL를 첨가하여 37℃에서 24시간 동안 5% CO2의 공기조건으로 배양하였다. 시료에 대한 대조구로는 500 ng/mL의 lipopolysaccharide(LPS)를 처리하여 비교군으로 사용하였다. 배양 후, 상징액 100 μL를 회수하고 여기에 동량의 griess reagent를 첨가한 뒤 15분 동안 실온에서 반응시켰으며 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
7 mL을 달리하여 가한 후 반응용액의 부피를 1 mL로 하였다. 이를 37℃에서 1시간 동안 반응시킨 다음 여기에 2% acetic acid 5 mL, griess reagent(Promega, Madison, WI, USA) 0.4 mL를 가하여 잘 혼합시켜 15분간 실온에서 방치시킨 후 분광광도계를 사용하여 520 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산염량을 구하였다. 그리고 대조구는 griess reagent 대신 증류수 0.
전자공여 작용(electron donating abilities, EDA) 측정은 Blois의 방법(16)을 변형하여 각 추출물의 DPPH에 대한 수소공여 효과를 측정하여 전자공여능을 평가하였다, 즉, 일정 농도의 시료 30 μL에 0.32 mM DPPH 용액(disolved in 99% methanol)을 180 μL 넣고 혼합한 후, 암실에서 30분간 반응시켰다.
0 mL 첨가하고 증류수 7 mL을 첨가해 최종 부피를 10 mL로 맞춘 후 암실에서 1시간 동안 반응시킨 뒤 765 nm에서 흡광도를 측정했다. 표준시약은 gallate, tannic acid, catechin을 사용했으며, 각 표준시약의 농도를 달리하여 조제한 후 표준 곡선을 작성하였다. 실험 측정은 3회 반복 실험하여 평균±표준편차로 나타내었다.
혈전용해 활성은 Astrup과 Müllertz의 fibrin plate법(19)을 수정하여 사용하였다.
활성화된 대식세포가 분비하는 것으로 알려진 nitric oxide (NO)의 생성에 미치는 영향을 알아보기 위해 mouse 단핵구기원의 Raw 264.7 cell을 이용하여 NO 생성량의 변화를 측정(20)하였다. RAW 264.

대상 데이터

응고된 plate 위에 시료 50 μL를 조심스럽게 점적하였다. 대조구로는 시료대신 plasmin(2.5 unit/mL)을 사용하였다. 이때 시료는 50 mg/mL의 농도를 사용하였다.
본 실험에 사용된 송이버섯(Tricholoma matsutake)은 양구 솔레원(주)에서 제공받아 사용하였으며, 새송이버섯 (Pleurotus eryngii), 양송이버섯(Agaricus bisporus), 느타리버섯(Pleurotus ostreatus (Jacq.) Quel), 애느타리버섯(Pleurotus osteratus (Fr.) Kummer), 표고버섯(Lentinus edodes (Berk.) Singer), 팽이버섯(Flammulina velutipes)은 춘천 소재의 대형마트에서 구입하여 사용하고, 상황버섯(P hellinus linteus)은 삼성생약에서 제공 받아 사용하였다.
분말시료 일부는 β-glucan 함량 측정시료로 사용하였고, 그 외 버섯 분말 시료의 저분자 분획 및 고분자 분획 추출방법은 Fig. 1에 나타내었다.

데이터처리

실험 측정은 3회 반복 실험하여 평균±표준편차로 나타내었다.
통계처리는 SAS(statistical analysis system) program을 사용하여 각각의 시료에 대한 평균±표준편차로 나타내었으며, 각 군의 평균치의 통계적 유의성을 p<0.05 수준에서 ANOVA test와 Duncan's multiple range test에 의해 검정하였다.

이론/모형

SOD 유사활성의 측정은 Marklund의 방법을 변형한 Kim 등(17)의 방법을 이용하여 실시하였다. 즉, tris-HCl buffer (50 mM tris[hydroxymethyl] amino-methane＋10 mM EDTA, pH 8.
아질산염 소거효과는 Gray와 Dugan(18)의 방법으로 측정하였다. 즉, 1 mM NaNO₂ 0.
총 폴리페놀의 함량은 Folin-Ciocalteu법(14,15)을 사용해 측정하였다. 건조 시료 일정량을 증류수에 녹이고 일정농도로 희석하여 측정에 이용하였다.

