[논문]선학초 추출물의 멜라닌합성 억제 및 항산화효과

김대성; 김영목; 우원홍; 문연자

선학초 추출물의 멜라닌합성 억제 및 항산화효과
Study of Inhibitory Effect of Melanogenesis and Antioxidant Activity of Agrimonia pilosa Ledeb 원문보기

동의생리병리학회지 = Journal of physiology & pathology in Korean Medicine, v.24 no.2, 2010년, pp.236 - 241

김대성 (원광대학교 한의학전문대학원 한약자원개발학과) , 김영목 (원광대학교 한의과대학 병리학교실) , 우원홍 (원광대학교 한의학전문대학원 한약자원개발학과) , 문연자 (원광대학교 한의과대학 해부학교실)

Abstract ▼ AI-Helper

The purpose of this study was to investigate the mechanism of ethanol extract of Agrimonia pilosa Ledeb. (EAP)-reduced melanogenesis and diphenyl-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity. Agrimonia pilosa Ledeb., a perennial herbaceous plant, has been used as an antihemorrhagic, anthelminntic, and antiinflammatory agents in Chinese herbal medicine. In the present study, we observed that melanin synthesis and tyrosinase activity of B16F10 cells were significantly decreased by EAP. However, EAP could not suppress tyrosinase activity in the cell-free system, whereas kojic acid directly inhibited tyrosinase activity. Furthermore, EAP decreased the protein expression of tyrosinase, tyrosinase-related prootein 1 (TRP-1), and tyrosinase-related prootein 2 (TRP-2). EAP scavenged DPPH radical up to 41% with 100 ${\mu}g/m{\ell}$ concentration. These results suggest that the hypopigmentary effect of EPA was due to regulation of tyrosinase protein.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

Kojic acid는 tyrosinase 활성 부위의 구리를 chelation하여 tyrosine에서 DOPA로 그리고 DOPA에서DOPA quinone으로 진행되는 과정을 조절한다6). 본 실험에서 선학초 에탄올추출물에 의한 멜라닌 합성 억제가 tyrosinase 활성에 대한 직접적인 억제효과로 인한 것인지 알아보기 위해 기본 배지로만 배양한 B16F10 세포를 용해하여 얻은 효소액에 선학초 에탄올추출물을 직접 처리하여 tyrosinase 활성을 측정하였다. 그 결과 tyrosinase 활성이 200 ㎍/㎖에서 14%로 일부 억제를 보인반면, 양성대조군으로 사용한 kojic acid는 농도 의존적으로 tyrosinase 활성을 현저하게 억제시켰다.
최근 연구에서는 항바이러스 효과¹²⁾, 당뇨치료효과¹³⁾, 혈관이완 효과¹⁴⁾, 항균효과^15,16) 등이 보고되었고, 또한 선학초의 isocoumarin은 간암 세포주의 생육을 억제하며, 간세포독성에 대한 보호 작용이 있음이 밝혀졌다¹⁷⁾. 본 연구는 선학초 에탄올 추출물이 B16F10 세포에서 tyrosinase 활성과 멜라닌합성에 대한 조절 메커니즘과 DPPH 라디칼 소거 효능을 나타내는지 조사하였다.
본 연구에서는 선학초 에탄올추출물이 멜라닌 합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포를 사용하여 tyrosinase활성을 측정하였다. 기본 배지만 사용한 것을 대조군으로 하고, 선학초 에탄올추출물을 농도별로 처리하였을 때 세포내tyrosinase 활성과 멜라닌 합성 양을 측정한 결과 세포내tyrosinase 활성은 효과적으로 억제되었으며 멜라닌 합성 양의현저한 감소를 나타냈다.
3A). 선학초 에탄올추출물이tyrosinase의 효소활성을 억제시키는 것 인지 알아보기 위하여 배양된 B16F10 세포를 용해하여 tyrosinase 활성도 측정에 사용될 효소를 얻었다. 세포 용해액에 선학초 에탄올추출물을 농도별로 처리하고 L-DOPA oxidation 활성을 측정한 결과 선학초 에탄올추출물은 50 ㎍/㎖에서 10%, 100, 200 ㎍/㎖에서 14%로tyrosinase 활성도를 약간 감소시켰다.

