[논문]상황버섯 추출물의 항산화 및 성분분석

김아름; 김정은; 박수남

doi:10.15230/scsk.2011.37.4.309

상황버섯 추출물의 항산화 및 성분분석
Antioxidative Activity and Component Analysis of Phellinus linteus Extracts 원문보기

大韓化粧品學會誌 = Journal of the society of cosmetic scientists of Korea, v.37 no.4, 2011년, pp.309 - 318

김아름 (서울과학기술대학교 자연생명과학대학 정밀화학과 나노바이오화장품연구실, 화장품종합기술연구소) , 김정은 (서울과학기술대학교 자연생명과학대학 정밀화학과 나노바이오화장품연구실, 화장품종합기술연구소) , 박수남 (서울과학기술대학교 자연생명과학대학 정밀화학과 나노바이오화장품연구실, 화장품종합기술연구소)

초록
AI-Helper

본 연구에서는 상황버섯 추출물의 항산화 및 항노화 활성 및 항균 효과, 그리고 성분분석에 관한 연구를 수행하였다. 상황버섯 추출물의 자유 라디칼(1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성($FSC_{50}$)은 에틸아세테이트(ethylacetate) 분획($2.94\;{\mu}g/mL$)에서 가장 큰 활성을 나타내었고, 루미놀-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}$-EDTA/$H_2O_2$계에서 생성된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 상황버섯 추출물의 총항산화능은 추출물의 에틸아세테이트 분획($0.0072\;{\mu}g/mL$)에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 광증감제인 rose-bengal로 증감된 사람 적혈구의 광용혈에 대한 억제 효과를 측정하였을 때 농도범위($5{\sim}50\;{\mu}g/mL$)에서 50 % 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획 모두 농도 의존적으로 세포 보호 효과를 나타내었다. 타이로시네이즈의 활성 저해 효과($IC_{50}$)를 측정한 결과 50 % 에탄올 추출물($IC_{50}=6.34\;{\mu}g/mL$)에서 우수한 효과를 나타내었으며, 엘라스테이즈의 활성 저해 효과($IC_{50}$)는 에틸아세테이트분획($IC_{50}=14.08\;{\mu}g/mL$)에서 큰 효과가 나타났다. TLC, HPLC 및 LC/ESI-MS를 이용하여 상황버섯 추출물 ethylacetate 분획의 주성분을 분석하였고 hispidin 유도체인 interfungin A를 확인하였다. 이상의 결과들은 상황버섯 추출물이 ROS에 대항하여 세포막을 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로써 작용할 수 있으며, 특히 상황버섯 추출물의 에틸아세테이트 분획을 항산화, 항노화 및 미백 기능성 화장품 소재로써의 응용 가능성을확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, the antioxidative effect, antibacterial, inhibitory effects on tyrosinase, inhibitory effects on elastase and component analysis of Phellinus linteus (P. linteus) extracts were investigated. The ethyl acetate fraction of P. linteus extracts ($2.94\;{\mu}g/mL$) showed the highest free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity ($FSC_{50}$). Reactive oxygen species (ROS) scavenging activity ($OSC_{50}$) of P. linteus extracts on ROS generated in $Fe^{3+}$-EDTA/$H_2O_2$ system was investigated using the luminol-dependent chemiluminescence assay. The ethyl acetate fraction ($0.0072\;{\mu}g/mL$) showed the most prominent ROS scavenging activity. The protective effects of extract/fractions of P. linteus extracts on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The P. linteus extracts showed cellular membrane protective effects in a concentration dependent manner ($5{\sim}50\;{\mu}g/mL$). The inhibitory effect ($IC_{50}$) on tyrosinase of P. linteus extract was the highest at 50 % ethanol extract ($6.34\;{\mu}g/mL$), and the inhibitory effect ($IC_{50}$) on elastase of P. linteus was the highest at ethyl acetate fraction ($14.08\;{\mu}g/mL$). TLC, HPLC chromatogram and LC/ESI-MS of the ethyl acetate fraction obtained from P. linteus extracts were identified interfungin A (PL RPT-1a). These results indicate that extract/fractions of P. linteus can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging ROS, and protect cellular membranes against ROS. Extract/fractions of P. linteus can be applicable to new cosmeceuticals for antioxidant, antiaging, antiwrinkle and whitening.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

따라서 본 연구에서는 천연 항산화제를 찾아 화장품 원료로서 사용가능한 상황버섯 추출물을 제조하여 이들 추출물(혹은 분획)의 항균활성과 자유 라디칼 소거활성, 총 항산화능, ¹O₂로 유도된 세포손상에 대한 보호활성, 더 나아가 기능성 화장품의 원료로서 타이로시네이즈 저해 효과, 엘라스테이즈 저해 효과를 측정함으로써 항산화 및 항노화 화장품의 천연 소재로서 응용 가능성을 검토하였다.

