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문제 정의
- ICR (7주령) 마우스를 대상으로 黃連解毒湯 추출물이 compound 48/80과 히스타민으로 유발한 가려움증을 억제하는 효과가 있는지 알아보았다. 그 결과 Fig.
- 따라서 본 연구는 黃連解毒湯을 대상으로 활성화된 렛트 복강 비만세포(rat peritoneal mast cells, RPMCs)에서 tumor necrosis factor-α (TNF-α), IL-1β와 히스타민(histamine) 조절에 대한 黃連解毒湯의 가려움증 완화에 대한 효과를 조사하였으며, 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB) 유도 아토피 피부염 유사모델 마우스에서 귀 부종과 피부염 완화 및 IgE와 IL-4의 생성 억제에 대한 실험을 통하여 黃連解毒湯이 아토피 피부염 개선에 유의한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.
제안 방법
- DNFB로 감작한 마우스로부터 IgE와 사이토카인의 측정은 추출물(25-200μg/mL) 투여 종료 후 12시간에 혈청을 취하고 혈청으로부터 IgE, IL-4를 측정하였다.
- RPMCs로부터 사이토카인의 측정은 추출물(25-200 μg/mL)을 10분 동안 전 처리한 후 PMA (30 ng/mL)와 A23187 (10 μM)로 동시에 자극한 다음 30분에 세포 상층액으로부터 TNF-α와 IL-1β를 측정하였다.
- 黃連解毒湯 추출물이 RPMCs에서 전염증성 사이토카인의 생성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 RPMCs(1×106/mL)를 접종하고 각각의 추출물을 25-200 μg/mL 농도로 30분간 전 처리한 다음 PMA (30 ng/mL)와 A23187 (10 μM)을 동시에 처리하고 18시간 후 배양액에 축척된 TNF-α 와 IL-1β 양을 측정하였다.
- 黃連解毒湯 추출물이 RPMCs에서 히스타민의 방출에 미치는 영향을 알아보기 위하여 RPMCs (1×106/mL)를 접종하고 각각의 추출물을 25-200μg/mL 농도로 15분간 전 처리한 다음 compound 48/80 (0.5 μg/mL)을 처리하고 30시간 후 방출된 히스타민 양을 측정하였다.
- 실험에 사용한 黃連, 黃芩, 黃柏, 梔子는 경동시장(서울시, 대한민국)에서 구입하였으며, 圓光大學校 韓醫科大學 方劑學敎室에서 형태학적 및 화학적으로 동정하여 사용하였으며, 증거표본은 방제학교실에 보관 중에 있다. 黃連解毒湯은 Table 1과 같이 黃連, 黃芩, 黃柏 및 梔子를 각각 36g 씩 정량하여 총 114g으로 조성하여 한약추출기(대웅 약탕기, SK-1600))에 넣고, 2,000 mL 증류수를 첨가하여 100℃에서 3시간 동안 煎湯하였다. 이와 같이 추출한 추출물은 5,000 rpm으로 30분간 원심침전시켜 상층액을 취하고 0.
- 가려움증 유발 물질을 주사한 마우스는 곧바로 micro-camera (ONCCTV, 서울, 대한민국)를 사용하여 60분 동안 녹화하였으며, 뒷발로 가려움증 유발 물질이 주입된 부위를 긁는 횟수를 이중맹검법으로 계수하여 평가하였다.
- 그러므로 본 연구는 가려움증에 대한 효과를 알아보기 위해서 먼저 黃連解毒湯 추출물을 전처리하고 PMA와 A23187로 RPMCs을 자극하여, TNF -α 및 IL-1β 생성을 조사하였다.
- 15% DNFB를 제조하여 1일과 4일에 두 번 귀 등(25μL)과 등 쪽 피부(100 μL)에 감작(sensitization)하였다. 두 번째 감작일인 4일부터 대조군은 생리식염수 만 복강에 하루에 한번 실험 종료일까지 주사하였고, 실험군은 추출물(25-100 mg/kg)을 복강에 하루에 한번 실험 종료일인 13일까지 주사하였다. 첫 번째 감작일로부터 7일, 10일과 13일에 3일 간격으로 0.
- 마지막 공격 후 5시간 후에 마우스의 간 문맥으로부터 혈액을 채취하여 혈청을 얻고, 귀 조직과 등 피부조직의 두께는 verner digital caliper (Mitutoyo, Japan)를 사용하여 측정하였다.
- 무균환경에서 사육된 7주령의 수컷 hairless 와 ICR 마우스 그리고 10주령의 Sprague Dawley 렛트는 중앙실험동물(주)(서울시, 대한민국)에서 구입하였고, 사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일간 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 사육환경은 낮과 밤의 주기를 12시간씩 하였고, 온도(20-22℃) 와 습도(50-60%)는 일정하게 유지하였으며, 실험동물위원회의 규정에 준하여 실험하였다.
