[논문]LPS로 유도된 RAW 264.7 cell의 염증반응에서 MAPK 조절에 의한 가감당귀음자(加減當歸飮子)의 항염증 효과

김태연

LPS로 유도된 RAW 264.7 cell의 염증반응에서 MAPK 조절에 의한 가감당귀음자(加減當歸飮子)의 항염증 효과
Effect of Gagam-Danguieumja through Regulation of MAPK on LPS-Induced Inflammation in RAW 264.7 Cells 원문보기

대한한방내과학회지 = The journal of internal Korean medicine, v.34 no.4, 2013년, pp.339 - 348

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : Danguieumja is a traditional medicinal prescription to treat skin disease. It was commonly used for the treatment of itching, chronic urticaria and atopic dermatitis in Korea by the addition or omission of several herbs. This study investigated the anti-inflammatory potential of Gagam-Danguieumja (GDE) water extract. Methods : We examined the effects of GDE on the lipopolysaccharide (LPS)-induced production of nitric oxide (NO) in a murine macrophage cell line, RAW 264.7 cells. Results : GDE inhibited production of NO in a dose dependent manner and also decreased the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2). As a possible molecular mechanism of anti-inflammatory effect increased phosphorylation of mitogen-activating protein kinases (MAPK) by LPS were blocked by GDE treatment. Conclusions : These results suggest that GDE has an anti-inflammatory therapeutic potential through the inhibition of MAPK phosphorylation, thereby decreasing the expression of pro-inflammatory genes.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

본 저자는 염증성 질환에 대한 GDE의 효과를 확인하기 위하여 GDE를 RAW 264.7 cells에 전처리한 후 lipopolysaccharide(LPS)로 유도된 NO의 생성 및 iNOS와 COX-2 발현에 미치는 영향과 GDE가 염증반응의 주요 신호전달 분자인 MAPK의 인산화를 차단하여 염증매개물질에 대한 염증 억제효과를 나타내는지에 대하여 연구한 결과 유의한 결과를 얻었기에 이에 보고하는 바이다.

대상 데이터

RAW 264.7 cells은 한국 세포주 은행(Korea Cell Line Bank, KCLB, No. 40071)(Seoul, Korea)에서 분양받았으며 세포의 배양을 위하여 10% heatinactivated FBS과 1% penicillin 및 streptomycin을 포함한 DMEM 배양액에서 배양하였다. 세포는 37 ℃ 5% CO₂ 조건하에서 배양하였고, 2일마다 배지를 교환하였으며, 세포의 증식에 따른 과밀도 현상을 해소하기 위하여 계대 배양하였다.
본 실험에 사용된 GDE 2첩(240 g)은 세명대학교 제천한방병원에서 구입하였으며 증류수로 水洗한 뒤 3 L의 증류수를 加하여 3시간 동안 가열 추출하였다. 추출된 용액을 원심분리를 통하여 상층액을 취한 뒤 Rotary evaporator(NE-1001, EYELA, JAPAN)로 200 ml가 되도록 감압 농축한 후 -80℃에서 동결시켰다.

데이터처리

각 실험군 간의 통계학적 분석은 SPSS 17.0 K for Windows 통계 프로그램 패키지를 사용하여 oneway-analysis of variance를 실시하였으며 유의수준은 p<0.05로 하였다.

이론/모형

GDE가 RAW 264.7 cells의 생존율에 미치는 영향을 알아보기 위하여 MTT assay를 실시하였다. 아무런 처리를 하지 않은 대조군의 흡광도 평균을 100으로 정하고 각 흡광도 값을 환산하여 계산한 결과, 0, 0.
LPS 자극에 의한 RAW 264.7 cells의 NO 생성 증가 기전에 미치는 GDE의 작용을 확인하기 위하여 NO assay를 실시하였다. LPS만 처리한 대조군의 NO 생성량은 7.

성능/효과

3. GDE는 mitogen-activated protein kinase(MAPK) 경로인 p38, ERK, JNK의 인산화를 억제하였다.
1. GDE는 NO 생성을 억제하였다.
2. GDE는 iNOS, COX-2의 mRNA 발현을 감소시켰다.
이러한 결과를 바탕으로 GDE는 항염증효과가 있을 것으로 사료된다.

