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문제 정의
- 여러 연구 결과, 유색미 미강에 색소로 존재하는 안토시아닌은 항산화 활성이 있음이 보고되어 왔고, 미강의 표고버섯 균사체 발효로 생성된 다당체 성분은 면역 증진 작용 및 항암 작용을 가지고 있는 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 연구에서는 유색미의 미강을 표고버섯 균사체로 발효한 1차 발효물과 1차 발효물을 통해 생성된 다당체 성분을 효모와 유산균으로 2차 발효시킨 2차 발효물을 이용해 in vivo상에서 면역활성을 평가하였다. 이로써 유색미 미강의 1차 발효물과 2차 발효물이 보유한 생리활성을 규명하고 활용하고자 하였다.
- 또한 Chae 등(2004)의 연구에서도 미강에서 추출한 아라비녹실란을 대식세포에 처리한 결과, IL-6와 TNF-α 분비량이 모두 증가하는 결과를 나타내었다. 본 실험에서는 CFP와 CFP-S을 경구 투여한 군에서 대식세포의 사이토카인이 증가하는 결과를 나타내었다. 이와 같은 결과는 대식세포의 증식능을 평가한 결과(Fig.
- 또한 Kim 등(2005)의 연구에서도 미강을 표고버섯 균사체로 발효시킨 미강발효물이 비장세포 증식능이 증가시키는 것을 확인할 수 있었다. 본 연구에서도 각 시료들의 경구 투여가 비장세포를 증식을 활성화시키는 결과를 나타내었다. 특히 대조군과 상대 비교 시 미토젠을 첨가한 조건보다 첨가하지 않고 배양한 조건에서 유의적인 차이를 나타내었다.
- 따라서 본 연구에서는 유색미의 미강을 표고버섯 균사체로 발효한 1차 발효물과 1차 발효물을 통해 생성된 다당체 성분을 효모와 유산균으로 2차 발효시킨 2차 발효물을 이용해 in vivo상에서 면역활성을 평가하였다. 이로써 유색미 미강의 1차 발효물과 2차 발효물이 보유한 생리활성을 규명하고 활용하고자 하였다.
제안 방법
- 탈지공정으로 탈지한 미강을 발효 배지에 2%가 되도록 첨가하고, PDA 배지에서 배양한 표고버섯 균사체인 Lentinus edodes을 접종하여 28℃에서 5일간 배양한 후 회수하여 열수 추출, 농축 및 멸균 공정을 거치고 동결건조하였다. 2차 발효 공정은 Lentinus edodes 발효를 통해 얻은 발효물을 회수하여 별도로 종균 배양된 Lactobacillus gasseri 유산균종 및 Saccharomyces cerevisiae 효모 균주를 각기 접종하여 30℃에서 2일간 추가 배양 후 회수, 멸균, 동결건조 공정을 통해 제조했다.
- 본 연구는 유색미 미강을 표고버섯 균사체로 발효한 1차 발효물(CFP)과 1차 발효물을 효모와 유산균으로 2차 발효시킨 2차 발효물(CFP-S, CFP-L)을 이용하여 in vivo 상에서 면역 활성을 측정하였다. 4주간 각 물질을 250 ㎎/㎏ BW/day로 경구 투여시킨 후 마우스 복강 대식세포와 비장세포를 분리하여 각각의 세포 증식도을 평가하였으며, 각 세포에서 분비하는 사이토카인의 분비량을 측정하였다. 실험 결과, 마우스 대식세포의 증식은 CFP 경구 투여군과 CFP-S 경구 투여군이 높게 나타났다.
- 각 시료를 경구 투여한 마우스의 복강 내 대식세포와 비장에서 분리한 비장세포을 배양시킨 다음 배양 상층액으로부터 분비되는 사이토카인(IFN-γ, TNF-α, IL-6) 분비량을 측정하였다.
- 대식세포 활성화 능력을 측정하기 위하여 총 4주간 시료를 섭취시킨 실험동물에게 3% thioglycollate 1 ㎖를 투여하고 72시간 이후 희생시켰다. 이후 RPMI 1640 배지 3 ㎖를 복강에 주입하여 세척한 후 다시 회수한 뒤 원심분리하여 대식세포를 분리하였다.