성능/효과

500 ng/mL의 LPS을 처리한 대조구에서는 22.17 μM의 NO가 생성되었으며, 이와 비교하여 LMW 분획물에서는 상황버섯(Ⅷ) 500 μg/mL의 농도에서 100%1)의 NO 생성 저해 활성을 보였으며 농도 의존적으로 NO의 생성을 저해하는 것을 알 수 있었다.
Gallate를 기준으로 LMW 분획에서의 총 페놀 함량은 상황버섯(Ⅷ)(233.23 mg/g)이 가장 높은 함량을 가졌으며, 그다음은 애느타리버섯(Ⅴ) 12.18 mg/g, 송이버섯(Ⅰ) 11.72 mg/g 순으로 나타났다. 그 외의 버섯은 4∼10 mg/g의 다양한 페놀함량을 나타내었다.
24%의 순이었다. HMW 분획물은 새송이버섯(Ⅱ)이 2.31%로 가장 높은 수율을 보였으며, 그 다음 느타리버섯(Ⅳ) 1.46%, 애느타리버섯(Ⅴ) 1.45% 순으로 나타났다. LMW와 HMW의 추출 수율을 비교한 결과 새송이버섯(Ⅱ)과 상황버섯(Ⅷ)은 약 7배, 그 외의 버섯들은 평균 10배 이상 LMW 분획의 추출수율이 높게 나타났다.
그 외의 버섯은 4∼10 mg/g의 다양한 페놀함량을 나타내었다. HMW 분획은 LMW 분획보다 낮은 페놀 함량을 나타냈으며, 상황버섯(Ⅷ)(17.23 mg/g)이 가장 높은 페놀 함량을 가졌으며, 그 다음으로 양송이버섯 (Ⅲ)(9.45 mg/g), 표고버섯(Ⅶ)(5.78 mg/g), 송이버섯(Ⅰ)(5.72 mg/g)으로 나타났다(Table 3). Kim 등(26)의 연구에서 상황버섯 열수추출물의 페놀 함량이 149.
88% 순으로서 버섯류의 LMW 분획물 모두 30% 이상의 SOD 유사활성을 갖는 것으로 나타났다. HMW 분획은 LMW 분획에 비해 다소 낮은 SOD 유사활성을 (Ⅲ) 32.06%로서 가장 높은 SOD 유사활성을 보였고, 표고버섯(Ⅶ), 애느타리버섯(Ⅵ) 이 30.53%의 SOD 유사활성을 나타내었다. 비교물질로 사용된 1 mg/mL 및 0.
4와 같다. LMW 분획물과 HMW 분획물의 아질산염 소거능력은 크게 차이가 없었고, pH가 감소함에 따라 소거능력이 증가하는 것을 알 수 있었다. 다만 pH 3.
2에서 nitrite 제거활성이 다른 pH 조건보다 높았던 것은 본 실험결과와 일치하였다. LMW 분획물에서 상황버섯(Ⅷ) 78.95%로 가장 높은 활성을 보였고, 애느타리버섯(Ⅴ)이 pH 1.2에서 41.05%, 새송이버섯(Ⅱ) 이 40%의 활성을 보였다. 또한 HMW 분획에서 양송이버섯 (Ⅲ)이 pH 1.
3과 같다. LMW 분획물의 SOD 유사활성은 상황버섯(Ⅷ)이 41.98%로 가장 높게 나타났으며, 그 다음은 양송이버섯(Ⅲ) 37.02%, 팽이버섯(Ⅵ) 36.64%, 느타리버섯(Ⅳ) 35.88% 순으로서 버섯류의 LMW 분획물 모두 30% 이상의 SOD 유사활성을 갖는 것으로 나타났다. HMW 분획은 LMW 분획에 비해 다소 낮은 SOD 유사활성을 (Ⅲ) 32.
45% 순으로 나타났다. LMW와 HMW의 추출 수율을 비교한 결과 새송이버섯(Ⅱ)과 상황버섯(Ⅷ)은 약 7배, 그 외의 버섯들은 평균 10배 이상 LMW 분획의 추출수율이 높게 나타났다.
5%)이 가장 높게 나타났다. Polyphenol 함량은 약용버섯인 상황버섯(LMW)이 233.23 mg/g로 가장 높게 나타났으며, 애느타리버섯(LMW) 12.18 mg/g, 송이버섯(LMW) 11.72 mg/g 순으로 확인되었다. 버섯 추출물의 항산화 능력을 측정하기 위한 전자공여능 측정 결과는 ascorbic acid 0.
74%의 억제활성을 나타내었다. SOD 유사활성 측정에서는 대부분의 버섯 추출물에서 큰 차이를 나타내지 않았으며, 아질산염 소거능 측정에서는 pH의 감소에 따라 소거능이 증가하였고, 상황버섯(LMW)이 가장 높은 소거능을 나타내었다. 이처럼 버섯 추출물의 항산화능력 측정에서 phenol성 물질을 많이 함유하고 약용버섯으로 사용되는 상황버섯이 식용버섯(송이버섯, 새송이버섯, 양송이버섯, 느타리버섯, 애느타리버섯, 표고버섯, 팽이버섯)보다 LMW 분획에서 우수한 항산화 능력을 갖는 것을 알 수 있었다.