후속연구

이와 같은 항염증반응효과는 iNOS와 COX-2의 mRNA 발현을 효과적으로 감소시킴으로써 일어나며, MAPK 경로의 억제를 통해 NO생성을 경감시키는 것으로 사료된다. 이러한 결과들을 통해 GDE은 항염증 효과를 지니고 있으며 향후 GDE가 단백질 수준에서 염증 발현에 관여하는 iNOS와 COX-2의 억제효과 확인, NF-kB signaling 관련 여부, COX-2에 의해 생성되는 염증매개인자인 PGs 확인 등의 추가적인 연구를 통해 피부 질환을 비롯한 각종 염증 질환의 효과적인 치료처방으로 제시될 수 있을 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	염증은 무엇인가?	염증은 인체에 침입한 병원체나 내인적으로 유발되는 염증활성인자를 인지하고 제거하기 위해 활성화되는 인체의 적극적인 생체 방어 기전이다. 적절한 염증 반응은 외•내인적 인자로부터 인체를 보호하는 필수 불가결한 반응이나, 과도하고 부적절한 염증 반응은 정상 조직의 파괴와 더불어 암과 대사성 질환 등 다양한 질환의 원인으로 작용할 수 있다1.
	적절한 염증 반응의 특징은?	염증은 인체에 침입한 병원체나 내인적으로 유발되는 염증활성인자를 인지하고 제거하기 위해 활성화되는 인체의 적극적인 생체 방어 기전이다. 적절한 염증 반응은 외•내인적 인자로부터 인체를 보호하는 필수 불가결한 반응이나, 과도하고 부적절한 염증 반응은 정상 조직의 파괴와 더불어 암과 대사성 질환 등 다양한 질환의 원인으로 작용할 수 있다1.
	염증을 일으키는 inflammagen으로 사용된 LPS의 역할은 무엇인가?	LPS는 생체 내에서 염증을 일으키는 inflammagen 으로 널리 사용되어 왔다. LPS는 염증반응 병원체의 중심적 역할을 하며, nitric oxide(NO), prostaglandin E2(PGE2) 및 leukotriene과 같은 염증매개체의 생성을 자극하며, 이 염증매개체의 신호경로를 자극 한다22,23. 본 연구에서는 GDE의 염증성 질환에 대한 효과를 확인하기 위하여 RAW 264.

참고문헌 (33)

Kindt TJ, Goldsby RA, Osborne BA. Innate immunity : Tenney S. Kuby Immunology. 6th ed. New York: Freeman press; 2007, p. 52-73.
박상미, 변성희, 김영우, 조일제, 김상찬. 桑葉추출물의 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서의 항염증 효과. 대한본초학회지 2012;27(3):31-8.

원문보기 상세보기
嚴用和. 濟生方. 中國醫學大系券十一. 서울: 여강출판사; 1987, p. 522.
차관배, 김윤식, 설인찬. 아토피 피부염에 관한 文獻的考察. 대전대학교 한의학연구소 논문집 2005;14(2):113-26.

원문보기 상세보기
세명대학교 부속 제천한방병원. 원내 처방집. 제천: 인성사; 2009, p. 211.
이건학, 노석선. 乾癬에 활용되는 加味當歸飮子에 대한 실험적 연구. 대한외관과학회지 1999; 19(2):113-42.
심상신, 김종한, 최정화. 당귀음자가감을 응용한 건선 환자 1례에 대한 임상적 고찰. 대한한방안 이비인후피부과학회지 2002;5(1):336-42.
민들레, 장성진, 박은정. 當歸飮子加減方과 外治法을 병용한 小兒乾癬치험 1례. 대한한방소아과학회지 2012;26(3):20-9.

원문보기 상세보기
노석선. 當歸飮子水抽出液이 抗allergy 反應과 mouse의 免疫細胞機能에 미치는 영향. 원광대학교 대학원, 1990.
한재경, 김윤희. 加味當歸飮子가 아토피 동물 모델에 미치는 영향. 대한한방소아과학회지 2005; 19(1):34-52.
한경훈, 박은정, 이해자. 當歸飮子加減方의 처방별(A, B) 아토피성 알레르기반응 조절 효과 비교 연구. 대한한방소아과학회지 2005;19(2) :13-30.

원문보기 상세보기
김성훈, 최정화, 김종한, 박수연. 當歸飮子加減方과 外治方병용이 NC/Nga 아토피 생쥐에 미치는 영향. 한방안이비인후피부과학회지 2005; 18(1):27-49.