- 이 때 미토젠인 LPS(1 ㎍/㎖)를 첨가한 것과 첨가하지 않은 것으로 나누어 배양하였다. 대식세포의 증식능은 대식세포가 활성되었을 때 분비되는 lysosomal enzyme의 활성을 측정하여 반영하였다. 실험방법은 추가 배양된 대식세포의 배양액을 제거하고 0.
- 2와 같이 나타났다. 대식세포의 활성 측정은 대식세포의 활성을 유도하는 미토젠(mitogen)인 LPS를 첨가하여 증식시킨 것과 첨가하지 않고 증식시킨 것으로 나누어 측정하였다. 실험에서 대식세포 활성을 보기 위해 측정한 lysosomal acid phosphatase(lysosomal enzyme) 활성은 외부 자극에 의해 대식세포에서 생산되는 효소로 lysosomal acid phosphatase는 대식세포가 침입한 미생물에 대해 공격할 수 있는 1차 반응물질이다.
- 마우스는 임의 배치법에 의해 대조군과 투여군으로 나누었으며, 실험군마다 10마리씩 사용하였다. 대조군에는 멸균증류수를 투여군에는 250 ㎎/㎏ BW/day씩 4주간 경구 투여하였다(Fig. 1).
- 이는 발효물에 생리활성을 나타내는 기능성 다당체가 포함되어 있기 때문이다. 따라서 본 연구에서는 일반 미강에서 유색미 미강을 이용하고, 더 나아가 1차 발효물을 효모와 유산균으로 2차 발효를 함으로 좀 더 저분자화된 다당체를 생성함으로 면역 증진 기능의 상승효과를 기대하였다. 특히, 2차 발효에 사용한 효모는 자체 내세포벽에 베타-글루칸을 함유한 것으로 현재 기능식품소재로 사용되고 있으며, 여러 연구 결과, 면역 증강 작용이 확인되었다(Kim 등 2008).
- 이때, T 세포의 활성화 유도물질인 LPS와 B 세포 활성화 유도물질인 ConA을 1 ㎍/㎖ 첨가한 것과 첨가하지 않은 것으로 나누어 배양하였다(Song 등 2003). 배양 이후 비장세포의 활성은 세포 생육도를 통하여 분석하였다. 측정은 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay(MTS), kit(Promega, USA)로 측정하였다(Desai 등 2008).
- 배양 후 배양 상층액을 분리하여 배양액에 축척된 IFN-γ, TNF-α, IL-6 사이토카인의 농도를 ELISA 사이토카인 kit(R&D system, USA)를 이용하여 측정하였다.
- 실험에서 대식세포 활성을 보기 위해 측정한 lysosomal acid phosphatase(lysosomal enzyme) 활성은 외부 자극에 의해 대식세포에서 생산되는 효소로 lysosomal acid phosphatase는 대식세포가 침입한 미생물에 대해 공격할 수 있는 1차 반응물질이다. 본 실험에서는 lysosomal acid phosphatase의 농도를 측정함으로 대식세포의 활성을 반영하였다(Page 등 1978). LPS를 첨가하지 않고 증식시킨 대식세포에서 대조군과 비교 시 CFP군 104.
- 본 연구는 유색미 미강을 표고버섯 균사체로 발효한 1차 발효물(CFP)과 1차 발효물을 효모와 유산균으로 2차 발효시킨 2차 발효물(CFP-S, CFP-L)을 이용하여 in vivo 상에서 면역 활성을 측정하였다. 4주간 각 물질을 250 ㎎/㎏ BW/day로 경구 투여시킨 후 마우스 복강 대식세포와 비장세포를 분리하여 각각의 세포 증식도을 평가하였으며, 각 세포에서 분비하는 사이토카인의 분비량을 측정하였다.