각 버섯의 β-glucan의 함량은 표고버섯(Ⅶ) 33.50%로 β-glucan 함량이 가장 높았으며, 그 다음으로 애느타리버섯(Ⅴ) 25.57%, 상황버섯(Ⅷ) 23.92% 순으로 나타났다(Table 2).
본 실험에서 버섯 추출물의 총 폴리페놀 함량을 구하기 위하여 gallate, tannic acid, catechin의 3가지 표준물질로 함량을 계산하였다. 각각의 표준물질에 따라 버섯의 총 폴리페놀 함량이 차이가 나타났으며, 표준물질을 catechin으로 했을 때 가장 높은 페놀 함량을 가졌고, tannic acid, gallate 순으로 나타났다. 이것은 각 표준물질의흡광도를 통해 얻어진 결과를 이용하였기에, 서로 다른 표준물질 간 흡광도 차이에 의한 결과라고 생각되어진다.
Kim 등의 연구(31)에서 자생하는 55종의 버섯을 메탄올로 추출한 후 100 mg/mL의 농도로 희석하여 혈전용해 활성을 측정하였다. 그 결과 14종의 버섯에서 혈전용해 활성을 확인하였으며, 그중 흰가시광대버섯이 3.9 plasmin unit 정도의 범위를 보였다. 이는 본 연구에서 사용한 버섯 분획물의 농도보다 2배 높음을 감안한다면, 송이버섯(Ⅰ) HMW 분획물이 우수한 항혈전 능력을 가진다는 것을 알 수 있다.
그 결과 전체 수율은 식용버섯이 약용버섯보다 높게 나타났으며, β-glucan의 함량은 표고버섯(33.5%)이 가장 높게 나타났다.
이처럼 버섯 추출물의 항산화능력 측정에서 phenol성 물질을 많이 함유하고 약용버섯으로 사용되는 상황버섯이 식용버섯(송이버섯, 새송이버섯, 양송이버섯, 느타리버섯, 애느타리버섯, 표고버섯, 팽이버섯)보다 LMW 분획에서 우수한 항산화 능력을 갖는 것을 알 수 있었다. 그러나 혈전용해 활성을 측정한 결과에서 대부분의 LMW 분획물들은 혈전용해 활성을 갖지 않았으며, 송이버섯(HMW, 50 mg/mL)이 60.4%의 가장 높은 혈전용해 활성을 나타내었다. 또한 RAW 264.
또한 50 μg/mL의 저농도에서 양송이버섯(Ⅲ) 19.67 μM, 새송이버섯(Ⅱ) 14.89 μM, 표고버섯(Ⅶ) 14.46 μM의 NO를 생성하여 대식세포를 활성화시키는 것을 확인하였다.
05%, 새송이버섯(Ⅱ) 이 40%의 활성을 보였다. 또한 HMW 분획에서 양송이버섯 (Ⅲ)이 pH 1.2에서 40%로 가장 높은 활성을 가졌으며, 느타리버섯(Ⅳ) 37.89%, 표고버섯(Ⅶ) 36.84%의 활성을 나타내었다. 이처럼 상황버섯(Ⅷ) LMW 분획물을 제외하고 각 버섯의 HMW와 LMW분획물의 활성에는 큰 차이를 보이지 않았다.
버섯 추출물의 항산화 활성과 페놀 함량과의 상관관계는 Cheung 등(27)의 연구와 같이 높은 폴리페놀 함량을 가진 버섯 추출물에서 안정적인 DPPH radical 억제활성을 가진다는 결과와 유사하였다. 또한 HMW 분획은 LMW 분획보다 페놀 함량이 낮았으며 전자공여능 억제활성도 LMW 분 획보다 현저히 낮은 전자공여 작용을 나타내었다.
또한 RAW 264.7 cell을 이용한 대식세포 활성능(NO 생성)을 측정한 결과 LMW 분획에서는 대식세포 활성능력이 거의 없는 것으로 조사되었으며, 대조군인 LPS 500 ng/mL를 첨가한 상태에서 32.9 μM의 NO를 생성하는 것과 비교하여, 표고버섯(HMW, 500 μg/mL) 39.86 M, 송이버섯 35.17 μM의 NO 생성능을 나타내었다.
또한 본 연구에서 β-glucan 함량과 비교했을 때 βglucan 함량이 높은 표고버섯(Ⅶ)의 NO 생성능이 가장 높았지만, 그 외의 버섯들은 β-glucan 함량과 NO 생성능이 낮은 관관계를 보여주었다.
