[논문]시판 어패류에서 분리한 장염 비브리오균의 항생제 감수성 특성

류승희; 황영옥; 박석기; 이영기

[국내논문] 시판 어패류에서 분리한 장염 비브리오균의 항생제 감수성 특성
Antibiotic Susceptibility of Vibrio parahaemolyticus Isolated from Commercial Marine Products 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.42 no.4 = no.212, 2010년, pp.508 - 513

류승희 (서울특별시 보건환경연구원 강남농수산물검사소) , 황영옥 (서울특별시 보건환경연구원 강남농수산물검사소) , 박석기 (서울특별시 보건환경연구원 강남농수산물검사소) , 이영기 (단국대학교 대학원 보건학과)

초록
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2006년부터 2008년까지 3년간 시판 수산물 2,239건에서 분리한 V. parahaemolyticus에 대한 항생제 감수성 결과는 다음과 같았다. 어류 789건을 검사하여 42주(5.3%)의 V. parahaemolyticus가 분리 동정되었으며, 패류 735건 중 27건(3.7%), 연체류 387건 중 12건(3.1%), 기타 수산물 328건 중 12건(3.7%), 총 93건(4.2%)에서 V. parahaemolyticus가 분리 동정되었다. 내성률이 높은 항생제는 ampicillin 93.5%, cephalothin 90.3%, streptomycin 87.1%, ticarcillin 55.9%, 그리고 amikacin 40.9%이었으며, 감수성률이 높은 항생제는 nalidixic acid, chloramphenicol 및 ampicillin/sulbactam trimethoprim/sulfamethoxazole 98.9%, gentamicin 및 tetracycline 82.8%, ceftriaxone 63.4%이었다. 중등도 내성률은 kanamycin 79.6%, ciprofloxacin 64.5%, amikacin 47.3%, cefoxitin 43.0%순이었다. 항생제 내성양상은 3제 내성이 37.6%, 4제 내성 24.7%, 5제 내성 17.2%, 6제 내성 11.8%, 2제 내성6.5%, 7제 내성 2.2% 순이었으며, 가장 많은 내성 양상은 AM-CF-S의 3제 내성(22.6%), AM-CF-S-TIC 4제 내성(18.3%), AM-AN-CF-S-TIC 5제 내성(9.7%) 순이었다.

Abstract ▼ AI-Helper

Ninety three strains (4.2%) of Vibrio parahaemolyticus were isolated from 2,239 samples of commercial marine products during 2006-2008 in Seoul, Korea. We examined 16 antimicrobial susceptibilities of 93 V. parahaemolyticus isolates. Antibiotic resistance of V. parahaemolyticus was most frequently observed to ampicillin (93.5%), followed by cephalothin (90.3%), streptomycin (87.1%), ticarcillin (55.9%), and amikacin (40.9%). Antibiotic susceptibility was most frequently observed to nalidixic acid, chloramphenicol and ampicillin/sulbactam (100%), followed by trimethoprim/sulfamethoxazole (98.9%), gentamicin and tetracycline (82.8%), and ceftriaxone (63.4%). In addition, the isolates also displayed intermediate resistance to kanamycin (79.6%), ciprofloxacin (64.5%), amikacin (47.3%) and cefoxitin (43.0%). All isolates were resistant to more than two drugs. The most prominent multiple drug resistance was 3 drug resistance (37.6%), followed by 4 drug (24.7%), 5 drug (17.2%), and 6 drug resistance (11.8%). The most prominent multiple drug resistance pattern was the cephalothin-streptomycin-ampicillin resistance pattern (22.6%), followed by cephalothinticarcillin-streptomycin-ampicillin (18.3%) and cephalothin-ticarcillin-streptomycin-ampicillin-amikacin (9.7%). Multiple drug resistance patterns of V. parahaemolyticus from marine products require continuous monitoring.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 실험은 2006년부터 2008년까지 3년간 가락시장에서 시판되는 수산물 2,239건에서 V. parahaemolyticus를 분리하고, 분리한 균의 항생제 감수성을 조사함으로써 수산물의 안전성 및 국민건강에 이바지하고자 하였다.
parahaemolyticus는 FDA(23) 및 Lee와 Park(24)의 시험법에 따라 시험하였다. 어패류 종류별로 100 g 이상을 폴리비닐백에 채취하여 가능한 한 신속히 검사하였다. 무균적으로 세분한 검체 10 g을 salt polymixin B broth(Nissui, Tokyo, Japan) 90 mL에 접종하고 stomacher(Seward stomacher 400, Worthing, UK)로 처리하고 내용액을 멸균 플라스크에 옮겨 배양하였다.