제안 방법

λ = 380 nm에서 크로마토그램은 9개의 peak으로 나타났으며(data not shown) 각각의 peak를 동정하기 위하여 Figure 6에 있는 TLC 크로마토그램에서 분리된 띠를 긁어서 추출·여과하고 용매를 감압·건조시킨 후 얻은 파우더를 에탄올로 녹여HPLC 분석을 위한 시료로 사용하였다.
(USA) 제품, 화학발광기는 Berthold (Germany)의 6-channel LB9505 LT를, pH meter는 Istek (Korea) 제품을 사용하였으며, 상황버섯 성분분석을 위한 HPLC는 Shimadzu (Japan)사의 제품을 사용하였다. LC/ESIMS (Applied Biosystems, USA)는 서울대학교 농생명과학 공동기기원에 분석 의뢰하였다. 성분분석에 사용한 thin layer chromatography (TLC)는 aluminum sheet silica gel 60 F₂₅₄ (0.
1 mL 접종하였다. P. acnes는 37 ℃에서 72 h 후에, S. aureus와 E. coli는 37 ℃에서 24 h 후에, P. ovale는 30 ℃에서 48 h 후에 육안으로 관찰하였을 때, 각각의 균들이 증식되지 않는 농도를 MIC로 결정하였다.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm × 20 cm × 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적혈구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한 후 15 min 동안 광조사 하였다.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm × 20 cm × 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적혈구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한 후 15 min 동안 광조사 하였다. 광조사가 끝난 후 암반응(post-incubation) 시간에 따른 적혈구의 파괴정도를 15 min 간격으로 700 nm에서 투광도(transmittance, %)로부터 구하였다. 이 파장에서 적혈구 현탁액의 투광도의 증가는 적혈구의 용혈정도에 비례한다.
2 mM DPPH용액 1 mL에 에탄올 1 mL를 첨가하고 여러 농도의 추출물 1 mL을 첨가하여 섞은 다음 실온에서 10 min 동안 방치 후 spectrophotometer로 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 활성의 크기는 시료를 넣지 않은 경우를 대조군(control)으로 하고 시료를 넣은 것을 실험군(experiment)으로 하여 다음 식에 의해 DPPH의 활성 저해율을 나타내었다. 소거 활성은 DPPH의 농도가 50 % 감소되는데 필요한 시료의 농도(free radical scavenging activity, FSC₅₀, µg/mL)로 표기하였다.
5 min 동안 항온시킨 후 150 mM H₂O₂ 40 µL를 넣고 화학발광을 25 min 동안 측정하였다. 대조군(control)은 시료용액 대신에 증류수를 넣고, 공시험(blank)은 시료군과 조건이 동일하나 H₂O₂와 FeCl₃․6H₂O을 첨가하지 않은 것으로 하였다. 화학발광기 6-channel LB9505 LT의 각 채널은 실험 전에 보정하여 채널간의 차이가 거의 없도록 하였다.
대조군은 시료대신 시료용액으로 사용된 용매를 100 µL 첨가하였다.
노화, 특히 피부노화의 원인 물질로 자유 라디칼이 원인 물질로 알려져 있다. 따라서 DPPH를 이용하여 상황버섯 추출물의 자유 라디칼 소거활성을 측정하였다. 실험방법은 메탄올에 용해시킨 0.
45 µm)로 여과한 후 비극성 TLC 및 HPLC를 이용하였다. 비극성 TLC 분석에 사용한 전개용매는 90 %, 70 % 메탄올이며, HPLC 분석은 0.1 % formic acid 수용액과 100 % acetonitrile을 이용해 기울기 용리법으로 분석하였으며 HPLC 분리조건은 Table 1에 나타내었다. 성분확인은 이미 보고된 분광학적 자료를 이용하여 확인하였다.
상황버섯 에틸아세테이트 분획을 100 % 에탄올에 녹여 syringe filter (0.45 µm)로 여과한 후 비극성 TLC 및 HPLC를 이용하였다.
상황버섯 추출물의 광용혈에 미치는 효과는 암반응 시간과 용혈정도로 구성된 그래프로부터 적혈구의 50 %가 용혈되는 시간인 τ50을 구하여 비교하였다.
상황버섯 추출물의 에틸아세테이트 분획을 Table 1의 조건으로 HPLC를 실시하였다. λ = 380 nm에서 크로마토그램은 9개의 peak으로 나타났으며(data not shown) 각각의 peak를 동정하기 위하여 Figure 6에 있는 TLC 크로마토그램에서 분리된 띠를 긁어서 추출·여과하고 용매를 감압·건조시킨 후 얻은 파우더를 에탄올로 녹여HPLC 분석을 위한 시료로 사용하였다.
상황버섯 추출물의 에틸아세테이트 분획의 주성분을 확인하기 위하여 HPLC 상에서 함량이 높은 peak 3(25.18 %)를 LC/ESI-MS를 이용하여 분자량을 확인하였다. HPLC peak 3 (PL RPT-1a)의 성분확인을 위한 LC/ESI-MS를 이용한 분석 결과 positive ion mode에서 분자이온[M+H]⁺는 m/z 465.
1 % formic acid 수용액과 100 % acetonitrile을 이용해 기울기 용리법으로 분석하였으며 HPLC 분리조건은 Table 1에 나타내었다. 성분확인은 이미 보고된 분광학적 자료를 이용하여 확인하였다.
이 중 가장 진하게 나타난 PL RPT-1a (Rf 0.83)를 긁어 추출·여과하고 용매를 감압·건조시켜 얻은 파우더를 성분 분석에 사용하였다.
중화 적정 후 증류수로 산, 염기 및 당 등을 제거한 후 다시 에틸아세테이트로 추출하고 이를 감압·농축하여 실험에 사용하였다.
최소억제농도(MIC)는 한천배지 확산법을 이용하여 다음과 같이 측정하였다. 즉, 각각의 분획물을 2 mL씩 함유한 배지 20 mL를 petri dish에 주입하였고, 시험균을 평판 배지 위에 0.1 mL 접종하였다. P.
추출물을 농도별로 각각 50 µL씩 첨가하였다.
대조군(control)은 시료용액 대신에 증류수를 넣고, 공시험(blank)은 시료군과 조건이 동일하나 H₂O₂와 FeCl₃․6H₂O을 첨가하지 않은 것으로 하였다. 화학발광기 6-channel LB9505 LT의 각 채널은 실험 전에 보정하여 채널간의 차이가 거의 없도록 하였다. 화학발광으로 측정한 저해율을 다음 식과 같이 나타내었고, 활성산소 소거활성의 크기는 화학발광의 세기가 50 % 감소되는데 필요한 시료의 농도(reactive oxygen species scavenging activity, OSC₅₀, µg/mL)로 표기하였다.
화학발광으로 측정한 저해율을 다음 식과 같이 나타내었고, 활성산소 소거활성의 크기는 화학발광의 세기가 50 % 감소되는데 필요한 시료의 농도(reactive oxygen species scavenging activity, OSC50, µg/mL)로 표기하였다.