제안 방법

B16F10 세포를 10 cm 배양용기에 3×105 개씩 세포를 부착시키고 25, 50 ㎍/㎖씩 선학초 에탄올추출물을 처리하고 3일 동안배양하였다.
B16F10 세포를 10 ㎝ 배양용기에 3×105 개씩 분주하여 4일간 배양하여 세포를 수거하고, 5 mM EDTA가 포함된 0.1 Msodium phosphate buffer(SPB, pH 6.8) 1 ㎖에 1%(V/V) TritonX-100과 0.1%(V/V)의 0.1 M PMSF를 혼합한 lysis buffer로 용해하여 얻은 상층액을 tyrosinase 활성 측정에 사용하였다.
B16F10 세포에서 선학초 에탄올추출물의 미백효과를 알아보기 위하여 다양한 농도로 처리한 후 세포독성, tyrosinase 활성억제, 멜라닌 양의 변화 및 멜라닌합성 관련 단백질의 발현 양을 측정하였다. 또한 DPPH 라디칼 소거법을 이용하여 활성산소 소거능을 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
25 ㎖ 1 M Tris-HCl, 2 ㎍ bromophenol blue)를 동량으로 혼합한 후 총 단백질 40 ㎍을 10% SDS polyacrylamide gel에서 전기영동 하였다.Nitrocellulose membrane로 전이시키고 5% non-fat skim milk로blocking 시킨 후, tyrosinase, TRP-1, TRP-2 antibody를 1:1000으로 희석하여 각각 실온에서 1시간 30분 동안 반응시켰다. TBST로 3회 세척한 후, 2차 antibody를 1:3000으로 희석하여 실온에서 1시간 동안 반응시켰다.
TBST로 세척한 후 ECL 용액으로 발색 후 ChemiDoc을 이용하여 band의 사진을 촬영하였다.
1 M PMSF를 혼합한 lysis buffer를 200 ㎕씩 분주하고 세포를 수거하여 얼음에서 30분간 용해시킨 다음 4℃, 15,000 rpm에서 30분간 원심분리 하여 얻은 상층액을 tyrosinase 활성 측정에 사용하였다. 단백질 정량은 Bradford 시약으로 595 nm에서 흡광도를 측정하여 동량의 단백질 양을 계산하였으며, 계산된 단백질과 0.1 M SPB의 총량이 150 ㎕가 되도록 분주 하고 0.1%(W/V)L-DOPA를 50 ㎕씩 분주하여 37℃에서 1시간 반응시켰으며, 30분 간격으로 405 nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다
B16F10 세포에서 선학초 에탄올추출물의 미백효과를 알아보기 위하여 다양한 농도로 처리한 후 세포독성, tyrosinase 활성억제, 멜라닌 양의 변화 및 멜라닌합성 관련 단백질의 발현 양을 측정하였다. 또한 DPPH 라디칼 소거법을 이용하여 활성산소 소거능을 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 선학초 에탄올추출물 처리 시 세포내 tyrosinase 활성도와 멜라닌 합성이 현저하게 감소하였으며, Western blot 결과 tyrosinase 단백질 발현이 현저하게 감소하였다.
멜라닌 정량은 Hosei 등의 방법²⁰⁾을 변형하여 사용하였다. 직경 6 ㎝ 배양용기에 1.
선학초 에탄올추출물이 B16F10 세포에 미치는 생존율을 조사하기 위하여 12.5, 25, 50 ㎍/㎖로 처리하여 세포 생존율을 측정하였다. 실험 결과 대조군 100%에 비해 선학초 에탄올추출물처리군은 98%, 94.
세포내의 멜라닌 합성양의 변화를 측정하기 위하여 선학초 에탄올추출물을 25 ㎍/㎖, 50 ㎍/㎖로 처리하고 3일간 배양하고2×106개의 세포를 수집한 다음 세포를 용해하여 멜라닌 합성양의 변화를 측정한 결과 Fig. 3B와 같았다.
직경 6 ㎝ 배양용기에 1.5×105 개씩 분주하여 24시간 배양한 후, 선학초 에탄올추출물 25, 50 ㎍/㎖씩 처리한 다음 3일간 배양하였으며, 각 군당 2×106 개씩 수거하여 lysis buffer(5 mM EDTA,0.1 M SPB(pH 6.8), 1% Triton X-100)로 세포를 용해하였다.
활성산소 소거능은 라디칼에 전자를 공여하여 산화를 억제하는 능력, 즉 DPPH 라디칼 소거능 측정법을 이용하여 선학초 에탄올추출물의 항산화력을 측정하였다. 0.

