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문제 정의
- 또한 세계화에 맞추어 수출입이 증가함에 따라 해외의 항생제 함유 수산물의 국내 유입이 증가되어 새로운 내성 인자 전파가 우려되고 있다. 따라서다제 내성균의 증가와 신종 내성균의 출현 등 내성 확산 방지를 위해서는 체계적이고 지속적인 감시와 내성 관련 연구가 활성화되어야 한다」。) 이에 수입산 및 전국의 수산물이 집결되는 가락시장의 유통 수산물을 채취하여, V. parahaemolyticuse] 분포양상을 분석하고 지속적인 항생제 내성 감시 프로그램의 일환으로 본 연구를 실시하였다.
제안 방법
- 2004년 가락시장, 노량진시장 및 대형유통점의 수산물에서 매월 8회씩 채취된 1, 143건의 시료에서 생화학적 방법에 의해 306균주를 분리하여 시료별, 계절별 균의 분포를 조사하고 항생제 내성시험을 실시하였다. 시료는 polybag에 채취한 후 ice box에 보관하여 2시간 이내에 실험실로 운반, 즉시 배양실험을 하였다.
- 2004년 서울시내 가락시장, 노량진시장 및 대형유통점에서 채취된 1, 143건의 시료에서 306주의 V. parahaemolyticus-^:^: 분리하여 시료별 월별 균의 분포를 조사하였으며 trimethoprim/sulfamethoxazole, cefoxithin, amoxicillin, ceftriaxone, ticarcillin, ciprofloxacin, nalidixic acid, tetracycline, ampicillin/ sulbactam, ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, kanamycin 등의 항생제 감수성검사를 실시하였다.
- TCBS 배지 상에서 2~3mm 직경의 비교적 큰 크기의 점조성 녹색 집락을 분리, 생화학 시험을 하였다. glucose, amylose, mannitol, lycine decarboxylase, ornithine decarboxylase, oxidase에는 모든 균이 양성반응을 보여 이 등坷의 결과와 유사하였으며 gelatin 100%, citrate 72.
- 항생제 감수성시험은 trimethoprim/ sulfamethoxazole, cefoxithin, amoxicillin, ceftriaxone, ticarcillin, ciprofloxacin, nalidixic acid, tetracycline, ampicillin/sulbactam, ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, kanamycin 등 종 13종(BBL, USA)의 항생물질을 사용하였다. 배양 후 억제대의 크기를 측정하여 NCCLS (National Committee Clinical Laboratory Standard) 기주, 과 비교하여 내성과 감수성을 판정하였다.
- 시료는 polybag에 채취한 후 ice box에 보관하여 2시간 이내에 실험실로 운반, 즉시 배양실험을 하였다.
대상 데이터
- 5。(2에서 18-24시간 배양하였다. 항생제 감수성시험은 trimethoprim/ sulfamethoxazole, cefoxithin, amoxicillin, ceftriaxone, ticarcillin, ciprofloxacin, nalidixic acid, tetracycline, ampicillin/sulbactam, ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, kanamycin 등 종 13종(BBL, USA)의 항생물질을 사용하였다. 배양 후 억제대의 크기를 측정하여 NCCLS (National Committee Clinical Laboratory Standard) 기주, 과 비교하여 내성과 감수성을 판정하였다.
성능/효과
- 1. V. parahaemolyticus의 연중 분리율은 26.8%였고, 월별 분리율은 1월에 1.4%, 2, 3, 4월에 0.0%, 6월에 35.8%, 7월에 30.6%, 8월에 53.6%, 9월에 64.9%, 10 월에 45.8%, 11월에 16.9%, 12월에 15.2%로 나타나 9월에도 이균에 의한 식중독위험이 높아질 수 있음을 보였다.
- 2. 시료별 V. parah迎emotyticus는 국산의 경우 23.5% -37.1%, 수입산의 경우 10.0%~26.8%의 분리율을 보였고 국산패류는 37.1%로 가장 많이 분리되었으나 냉동상태로 유통되는 수입산 패류에서는 10.0%로 분리율이 낮게 나타났다.
- 3. 항생제 감수성 검사결과, 모든 균주가 ampicillin에 내성을 나타내었으며 ticarcillin에 모든 균주가 내성을 보인 점은 내성율이 낮은 임상분리 균주와 차이가 있었. 다.
- 하였다. glucose, amylose, mannitol, lycine decarboxylase, ornithine decarboxylase, oxidase에는 모든 균이 양성반응을 보여 이 등坷의 결과와 유사하였으며 gelatin 100%, citrate 72.7%, urea 0.0%, rhamnose 10.4%, arabinose에서 72.7%가 양성을 보였다. Gelatin 분해율은 90% 이상이라고 한 이 등"), 80%의 양성율을 보인다고 한 이 등坷의 결과와 유사하였다.
