[논문]2년 동안 지실의 채취시기 및 지역에 따른 Poncirin과 Naringin의 함량

이설림; 서창섭; 김정훈; 신현규

2년 동안 지실의 채취시기 및 지역에 따른 Poncirin과 Naringin의 함량
Contents of Poncirin and Naringin in Fruit of Poncirus Trifoliata according to Different Harvesting Times and Locations for Two Years 원문보기

생약학회지, v.42 no.2 = no.165, 2011년, pp.138 - 143

이설림 (한국한의학연구원 한약EBM연구센터) , 서창섭 (한국한의학연구원 한약EBM연구센터) , 김정훈 (한국한의학연구원 한약EBM연구센터) , 신현규 (한국한의학연구원 한약EBM연구센터)

Abstract ▼ AI-Helper

A high performance liquid chromatography (HPLC) method was developed for simultaneous determination of two major flavonoid glycosides (poncirin and nanringin) in Poncirus trifoliata Raf. by different harvesting times and locations for two years. A SunFire $C_{18}$ column (4.6 mm${\times}$250 mm, 5 ${\mu}M$) was used at $40^{\circ}C$ for the determination of poncirin and naringin. The mobile phase using gradient flow consisted of two solvent systems. Solvent A was 1.0% (v/v) aqueous acetic acid and solvent B was acetonitrile with 1.0% (v/v) acetic acid. Flow rate was 1.0 mL/min and injection volume was 10 ${\mu}l$. The chromatogram was monitored by photodiode array (PDA) detection at 280 nm for the identification of two flavonoid glycosides in P. trifoliata. The contents of the two components in P. trifoliata ranged from 0.32~13.02%.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

¹⁵⁾ 이와 같이 한의학의 문헌과 공정서에 기록된 지실의 채취시기와 크기, 완숙 정도가 상이한 실정에서 이에 대한 연구가 필요하다고 본다. 따라서 본 연구에서는 2009년, 2010년 2년 동안 5월부터 11월까지 월별 채취시기에 따른 크기와 건조 감량, 회분 및 poncirin과 naringin 함량의 상관성을 확인하여 지실의 품질평가 기준을 제시하고자 한다.
한의학적으로 지실은 신체에 이상적으로 뭉쳐진 기를 분산시키는 효능을 가지고 있어서, 배가 더부룩하면서 그득한 복부 창만, 명치끝이 그득하면서 아픈 것을 낫게 하고, 음식을 먹고 체한 지 오래된 증상과 기가 뭉쳐서 생긴 창만, 변비 등의 증상을 완화시켜주는 등의 목적으로 사용되었다.²⁾최근 연구보고에 따르면 지실은 항암작용, 항혈전작용, 항박테리아작용, 항바이러스작용, 항알러지작용 및 자궁수축 작용 등이 있는 것으로 나타났다.

제안 방법

에 따라 미리 칭량병을 105℃에서 1시간 건조하고 그 무게를 정밀하게 달았다. 그 후 무게를 단 칭량병에 시료 약 1g을 넣어 무게를 정밀하게 측정하여 105℃에서 5시간 동안 건조하여 데시게이터 에서 식힌 후 그 무게를 정밀하게 측정하고 이것을 다시 105℃에서 건조하여 1시간마다 질량을 정밀하게 달아 항량이 될 때의 감량을 건조감량 (%)으로 하였다.
무게를 단 사기제 도가니에 시료를 약 1g을 넣어 무게를 정밀하게 측정하여 550℃에서 4시간 동안 강열하여 탄화물이 남지 않을 때까지 회화한다. 방냉한 후 질량을 정밀하게 달고 다시 항량이 될 때까지 회화하고 방냉한 다음 그 질량을 정밀하게 달아 회분량 (%)을 계산하였다.¹⁾
이를 초음파 추출법으로 1시간 동안 추출한 후 SmartPor GHP syringe filter (0.2 µm, Woongki Science, Seoul, Korea )하여 검액으로 하였다.
지실의 크기 측정 − 캘리퍼스를 사용하여 지실의 가로와 세로의 지름을 측정하고, 이를 평균값으로 계산하여 지실의 크기를 표시하였다.
산불용성회분 − 회분에 묽은 염산 25 mL를 가하여 5분간 약한 열에 끓여 불용물을 정량용 여과지로 여과한 후 잔류물을 열탕으로 잘 씻어 여과지와 함께 건조하였다. 회분항과 같은 방법으로 550℃에서 3시간 동안 강열하여 데시게이터에서 방냉한 후 그 무게를 정밀하게 달아 산불용성회분량 (%)으로 하였다. 얻은 값이 규정하는 값보다 클 경우에는 항량이 될 때까지 강열하였다.

