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문제 정의
- 본 연구는 말백합의 안정적인 인공종묘생산을 위해 먹이생물의 종류 및 공급량을 조사하였고, 일정기간 절식 후 먹이생물의 재공급에 따른 영향을 관찰하였다. 유생의 먹이생물은 I.
- 본 연구에서는 말백합 유생사육 시 먹이생물의 종류 및 공급량을 조사하고, 인공 종묘생산시 먹이생물이 부족할 경우에 대비하여 유생을 일정기간 절식 후 먹이생물 공급에 의한 성장 및 생존율을 조사 분석하였다.
제안 방법
- 유생의 절식실험은 8일간 실시하였다. 1일, 2일, 4일로 나누어 절식 후 먹이생물을 공급하였고, 먹이생물을 공급하지 않은 실험구 그리고 절식 없이 당일 먹이생물을 공급한 실험구를 함께 설정하여 유생의 성장과 생존율을 비교 분석하였다. 실험에 사용한 D형 유생의 크기는 각장 133.
- 먹이생물 공급량에 따른 유생의 성장과 생존율을 알아보기 위하여 3일간 먹이생물 공급량을 달리하며 사육실험을 실시하였다. 실험에 사용한 D형 유생의 크기는 각장 132.
- 이 실험에서 3종류의 미세조류를 단독으로 공급한 실험구와 3종을 혼합하여 공급한 실험구를 설정하여 성장과 생존율을 비교하였다. 먹이생물은 hemacytometer를 이용하여 1 mL당 세포수를 계수한 후 유생이 성장함에 따라 매일 1,000 세포씩 공급량을 증가시켜 유생 1개체 당 6,000-10,000 세포를 오전과 오후 10시에 2회 나누어 공급하였다.
- 먹이생물의 종류에 따른 유생의 성장과 생존율을 조사하기 위하여 4일간 먹이생물 종류를 달리하여 사육실험을 실시하였다. 사용된 먹이생물은 규조류 (Class Bacillariophyceae) 인 Chaetoceros calcitrans, 착편모조류 (Class: Haptophyceae)인 Isochrysis galbana, 녹조류 (Class: Chlorophyceae)인 Nannochloris oculata 3종이었다 (Table 1).
- 본 연구에서는 C. calcitrans, I. galbana, N. oculata를 혼합하여 공급한 말백합 유생의 일간 성장은 공급량 3,000-7,000 세포/개체에서 12.8-13.2 μm, 1,000 세포/개체에서 9.9 μm, 250 세포/개체에서 7.2 μm로 나타나, 공급량 1,000 세포/개체 이하는 먹이생물의 부족에 의한 유생 성장의 저해요인으로 작용하였다.
- 7 g의 개체들이었다. 성숙된 어미는 공기노출 및 수온상승 방법을 병행하여 채란 및 수정하였고, 정상적인 발생과정을 거친 후 D형 유생으로 발생된 개체들을 사용하였다.
- 실험에 사용한 D형 유생의 크기는 각장 132.7±5.9 μm였으며, C. calcitrans, I. galbana, N. oculata 3종의 미세조류를 동일한 세포수로 혼합한 후 사육 0-1, 2, 3일째의 공급량을 유생 1개체당 250-500-1,000 세포, 1,000-2,000-3,000 세포, 3,000-4,000-5,000 세포, 5,000-6,000-7,000 세포, 7,000-8,000-9,000 세포로 구분한 실험구를 설정하여 유생의 성장 및 생존율을 비교 분석하였다.
- 유생의 성장은 10 mL를 3회 채집하여 만능투영기 (Nikon V-12) 로 각장과 각고를 1 μm 단위까지 측정하였고, 생존 개체수를 계수하여 생존율을 분석하였다. 실험은 2반복으로 실시하였다.
- oculata로서 초기 D형 유생에게 1개체당 매일 6,000 세포를 공급하였으며, 유생이 성장함에 따라 공급량을 증가시켜 4일째 10,000 세포를 공급하였다. 실험은 2반복으로 실시하였으며, 그 외 실험조건은 먹이생물 종류별 유생사육에서와 동일하게 하였다.
- oculata 3종의 미세조류를 동일한 세포수로 혼합한 후 사육 0-1, 2, 3일째의 공급량을 유생 1개체당 250-500-1,000 세포, 1,000-2,000-3,000 세포, 3,000-4,000-5,000 세포, 5,000-6,000-7,000 세포, 7,000-8,000-9,000 세포로 구분한 실험구를 설정하여 유생의 성장 및 생존율을 비교 분석하였다. 실험은 3반복으로 실시하였으며, 그 외 실험조건은 먹이생물 종류별 유생사육에서와 동일하게 하였다.
- 염분은 1 μm cartridge filter를 사용하여 여과된 해수에 증류수를 혼합하여 30 psu로 조절하였고, 수온은 water bath를 이용하여 33℃로 조절하였다.