- 7%가 감수성을 보인 것 22)과는 차이가 있었다. 대장균의 경우 임상 분리 균주보다 환경분리균주에서 내성을 나타내는 항생제의 종류가 현저히 적은 것适과는 대조적으로 虻 parahaee mo顷icus는 큰 차이가 없었다. Salmonella Enteritidis 의 경우 인수공통 감염균으로 항생제가 함유된 가축 사료 사용으로 항균제에 대한 내성균 출현이 문제가 되고 있어 ampicilliii과 nalidixic acid에 대한 내성이 해마다 증가추세에 있으며 다제내성 경향도 해마다 증가 추세에 있으나g 해양자연환경의 상재세균의 경우 육상 유래 세균에 비해 항생제 내성이 약한 것으로 보이며 시중에서 양牛거류의 유통이 많음에도 불구하고 상재 세균의 내성획득은 아직 활발하지 않은 것으로 보인다.
- parahaemolyticuse 대한 항생제 감수성 검사결과, 모든 균주가 ticarcillin과 ampicillin 에 내성을 나타내었으며, chloramphenicol, tetracycline, nalidixic acid, amoxicillin, ceftriaxone0]] 모든 균주가 감수성을 보였다. 또한 streptomycin에 70.8% 감수성, kanamycin에 81.3% 감수성, trimethoprim/sulfa-methoxazol에 97.9% 감수성, ampicillin/sulbactam에 89.6% 감수성, ciprofloxacin에 72.9%가 감수성을 보였다. 이는 식중독 환자에서 분리된 V.
- 또한 가장 분리율이 가장 높을 때는 64.9%였는데 이는 해양환경에서 상재 균으로 존재하는 V. parahaemolyticus7\ 매우 흔하게 분포하고 있음을 보여주는 것으로서 해산물에 대한 위생관리시 생산시기 뿐만 아니라 유통단계의 관리가 더욱 필요하며 특히 굴 등 생식을 하는 해산물의 경우 냉장상태의 유지에 주의를 기울여야 할 것으로 보인다.
- 수산물에서 분리된 V. parahaemolyticuse 대한 항생제 감수성 검사결과, 모든 균주가 ticarcillin과 ampicillin 에 내성을 나타내었으며, chloramphenicol, tetracycline, nalidixic acid, amoxicillin, ceftriaxone0]] 모든 균주가 감수성을 보였다. 또한 streptomycin에 70.
- 시료별 V. parahaemolyticus의 분리율은 국산의 경우 어류는 23.5%, 패류는 37.1%, 연체류는 30.0%, 갑각류는 28.6%였고, 수입산은 각각 24.6%, 10.0%, 26.8%, 23.6%였다. 가장 높은 분리율을 보인 국산 패류와는 달리 수입산 패류는 분리율이 낮았는데 이는 부패하기 쉬운 패류의 성격상 수입산은 해동하지 않은 냉동상태로 거래되기 때문으로 보인다.
- 9%가 감수성을 보였다. 이는 식중독 환자에서 분리된 V. parahaemolyticus 균이 ampicillin 내성이 88.2%, ampicillin/sulbactam°l] 100.0% 감수성, ceftriaxone에 97.1% 감수성, chloramphsic이에 100.0% 감수성, ciprofloxacin에 97.1% 감수성, nalidixic acid에 100.0% 감수성, tetracycline 에 100.0% 감수성, trimethoprim/sulfamethoxazole 에 100.0%가 감수성을 보인 결과와 유사하였으나 ticarcillin에 353%가 내성, 64.7%가 감수성을 보인 것 22)과는 차이가 있었다. 대장균의 경우 임상 분리 균주보다 환경분리균주에서 내성을 나타내는 항생제의 종류가 현저히 적은 것适과는 대조적으로 虻 parahaee mo顷icus는 큰 차이가 없었다.
후속연구
- parahaemolyticue 양호한 성장조건이 형성된 것으로 보인다. 계속적인 자료의 축적을 통한 확인이 필요하나; 본 실험에서 사용한 접종 방법은 특수한 배지"를 사용하지 않고도 검출율을 향상시킬 수 있어 검사의 정확도를 높이는 것 뿐만 아니라 자연시료에서 검출이 잘 되지 않는 병원성 V. parahaemolyticus의 분리, 22> 최근 아시아권에서 발생되고 있는 혈청형 O3:K5 의 검사口23) 및 각종 유전자 관련 연구에도 도움이 될 수 있을 것으로 보인다.
- 0%, 포르투칼에서 35%의 분리율을 보고하였다. 본 실험에서 비교적 분리율이 높은 것이 유통개선에 의한 선도향상에 기인한 것인지 유통 중의 2차적 오염에 의한 것인지는 계속적인 검토가 필요할 것으로 보인다. Wong 등飨은 대만으로 수입되는 수산물의 45.
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