대상 데이터

Dulbecco's modified Eagle medium(DMEM), fetal bovine serum(FBS)은 Gibco(NY, USA)사 제품을, tyrosinase, TRP-1, TRP-2는 Santa Cruz(CA, USA)사 제품을, anti-Goat, anti-Rabbit anti-Mouse IgG HRP conjugate antibody는 ZYMED(CA, USA)사 제품을, hybond-ECL nitrocellulose membrane는 Amersham Biosciences(Buckinghanshire, England)사 제품을, westernblotting detection reagent는 iNtRON(seongnam, korea)사 제품을, non-fat skim milk는 Becton(Le Pont de Claix, France)사 제품을, dimethylsulfoxide(DMSO), phenylmethyl sulfonyl fluoride(PMSF), leupeptin, aprotonin, N,N,N',N' tetrametylethylenediamine (TEMED), thiazolyl blue tetrazolium bromide(MTT), L-3,4-dihydroxyphenyl alanine(L-DOPA)은Sigma사 제품을, 단백질 정량 시약은 Bio-Rad(CA, USA)사 제품을 사용하였다.
실험에 사용된 선학초는 (주)옴니허브에서 구입한 것으로 경북 영천에서 재배된 것을 사용하였다. 선학초 200 g에 100% 에탄올 2 L를 가하여 3일 동안 실온에서 추출하였고, 침전물을 여과한 후 감압 농축 하여 4.

데이터처리

실험 결과는 student's t-test를 이용하여 p-value를 구하였으며, p<0.05인 경우 *, p<0.01인 경우 **로 유의성이 있다고 표시하였다.

이론/모형

선학초 에탄올추출물을 배양액 중에 첨가하였을 경우tyrosinase 활성이 감소하였으나, 세포 용해 후 용해액에 첨가한 경우 tyrosinase 활성에는 변화가 거의 없었으므로 선학초 에탄올추출물은 tyrosinase 활성에 직접 작용한 것이 아니라고 판단되어 tyrosinase 활성 감소가 단백질 발현양의 변화에 의한 것인지 확인하기 위하여 Western blot을 시행하였다. 선학초 에탄올추출물 25, 50 ㎍/㎖로 처리하고 3일간 배양 하여 단백질 발현양의 변화를 조사한 결과 tyrosinase는 대조군에 비하여 발현양이 현저하게 감소하는 것을 관찰할 수 있었으며, tyrosinase-related protein 1(TRP-1)과 tyrosinase-related protein 2(TRP-2) 모두 단백질 발현양이 감소하였다(Fig.
세포내 tyrosinase 활성은 Martinez-Esparza 등의 방법¹⁹⁾으로 측정하였다. 6-well 배양용기에 B16F10 세포를 각각의 well당 8.
세포생존율 측정은 Mosmann의 방법¹⁸⁾에 의하여 실시하였다. 24-well 배양 용기에 B16F10 세포를 7×103 개씩 분주하고 24시간 배양 후 선학초 에탄올추출물을 여러 농도로 처리한 다음 37℃, 5% CO2 하에서 1일간 배양하였다.
활성산소 소거능은 Blosis 방법²¹⁾에 의한 DPPH 라디칼 소거법으로 측정하였다. 즉, 선학초 에탄올추출물을 메탄올에 녹여 준비하고, 메탄올에 녹인 0.