- 유생의 성장은 10 mL를 3회 채집하여 만능투영기 (Nikon V-12) 로 각장과 각고를 1 μm 단위까지 측정하였고, 생존 개체수를 계수하여 생존율을 분석하였다.
- 유생의 절식실험은 8일간 실시하였다. 1일, 2일, 4일로 나누어 절식 후 먹이생물을 공급하였고, 먹이생물을 공급하지 않은 실험구 그리고 절식 없이 당일 먹이생물을 공급한 실험구를 함께 설정하여 유생의 성장과 생존율을 비교 분석하였다.
- 사용된 먹이생물은 규조류 (Class Bacillariophyceae) 인 Chaetoceros calcitrans, 착편모조류 (Class: Haptophyceae)인 Isochrysis galbana, 녹조류 (Class: Chlorophyceae)인 Nannochloris oculata 3종이었다 (Table 1). 이 실험에서 3종류의 미세조류를 단독으로 공급한 실험구와 3종을 혼합하여 공급한 실험구를 설정하여 성장과 생존율을 비교하였다. 먹이생물은 hemacytometer를 이용하여 1 mL당 세포수를 계수한 후 유생이 성장함에 따라 매일 1,000 세포씩 공급량을 증가시켜 유생 1개체 당 6,000-10,000 세포를 오전과 오후 10시에 2회 나누어 공급하였다.
- 염분은 1 μm cartridge filter를 사용하여 여과된 해수에 증류수를 혼합하여 30 psu로 조절하였고, 수온은 water bath를 이용하여 33℃로 조절하였다. 적절한 수질을 유지하기 위하여 2일째 사육수를 전량 환수하였으며, 매일 오전 10시에 수온과 염분을 측정하였다. 유생의 성장은 10 mL를 3회 채집하여 만능투영기 (Nikon V-12) 로 각장과 각고를 1 μm 단위까지 측정하였고, 생존 개체수를 계수하여 생존율을 분석하였다.
대상 데이터
- , 1992). 본 연구에서 사용한 먹이생물은 C. calcitrans, I. galbana, N. oculata이다. 규조류인 C.
- 실험에 사용된 D형 유생의 크기는 각장 133.1±2.5 μm로 1 L 비이커에 사육수 1 mL당 5개체씩 수용하여 사육하였다.
- 실험에 사용된 말백합은 2003년 전북 김제시 진봉면 심포리 앞바다에서 생식소 발달단계가 성숙기 및 산란기인 7-9월에 채집된 각장 58.8±8.2-65.8±8.4 mm, 전중 54.3±29.8-73.1±28.7 g의 개체들이었다.
- 실험에 사용한 D형 유생의 크기는 각장 133.1±2.5 μm였다.
데이터처리
- 각 실험 결과로부터 얻어진 모든 측정값들은 평균±표준편차 (SD) 로 표시하였으며, 측정값들 사이의 유의차 유무는 SPSS (ver. 12) 를 사용하여 95% 신뢰수준에서 ANOVA와 Duncan's multiple range test (Duncan, 1955) 로 검정하였다.
성능/효과
- 1일 절식 후 먹이생물을 공급한 실험구는 먹이생물 공급 후 4일째에 각장 197.3 ± 18.3 μm, 일간성장 12.3 μm, 2일 절식 후 먹이생물을 공급한 실험구에서는 각장 200.3 ± 17.2 μm, 일간성장 11.4 μm, 그리고 4일 절식 후 먹이를 공급한 실험구에서는 각장 199.8 ± 21.4 μm, 일간성장 10.1 μm로 나타났다.
- 공급량 3,000 세포/개체 이상에서는 유생의 성장에 유의한 차이가 없어 (P > 0.05), 말백합 유생은 5 개체/mL의 사육밀도에서 먹이생물 공급량은 3,000-7,000 세포/개체가 가장 적합한 것으로 나타났다.
- 먹이생물 공급량에 따른 유생의 각장 성장은 공급량 250 세포/개체, 1,000 세포/개체의 실험구에서 사육 3일째 각각 154.2 ± 11.8 μm, 162.4 ± 13.4 μm 크기로 나타나 일간 성장은 각각 7.2 μm, 9.9 μm였다.
- 먹이생물 공급량에 따른 유생의 각장 성장은 공급량 3,000 세포/개체, 5,000 세포/개체와 7,000 세포/개체 실험구간에는 유의한 차이가 없었으나 (P > 0.05), 공급량 250 세포/개체, 5,000 세포/개체와 먹이생물을 공급하지 않은 실험구와는 유의한 차이가 있었다 (P 0.05, Table 5).
- 먹이생물 종류에 따른 유생의 성장은 3종의 먹이생물을 혼합한 실험구와 C. calcitrans의 단독 먹이 실험구 사이에는 유의한 차이가 없었 으나 (P > 0.05), I. galbana와 N. oculata를 단독으로 공급한 실험구와는 유의한 차이가 있었다 (P < 0.05, Table 2).