원문보기 상세보기
송성필, 손대범, 황치환, 송승현, 황충연. 當歸飮子와 三黃洗劑加味方병용이 NC/Nga 아토피 생쥐에 미치는 영향. 동의생리병리학회지 2007; 21(5):1210-8.

원문보기 상세보기
류순현, 최요섭, 김정진, 정기현, 김영석, 김태경. 當歸飮子로 好轉된 中風患者의 anticonvulsant hypersensitivity syndrome 1例. 대한한방내과학회지 2002;23(2):268-73.

원문보기 상세보기
이상인. 방제학. 서울: 영림사; 1990, p. 171-2.
이상인, 안덕균, 신민효, 노승현, 이영종, 김선희. 한약임상응용. 서울: 성보사; 1998, p. 90-1, 107-8, 356-7, 433-6.
전국한의과대학 본초학교수. 본초학. 서울: 영림사; 2000, p. 127, 131, 518, 534, 540, 583.
曹世榮. 活幼心書(明本論). 上海: 大東書局; 1933, p. 2-8.
Robbins SL, Kumar V, Cotran RS. Acute and chronic inflammation : Mitchell S. Pathologic basis of disease. 7th ed. Philadelphia: W. B. Saunders Co.; 2006, p. 47-86.
Dong C, Davis RJ, Flavell RA. MAP kinases in the immune response. Annu Rev Immunol 2002;20:55-72.

상세보기
김범회, 이용태, 강경화. LPS로 유도된 RAW264.7 염증모델에서 MARK 조절에 의한 羊乳의 항염증효과. 동의생리병리학회지 2010;24(1):80-4.

원문보기 상세보기
Raabe T, Bukrinsky M, Currie RA. Relative contribution of transcription and translation to the induction of tumor necrosis factor-alpha by lipopolysaccharide. J Biol Chem 1998;273(2) :974-80.

상세보기
Dawson TM, Dawson VL, Snyder SH. A novel neuronal messenger molecule in brain: The free radical, nitric oxide. Ann. Neurol 1992;32:297-311.

상세보기
Yui Y, Hattori R, Kosuga K, Eizawa H, Hiki K, Kawai C. Purification of nitric oxide synthase from rat macrophages. J Biol Chem 1991;266 :12544-7.
Korhonen R, Lahti A, Hamalainen M, Kankaanranta H, Moilanen E. Dexamethasone inhibits inducible nitric-oxide synthase expression and nitric oxide production by destabilizing mRNA in lipopolysaccharide-treated macrophages. Mol Pharmacol 2002;62(3):698-704.

상세보기
Vegeto E, Bonincontro C, Pollio G, Sala A, Viappiani S, Nardi F, et al. Estrogen prevents the lipopolysaccharide-induced inflammatory response in microglia. J Neurosci 2001;21(6) :1809-18.

상세보기
Wang MJ, Lin WW, Chen HL, Chang YH, Ou HC, Kuo JS, et al. Silymarin protects dopaminergic neurons against lipopolysaccharide-induced neurotoxicity by inhibiting microglia activation. Eur J Neurosci 2002;16(11):2103-12.

상세보기
Hanisch UK. Microglia as a source and target of cytokines. Glia 2002;40(2):140-155.

상세보기
Chen W, Tang Q, Gonzales MS, Bowden GT. Role of p38 MAP kinases and ERK in mediating ultraviolet-B induced cyclooxygenase-2 gene expression in human keratinocytes. Oncogene 2001;20(29):3921-6.

상세보기
Marina L, Kamal RM, Andrew F, Gary B, Jeremy S, Andrew RC. Regulation of Cyclooxygenase 2 mRNA Stability by the Mitogen-Activated Protein Kinase p38 Signaling Cascade. Mol Cell Biol 2000;20(12):4265-74.

상세보기
Mitchell JA, Larkin S, Williams TJ. Cyclooxygenase-2 :regulation and relevance in inflammation. Biochem Pharmacol 1995;50:1535-42.

상세보기
Crofford LJ, Lipsky PE, Brooks P, Abramson SB, Simon LS, Van de Putte LB. Basic biology and clinical application of specific cyclooxygenase-2 inhibitors. Arthritis Rheum 2000;43(1):4-13.

상세보기
김영선, 이성근, 이기상. 大？가 LPS로 유도된 Mouse BV2 Microglial cells의 염증반응에 미치는 영향. 대한한방내과학회지 2008;29(4):1048-60.

원문보기 상세보기

저자의 다른 논문 :

LOADING...

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증