대상 데이터

기기 및 시약 − 회분시험법 및 산불용성회분시험법에 사용된 회화로는 TYPE 48000 Furnace (BARNSTEAD, Dubuque, IA, USA)이고, 함량분석에 사용된 HPLC는 LC20AT pump, SIL-20AC autosampler 및 SPD-M20A photodiode array (PDA) 검출기 등으로 구성된 LC-20A series (Shimadzu, Kyoto, Japan)였다. Poncirin 표준품 (98%)은 Roth (Karlsruhe, Germany)에서 구입하였으며, naringin (95%)과 내부표준물질인 propylparaben (99%)은 SigmaAldrich (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다 (Fig. 1). 추출 및 분석에 사용된 methanol, acetonitrile 및 water는 J.
건조 된 시료는 미세분말로 한 후 약전표준 체 (standard sieve No. 30, 600 µm)를 통과한 균질한 재료를 사용하였다.
기기 및 시약 − 회분시험법 및 산불용성회분시험법에 사용된 회화로는 TYPE 48000 Furnace (BARNSTEAD, Dubuque, IA, USA)이고, 함량분석에 사용된 HPLC는 LC20AT pump, SIL-20AC autosampler 및 SPD-M20A photodiode array (PDA) 검출기 등으로 구성된 LC-20A series (Shimadzu, Kyoto, Japan)였다.
실험 재료 − 본 실험에 사용된 지실은 중부이남 지역인 충청남도 공주시 반포면의 1곳 (PT1), 대전광역시 유성구 계산동의 2곳 (PT2, PT3) 및 경상북도 경주시 석장동의 3곳 (PT4, PT5, PT6) 등 총 6곳에서 2009년 6~11월, 2010년 5~11월까지 매달 채집하였다.
1). 추출 및 분석에 사용된 methanol, acetonitrile 및 water는 J.T. Baker (Phillipslurg, NJ, USA)로 부터 구입하였다.

이론/모형

건조 감량 − 대한약전의 생약시험법1)에 따라 미리 칭량병을 105℃에서 1시간 건조하고 그 무게를 정밀하게 달았다.

성능/효과

본 실험 결과 탱자나무 열매의 채취시기에 따른 크기는 5, 6월에 채취한 지실은 1~2 cm를 나타내었고, 그 외는 크기를 벗어났다. 각 시료의 건조감량과 회분량 및 산불용성 회분량의 측정 결과, 건조감량은 2.1~11.2%을 나타내었으며, 회분량과 산불용성 회분량은 각각 2.6~4.6%와 0.2~0.6%로 대한약전 기준치인 7.0% 이하 및 0.6% 이하로 모든 지 실이 기준에 적합하였다. 지실의 월별 유효성분의 함량을 비교 분석한 결과, 채취시기에 따라 poncirin과 naringin의 함량이 다르게 나타났고, 7월 이전 모든 지실은 대한약전 기준인 poncirin 2.
건조감량, 회분 및 산불용성회분 − 지실의 건조감량은 2.1~11.2%로 나타났고, 회분량과 산불용성회분량은 2.6~4.6% 및 0.2~0.6%로 나타났으며, 이는 대한약전 기준치인 7.0% 및 0.6% 이하에서 모든 지실이 적합하였다 (Table II).
본 실험 결과 탱자나무 열매의 채취시기에 따른 크기는 5, 6월에 채취한 지실은 1~2 cm를 나타내었고, 그 외는 크기를 벗어났다. 각 시료의 건조감량과 회분량 및 산불용성 회분량의 측정 결과, 건조감량은 2.
유효성분의 함량분석 결과 모든 지역의 탱자나무 열매가 채취시기가 늦어짐에 따라 poncirin은 감소하였고, 8월 이후에는 초기 채취시기 (5, 6월)와 비교하여 15% 이하의 함량을 나타내었다. Naringin은 2009년 시료 6종에서 시기별로 감소하는 경향을 보였으나 증감이 일정하지 않았다.
이상과 같이, 대한약전 기준인 1~2 cm의 지실 크기가 기준일 경우 5월과 6월 사이에 채취하여야 품질 기준에 적합한 것으로 나타났다.
6% 이하로 모든 지 실이 기준에 적합하였다. 지실의 월별 유효성분의 함량을 비교 분석한 결과, 채취시기에 따라 poncirin과 naringin의 함량이 다르게 나타났고, 7월 이전 모든 지실은 대한약전 기준인 poncirin 2.0% 이상 함량을 나타내어 적합하였으며, 또 결과를 통해 얻어진 naringin 함량도 7월을 기준으로 할 경우 naringin 2.0% 이상을 지실 품질기준을 설정할 때 참고될 수 있을 것으로 사료된다.
3). 채취시기와 지역에 따라 poncirin과 naringin의 함량은 각각 0.30~13.02%와 0.38~9.93%로 나타났다 (Table IV).
탱자나무 열매의 크기를 측정한 결과, 채취시기가 늦어질수록 비례하여 크기가 증가하였는데 5~10월에는 증가하는 경향을 보였고, 그 중에서 PT1은 5월에 비해 6월에 약 1.5배의 크기를 나타내었으며, PT2, 3은 10% 이하의 크기 차이를 보였다. 5월의 시료 6종과 6월의 PT2, 3은 0.
탱자나무의 열매는 미성숙기인 4, 5, 6월의 유효성분 함량이 성숙기인 7월 이후보다 높게 나타나 미성숙기의 크기가 작은 열매가 유효성분의 함량이 높아진다는 상관성을 확인할 수 있었다. 유효성분 함량을 기준으로 할 경우 대한약전에 기재된 채취시기가 적당하다고 할 수 있고 동의보감에 기재된 채취시기는 함량이 적은 상태로 볼 수 있으나, 채취시기는 성분 함량 뿐만 아니라 약효의 발현까지 고려해서 설정된 것이라고 할 수 있으므로 정확한 채취시기를 설정하기 위해서는 차후 효능 연구를 비롯한 추가 연구가 필요하다고 사료된다.