대상 데이터

(+)-α-Tocopherol (1,000 IU vitamin E/g), L-ascorbic acid, EDTA, 루미놀, 헤파린, 증감제로 사용된 rose-bengal, 자유 라디칼 소거활성에 사용한 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical은 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용하였다.
완충용액제조에 사용된 Na₂HPO₄·12H₂O, NaH₂PO₄ ·2H₂O, NaCl, 그리고 trizma base, HCl, 에탄올(EtOH), 메탄올(MeOH), 에틸아세테이트(EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다. UV-visible spectrophotometer는 Varian (Australia)의 Cary 50, 적혈구 광용혈에 사용한 Spectronic 20D는 Milton Roy Co. (USA) 제품, 화학발광기는 Berthold (Germany)의 6-channel LB9505 LT를, pH meter는 Istek (Korea) 제품을 사용하였으며, 상황버섯 성분분석을 위한 HPLC는 Shimadzu (Japan)사의 제품을 사용하였다. LC/ESIMS (Applied Biosystems, USA)는 서울대학교 농생명과학 공동기기원에 분석 의뢰하였다.
기타 FeCl3·6H2O는 Junsei Chemical Co. (Japan) 제품을, H2O2는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea) 제품을 사용하였다.
coli는 MuellerHinton 배지(Merck, Germany)를 사용하였으며 균을 접종한 후 37 ℃ incubator에서 24 h 배양하면서 사용하였다. 또한 비듬균인 P. ovale는 Pityrosporum 배지(Malt extract agar : 6 %, ox-bile : 2 %, tween 40 : 1 %, glycerol mono-oleate : 0.25 %)를 사용하였으며 균을 접종한 뒤 30 ℃에서 24 h 동안 배양하여 사용하였다.
본 실험에 사용된 균주는 여드름의 원인균인 Propionibacterium acnes (P. acnes) ATCC6919와 비듬균인 Pityrosporum ovale (P. ovale) ATCC12078, 호기성 그람 양성 균주인 Staphylococcus aureus (S. aureus)ATCC6538, Escherichia coli (E. coli) ATCC23736는 한국 미생물 보존센터에서 분양 받아 사용하였다.
83)를 긁어 추출·여과하고 용매를 감압·건조시켜 얻은 파우더를 성분 분석에 사용하였다. 분리된 TLC 띠 성분 확인에는 HPLC에 의한 분리 및 retention time확인, LC/ESI-MS 등에 의한 분자량 등의 분광학적 데이터를 이용하였다.
LC/ESIMS (Applied Biosystems, USA)는 서울대학교 농생명과학 공동기기원에 분석 의뢰하였다. 성분분석에 사용한 thin layer chromatography (TLC)는 aluminum sheet silica gel 60 F₂₅₄ (0.2 mm)로 Merck (USA)에서 구입하였고 본 연구에서 사용한 상황버섯는 2010년 경동시장에서 구입하여 실험에 사용하였다.
실험에 사용된 적혈구 현탁액은 700 nm에서 O.D.가 0.6이었으며 이때 적혈구 수는 1.5 × 107 cells/mL이었다.
50 % 에탄올 추출물은 감압 농축한 후 비극성 성분을 제거하기 위해 헥산을 처리한 후 에틸아세테이트로 추출한 분획을 감압 농축하여 파우더를 얻었다. 에틸아세테이트 분획 중 일부는 산 가수분해 반응을 이용해 당을 제거시킨 후 얻은 아글리콘 파우더를 실험에 사용하였다. 아글리콘 제조 방법은 에틸아세테이트 분획 가용분 일정량에 H₂SO₄ 및 아세톤 용액을 넣고, 4 h 동안 중탕 가열하면서 환류·냉각시킨 후 그 용액을 5 % KOH-MeOH 용액으로 중화 적정한다.
완충용액제조에 사용된 Na2HPO4·12H2O, NaH2PO4 ·2H2O, NaCl, 그리고 trizma base, HCl, 에탄올(EtOH), 메탄올(MeOH), 에틸아세테이트(EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
적혈구는 건강한 성인 남녀로부터 얻었다. 채혈 즉시 헤파린이 첨가된 시험관에 넣은 후, 3,000 rpm으로 5 min 동안 원심분리하여 적혈구와 혈장을 분리하고, 분리한 적혈구는 0.
acnes는 4 ℃에서 보관하면서 실험 72 h 전에 활성화 시켰으며, 균을 배양 배지에 접종한 후 anaerobic jar에서 Gaspack system (Merck Anaerocult^Ⓡ Gaspack system, Germany)을 이용하여 밀봉하여 37 ℃에서 72 h 동안 혐기성 배양하였다. 호기성 균주인 S. aureus와 E. coli는 MuellerHinton 배지(Merck, Germany)를 사용하였으며 균을 접종한 후 37 ℃ incubator에서 24 h 배양하면서 사용하였다. 또한 비듬균인 P.