- 각 시료를 경구 투여한 마우스의 복강 내 대식세포와 비장에서 분리한 비장세포을 배양시킨 다음 배양 상층액으로부터 분비되는 사이토카인(IFN-γ, TNF-α, IL-6) 분비량을 측정하였다. 비부착성 세포를 제거하고 부착성 세포만을 얻은 후 대식세포는 대식세포를 활성화시키는 미토젠인 LPS를 1 ㎍/㎖ 농도로 처리한 것과 처리하지 않은 것으로 나누어 배양하였다. 반면, 비장세포는 LPS와 ConA를 처리한 것과 처리하지 않은 것을 나누어 배양하였다.
- 비장세포에서 분비되는 사이토카인의 농도를 측정한 결과는 Table 2와 같다. 비장세포는 B세포를 활성화시키는 ConA와 T세포를 활성화시키는 LPS를 처리한 것과 미토젠을 처리하지 않은 것으로 나누어 각각 사이토카인의 농도를 측정하였다.
- 3과 같다. 비장세포의 측정은 세포성 면역과 관련된 T세포의 활성을 유도하는 물질인 LPS을 첨가한 것과 체액성 면역과 관련 있는 B세포의 활성을 유도하는 물질인 ConA를 첨가한 것, 그리고 미토젠을 첨가하지 않은 것으로 나누어 측정하였다. 실험 결과, 미토젠을 첨가하지 않은 비장세포는 CFP군이 124.
- 비장세포의 활성화 능력을 측정하기 위하여 실험동물 비장을 적출하여 비장세포를 분리하였다. 총 4주간 시료를 섭취시킨 실험동물을 경추탈골한 후 복강내 대식세포를 회수하고 곧바로 복강을 개복하여 비장을 적출하였다.
- 유색미 미강 발효물의 경구 투여가 마우스의 비장세포 증식능에 미치는 영향을 확인하기 위한 지표로 세포의 MTS 분석을 이용하였다. 유색미 미강발효물의 비장세포 증식능 측정 결과는 Fig.
- 유색미 미강발효물을 250 ㎎/㎏ BW/day의 농도로 경구 투여한 마우스로부터 대식세포와 비장세포를 분리한 후 각 세포의 증식능을 측정하였다.
- 총 4주간 시료를 섭취시킨 실험동물을 경추탈골한 후 복강내 대식세포를 회수하고 곧바로 복강을 개복하여 비장을 적출하였다. 적출해낸 비장은 mesh를 통하여 분쇄하고 원심분리하여 상층액을 제거하여 비장세포를 회수하였다. 이후 RBC lysis buffer로 잔여 적혈구를 제거한 뒤 RPMI 1640 배지를 이용하여 2회 세척하였다.
- 비장세포의 활성화 능력을 측정하기 위하여 실험동물 비장을 적출하여 비장세포를 분리하였다. 총 4주간 시료를 섭취시킨 실험동물을 경추탈골한 후 복강내 대식세포를 회수하고 곧바로 복강을 개복하여 비장을 적출하였다. 적출해낸 비장은 mesh를 통하여 분쇄하고 원심분리하여 상층액을 제거하여 비장세포를 회수하였다.
- 배양 이후 비장세포의 활성은 세포 생육도를 통하여 분석하였다. 측정은 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay(MTS), kit(Promega, USA)로 측정하였다(Desai 등 2008).
- 본 연구에 사용한 시료는 ㈜ STR 바이오텍(한국)에서 공급받았다. 탈지공정으로 탈지한 미강을 발효 배지에 2%가 되도록 첨가하고, PDA 배지에서 배양한 표고버섯 균사체인 Lentinus edodes을 접종하여 28℃에서 5일간 배양한 후 회수하여 열수 추출, 농축 및 멸균 공정을 거치고 동결건조하였다. 2차 발효 공정은 Lentinus edodes 발효를 통해 얻은 발효물을 회수하여 별도로 종균 배양된 Lactobacillus gasseri 유산균종 및 Saccharomyces cerevisiae 효모 균주를 각기 접종하여 30℃에서 2일간 추가 배양 후 회수, 멸균, 동결건조 공정을 통해 제조했다.
