선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 지실은 동아시아권에서 소화기 질환에 많이 사용되어 왔지만, 소화기 기능성 질환과 밀접한 관련이 있는 위장관의 운동에 대한 효능은 최근에서야 실험적으로 증명되기 시작했으며, 아직까지 위로 들어오는 음식물을 수용하는 역할을 하는 위저부(gastric fundus)에 대한 지실의 영향에 대한 보고는 없었다. 따라서 본 연구는 위저부에 대한 국산 지실과 중국산 지실의 효능을 평가하고, 대표적인 flavonone 계 성분인 poncirin과 hesperidin 그리고 hesperidin의 비배당체(aglycone) 인 hesperetin의 영향에 대해 알아보았다.
제안 방법
- pH 7.4 로 조정한 Krebs 용액이 담긴 10 ml 용량의 장기 수조의 중앙에 tissue holder를 넣어 고정한 후, 조직 절편의 상단은 등척성 근수축변환기(FT-03, Grass, USA)에 연결하여 0.5 g의 기본장력을 가하였다. 한 시간 정도의 안정화 기간이 지난 후 U46619(10−7M)을 투여하여 전수축을 유발하였다.
- 국산 지실과 중국산 지실에 공통적인 성분인 hesperidin과그 비배당체인 hesperetin 그리고 중국산 지실에는 없고 국산지실에만 있는 성분인 poncirin의 효능을 알아보았다. Hesperidin(10−4M) 은 U46619로 전수축을 유도한 위저부 평활근의 윤상근과 종주근 모두를 서서히 이완시켰다(Fig 5A, B).
- 위저부 종주근을 U46619를 이용하여 전수축을 유발한 후 국산과 중국산 지실의 메탄올 추출물(PFM, AIM, 100 µg/ mL), 메탄올 추출물의 수용성분획(PFW, AIW, 100 µg/mL)을 투여하였을 경우, 다상성(multiphasic)의 반응을 나타내었다. 국산 지실의 메탄올 추출물(PFM)과 수용성분획(PFW)는 투여 직후 빠른 이완과 반사성의 수축을 보인 후 다시 서서히 종주근을 이완시켰다(Fig 3A, C). 반면에 중국산 지실의 메탄올 추출물(AIM), 메탄올 추출물의 수용성분획(AIW)은 모두 위저부 종주근을 일시적으로 수축을 일으킨 후 완만하게 이완시켰다(Fig 3B, D).
- 전수축이 plateau에 이르면 지실 추출물을 투여하였다. 데이터의 기록과 저장은 Powerlab과 소프트웨어 Chart 7.2 (ADInstruments)로 평활근의 수축과 이완을 기록하였다. 장기 수조내의 온도를 35oC로 일정하게 유지하면서 혼합 가스를 지속적으로 공급하였다.
- 두 지실 메탄올 추출물의 수용성 분획(PFW, AIW, 100 µg/mL)도 랫트 위저부 윤상근을 서서히 이완시켰다(Fig 1C, D).
- 두 지실 메탄올 추출물의 클로로포름분획(PFC, AIC, 10µg/mL)은 랫트 위저부 종주근을 서서히 이완시켰다(Fig 3E, F). 위저부 종주근은 U46619에 의한 전수축을 유도한 지실 추출물을 투여하였을 경우 비록 다상성의 반응이 나오기도 하였지만 공통적으로 이완이 일어났으므로 이완에 대해서만 통계처리를 하였다. 국산 지실(PF)의 메탄올 추출물(PFM), 수용성분획(PFW), 클로로포름분획(PFC)을 투여하였을 경우 최종적으로 96.
- 위저부 종주근을 U46619를 이용하여 전수축을 유발한 후 국산과 중국산 지실의 메탄올 추출물(PFM, AIM, 100 µg/ mL), 메탄올 추출물의 수용성분획(PFW, AIW, 100 µg/mL)을 투여하였을 경우, 다상성(multiphasic)의 반응을 나타내었다.
- 각각의 약재 500 g을 70% 메탄올(MeOH)을 용매로 하여 105oC에서 2회 반복추출하고 rotary evaporator를 이용하여 감압농축한 후 동결건조하여 70% MeOH추출물(PFM, AIM)을 얻었다. 이후 메탄올 추출물을 열수에 녹인 후 chloroform(CHCl3)을 이용하여 분획함으로써 수용성분획(PFW, AIW)과 지용성 분획(PFC, AIC)을 얻어 사용하였다.
- 2 (ADInstruments)로 평활근의 수축과 이완을 기록하였다. 장기 수조내의 온도를 35oC로 일정하게 유지하면서 혼합 가스를 지속적으로 공급하였다.
