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제안 방법
- HPLC 분석을 위해 multiwavelength detector(MD-2010 Plus)를 장착한 HPLC system(JASCo Co.)을 이용하여 XTerra RP18 column (3.5 µm, 4.6×150 mm, Waters)을 사용하여 분리하였다.
- HPLC 분석조건은 Hu 등의 방법(11)을 변형하여 multiwavelength detector (MD-2010 Plus)를 장착한 HPLC system(JASCo Co., Tokyo, Japan)을 이용하여 XTerra RP18 column(3.5 µm, 4.6×150 mm, Waters, Milford, MA, USA)을 사용하여 분리하였다.
- 즉 가루녹차 10 mg을 2 mL용 microtube에 취한 후 80% cold acetone 1 mL을 가하여 1분간 교반 추출 후 원심분리하여 상등액을 얻었다. 가루녹차에 함유된 루테인 및 클로로필이 완전 용출되도록 이 과정을 3회 반복하여 실시 후 상등액을 모두 합하여 membrane filter하였으며 HPLC 분석용 시료로 사용하였다. HPLC 분석을 위해 multiwavelength detector(MD-2010 Plus)를 장착한 HPLC system(JASCo Co.
- 가루녹차의 루테인 및 클로로필 분석을 위한 시료 조제 및 HPLC 조건은 Caldwell 등의 방법(12)을 변형하여 사용하였다. 즉 가루녹차 10 mg을 2 mL용 microtube에 취한 후 80% cold acetone 1 mL을 가하여 1분간 교반 추출 후 원심분리하여 상등액을 얻었다.
- 대차12호와 야부기다 품종을 녹차를 85% 차광률로 15일간 재배한 후 제조한 가루녹차를 대상으로 카테킨, 카페인, 테오브로민, 테아닌, 루테인, 클로로필 및 색도를 비교 분석하였다. 총카테킨 함량은 유의적인 차이가 없었으며 비 gallate형 카테킨 함량은 대차12호가 유의적으로 높은 함량을 나타내었다(p<0.
- 지금까지 가루녹차에 관한 연구로는 가루차용 차엽의 저장 중 성분변화, 한일 말차의 성분비교, 가루녹차를 첨가한 제품 개발, 시판 가루녹차의 이화학적 특성비교 등의 연구(7-11)가 일부 진행되었으나 품종에 따른 가루녹차의 성분변화에 대한 연구는 거의 없는 실정이다. 따라서 본 연구에서는 녹색이 강하여 가루녹차용으로 적합한 야부기다와 병충해에 강하고 다수성이며 주로 우롱차 제조용으로 사용되는 대차12호를 대상으로 차광재배 후 가루녹차 제조 후 카테킨, 카페인, 테오브로민, 테아닌, 루테인, 클로로필 및 색 등 성분특성을 비교하였다.
- 우리나라에서 재배되고 있는 녹차 품종으로는 광주, 보성, 하동 등에서 재배되고 있는 우리나라 자생종인 재래종, 일본에서의 점유 비율이 80% 이상이며 제주도, 강진, 해남지역에서 주로 재배되고 있는 야부기다 및 향기가 강하여 우롱차 제조에 적합하며 우리나라에서도 생육 적응도가 우수한 품종인 대차 등이 있다. 본 연구에서는 다수성이며 꽃향기가 강한 대차12호 및 녹색이 강하고 떫은맛이 적어 가루녹차용으로 적합한 야부기다를 15일간 차광재배한 후 제조한 가루녹차를 대상으로 카테킨 함량을 분석하였다. 그 결과 Table 1에 나타낸 바와 같이 카테킨 조성은 품종에 관계없이 EGCG, EGC, ECG, EC, GCG, GC 및 C의 순으로 함유되어 있었고 CG의 존재는 확인하지 못했으며 총카테킨 함량은 대차12호 16.
- 차광재배 차엽은 생엽 채취 후 100℃에서 20초로 증열처리 후 냉각하였고 100℃에서 17분간 조유, 80℃에서 17분간 중유, 80℃에서 17분간 수건, 120℃에서 34분간 재건 및 80℃에서 30분간 건조하고 이물질 선별 후 micro air jet mill(Hankook Crusher Co., Ltd., Seoul, Korea)로 분쇄하여 10-12µm의 평균입도를 갖는 가루녹차를 제조하였으며 −20℃에 저장하면서 분석용 시료로 사용하였다.
- 본 실험에 사용한 가루녹차는 아래와 같이 제조하여 사용하였다. 차나무는 전남 해남군 소재 다원에서 대차12호 및 야부기다를 대상으로 차잎의 새잎 2-3엽이 50% 이상 전개시 85% 흑색 화학피복재를 사용한 1단 직접피복 방법으로 15일간 차광재배 하였으며 이때 시비조건은 N-P-K의 비율을 43-7-5로 하여 질소질 구아노, 유채박, 어분, 피마자박, 채종유박 및 미강유박으로 구성된 비료를 4회 분시하였다. 차광재배 차엽은 생엽 채취 후 100℃에서 20초로 증열처리 후 냉각하였고 100℃에서 17분간 조유, 80℃에서 17분간 중유, 80℃에서 17분간 수건, 120℃에서 34분간 재건 및 80℃에서 30분간 건조하고 이물질 선별 후 micro air jet mill(Hankook Crusher Co.
데이터처리
- Significant differences between Daecha-12 and Yabukita group measured by Student’s t-test (***p<0.001).
- Significant differences between Daecha-12 and Yabukita group measured by Student’s t-test (**p<0.01).
- Significant differences between Daecha-12 and Yabukita group measured by Student’s t-test (**p<0.01, ***p<0.001).
- Significant differences between Daecha-12 and Yabukita group measured by Student’s t-test (*p<0.05, **p<0.01).
- 모든 분석결과는 SPSS program(SPSS version 17.0, SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 통해 3회 반복하여 측정한 평균값과 표준편차로 나타내었으며, Student’s t-test를 실시하여 유의성을 검정하였다.
- 차나무 품종에 따른 가루녹차의 색도는 투명한 플라스틱 원통용기(35×10 mm)에 담아 분광측색계(Minolta, CM-2500D, Tokyo, Japan)를 사용하여 CIE 체계인 L*, a*, b*를 측정하였으며 각각 3개씩 준비하여 3회 반복 측정하였으며 평균(mean)과 표준편차 (SD)로 나타내었다.
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