제안 방법

또한 패류 등 파편이 들어있는 것이나 새우 등 갑각류의 경우에는 stomacher용 폴리비닐백이 찢어지는 수가 있으므로 폴리비닐백을 2중으로 사용하였다. 37℃에서 24시간 증균 배양한 후 Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar(TCBs, Difco, Detroit, MI, USA) 배지에 획선도말하고 녹색집락을 형성하는 균에 대하여 API 20E kit(BioMerieux, Marcy, France)로 생화학적 시험을 실시하여 V. parahaemolyticus를 확인 동정하였다. 확인 동정된 V.
5 MacFarland scale(BioMerieux)의 균액으로 희석한 후 Müller-Hinton agar(Difco)에 도말한 후 30분간 건조시킨 후 16종의 항생제 디스크를 올려놓고 37℃에서 하룻밤 배양하였다. 각 항생제에 대한 억제대 크기를 측정하고 CLSI guideline(26)에 의해 감수성과 내성을 판정하였다. 사용한 항생제 디스크는 모두 BD BBL(Becton Dickinson and Company, Sparks, MD, USA)사제품으로 amikacin(AN30: 30 µg), amoxicillin/clavulanic acid(AMC30: 20 µg/10 µg), ampicillin(AM10: 10 µg), ampicillin/sulbactam(SAM20: 10 µg/10 µg), cefoxitin(FOX30: 30 µg), ceftriaxone(CRO30: 30 µg), cephalothin (CF30: 30 µg), chloramphenicol(C30: 30 µg), ciprofloxacin(CIP5: 5 µg), gentamicin(GM10: 10 µg), kanamycin(K30: 30 µg), nalidixic acid(NA: 30 µg), streptomycin(S10: 10 µg), tetracycline(TE30: 30 µg), ticarcillin(TIC75: 75 µg), trimethoprim/sulfamethoxazole(SXT: 1.
5%) 순이었다. 패류 27주 중 9주(33.3%)가 AM-CF-S 3제 내성이었고, AM-CF-S-TIC 및 AMCF-CIP-S-TIC 내성이 각 3주(11.1%)였으며, 연체류 12주의 내성 양상은 AM-CF-TIC 3주(25%), AM-CF-S, AM-CF-S-TIC 및 AM-AN-CF-S-TIC 각 2주(16.7%) 이었다. 극피척색류에서 분리한 균주 12주의 내성양상은 AM-CF-S 3제 내성 3주(25%), AM-CFTIC 및 AM-CF-S-TIC 각 2주(16.

대상 데이터

시판 수산물의 종류와 수량은 Table 1과 같았다. 2006년 총 942건을 실험하였으며, 2007년 749건, 2008년 548건을 실험하여 총 2,239건을 실험하였다. 수산물 종류별로는 어류 789건, 패류 735건, 연체류 387건, 갑각류 170건 및 극피척색류 158건이었다.
사용한 항생제 디스크는 모두 BD BBL(Becton Dickinson and Company, Sparks, MD, USA)사제품으로 amikacin(AN30: 30 µg), amoxicillin/clavulanic acid(AMC30: 20 µg/10 µg), ampicillin(AM10: 10 µg), ampicillin/sulbactam(SAM20: 10 µg/10 µg), cefoxitin(FOX30: 30 µg), ceftriaxone(CRO30: 30 µg), cephalothin (CF30: 30 µg), chloramphenicol(C30: 30 µg), ciprofloxacin(CIP5: 5 µg), gentamicin(GM10: 10 µg), kanamycin(K30: 30 µg), nalidixic acid(NA: 30 µg), streptomycin(S10: 10 µg), tetracycline(TE30: 30 µg), ticarcillin(TIC75: 75 µg), trimethoprim/sulfamethoxazole(SXT: 1.35 µg/23.75 µg)을 사용하였다.
서울시내에서 시판되고 있는 수산물을 구입하여 V. parahaemolyticus를 분리하였다. 시판 수산물의 종류와 수량은 Table 1과 같았다.