대상 데이터
- 5주령 Balb/c mouse를 ㈜오리엔트바이오(한국)에서 분양받아 사용하였으며, 사육환경은 온도 22±2℃, 습도 50±20%, 12시간 조명하에 사육하였다.
- 시료는 ㈜STR 바이오텍에서 공급받았으며, 멸균증류수에 용해시킨 후 적정 농도로 희석하여 사용하였다. 마우스는 임의 배치법에 의해 대조군과 투여군으로 나누었으며, 실험군마다 10마리씩 사용하였다. 대조군에는 멸균증류수를 투여군에는 250 ㎎/㎏ BW/day씩 4주간 경구 투여하였다(Fig.
- 본 연구에 사용한 시료는 ㈜ STR 바이오텍(한국)에서 공급받았다. 탈지공정으로 탈지한 미강을 발효 배지에 2%가 되도록 첨가하고, PDA 배지에서 배양한 표고버섯 균사체인 Lentinus edodes을 접종하여 28℃에서 5일간 배양한 후 회수하여 열수 추출, 농축 및 멸균 공정을 거치고 동결건조하였다.
- 5주령 Balb/c mouse를 ㈜오리엔트바이오(한국)에서 분양받아 사용하였으며, 사육환경은 온도 22±2℃, 습도 50±20%, 12시간 조명하에 사육하였다. 사료는 마우스용 고형사료를, 음수는 상수도수를 제한 없이 섭취시켰다. 동물은 1주일 동안 실험 동물실에서 적응시킨 후 실험하였다.
- 동물은 1주일 동안 실험 동물실에서 적응시킨 후 실험하였다. 시료는 ㈜STR 바이오텍에서 공급받았으며, 멸균증류수에 용해시킨 후 적정 농도로 희석하여 사용하였다. 마우스는 임의 배치법에 의해 대조군과 투여군으로 나누었으며, 실험군마다 10마리씩 사용하였다.
데이터처리
- 그룹간의 유의적인 통계차를 분석하기 위하여 p<0.05의 유의수준으로 일원분산분석(one-way ANOVA)을 실시한 후 Duncan의 다중범위 검정법(Duncan’s multiple range test)을 이용하여 사후검증을 하였다.
- 모든 실험 결과의 자료는 SPSS 통계프로그램을 이용하여 평균 및 표준편차를 구하였다. 그룹간의 유의적인 통계차를 분석하기 위하여 p<0.
성능/효과
- ConA를 첨가하여 배양한 비장세포에서는 대조군에 비해 CFP군이 128.33±21.29%로 유의적으로 높은 활성을 나타내었다.
- IFN-γ의 농도는 LPS로 처리하지 않은 경우 CFP-S군이 8.99±2.51 pg/㎖로 대조군에 비해 31% 높은 분비량을 나타내었고, 군간의 유의적인 차이도 나타났다.
- IL-6의 분비량을 측정한 결과, 미토젠을 처리하지 않은 비장세포에서는 CFP군이 34.99± 39.43 pg/㎖로 대조군에 비해 유의적으로 높은 농도값을 나타내었다.
- LPS를 처리한 경우 CFP-S군이 4,767.62±584.18 pg/㎖로 대조군에 비해 28% 높은 분비량을 나타내었고, CFP는 4,186.04±643.55 pg/㎖로 대조군에 비해 18% 높은 분비량을 나타내었다(Table 1).
- 59 pg/㎖로 대조군과 유의적인 차이는 나타내지 않았으나, 대조군보다 3% 높게 나타났다. LPS를 처리한 경우 모든 군에서 유의적인 차이는 나타내지 않았으나 CFP군의 IL-6 분비량이 대조군에 비해 28% 높게 나타났다(Table 2).
- LPS를 첨가하여 배양한 대식세포에서는 CPF군은 113.21±13.10%, CFP-S군 138.78±24.41%, CFP-L군 93.60±15.34%로 대조군과 비교하여 상대활성을 나타내었다(Fig. 2).