데이터처리

Rose-bengal을 첨가하고 광조사를 안 했을 경우와 rose-bengal을 첨가하지 않고 광조사만 했을 경우는 모두 암반응 120 min까지는 용혈이 거의 일어나지 않았다. 모든 실험은 3회 반복하여 평균하였다. 상대적인 광용혈 보호 효과는 다음과 같이 나타내었다.
모든 실험은 3회 반복하였고 통계분석은 5 % 유의수준에서 Student's t-test를 행하였다.

이론/모형

상황버섯 추출물을 이용하여 활성산소에 의해 야기되는 세포 손상에 대한 보호효과를 적혈구 광용혈법으로 측정하였고 각 분획의 농도에 따른 세포 보호효과를 Table 2에 나타내었다. 적혈구 세포가 50 % 파괴되는데 걸리는 시간(τ₅₀)은 세포보호활성이 클수록 크게 나타나는데 상황버섯 추출물의 50 % 에탄올 추출물은 5, 10, 25, 50 µg/mL에서 각각 50.
최소억제농도(MIC)는 한천배지 확산법을 이용하여 다음과 같이 측정하였다. 즉, 각각의 분획물을 2 mL씩 함유한 배지 20 mL를 petri dish에 주입하였고, 시험균을 평판 배지 위에 0.