반면에 RAW 264.7 cell로부터 LPS에 의해 유도된 NO 생성 저해활성을 측정한 결과 상황버섯(LMW) 500 μg/mL의 농도에서 NO의 생성을 100% 저해하였고, 새송이버섯(LMW)은 50 μg/mL에서 58.14%, 500 μg/mL에서 67.79%의 저해활성을 나타내었다.
72 mg/g 순으로 확인되었다. 버섯 추출물의 항산화 능력을 측정하기 위한 전자공여능 측정 결과는 ascorbic acid 0.5 mg/mL에서 95.91%의 저해율을 나타낸 것에 비하여 상황버섯(LMW, 10 mg/mL)이 80.74%의 억제활성을 나타내었다. SOD 유사활성 측정에서는 대부분의 버섯 추출물에서 큰 차이를 나타내지 않았으며, 아질산염 소거능 측정에서는 pH의 감소에 따라 소거능이 증가하였고, 상황버섯(LMW)이 가장 높은 소거능을 나타내었다.
본 실험에서 양송이버섯(Ⅳ)이 해송이버섯과 유사한 β-glucan 함량을 나타내었으며, 아카리쿠스버섯보다 표고버섯은 10% 정도 더 높은 33.5% β-glucan 함량을 나타내었다.
본 연구에서 표고버섯(Ⅶ) 500 μg/mL 농도에서 39.86 μM의 생성능에 비해 다소 높은 결과를 나타내었다.
53%의 SOD 유사활성을 나타내었다. 비교물질로 사용된 1 mg/mL 및 0.1 mg/mL의 L-ascorbic acid의 경우 각각 92.37%, 38.93%의 활성을 보였으며 가장 높은 활성을 나타낸 상황버섯(I)은 L-ascorbic acid 0.1 mg/mL보다 더 높은 SOD 유사활성을 가졌다. Lim 등(29)의 보고에서 흰색 양송이버섯(Ⅲ)의 열수 추출물에서 22.
2는 각각 버섯시료 LMW 분획물 10 mg/mL을 사용하여 전자공여능을 나타낸 것이다. 상황버섯(Ⅷ)이 80.74%로 가장 높은 억제활성을 보였으며, 그 다음으로 양송이버섯(Ⅲ) 51.35%, 애느타리버섯(Ⅴ) 36.61%, 송이버섯 (Ⅰ) 36.04%의 억제활성을 나타내었다. 앞의 총 페놀 함량에서 높은 페놀 함량을 가진 상황버섯(Ⅷ)이 가장 높은 억제활성을 가졌으며, 양송이버섯(Ⅲ)은 송이버섯(Ⅰ)보다 페놀 함량이 낮았지만 송이버섯보다 높은 억제활성을 나타내었다.
04%의 억제활성을 나타내었다. 앞의 총 페놀 함량에서 높은 페놀 함량을 가진 상황버섯(Ⅷ)이 가장 높은 억제활성을 가졌으며, 양송이버섯(Ⅲ)은 송이버섯(Ⅰ)보다 페놀 함량이 낮았지만 송이버섯보다 높은 억제활성을 나타내었다. 버섯 추출물의 항산화 활성과 페놀 함량과의 상관관계는 Cheung 등(27)의 연구와 같이 높은 폴리페놀 함량을 가진 버섯 추출물에서 안정적인 DPPH radical 억제활성을 가진다는 결과와 유사하였다.
양성대조군인 LPS를 첨가한 상태에서는 배양 24시간에 32.9 μM의 NO를 생성하였으며, HMW 분획물 500 μg/mL 처리군에서 표고버섯(Ⅶ), 송이버섯(Ⅰ), 양송이버섯(Ⅲ)이 각각 39.86 μM, 35.17 μM, 30.34 μM의 NO를 생성하였고, 특히 표고버섯(Ⅶ), 송이버섯 (Ⅰ)은 LPS보다 더 높은 NO 생성능을 가진 것으로 나타났다.
9 plasmin unit 정도의 범위를 보였다. 이는 본 연구에서 사용한 버섯 분획물의 농도보다 2배 높음을 감안한다면, 송이버섯(Ⅰ) HMW 분획물이 우수한 항혈전 능력을 가진다는 것을 알 수 있다.
79%의 저해활성을 나타내었다. 이상의 결과로부터 phenol 성분을 다량 함유하고 있는 상황버섯(LMW)은 일반적인 식용버섯에 비해 항산화능이 우수함을 알 수 있었으며, 혈전용해능력(송이버섯,Ⅰ)과 면역증강(표고버섯, Ⅶ) 그리고 항염증(새송이버섯, Ⅱ)에서는 식용버섯의 HMW 분획물이 우수한 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