- 한 시간 정도의 안정화 기간이 지난 후 U46619(10−7M)을 투여하여 전수축을 유발하였다. 전수축이 plateau에 이르면 지실 추출물을 투여하였다. 데이터의 기록과 저장은 Powerlab과 소프트웨어 Chart 7.
- 한 시간 정도의 안정화 기간이 지난 후 U46619(10−7M)을 투여하여 전수축을 유발하였다.
대상 데이터
- 본 실험에 사용한 Krebs 용액의 조성은 다음과 같다(mM); NaCl 118, KCl 4.7, KH2PO4 1.2, MgSO4 1.2, NaHCO3 25, CaCl2 2.5, glucose 11, pH 7.4 by HCl.
- 본 실험에서 사용한 약재는 약령시에서 구입하였다. 각각의 약재 500 g을 70% 메탄올(MeOH)을 용매로 하여 105oC에서 2회 반복추출하고 rotary evaporator를 이용하여 감압농축한 후 동결건조하여 70% MeOH추출물(PFM, AIM)을 얻었다.
- 실험동물로는 체중300-400 g의 SD rat 수컷을 사용하였으며, 경추탈골법으로 희생시킨 후 위를 분리하였다. 분리한 위저부를 Krebs 용액이 담긴 넓은 초자용기에서 점막층을 제거한 후 윤상근 또는 종주근 방향을 따라 2 × 8 mm의 크기로 절편을 만들어 양끝을 tissue holder에 고정하였다.
- 위저부 윤상근을 U46619를 이용하여 전수축을 유발한 후두 종류 지실의 메탄올 추출물 100 µg/mL을 투여하였다.
데이터처리
- One-way ANOVA test와 Newman-Keuls Multiple Comparison Test 를 이용하여 P < 0.05 수준에서 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- 이때 Krebs 용액에 혼합가스(95% O2+ 5% CO2)를 계속 공급하였다. 동물실험은 경북대학교의 실험동물에 관한 사용과 관리규정에 따라 진행하였다.
성능/효과
- Hesperetin 역시 윤상근과 종주근 모두를 이완시켰으며, 배당 체인 hesperidin보다 더 크고 빠른 이완반응을 보였다(Fig 5C, D). Poncirin도 역시 hesperidin과 유사하게 윤상근과 종주근 모두에서 서서히 이완반응을 유발하였다(Fig 5E, F).
- 국산 지실(PF)의 메탄올 추출물(PFM), 수용성분획(PFW), 클로로포름분획(PFC)을 투여하였을 경우 최종적으로 96.4.5 ± 10.6, 54.9 ± 9.8, 93.4 ± 4.4%가 이완되었고, 반면에 중국산 지실(AI)의 메탄올 추출물(AIM), 수용성분획(AIW), 클로로포름분획(AIC)에 의해 55.4 ± 5.7, 52.0 ± 6.4, 79.4 ± 2.7%가 이완되었다.
- 7%가 이완되었다. 국산지실의 메탄올추출물(PFM)은 중국산 지실의 메탄올추출물(AIM)보다 이완효과가 유의성 있게 크게 나타났으며, 또한 국산과 중국산 지실메탄추출물의 수용성분획들(PFW, AIW)보다도 유의성 있게 더 큰 이완 반응을 보였다(Fig 4).
- 본 연구에서 hesperidin, hesperetin, poncirin과 같은 flavonoids는 랫트 위저부 윤상근과 종주근 모두를 이완시켰다. 따라서 두 종류의 지실에 의한 위저부 평활근의 지속적인 이완반응은 적어도 부분적으로는 이러한 flavonoids 성분에 의한 것이라고 생각된다.
- 본 연구에서 국산 지실과 중국산 지실의 메탄올 추출물과 수용성분획, 클로로포름분획은 모두 위저부 윤상근을 이완시켰다. 위저부 종주근에서는 국산 지실과 중국산 지실의 메탄올 추출물과 수용성분획에 의해 다상성(multiphasic) 반응이 유발되었으나, 투여 직후의 이완과 반사성 수축 또는 일시적인 수축이 짧은 시간 동안 일어난 후 지속적인 이완반응이 나타났으므로 이완반응이 주된 반응이라고 생각된다.
후속연구
- 그러나 위저부 종주근에 대한 반응에서 두 종류 지실이 다소 다른 반응을 보이는 것으로 보아 완전히 같은 효능을 보인다고 말하기는 어려울 것으로 생각된다. 그리고 종주근에서 나타나는 일시적인 이완과 반사성 수축 또는 일시적인 수축에 대한 기전은 더 연구할 필요가 있을 것으로 보인다
- Hesperidin 은 소화관의 운동을 증가시킨다는 보고가 있었으나(3), 소화관 운동에 대한 poncirin의 효능은 아직 보고된 바가 없다. 따라서 소화관의 운동에 대한 이들 flavonoids의 작용 기전에 대해서는 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.