- 실험 과정에 따라 대조군과 실험군을 대상으로 희생시키고, 피부조직 약 5x5 mm를 적출하여 4% paraformaldehyde(pH 7.4)로 고정하고 일련의 과정을 통하여 파라핀 블록을 제작한 후, 5 μm 간격으로 피부조직을 종단면으로 절편하였다.
- 실험을 시작하기 전에 실험군당 5마리의 마우스를 각각 투명 아크릴 케이지(20×26×13cm)에 한 마리씩 넣고, 안정을 위해 30분 동안 동일한 실험 환경에 방치하였다.
- 아토피 피부염 유사 모델을 유도하기 위해서 acetone과 olive 오일을 3:1로 제조된 용매에 0.15% DNFB를 제조하여 1일과 4일에 두 번 귀 등(25μL)과 등 쪽 피부(100 μL)에 감작(sensitization)하였다.
- 요약하면, 세포상층액 (100 μL) 또는 혈청 (20-50 μL)을 각각의 항체가 코팅된 plate에 주입하고 반응시킨 후 잘 세척한 다음 horseradish peroxidase가 부착된 2차 항체를 주입하고 반응시킨 후 발색 기질을 주입하고 반응시켜 ELISA reader (Molecular Devices, USA)로 측정하였으며, 각 물질에 대한 정량은 각각의 물질을 농도별로 처리하여 반응시켜 표준곡선을 정하고 세포상층액 또는 혈청에 함유된 물질의 량을 계산하였다.
- 3). 이번 연구에서는 compound 48/80 또는 히스타민을 마우스 등쪽에 피하주사(subcutaneous injection) 하여 가려움증 유발 물질이 주입 된 부위를 마우스 뒷발로 긁는 횟수를 측정하여 가려움증과 연관된 행위라 간주하고 이를 가려움증 유발 동물모델로 제시하였는데, 이는 黃連解毒湯이 아토피 피부염 치료 또는 개선에 사용할 수 있는 근거로 제시할 수 있으며, 이러한 결과로 Kuraishi 등27)의 보고와 일치한다.
- 조직학적 검사와 백혈구 침윤을 검사하기 위해 hematoxylin & eosin 또는 toluidine blue로 염색하고 저배율(X40)에서 관찰하고 확대하면서 X100현미경 시야에서 사진을 찍어 제시하였고, 백혈구의 침윤을 확인하기 위해 X400 현미경 시야에서 검경하였다(Leica, Wetzbre, Germany).
- 두 번째 감작일인 4일부터 대조군은 생리식염수 만 복강에 하루에 한번 실험 종료일까지 주사하였고, 실험군은 추출물(25-100 mg/kg)을 복강에 하루에 한번 실험 종료일인 13일까지 주사하였다. 첫 번째 감작일로부터 7일, 10일과 13일에 3일 간격으로 0.2% DNFB를 감작시킨 부위에 같은 용량으로 공격(challenge)을 하였다.
- 실험을 시작하기 전에 실험군당 5마리의 마우스를 각각 투명 아크릴 케이지(20×26×13cm)에 한 마리씩 넣고, 안정을 위해 30분 동안 동일한 실험 환경에 방치하였다. 추출물(25-200 mg/kg))은 멸균증류수에 용해하여 각 마우스 당 0.20 mL 씩 경구투여 하였다. Compound 48/80은 인산완충액(phosphate buffer saline, pH 7.
- 피부상태는 0주째부터 1주 간격으로 4주 동안 사진을 찍어 조사하였다. 피부의 건조상태(dryness) 와 스켈링(scaling) 그리고 미란(erosion), 찰과상(excoriation), 출혈 등을 체크하여 병변이 없는 상태를 0점(none), 가벼운 상태를 1점(mild), 중간 상태를 2점(moderate), 심한상태를 3점(severe)을 주었고 각 단계별로 총점수부여하여 평가하였다.
- 피부상태는 0주째부터 1주 간격으로 4주 동안 사진을 찍어 조사하였다. 피부의 건조상태(dryness) 와 스켈링(scaling) 그리고 미란(erosion), 찰과상(excoriation), 출혈 등을 체크하여 병변이 없는 상태를 0점(none), 가벼운 상태를 1점(mild), 중간 상태를 2점(moderate), 심한상태를 3점(severe)을 주었고 각 단계별로 총점수부여하여 평가하였다.
- 황련 추출물(25-200 μg/mL)은 RPMCs (2×105)에 10분간 전 처리한 후 compound 48/80이나 PMA와 A23187로 자극하여 히스타민과 전염증성 사이토카인 측정에 사용하였다.