이론/모형

V. parahaemolyticus는 FDA(23) 및 Lee와 Park(24)의 시험법에 따라 시험하였다. 어패류 종류별로 100 g 이상을 폴리비닐백에 채취하여 가능한 한 신속히 검사하였다.
항생제 감수성 시험은 93건의 장염비브리오균을 대상으로 Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI) guidelines를 따라 Müller-Hinton 배지를 이용 disc method에 의해 수행하였다(25).

성능/효과

7%, FOX 및 AN 50% 순이었다. 극피척색류에서 분리된 12주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 CF 및 AM 91.7%, S 75%, TIC 66.7% 순이었으며, 높은 감수성은 NA, GM, C, SAM, SXT 및 AMC 100%, TE 91.7% TIC, S 75%, FOX 58.3% 순이었으며, 중등도 내성은 K 83.3%, AN 및 CIP 50%, FOX 41.7%순이었다. 총 93주에 대한 높은 내성을 나타낸 것은 AM 93.
본 실험에서는 2006년부터 2008년까지 3년간 2,239건의 수산물 시료 중 93건(4.2%)에서 V. parahaemolyticus를 분리하였는데 이것은 Lee 등(26)이 2004년 가락시장에서 시판되는 어패류 1,143건을 검사하여 306주(26.8%), Lee 등(27)이 2003년 1,869건의 해산물에서 391주(20.9%) 그리고 Son 등(28)이 경북 동해안의 시판 어패류 285건 중 69주(24.2%) 그리고 해수 및 기수를 포함 총 439건에서 140주(31.9%)의 V. parahaemolyticus를 분리하여 높은 분리율을 보고한 것보다 낮은 분리율을 보였다. 반면, Lee 등(29)이 1997년 1,577건의 시판 어패류에서 66주(4.
본 실험에서의 주요 내성 양상은 AM-CF-S-TIC 4제 내성(10주, 23.8%), AM-CF-S 3제 내성(7주, 16.7%), AM-AN-CF-K-S-TIC 6제 내성(4주, 9.5%)으로 임상용으로 오래 전부터 널리 이용된 항생제에 대한 내성이었으나, 식중독 환자에서 분리된 V. parahaemolyticus의 55.9%가 단제내성을 나타내 매우 다른 양상을 보였다(40). 이와 같은 결과는 자연환경에서 살아남기 위한 결과로 생각되며, 분리균주들의 다양한 내성 양상과 항생제 내성 유전자와의 관련성도 있을 것으로 판단되어, 이에 대한 연구를 진행 중에 있다.
parahaemolyticus에 대한 연도별 항생제 감수성은 Table 3과 같았다. 어류에서 분리된 42주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 AM 95.2%, S 90.5%, CF 88.1%, 52.4%, AN 45.2%, K 30.9%순이었고, 높은 감수성을 나타낸 항생제는 NA, C 및 SAM 100%, SXT 97.6%, AMC 83.3%, TE 80.9%, GM 69.0%, CRO 54.8%, FOX 50%순이었으며, 중등도 내성은 K 69.0% 및 CIP 66.7%순이었다. 패류에서 분리된 27주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 S 및 AM 92.
parahaemolyticus의 항생제 내성 분포는 Table 4와 같았다. 어류에서 분리된 총 42주에 대해 가장 많이 검출된 내성 양상은 AM-CF-S-TIC 4제내성으로 총 10주(23.8%)가 이에 해당되었으며, AM-CF-S 3제 내성이 7주(16.7%), AM-AN-CF-K-S-TIC 6제 내성 4주(9.5%) 순이었다. 패류 27주 중 9주(33.
1% 순이었다. 연체류에서 분리된 12주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 CF 100%, AM 91.7%, TIC 및 S 75%순이었으며, 높은 감수성은 NA, C, SAM 및 SXT 100%, GM 및 TE 91.7%, AMC 83.3% 순이었으며, 중등도 내성은 K 91.7%, CIP 66.7%, FOX 및 AN 50% 순이었다. 극피척색류에서 분리된 12주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 CF 및 AM 91.
7%) 순이었다. 전체적으로 분리 균주 93주 중 3제 내성이 35주(37.6%)로 가장 많았으며, 4제 내성 23주(24.7%), 5제 내성 16주(17.2%), 6제 내성 11주(11.8%), 2제 내성 6주(6.5%) 및 7제 내성 2주(2.2%)였다.
7%순이었다. 총 93주에 대한 높은 내성을 나타낸 것은 AM 93.5%, CF 90.3%, S 87.1%, TIC 55.9% 및 AN 38.7%순이었으며, 높은 감수성은 NA, C 및 SAM 100%, SXT 98.9%, AMC 88.2%, GM 및 TE 82.8% 순이었으며, 중등도 내성은 K 79.6%, CIP 64.5%, AM 47.3% 순이었다.
7%순이었다. 패류에서 분리된 27주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 S 및 AM 92.6%, CF 88.9%, TIC 48.1%, AN 37.0%순이었고, 높은 감수성은 NA, C, SAM 및 SXT 100%, GM 및 AMC 92.6%, TE 77.8%, CRO 74.1% 및 FOX 59.3% 순이었으며, 중등도 내성은 K 88.9%, CIP 66.7%, TIC 및 AN 48.1% 순이었다. 연체류에서 분리된 12주 중 높은 내성을 나타낸 항생제는 CF 100%, AM 91.
한편 시판 어패류에서 분리된 대장균의 분리율은 6.7%로 본 실험의 V. parahaemolyticus의 분리율과 큰 차이를 보이지 않았으며, 항생제 내성률은 매우 낮아 TIC 30.7%, CF 11.7%, S 12.8%, AM 6.7%를 보여 현격한 차이를 보였고, 전체의 39.1%만이 내성을 나타내어 모든 분리균주가 두 가지 이상의 항생제에 내성을 나타낸 본 실험의 결과와는 매우 큰 차이를 보였다(41). 비록 이와 같은 결과는 균종 및 발육 환경의 영향일 수 있으나, 어패류에서 분리되는 각종 미생물에 대한 항생제 감수성 모니터링은 국민건강을 위하여 매우 중요한 사안이며 지속적인 감시가 필요할 것으로 판단된다.