성능/효과

0.3 mM DPPH 용액에 선학초 에탄올추출물을 넣고 실온에서 30분간 반응시킨 후,ELSA reader로 517 nm에서 흡광도를 측정한 결과 대조군은1.063 ± 0.06(100%)이었으며, 선학초 에탄올추출물 25, 50, 100,150, 200 ㎍/㎖로 처리한 구간의 흡광도는 각각 0.78 ±0.04(73%), 0.669 ± 0.08(63%), 0.437 ± 0.06(41%), 0.298 ± 0.09(28%), 0.192 ± 0.03(18%)로 측정되었다(Fig. 5).
멜라닌 합성은 tyrosine을 DOPA로 전환 시키는 tyrosine hydroxylase와 DOPA를 DOPAquinone으로 전환시키는 DOPA oxidase로서 처음 두 단계의 반응을 촉매 하는 tyrosinase의 작용에 의해 시작된다. B16F10 세포에 선학초 에탄올추출물을 25, 50㎍/㎖로 처리하여 3일간 배양 후 tyrosinase 활성에 미치는 영향을 측정한 결과 25 ㎍/㎖에서 74.8%, 50 ㎍/㎖에서 48.3%로 억제시킴을 알 수 있었다(Fig. 3A). 선학초 에탄올추출물이tyrosinase의 효소활성을 억제시키는 것 인지 알아보기 위하여 배양된 B16F10 세포를 용해하여 tyrosinase 활성도 측정에 사용될 효소를 얻었다.
본 실험에서 선학초 에탄올추출물에 의한 멜라닌 합성 억제가 tyrosinase 활성에 대한 직접적인 억제효과로 인한 것인지 알아보기 위해 기본 배지로만 배양한 B16F10 세포를 용해하여 얻은 효소액에 선학초 에탄올추출물을 직접 처리하여 tyrosinase 활성을 측정하였다. 그 결과 tyrosinase 활성이 200 ㎍/㎖에서 14%로 일부 억제를 보인반면, 양성대조군으로 사용한 kojic acid는 농도 의존적으로 tyrosinase 활성을 현저하게 억제시켰다. 선학초 에탄올추출물이 tyrosinase 활성에 대한 직접적인 억제효과가 일부 나타나기는 했지만, 세포내 멜라닌 합성의 현저한 억제 효과를 설명하기에는 부족한 것으로 사료된다.
본 연구에서는 선학초 에탄올추출물이 멜라닌 합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포를 사용하여 tyrosinase활성을 측정하였다. 기본 배지만 사용한 것을 대조군으로 하고, 선학초 에탄올추출물을 농도별로 처리하였을 때 세포내tyrosinase 활성과 멜라닌 합성 양을 측정한 결과 세포내tyrosinase 활성은 효과적으로 억제되었으며 멜라닌 합성 양의현저한 감소를 나타냈다. Kojic acid는 tyrosinase 활성 부위의 구리를 chelation하여 tyrosine에서 DOPA로 그리고 DOPA에서DOPA quinone으로 진행되는 과정을 조절한다6).
선학초 에탄올추출물 처리 시 세포내 tyrosinase 활성도와 멜라닌 합성이 현저하게 감소하였으며, Western blot 결과 tyrosinase 단백질 발현이 현저하게 감소하였다. 또한 우수한 DPPH 라디칼 소거 효능을 갖고 있는 것으로 나타났다
전사 이후 과정에는 tyrosinase 활성을 직접적으 로억제함으로써 멜라닌 생성을 감소시키거나, tyrosinase의 glycosylation을 저해하여 tyrosinase의 성숙을 방해하고 완전히 성숙되지 못한 tyrosinase는 ubiquitin-proteasome 경로를 통해 분해되는 경로 등이 있다. 본 실험에서 선학초 에탄올추출물은tyrosinase 단백질 발현을 효과적으로 억제시켰다. 이러한 결과가 전사 수준이나 단백질 합성 또는 성숙과정 중에 일어났을 가능성이 있지만 선학초 에탄올추출물의 멜라닌 합성 억제효과는tyrosinase 단백질 발현의 감소로 인한 것임을 확인 하였다.
특히 피부는 자외선에 의한 광학적 반응을 통해 활성산소를 생성하는데, 이러한 활성산소는 피부의항산화 방어체계의 균형을 붕괴시켜 피부 세포 및 조직의 손상, 피부 탄력 감소와 주름살 및 기미 주근깨 등의 피부 노화, 세포사멸 등을 초래한다. 본 실험에서 선학초 에탄올추출물의 항산화효능을 알아보기 위하여 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과 우수한 DPPH 라디칼 소거 효능이 있음을 나타내었다. 따라서 선학초 에탄올추출물은 미백효과뿐만 아니라 활성산소에 대한 방어체계를 향상시켜 노화를 지연시키고 각종 질병을 예방하기 위한 후보 물질로서 가능성이 있다고 사료된다.