성능/효과

1) 상황버섯 추출물의 자유 라디칼 소거능력(FSC50)은 50 % 에탄올 추출물에서 12.9 µg/mL, 에틸아세테이트 분획에서 2.94 µg/mL, 아글리콘 분획에서 3.74 µg/mL로 큰 소거활성을 나타내었으며 이는 비교물질인 (+)-α-tocopherol보다 더 큰 소거활성을 나타내었다.
2) 상황버섯 추출물의 활성산소 소거활성(OSC50)은 50 % 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획, 아글리콘 분획 각각 0.25 µg/mL, 0.0072 µg/mL, 0.24 µg/mL으로 비교물질인 L-ascorbic acid보다 매우 큰 항산화능을 나타내었다.
3) 1O2으로 유도된 적혈구의 광용혈 실험에서 상황버섯 추출물은 µg/mL의 농도범위(5 ～ 50 µg/mL)에서 50 % 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획 모두 농도 · 의존적으로 세포 보호효과를 나타냈으며, 비교물질인(+)-α-tocopherol 보다 약 1.5배 큰 세포보호활성을 나타내었다.
4) 상황버섯 추출물의 타이로시네이즈 저해활성(IC50)은 50 % 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획에서 각각 6.34 µg/mL, 17.78 µg/mL으로 나타났으며 비교물질인 알부틴보다 약 12배 이상 타이로시네이즈 저해활성이 더 우수한 것으로 나타났다.
5) 상황버섯 추출물의 엘라스테이즈 저해활성(IC50)은 50 % 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획에서 각각 61.44 µg/mL, 14.08 µg/mL로 나타났으며 특히 에틸아 세테이트분획은 비교물질인 oleanolic acid과 비슷한 저해활성을 나타내었다.
6) 상황버섯 추출물의 항균활성 측정결과, E. coli, P. ovale, P. acnes, S. aureus에 대한 에틸아세테이트 분획의 MIC는 각각 0.50, 0.50, 0.25, 0.06 %로 나타났으며, 특히 S. aureus에서는 50 % 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획 모두에서 매우 큰 항균활성을 나타내었다.
7) 상황버섯 추출물 중 에틸아세테이트 분획의 TLC 및 HPLC 크로마토그램에서 peak 3 (PL RPT-1a)은 LC/ESI-MS negative ion mode에서 [M-H]^-이 m/z 463으로 나타났다. 따라서 PL RPT-1a은 hispidin 유도체인 분자량 464의 interfungin A임을 확인하였다.
18 %)를 LC/ESI-MS를 이용하여 분자량을 확인하였다. HPLC peak 3 (PL RPT-1a)의 성분확인을 위한 LC/ESI-MS를 이용한 분석 결과 positive ion mode에서 분자이온[M+H]⁺는 m/z 465.1이, negative ion mode에서 분자 이온[M-H]^-는 m/z 463에서 나타났다. 이는 Yun 등이 보고한 논문에서도 확인할 수 있었다[9].
λ = 380 nm에서 크로마토그램은 9개의 peak으로 나타났으며(data not shown) 각각의 peak를 동정하기 위하여 Figure 6에 있는 TLC 크로마토그램에서 분리된 띠를 긁어서 추출·여과하고 용매를 감압·건조시킨 후 얻은 파우더를 에탄올로 녹여HPLC 분석을 위한 시료로 사용하였다. 그 결과 상황버섯 추출물 중 에틸아세테이트 분획에 대한 Figure 6의 TLC 크로마토그램에서 PL RPT-1a은 peak 3 (25.18 %)과 일치함을 확인하였다(data not shown).
대조군(control)은 τ50이 31 min으로 오차범위 ± 1 min 이내로 모든 경우의 실험에서 재현성이 양호하게 나타났다.
이 m/z 463으로 나타났다. 따라서 PL RPT-1a은 hispidin 유도체인 분자량 464의 interfungin A임을 확인하였다.
이는 Yun 등이 보고한 논문에서도 확인할 수 있었다[9]. 따라서 상황버섯 추출물 에틸아세테이트 분획의 TLC 상 PL RPT-1a 띠는 hispidin 유도체인 분자량 464의 interfungin A임을 확인하였다.
88 µg/mL)을 측정한 결과 상황버섯 추출물이 약 12배 이상 더 타이로시네이즈 저해활성이 더 우수한 것으로 나타났다(Figure 4). 따라서 상황버섯 추출물을 미백화장품에 응용할 경우 우수한 미백효과를 나타낼 것으로 사료된다.