후속연구

1%만이 내성을 나타내어 모든 분리균주가 두 가지 이상의 항생제에 내성을 나타낸 본 실험의 결과와는 매우 큰 차이를 보였다(41). 비록 이와 같은 결과는 균종 및 발육 환경의 영향일 수 있으나, 어패류에서 분리되는 각종 미생물에 대한 항생제 감수성 모니터링은 국민건강을 위하여 매우 중요한 사안이며 지속적인 감시가 필요할 것으로 판단된다.
4%가 1종 이상의 항생제에 내성을 나타내어 본 실험보다 낮은 결과를 보고하였다. 이와 같은 결과는 최근 양식 어업이 증가하는 추세로 이에 따른 항생제 사용 증가와 연관이 있는 것으로 생각되며, 보다 적극적으로 항생제 사용을 줄이면서 어류 질병을 억제할 수 있는 백신사용 등의 대책이 필요할 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	Vibrio parahaemolyticus 은 어디에서 발견되는가?	Vibrio parahaemolyticus(V. parahaemolyticus)는 연안 해수의 상재균으로 여름철에 연안 해수에서 발견된다. 겨울철에는 해수 중에서 검출되지 않지만, 갯벌 중에서 생존한다.
	Vibrio parahaemolyticus 은 여름철에 어디에서 발견되는가?	Vibrio parahaemolyticus(V. parahaemolyticus)는 연안 해수의 상재균으로 여름철에 연안 해수에서 발견된다. 겨울철에는 해수 중에서 검출되지 않지만, 갯벌 중에서 생존한다.
	Vibrio parahaemolyticus는 겨울철에 어디서 생존하는가?	parahaemolyticus)는 연안 해수의 상재균으로 여름철에 연안 해수에서 발견된다. 겨울철에는 해수 중에서 검출되지 않지만, 갯벌 중에서 생존한다. 해수 중 이 균의 출현 여부는 수온에 따라 달라, 수온이 17°C 이상이 되면 해수 중에서 검출된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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