선학초 에탄올추출물을 배양액 중에 첨가하였을 경우tyrosinase 활성이 감소하였으나, 세포 용해 후 용해액에 첨가한 경우 tyrosinase 활성에는 변화가 거의 없었으므로 선학초 에탄올추출물은 tyrosinase 활성에 직접 작용한 것이 아니라고 판단되어 tyrosinase 활성 감소가 단백질 발현양의 변화에 의한 것인지 확인하기 위하여 Western blot을 시행하였다. 선학초 에탄올추출물 25, 50 ㎍/㎖로 처리하고 3일간 배양 하여 단백질 발현양의 변화를 조사한 결과 tyrosinase는 대조군에 비하여 발현양이 현저하게 감소하는 것을 관찰할 수 있었으며, tyrosinase-related protein 1(TRP-1)과 tyrosinase-related protein 2(TRP-2) 모두 단백질 발현양이 감소하였다(Fig. 4).
3B와 같았다. 선학초 에탄올추출물25 ㎍/㎖는 79%, 50 ㎍/㎖는 57%로 멜라닌 합성 양을 현저하게 감소시켰으며(Fig. 2B), 멜라닌색소 침착을 육안으로 관찰한 결과 또한 확실한 색의 변화를 보였다(Fig. 2A).
선학초 에탄올추출물이tyrosinase의 효소활성을 억제시키는 것 인지 알아보기 위하여 배양된 B16F10 세포를 용해하여 tyrosinase 활성도 측정에 사용될 효소를 얻었다. 세포 용해액에 선학초 에탄올추출물을 농도별로 처리하고 L-DOPA oxidation 활성을 측정한 결과 선학초 에탄올추출물은 50 ㎍/㎖에서 10%, 100, 200 ㎍/㎖에서 14%로tyrosinase 활성도를 약간 감소시켰다. 반면 양성대조군으로 사용된 kojic acid는 cell-free tyrosinase 활성도 측정에서 농도 의존적으로 현저한 tyrosinase 활성 억제 효과를 보였다(Fig.
5, 25, 50 ㎍/㎖로 처리하여 세포 생존율을 측정하였다. 실험 결과 대조군 100%에 비해 선학초 에탄올추출물처리군은 98%, 94.6%, 93.5%의 생존율을 보였다(Fig. 1).
본 실험에서 선학초 에탄올추출물은tyrosinase 단백질 발현을 효과적으로 억제시켰다. 이러한 결과가 전사 수준이나 단백질 합성 또는 성숙과정 중에 일어났을 가능성이 있지만 선학초 에탄올추출물의 멜라닌 합성 억제효과는tyrosinase 단백질 발현의 감소로 인한 것임을 확인 하였다. 현재 선학초 에탄올추출물의 미백효과를 나타내는 기전을 밝히기 위해 실험 중에 있다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	멜라닌이 과도하게 생성되거나 분포에 이상이 생기면 어떤 증상과 질병을 일으키나요?	또한 멜라닌세포에서 멜라닌의 합성이 증가되고 합성된 멜라닌은 자외선을 차단하여 피부를 보호하는 이로운 작용을 하기도 한다. 그러나 과도한 멜라닌 생성이나 분포의 이상으로 인해기미, 주근깨 및 피부반점이 형성되고 피부노화 및 피부암 유발에 관여하는 것으로 알려져 있다1-3).
	선학초란?	선학초(仙鶴草, Agrimonia pilosa Ledeb.)는 장미과(Rosaceae)에 속하는 짚신나물의 전초로서 용아초, 황아초, 지선초, 짚신나물 등으로 부르기도 한다. 선학초는 예로부터 폐암, 간암, 식도암, 토혈, 혈뇨, 자궁출혈 등에 이용되어 왔으며10), 주요 성분으로는 전초에 agrimonin, agrimonolide, tormentic acid, ellagic acid등이 있고, 잎과 줄기에는 luteolin-7-glucoside가 함유되어 있음이 알려져 있다11).
	tyrosinase 억제제로 tyrosinase의 glycosylation을 저해하여 멜라닌합성을 억제하는 물질은 무엇인가요?	따라서 tyrosinase 활성 억제제를 찾는 연구가 미백제의개발에 있어서 중요한 부분을 차지하고 있으며, 지금까지 알려진tyrosinase 억제제로는 L-tyrosine과 경쟁적으로 작용하는 알부틴5), tyrosinase 활성 부위의 copper를 chelation하여 tyrosine에서DOPA로 그리고 DOPA에서 DOPA quinone으로 진행되는 과정을 저해하는 kojic acid가 있다6). 또한 fatty acid, glucosamine과 tunicamycin 같은 물질들은 tyrosinase의 glycosylation을 저해하여 tyrosinase의 성숙을 방해함으로써 멜라닌합성을 억제하고, 미성숙 tyrosinase는 ubiquitin-proteasome 경로를 통해 분해된다7,8). Sphingosylphosphorycholine은 ERK를 활성화시켜 microphthalmia-associated transcription factor(MITF)의 분해를 유도함으로써 멜라닌합성을 조절한다고 하였다9).