- LPS를 첨가하지 않고 증식시킨 대식세포에서 대조군과 비교 시 CFP군 104.60±10.97%, CPF-S군 115.21±18.94%, CFP-L군 97.99±16.79%의 상대활성도를 나타내었다.
- ConA와 LPS를 처리한 경우 CFP 군이 대조군과 유의적인 차이를 보였다. 결과값을 살펴볼 때 ConA를 처리한 비장세포에서는 대조군에 비해 42%, LPS를 처리한 비장세포는 14% 높게 나타났다. 각 농도는 125.
- 미토젠과 관련하여 Cho 등(1998)은 다시마 분말 투여에 의한 당뇨쥐의 비장 세포 기능에 관한 연구에서 4주간의 투여에 의해 비당뇨군의 비장 세포 증식능이 촉진되었고, 특히 LPS와 Con A 첨가에 의해 비장 세포 증식능이 3배까지 상승하였음을 보고하였으며, Kwon 등(2001)은 동충하초를 4주간 투여한 마우스의 비장세포를 미토젠과 같이 배양 시 비장세포 증식능이 상승하였음을 보고하였다. 그러나 본 연구에서는 LPS와 ConA를 처리한 비장세포의 증식능이 대조군과 비교시 유의적인 차이를 나타나지 않았다. 이와 같은 결과는 대조군의 비장세포가 첨가된 미토젠에 의해 자극을 받아 증식이 활성화된 되어 실험군과 상대적 비교 시 평가에 제한점이 있는 것으로 판단된다.
- 대조군과는 유의적인 차이는 없었으나, CFP-S를 경구 투여한 군에서 874.25±100.46 pg/㎖의 농도를 나타내어 대조군과 비교 시 6% 높은 TNF-α 분비량을 나타내었다.
- 또한 Kim 등(2008)의 연구 결과에 의하면 베타-글루칸을 대식세포주에 처리하였을 때, IL-1β, IL-6, IL-10, TNF-α의 유전자발현이 자극되었다. 따라서 본 연구에서 CFP-S군의 대식세포 활성이 가장 높게 나타난 것은 미강발효물의 기능성 다당체 성분과 효모의 베타 글루칸이 함께 작용하여 면역기능에 시너지 효과를 가져온 것으로 판단된다. 더 나아가 2차 발효로 생성된 물질이 면역에 관여할 가능성도 높다.
- 이는 LPS가 대식세포의 B 세포를 자극시키는 미토젠으로 작용하여 대식세포의 활성을 자극했기 때문으로, 대식세포는 외부 자극이나 특정 물질에 의해 자극 받아 활성화되어 활동을 하게 된다. 또한 본 연구에서는 2차 발효물 중 효모로 발효한 CFP-S의 대식세포 활성이 가장 높게 나타났다. 효모는 인체에 무해한 GRAS 미생물로 오래 전부터 식품분야에 사용되어 왔다.
- 그러나 연구 결과, 유산균을 통한 2차 발효물은 면역기능 평가 시 효과적이지 못하였다. 또한 본 연구에서는 유색미 미강발효물의 면역효과는 기능성 다당체와 더불어 유색미에 포함되어 있는 안토시아닌이라는 항산화 성분의 효과라고 생각된다. 그러나 본 연구에서는 유색미 미강 발효물과 일반미의 미강발효물의 면역활성 효과를 비교하지 않았고, 유색미 미강의 어떤 물질이 면역활성에 기여했을 지는 판단하기 어렵다.
- 마우스 대식세포에서 분비하는 사이토카인의 분비량을 측정한 결과, CFP-S군은 IFN-γ, TNF-α, IL-6의 분비량을 모두 증가시켰으며, CFP 경구 투여군은 LPS를 처리하여 대식세포를 활성화시킨 세포에서 IFN-γ, IL-6의 분비량이 증가하였다.
- 본 연구 결과, CFP와 CFP-S는 대식세포를 활성화시켜 IFN-γ, TNF-α와 IL-6의 생산을 유도하는 것으로 나타났으며, 이로 인해 면역계 활성을 통한 숙주방어 기전을 한층 더 강화하게 해줄 것으로 기대된다.