후속연구

대한약전 기준치인 회분량과 산불용성 회분량 7.0% 이하 및 0.6% 이하, poncirin 2.0% 이상을 기준으로 할 경우, 7월 이전의 탱자나무 열매인 지실이 기준에 적합하며, 추가적으로 naringin 2.0% 이상 함량의 지실 품질 기준에 대해 검토가 필요하다고 사료된다.
탱자나무의 열매는 미성숙기인 4, 5, 6월의 유효성분 함량이 성숙기인 7월 이후보다 높게 나타나 미성숙기의 크기가 작은 열매가 유효성분의 함량이 높아진다는 상관성을 확인할 수 있었다. 유효성분 함량을 기준으로 할 경우 대한약전에 기재된 채취시기가 적당하다고 할 수 있고 동의보감에 기재된 채취시기는 함량이 적은 상태로 볼 수 있으나, 채취시기는 성분 함량 뿐만 아니라 약효의 발현까지 고려해서 설정된 것이라고 할 수 있으므로 정확한 채취시기를 설정하기 위해서는 차후 효능 연구를 비롯한 추가 연구가 필요하다고 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	지실 (枳實)이란 어떤 열매인가?	지실 (枳實)은 운향과 (Rutaceae)에 속한 탱자나무Poncirus trifoliata Rafinesque의 익지 않은 열매로 봄·여름철에 1~2 cm의 어린 열매를 채취하여 쪼개서 말린 것을 사용하며, 우리나라 중부이남의 전국 각지에서 재배된다.1)
	枳實은 한의학적으로 어떠한 효능을 가지고 있는가?	한의학적으로 지실은 신체에 이상적으로 뭉쳐진 기를 분산시키는 효능을 가지고 있어서, 배가 더부룩하면서 그득한복부 창만, 명치끝이 그득하면서 아픈 것을 낫게 하고, 음식을 먹고 체한 지 오래된 증상과 기가 뭉쳐서 생긴 창만, 변비 등의 증상을 완화시켜주는 등의 목적으로 사용되었다.2)최근 연구보고에 따르면 지실은 항암작용, 항혈전작용, 항박테리아작용, 항바이러스작용, 항알러지작용 및 자궁수축 작용 등이 있는 것으로 나타났다.
	지실의 성분으로는 무엇이 보고되었는가?	지실의 성분으로는 limonene, linalool, camphene등과 같은 정유성분, poncirin, naringin, hesperidin, neohesperidin등과 같은 flavonoids 및 umbelliferone, auraptene, imperatorin 등과 같은 coumarins류가 보고되어 있다.7-9) Poncirin은 항혈소판 작용 및 장내세균 억제작용과 항헬리코박터파이로리 활성이 있다고 알려져 있고,11,12) naringin은 콜레스테롤 억제효과와 백혈병 세포를 정상세포로 변화시키는 작용, 유방암 세포증식 저해작용이 있는 것으로 보고되었다.

참고문헌 (15)

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