SOD 유사활성 측정에서는 대부분의 버섯 추출물에서 큰 차이를 나타내지 않았으며, 아질산염 소거능 측정에서는 pH의 감소에 따라 소거능이 증가하였고, 상황버섯(LMW)이 가장 높은 소거능을 나타내었다. 이처럼 버섯 추출물의 항산화능력 측정에서 phenol성 물질을 많이 함유하고 약용버섯으로 사용되는 상황버섯이 식용버섯(송이버섯, 새송이버섯, 양송이버섯, 느타리버섯, 애느타리버섯, 표고버섯, 팽이버섯)보다 LMW 분획에서 우수한 항산화 능력을 갖는 것을 알 수 있었다. 그러나 혈전용해 활성을 측정한 결과에서 대부분의 LMW 분획물들은 혈전용해 활성을 갖지 않았으며, 송이버섯(HMW, 50 mg/mL)이 60.
46 μM)의 NO 저해활성을 나타내었다. 이처럼 상황버섯(Ⅷ), 새송이버섯 (Ⅱ), 양송이버섯(Ⅲ)을 제외한 다른 버섯에서는 활성이 대부분 없는 것으로 나타났다. HMW 분획물은 상황버섯(Ⅷ) 500μg/mL의 농도에서 38.
25 U/mL)과 같이 점적하여 용해면적을 상대 비교하였다. 전체적으로 LMW 분획에서는 혈전용해 활성이 없는 것으로 보였으며, HMW 분획물 50 mg/mL에서 송이버섯(Ⅰ)은 1.51 plasmin unit의 비교적 강한 활성을 나타냈으며, 애느타리버섯(Ⅴ) 1.47 plasmin unit, 양송이버섯(Ⅲ) 1.16 plasmin unit 순으로 활성이 나타났다. 새송이버섯(Ⅱ), 표고버섯(Ⅶ), 상황버섯(Ⅷ)의 HMW 분획물에서는 혈전용해 활성이 나타나지 않았다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	버섯의 일반균류와 다른 특징은?	버섯은 분류학적으로 균류에 속하나 일반적인 균류와 다르게 포자를 형성하기 위한 대형의 자실체를 만드는 것이 특징으로 대부분 담자균류와 자낭균류에 속하는 고등균류 이다. 버섯은 풍미가 뛰어나고 탄수화물, 단백질, 지질, 무기질, 비타민 및 미네랄 등의 각종 영양소를 다양하게 함유하고 있을 뿐만 아니라 생리활성 물질들을 생산함으로써 예로 부터 식용 및 약용으로 널리 이용되어 온 식품이다(1).
	항산화제 중 천연 항산화제는 어떤 것들이 있는가?	조직의 방어기구에서 해리되지 못한 활성산소는 노화, 암, 관절염 등에 직·간접적으로 생체 장애를 일으키는 원인으로 알려져 있다(5). 활성산소를 조절할 수 있는 항산화제는 superoxide dismutase, catalase, glutathione reductase 등의 효소 계열의 예방적 항산화제(6)와 phenol성 화합물, tocopherol류, ascorbic acid, carotenoid, glutathione, 아미노산 등의 천연 항산화제가 있으며(7), 합성 항산화제인 butylated hydroxy anisole(BHA)와 butylated hydroxy toluene(BHT) 등은 안전성에 대하여 논란이 제기되어 현재에는 허용대상 식품이나 사용량이 법적으로 엄격히 규제되어 있다(8). 이처럼 천연으로부터 산화반응 및 radical의 반응성을 억제할 수 있는 항산화물질을 찾는 연구가 활발히 이루어지고 있으며 일부는 상품화되고 있다.
	염증반응에서 NO가 어떻게 암 발생을 유도하는가?	NO는 NOS의 효소 촉매작용을 통해 생성되는 자유라디칼로 혈압조절과 신경전달 매개체로 면역반응에 중추적 역할을 하지만, 지속적 과발현은 오히려 점막손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암 발생 등의 질환을 유도한다. 이처럼 염증과 암 사이의 연관성은 150년 전부터 알려져 왔으며, 1863년 Virchow는 만성염증이 발생한 부위에서 암이 발생 되는 경향성이 높다고 보고되었다(37).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

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용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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