- 그러나 2차 발효물인 CFP-S, CFP-L는 유의적인 결과를 나타내지 않았다. 본 연구 결과에서는 명확한 근거자료를 제시할 수 없으나, 비장세포와 관련된 체액성 면역에 관해서는 2차 발효물에 의한 면역 효과보다는 1차 발효물인 CFP의 면역 효과가 더 우수한 것으로 판단된다. 그러나 2차 발효물 중 CFP-S는 대식세포 활성에 효과적이었으므로 이에 대한 연구는 차후 더 이루어져야 할 것으로 판단된다.
- 본 연구 결과에서는 유색미 미강을 발효한 시료 CFP와 효모로 2차 발효한 CFP-S가 대식세포 증식을 증가시켰다. 특히, LPS를 첨가했을 때 대식세포의 활성이 더 높게 나타났다.
- Ryu 등(2010)의 연구에서도 도토리 추출물의 경구 투여가 마우스 비장세포의 사이토카인 IL-2, IL-6, IFN-γ의 분비량을 증가시켜 면역기능 향상에 기여한다고 보고하였다. 본 연구에서는 CFP 경구 투여가 비장세포에서 분비하는 사이토카인의 분비량을 증가시키는 것으로 나타났다. 이와 같은 결과는 선행된 연구와 비교할 때 유사한 결과를 나타내주고 있다.
- Park 등의 연구 결과에 의하면 LPS와 PHA(phytohemagglutinin)의 단독처리만으로도 마우스의 비장세포가 증식되었음을 나타내었다(Hyeon 등 1998). 비록, 본 연구에서는 미토젠 처리시 군간의 유의성은 없었지만 미토젠을 처리하지 않은 조건의 실험 결과에서 모든 실험군이 대조군과 비교 시 유의성을 나타내었다. 따라서 CFP, CFP-S, CFP-L을 섭취한 모든 군은 비장세포의 증식을 활성화 시키는 것으로 판단된다.
- 비장세포에서 분비하는 사이토카인의 농도 측정 결과는 CFP 경구 투여군에서 모든 사이토카인(IFN-γ, TNF-α, IL-6) 분비량을 증가시켰으며, CFP-S는 LPS를 처리한 비장세포에서 분비하는 사이토카인 중 TNF-α, IL-6의 분비량이 증가됨을 관찰하였다.
- 2). 실험 결과, LPS로 자극하지 않고 배양한 대식세포에서는 CFP-S군이, LPS로 자극하여 배양한 대식세포에서는 CFP군과 CFP-S군이 대조군에 비해 유의적으로 대식세포 활성이 높았다(Fig. 2).
- 4주간 각 물질을 250 ㎎/㎏ BW/day로 경구 투여시킨 후 마우스 복강 대식세포와 비장세포를 분리하여 각각의 세포 증식도을 평가하였으며, 각 세포에서 분비하는 사이토카인의 분비량을 측정하였다. 실험 결과, 마우스 대식세포의 증식은 CFP 경구 투여군과 CFP-S 경구 투여군이 높게 나타났다. 또한 비장세포의 증식에 있어서는 CFP 경구 투여군이 대조군에 비해 높게 나타났다.
- 실험 결과, 미토젠을 첨가하지 않은 비장세포는 CFP군이 124.69±20.65%, CFP-S군이 126.38±33.66% 그리고 CFP-L군은 118.88±28.86%로 대조군에 비해 높은 상대활성을 나타내었고, 모두 유의적인 차이를 나타내었다.
- 이상의 연구 결과를 바탕으로 유색미 미강 1차 발효물(CFP)와 2차 발효물 중 효모로 발효시킨 CFP-S가 마우스에 경구투여 시 면역과 관련된 세포의 활성을 증가시키고, 이 세포에서 분비되는 면역인자인 사이토카인의 분비량을 증가시키는 것으로 나타났다. 반면, 2차 발효물 중 유산균으로 2차 발효시킨 CFP-L은 면역 활성에 효과를 나타내지 않았다.