- 먹이생물 종류에 따른 유생의 성장을 비교한 결과, C. calcitrans, I. galbana, N. oculata를 동일비율로 혼합하여 공급한 실험구가 사육 4일째 각장 193.1 ± 11.4 μm, 일간 성장 15.0 μm로 성장이 가장 빨랐으며, 먹이생물 종류를 단독으로 공급한 실험구 중에서는 C. calcitrans와 I. galbana를 단독으로 공급한 실험구에서 사육 4일째 각장이 각각 187.2 ± 8.4 μm, 181.8 ± 10.1 μm로 성장하여 일간성장이 각각 13.5 μm, 12.2 μm였다.
- 먹이의 준비가 지연되는 경우를 대비하여 초기 D형 유생의 절식 후 재공급 실험을 실시한 결과, 일정기간 절식 후 먹이생물을 공급한 날로부터 4일째에 전실험구에서 평균 각장 192.5 μm 이상의 침착기 유생으로 성장하였으며, 생존율은 절식 기간이 길수록 낮은 경향을 보였다.
- 본 연구에서는 C. calcitrans, I. galbana, N. oculata를 동일비율로 혼합하여 공급한 실험구에서 사육 4일째 각장 193.1 ± 11.4 μm, C. calcitrans를 단독으로 공급한 실험구에서 각장 187.2 ± 8.4 μm의 침착기 유생으로 성장하였으나, N. oculata를 단독으로 공급한 실험구에서는 사육 4일째 173.1 ± 10.4 μm로 성장이 가장 늦어 먹이로서 효율이 가장 낮았다.
- 먹이생물의 종류에 따른 유생의 성장과 생존율을 조사하기 위하여 4일간 먹이생물 종류를 달리하여 사육실험을 실시하였다. 사용된 먹이생물은 규조류 (Class Bacillariophyceae) 인 Chaetoceros calcitrans, 착편모조류 (Class: Haptophyceae)인 Isochrysis galbana, 녹조류 (Class: Chlorophyceae)인 Nannochloris oculata 3종이었다 (Table 1). 이 실험에서 3종류의 미세조류를 단독으로 공급한 실험구와 3종을 혼합하여 공급한 실험구를 설정하여 성장과 생존율을 비교하였다.
- 생존율은 먹이생물을 매일 공급한 실험구에서 사육 4일째 69.0%, 1일 절식 후 먹이생물을 공급한 실험구에서 43.6%, 2일 절식 후 먹이생물을 공급한 실험구에서 33.6%, 4일 절식 후 먹이생물은 공급한 실험구에서 12.6%, 그리고 먹이생물을 전혀 공급하지 않은 실험구에서 7.8%로 나타나 절식 기간이 길수록 생존율이 낮아지는 경향을 보였다 (Fig. 2).
- 생존율은 사육 4일째 I. galbana 실험구에서 49.7%로 다른 실험구와는 유의한 차이를 보였고 (P 0.05, Table 3).
- 4 μm로 성장이 가장 늦어 먹이로서 효율이 가장 낮았다. 위와 같은 결과로 볼 때 백합과 말백합을 포함한 백합류는 C. calcitrans를 단독으로 그리고 여러 종을 혼합하여 공급하였을 경우 가장 양호한 효율을 나타내는 것으로 보인다.
- 본 연구는 말백합의 안정적인 인공종묘생산을 위해 먹이생물의 종류 및 공급량을 조사하였고, 일정기간 절식 후 먹이생물의 재공급에 따른 영향을 관찰하였다. 유생의 먹이생물은 I. galbana, C. calcitrans, N. oculata를 혼합하거나 단독으로 공급할 경우 C. calcitrans를 D형 유생 1개체당 3,000-5,000 세포를 공급하는 것이 가장 효과적이었다. D형 유생을 일정기간 절식 후 먹이생물을 공급한 경우 먹이생물을 공급한 시점부터 4일째에 평균각장 192.
- 절식없이 먹이생물을 매일 공급한 실험구에서 각장의 성장과 일간성장은 사육 4일째 각장 192.5 ± 11.2 μm의 침착기 유생으로 성장하였고, 일간성장은 14.9 μm였다.
후속연구
- 8일간 먹이생물을 공급하지 않은 유생은 6일 이후 각장 165 μm에서 성장이 정지하였으며, 이는 초기에 자체영양분이 성장에 관여했을 것으로 보인다. 따라서 본 연구결과를 볼 때 인공종묘생산 시 환경변화가 성장과 생존에 미치는 영향을 최소화하기 위해선 각 유생 단계별 절식에 따른 성장한계시간을 파악하여 이에 따른 원활한 먹이생물의 공급이 필요할 것으로 보인다.
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