비교물질로 사용한 (+)-α-tocopherol은 10, 50 µg/mL에서 각각 38.00 min, 74.33 min으로 동일 농도에서 상황버섯 추출물의 효능이 약 1.5배 정도 더 우수한 세포보호 활성이 있는 것으로 나타났다(Figure 3).
aureus의 활성을 억제하는 것을 확인하였다. 비듬균인 P. ovale에 대한 상황버섯 추출물 에틸아세테이트 분획의 MIC는 0.5 %로 비교물질인 MP (MIC = 1.3%)와 quercetin (MIC = 0.15 %)과 비교하였을 때 항균활성을 나타내지 않았으며 대장균인 E. coli에 대한 상황버섯 추출물의 에틸아세테이트 분획의 MIC는 0.5 %으로 나타나 MP (MIC = 0.13 %)와 quercetin (MIC = 0.06 %)보다 낮은 항균활성을 나타냈으며 50 % 에탄올 추출물의 경우에는 항균활성을 나타내지 않았다. 현재 사용되고 있는 방부제나 항균제가 평균적으로 0.
상황버섯 추출물 중 50 % 에탄올 추출물의 타이로시네이즈 저해활성(IC50)은 6.34 µg/mL으로 나타났으며 에틸아세테이트 분획의 경우 17.78 µg/mL로 50 % 에탄올 분획이 약 3배 더 큰 저해활성을 보였으며 비교물질로는 기능성 화장품의 미백제로 잘 알려져 있는 알부틴의 저해활성(IC50 = 226.88 µg/mL)을 측정한 결과 상황버섯 추출물이 약 12배 이상 더 타이로시네이즈 저해활성이 더 우수한 것으로 나타났다(Figure 4).
상황버섯 추출물 중 특히 에틸아세테이트 분획에서 자유 라디칼 소거활성이 비교물질로 사용된 (+)-α-tocopherol보다 약 3배 더 우수한 라디칼 소거활성을 나타내었다(Figure 1).
상황버섯 추출물과 비교물질인 (+)-α-tocopherol의 자유 라디칼 소거활성(FSC50) 측정 결과 50 % 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획, 그리고 아글리콘 분획에서 각각 12.9 µg/mL, 2.94 µg/mL, 3.74 µg/mL로 나타났으며, 비교물질로 사용한 (+)-α-tocopherol의 FSC50는 8.98 µg/mL로 나타났다.
상황버섯 추출물의 50 % 에탄올 추출물의 활성산소 소거활성(총항산화능, OSC50)은 0.25 µg/mL, 에틸아세테이트 분획은 0.0072 µg/mL으로 나타났으며 아글리콘 분획의 총항산화능은 0.24 µg/mL으로 나타났다.
5 µg/mL로 나타났다. 상황버섯 추출물의 모든 분획에서 L-ascorbic acid보다 6배 이상 큰 활성을 나타내었다(Figure 2).
상황버섯 추출물의 에틸아세테이트 분획에 대한 TLC 크로마토그램은 Figure 6에 나타내었다. 에틸아세테이트 분획을 역상 TLC를 이용하여 1차 분리로 6개의 띠(PL RPT-1, PL RPT-2, PL RPT-3, PL RPT-4, PL RPT-5, PL RPT-6)로 분리 후 자외선 흡수방법으로 확인한 결과 그 중 가장 진한 PL RPT (P. linteus Reverse Phase TLC)-1 (R_f 0.82)을 다시 2차 분리를 하여 5개의 띠(PL RPT-1a, PL RPT-1b, PL RPT-1c, PL RPT-1d, PL RPT-1e)를 확인하였다. 이 중 가장 진하게 나타난 PL RPT-1a (Rf 0.
상황버섯 추출물의 피부 상재균에 대한 항균 활성을 측정한 결과는 Table 3에 나타내었다. 여드름 균인 P. acnes에 대한 상황버섯 추출물의 50 % 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획의 MIC는 각각 0.50 %, 0.25 %으로 화장품에 주로 사용되는 항균제인 메틸 파라벤(MP, MIC = 0.25 %) 및 천연 플라보노이드 성분인 quercetin(MIC = 0.30 %)과 비슷한 항여드름 균 활성을 나타냄을 확인하였다. 피부에서 습진의 주원인으로 작용하는 gram(+) 균주 S.
30 %)과 비슷한 항여드름 균 활성을 나타냄을 확인하였다. 피부에서 습진의 주원인으로 작용하는 gram(+) 균주 S. aureus에 대한 상황버섯 추출물의 50% 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획의 MIC는 각각 0.25 %, 0.06 %으로 나타났으며 MP (MIC = 0.25 %)와 quercetin (MIC = 0.15 %)과 비교하였을 때 50 %에탄올 추출물보다 에틸아세테이트 분획에서 더 낮은 농도로 S. aureus의 활성을 억제하는 것을 확인하였다. 비듬균인 P.