참고문헌 (32)

Bell, A.A., Weeler, M.H. Biosynthesis and function of fungal melanin, Ann Rev Phtophathol 24: 411-451, 1986.

상세보기
Chen, J.S., Wei, C., Marshall, M.R. Inhibition mechannism of Kojic acid on polyphenol oxidase. J Agric Food Chem 39: 1897-1901, 1991.

상세보기
Urabe, K., Aroca, P., Tsukamoto, K., Mascagna, D., Paulumbo, A., Prota, G., Hearing, V.J. The inherent cytotoxicty of melanin precursors. Biochim Biophys Acta 1221: 272-278, 1994.

상세보기
Alaluf, S., Heath, A., Carter, N., Atkins, D., Mahalingam, H., Barrett, K., Kolb, R., Smit, N. Variation in melanin content and composition in type V and VI photoexposed and photoprotected human skin: the dominant role of DHI. Pigment Cell Res 14: 337-347, 2001.

상세보기
Maeda, K., Fukuda, M. Arbutin: mechanism of its depigmenting action in human melanocyte culture. J Pharmacol Exp Ther 276: 765-769, 1996.

상세보기
Battaini, G., Monzani, E., Casella, L., Santagostini, L., Pagliarin, R. Inhibition of the catecholase activity of biomimetic dinuclear copper complexes by kojic acid. J Biol Inorg Chem 5: 262-268, 2000.

상세보기
Ando, H., Funasaka, Y., Oka, M., Ohashi, A., Furumura, M., Matsunaga, J., Matsunaga, N., Hearing, V.J., Ichihashi, M. Possible involvement of proteolytic degradation of tyrosinase in the regulatory effect of fatty acids on melanogenesis. J Lipid Res 40: 1312-1316, 1999.

상세보기
Ando, H., Wen, Z.M., Kim, H.Y., Valencia, J.C., Costin, G.E., Watabe, H., Yasumoto, K., Niki, Y., Kondoh, H., Ichihashi, M., Hearing, V.J. Intracellular composition of fatty acid affects the processing and function of tyrosinase through the ubiquitin-proteasome pathway. Biochem J 394: 43-50, 2006.

상세보기
Kim, D.S., Park, S.H., Kwon, S.B., Park, E.S., Huh, C.H., Youn, S.W., Park, K.C. Sphingosylphosphorylcholine-induced ERK activation inhibits melanin synthesis in human melanocytes. Pigment Cell Res 29: 147-153, 2006.
Kang, B.S. Medical herbs. Young-Rym-Sa, seoul pp 384-386, 1992.
Pei, Y.H., Li, X., Zhu, T.R. Studies on the structure of a new ellagic acid glycoside from the root sprouts of Agrimonia pilosa Ledeb. Yao Xue Xue Bao 25: 798-800, 1990.

상세보기
Min, B.S., Kim, Y.H., Tomiyama, M., Nakamura, N., Miyashiro, H., Otake, T., Hattori, M. Inhibitory effects of Korean plants on HIV-1 activities. Phytother Res 15: 481-486, 2001.

상세보기
Swanston-Flatt, S.K., Day, C., Bailey, C.J., Flatt, P.R. Traditional plant treatments for diabetes. Studies in normal and streptozotocin diabetic mice. Diabetologia 33: 462-464, 1990.