- 2)와 비교해 볼 때 유사한 결과를 보여주고 있다. 즉, 대식세포의 증식이 활성화됨으로써 대식세포에서 분비되는 사이토카인의 분비도 증가된 것을 알 수 있다. Ryu(2008)의 연구 결과에 의하면 율무 추출물이 경구 투여를 통해 면역 활성을 측정할 때 대식세포에서 분비되는 사이토카인을 측정함으로 대식세포 활성화의 지표로 삼고 있다.
- 본 연구에서도 각 시료들의 경구 투여가 비장세포를 증식을 활성화시키는 결과를 나타내었다. 특히 대조군과 상대 비교 시 미토젠을 첨가한 조건보다 첨가하지 않고 배양한 조건에서 유의적인 차이를 나타내었다. 미토젠과 관련하여 Cho 등(1998)은 다시마 분말 투여에 의한 당뇨쥐의 비장 세포 기능에 관한 연구에서 4주간의 투여에 의해 비당뇨군의 비장 세포 증식능이 촉진되었고, 특히 LPS와 Con A 첨가에 의해 비장 세포 증식능이 3배까지 상승하였음을 보고하였으며, Kwon 등(2001)은 동충하초를 4주간 투여한 마우스의 비장세포를 미토젠과 같이 배양 시 비장세포 증식능이 상승하였음을 보고하였다.
후속연구
- 본 연구 결과에서는 명확한 근거자료를 제시할 수 없으나, 비장세포와 관련된 체액성 면역에 관해서는 2차 발효물에 의한 면역 효과보다는 1차 발효물인 CFP의 면역 효과가 더 우수한 것으로 판단된다. 그러나 2차 발효물 중 CFP-S는 대식세포 활성에 효과적이었으므로 이에 대한 연구는 차후 더 이루어져야 할 것으로 판단된다.
- 그러나 본 연구에서는 유색미 미강 발효물과 일반미의 미강발효물의 면역활성 효과를 비교하지 않았고, 유색미 미강의 어떤 물질이 면역활성에 기여했을 지는 판단하기 어렵다. 따라서 앞으로 1차 발효물과 2차 발효물의 기능성 다당체의 성분과 또한 항산화 효과를 기대한 안토시아닌 함량 분석하고, 2차 발효시 미강에 존재하는 기능성 다당체들의 수율과 활성의 변화를 평가할 필요가 있다고 판단된다. 이 같은 연구는 유색미 미강의 이용가치를 높이고, 식품 소재 개발에 있어서 중요한 기초자료가 될 것으로 보인다.
- 효모발효물에 대한 연구 결과 중 다시마의 기능성 다당체를 효모로 발효한 물질이 항염 활성을 나타낸 것으로 보고되었다(Eom 등 2010). 따라서 차후 CFP-S의 성분을 분석하고, 면역에 영향을 주는 기능성 성분에 대한 연구가 수행되어야 된다고 생각된다.
- 따라서 저가의 미강을 이용한 기능성 식품 소재의 개발은 부가가치가 높은 생산품으로 농가 소득의 증대를 불러올 수 있을 것이다. 뿐만 아니라 차후 면역 관련 기능성 소재로 새로운 건강기능식품 개발을 이끌 수도 있다. 여러 연구 결과, 유색미 미강에 색소로 존재하는 안토시아닌은 항산화 활성이 있음이 보고되어 왔고, 미강의 표고버섯 균사체 발효로 생성된 다당체 성분은 면역 증진 작용 및 항암 작용을 가지고 있는 것으로 보고되고 있다.
- 따라서 앞으로 1차 발효물과 2차 발효물의 기능성 다당체의 성분과 또한 항산화 효과를 기대한 안토시아닌 함량 분석하고, 2차 발효시 미강에 존재하는 기능성 다당체들의 수율과 활성의 변화를 평가할 필요가 있다고 판단된다. 이 같은 연구는 유색미 미강의 이용가치를 높이고, 식품 소재 개발에 있어서 중요한 기초자료가 될 것으로 보인다.
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