후속연구

이상의 결과로 미루어 볼 때 상황버섯 추출물은 항산화, 주름 및 미백 기능성 원료로서 우수한 응용가능성이 있다고 판단되며 추가적으로 이런 활성을 가진 물질을 분리·정제 및 구조분석을 통한 더 많은 연구가 이루어져야 할 것이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	피부노화란 무엇인가?	피부노화는 인체의 노화에 따라 피부에 나타나는 변화를 말하며 원인으로는 크게 내적요인과 외적요인으로 나눌 수 있다. 내적요인은 나이의 증가에 따른 노화현상을 말하며 외적요인은 다양한 환경적인 요소들 중 특히 매일 노출되는 신체부분에서 자외선에 의해 야기된다.
	자외선은 어떻게 나뉘는가?	내적요인은 나이의 증가에 따른 노화현상을 말하며 외적요인은 다양한 환경적인 요소들 중 특히 매일 노출되는 신체부분에서 자외선에 의해 야기된다. 자외선은 UVC (200～ 280 nm), UVB (280 ～ 320 nm), UVA (320 ～ 400 nm)로 나뉘며 빛의 파장이 짧을수록 투과력이 약하고, 길면 투과력이 강하다. UVC는 파장이 짧아 대기권을 통과하지 못하기 때문에 UVB와 UVA가 피부에 직접적인 영향을 미친다.
	활성산소종의 특징은 무엇인가?	이러한 UVB와 UVA에 피부가 노출되면 생체 내 광증감제 분자에 의한 자외선 흡수로부터 typeⅠ반응과 typeⅡ반응으로 superoxide radical (O2ㆍ-), hydroxyl radical (·OH), hydrogen peroxide (H2O2), singlet oxygen (1O2)등의 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)이 생성된다[16]. 이러한 ROS는 macrophage나 neutrophil과 같은 면역계 세포가 외부로부터 침입한 병원균을 죽이는 유용한 역할을 하지만 세포에 산화적 스트레스(oxidative stress)를 유발하여 콜라겐 및 엘라스틴 분자의 절단, 비정상적인 교차결합 및 섬유아세포의 능력 감소 등 세포 성분들에 대한 손상을 일으켜 주름을 생성시키고 멜라닌 생성 과정에 참여하는 등 광노화를 촉진시킨다[15].