상세보기
Cao, L.H., Lee, J.K., Cho, K.H., Kang, D.G., Kwon, T.O., Kwon, J.W., Kim, J.S., Sohn, E.J., Lee, H.S. Mechanism for the Vascular Relaxation Induced by Butanol Extract of Agrimonia pilosa. Kor J Pharmacogn 37: 67-73, 2006.
Lee, E.S., Seo, B.I. Growth inhibition of Escherichia coli KCTC 2441 by Agrimonia pilosa Ledeb. extract. Kor J Herbology 18: 15-20, 2003.
Bae, J.H., Sohn, M.A. Effect of Agrimonia Pilosa Ledeb. Extract on the Growth of Food-Borne Pathogens. Korean J Nutr 38: 112-116, 2005.

원문보기 상세보기
Park, E.J., Oh, H., Kang, T.H., Sohn, D.H., Kim, Y.C. An isocoumarin with hepatoprotective activity in Hep G2 and primary hepatocytes from Agrimonia pilosa. Arch Pharm Res 27: 944-946, 2004.

원문보기 상세보기
Mosmann, T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival : application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods 65: 55-63, 1983.

상세보기
Martinez-Esparza, M., Jimenez-Cervantes, C., Solano, F., Lozano, J.A., Garcia-Borron, J.C. Mechanisms of melanogenesis inhibition by tumor necrosis factor-alpha in B16/F10 mouse melanoma cells. Eur J Biochem 255: 139-146, 1998.

상세보기
Hosoi, J., Abe, E., Suda, T., Kuroki, T. Regulation of melanin synthesis of B16 mouse melanoma cells by 1 alpha, 25-dihydroxyvitamin D3 and retinoic acid.. Cancer Res 45: 1474-1478, 1985.
Blosis, M.S. Antioxidant determination by the use a stable free radical. Nature 26: 1199-1200, 1958.
Kim, H.J., Lim, H.W., Kim, B.H., Kim, H.S., Choi, S.W., Yoon, C.S. Studies on the anti-acne effect of Agrimonia pilosa Ledeb. J. Soc. Cosmet 32: 53-58, 2006.
Maeda, K., Fukuda, M. In vivo effectiveness of several whitening cosmetic components in human melanocytes. J Soc Cosmet Chem 42: 361-368, 1991.
Ha, S.K., Moon, E.J., Lee, M.J., Park, H.M., Yoo, E.S., Oh, M.S., Kim, S.Y. Effect of the BuOH Soluble Fraction of Cinnamomum camphora on Melanin Biosynthesis. Korean J Medicinal Crop Sci 17: 293-300, 2009.

원문보기 상세보기
유인식, 박시준, 문연자, 고준석, 신기돈, 이장천, 우원홍, 임규상. 싸리꽃 추출물의 tyrosinase 활성 및 멜라닌합성 억제 효과. 동의생리병리학회지 21: 1142-1147, 2007.

원문보기 상세보기
노성택, 김대성, 이성진, 박대중, 이장천, 임규상, 우원홍, 문연자. 교맥 에탄올 추출물의 피부 미백기전 연구. 동의생리병리학회지 21: 1243-1249, 2007.

원문보기 상세보기
Chin, J.E., Cho, N.C. Effect of Houttuynia cordata extracts on tyrosinase gene expression. J Korean Soc Food Sci Nutr 34: 1284-1288, 2005.

원문보기 상세보기
Busca, R., Ballotti, R. Cyclic AMP a key messenger in the regulation of skin pigmentation. Pigment Cell Res 13: 60-69, 2000.

상세보기
Sassone-Corsi, P. Coupling gene expression to cAMP signalling: role of CREB and CREM. Int J Biochem Cell Biol 30: 27-38, 1998.

상세보기
Bertolotto, C., Busca, R., Abbe, P., Bille, K., Aberdam, E., Ortonne, J.P., Ballotti, R. Different cis-acting elements are involved in the regulation of TRP1 and TRP2 promoter activities by cyclic AMP: pivotal role of M boxes (GTCATGTGCT) and of microphthalmia. Mol Cell Biol 18: 694-702, 1998.

상세보기
Kim, D.S., Kim, S.Y., Chung, J.H., Kim, K.H., Eun, H.C., Park, K.C. Delayed ERK activation by ceramide reduces melanin synthesis in human melanocytes. Cell Signal 14: 779-785, 2002.

상세보기
Chi, H.Y., Kim, K.H., Kong, W.S., Kim, S.L., Kim, J.A., Chung, I.M. and Kim, J.T. Antioxidant activity and total phenolic compound of P. eryngii spp. extracts. Kor J Crop Sci 50: 216-219, 2005.

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증