참고문헌 (17)

G. H. Kim and H. K. Han, The effect of mushroom extracts on carbon tetrachloride induced hepatotoxicity in rats, J. Korean Soc. Food Sci. Nutr., 27, 326 (1998).
H. D. Lee, Korean medicinal mushroom pictorial book, Kyohaksa, 576.
J. M. Sung, Y. B. Ryu, and D. R. Cha, Mushroom, Kyohak press, 593.
Y. Wang, S. J. Wang, S. Y. MO, S. Li, Y. C. Yang, J. G. Shi, and Phelligridimer A, A highly oxygenated and unsaturated 26-membered macrocyclic metabolite with antioxidant activity from the fungus Phellinus igniarius, Org. Lett., 7(21), 4733 (2005).

상세보기
Y. Wang, S. Y. Mo, S. J. Wang, S. Li, Y. C. Yang, and J. G. Shi, A unique highly oxygenated pyrano[ 4,3-c][2]benzopyran-1,6-dione derivative with antioxidant and cytotoxic activities from the fungus Phellinus igniarius, Org. Lett., 7(9), 1675 (2005).

상세보기
S. Mo, S. Wang, G. Zhou, Y. Yang, Y. Li, X. Chen, and J. Shi, Phelligridins CF: cytotoxic pyrano[4,3-c][2]benzopyran-1,6-dione and furo[3,2-c] pyran-4one derivatives from the fungus Phellinus igniarius, J. Nat. Prod., 67(5), 823 (2004).

상세보기
I. K. Lee and B. S. Yun, Hispidin analogs from the mushroom Inonotus xeranticus and their free radical scavenging activity, Bioorg. Med. Chem. Lett., 16(9), 2376 (2006).

상세보기
I. K. Lee, Y. S. Kim, Y. W. Jang, J. Y. Jung, and B. S. Yun, New ntioxidant polyphenols from the medicinal mushroom Inonotus obliquus, Bioorg. Med. Chem. Lett., 17(24), 6678 (2007).

상세보기
I. K. Lee and B. S. Yun, Highly oxygenated and unsaturated metabolites providing a diversity of hispidin class antioxidants in the medicinal mushroom Inonotus and Phellinus, Bioorg. Med. Chem., 15(10), 3309 (2007).

상세보기
E. H. Hwang, J. R. Kim, T. S. Jeong, S. Lee, M. C. Rho, and S. U. Kim, Phellinsin A from Phellinus sp. PL3 exhibits antioxidant activities, Planta Med., 72(6), 572 (2006).

상세보기
B. S. Min, B. S. Yun, H. K. Lee, H. J. Jung, H. A. Jung, and J. S. Choi, Two novel furan derivatives from Phellinus linteus with anti-complement activity, Bioorg. Med. Chem. Lett., 16(12), 3255 (2006).

상세보기
S. J. Kim and I. J. Kang, Evaluation of the antioxidant activity of the fruiting body of Phellinus linteus using the on-line HPLC-DPPH method, J. Korean Soc. Appl. Biol. Chem., 52(5), 472 (2009).

원문보기 상세보기
H. Muramatsu, K. Kogawa, M. Tanaka, K. Okumura, K. Koike, T. Kuga, and Y. Niitsu, Superoxide dismutase in SAS human tongue carcinoma cell line is a factor defining invasiveness and cell motility, Cancer Res., 55, 6210 (1995).

상세보기
I. H. Park, S. K. Chung, K. B. Lee, Y. C. Yoo, S. K. Kim, G. S. Kim, and K. S. Song, An antioxidant hispidin from the mycelial cultures of Phellinus linteus, Arch. Pharm. Res., 27(6), 615 (2004).

원문보기 상세보기
S. N. Park, Antibacterial and antioxidative activities of Quercus acutissima carruth leaf extracts and isolation of active ingredients, J. Soc. Cosmet. Scientists korea, 35(2), 159 (2009).
S. N. Park, Skin aging and antioxidant, J. Soc. Cosmet. Scientists Korea, 23(3), 75 (1997).
R. Kahl and H. Kappus, Toxicology of the synthetic antioxidants BHA and BHT in comparison with the natural antioxidant vitamin E, Z. Lebensm. Unters. Forsch, 196(4), 329 (1993).

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증