대상 데이터
- Phorbol 12- myristate 13-acetate (PMA), calcium ionophore A23187, 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB), dimethyl sulfoxide (DMSO), percoll, hematoxylin & eosin, toluidine blue, HEPES와 기타 시약은 Sigma-Aldrich (USA)로부터 구입했으며, RPMI 1640 배지, fetal bovine serum (FBS)와 penicillin /streptomycin는 Gibco BRL (Grand Islang, NY, USA)로부터 구입하였다.
- Tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin -1β (IL-1β), IL-4, immunoglobulin E (IgE), histamine ELISA kit들은 R&D Systems (Minneapolis, USA)로부터 구입하였다.
- 무균환경에서 사육된 7주령의 수컷 hairless 와 ICR 마우스 그리고 10주령의 Sprague Dawley 렛트는 중앙실험동물(주)(서울시, 대한민국)에서 구입하였고, 사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일간 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 사육환경은 낮과 밤의 주기를 12시간씩 하였고, 온도(20-22℃) 와 습도(50-60%)는 일정하게 유지하였으며, 실험동물위원회의 규정에 준하여 실험하였다.
- 실험에 사용한 黃連, 黃芩, 黃柏, 梔子는 경동시장(서울시, 대한민국)에서 구입하였으며, 圓光大學校 韓醫科大學 方劑學敎室에서 형태학적 및 화학적으로 동정하여 사용하였으며, 증거표본은 방제학교실에 보관 중에 있다. 黃連解毒湯은 Table 1과 같이 黃連, 黃芩, 黃柏 및 梔子를 각각 36g 씩 정량하여 총 114g으로 조성하여 한약추출기(대웅 약탕기, SK-1600))에 넣고, 2,000 mL 증류수를 첨가하여 100℃에서 3시간 동안 煎湯하였다.
- 요약하면, 에테르(ether)로 마취시킨 다음 calcium-free HEPES-Tyrode buffer를 10 mL을 복강에 주입시켜 약 90초간 복강을 부드럽게 맛사지한 후 복강을 주의 깊게 열어 Pasteur pipette 을 사용하여 세포부유액을 취하고 percoll density gradient법으로 RPMCs를 얻었다. 특별히 본 실험 목적에 따라 충분한 세포를 확보하기 위해서 5-10마리 렛트에서 얻은 복강비만세포를 혼합하여 사용하였다. 황련 추출물(25-200 μg/mL)은 RPMCs (2×105)에 10분간 전 처리한 후 compound 48/80이나 PMA와 A23187로 자극하여 히스타민과 전염증성 사이토카인 측정에 사용하였다.
데이터처리
- 모든 실험값은 평균±표준편차로 표시했으며, 통계분석은 ANOVA와 Student’s t-test로 처리하였으며, 유의성 한계는 p<0.05로 정하였다.
이론/모형
- IgE와 IL -4는 각각에 특이적으로 작용하는 ELISA kit을 사용하여 R&D Systems사가 제공하는 방법에 준하여 측정하고 정량하였다.
- Experimental groups received a various concentrations (25-200 mg/kg ) of HHT with ip for 10 days from 4 to 13 days. Levels of IL-4 and IgE were measured by ELISA method. Epidermal skin tissue thickness was measured by verner calipers.
- 건강한 수컷 Sprague Dawley 렛트로부터 복강비만세포(rat peritoneal mast cells, RPMCs)의 분리는 Martynova 등19)의 방법에 따라 분리하였다. 요약하면, 에테르(ether)로 마취시킨 다음 calcium-free HEPES-Tyrode buffer를 10 mL을 복강에 주입시켜 약 90초간 복강을 부드럽게 맛사지한 후 복강을 주의 깊게 열어 Pasteur pipette 을 사용하여 세포부유액을 취하고 percoll density gradient법으로 RPMCs를 얻었다.
- 의 방법에 따라 분리하였다. 요약하면, 에테르(ether)로 마취시킨 다음 calcium-free HEPES-Tyrode buffer를 10 mL을 복강에 주입시켜 약 90초간 복강을 부드럽게 맛사지한 후 복강을 주의 깊게 열어 Pasteur pipette 을 사용하여 세포부유액을 취하고 percoll density gradient법으로 RPMCs를 얻었다. 특별히 본 실험 목적에 따라 충분한 세포를 확보하기 위해서 5-10마리 렛트에서 얻은 복강비만세포를 혼합하여 사용하였다.
성능/효과
- 1) 黃連解毒湯은 PMA와 A23187로 활성화된 RPMCs에서 TNF-α와 IL-1β의 생성을 농도 의존적으로 억제하였다.
- 2) 黃連解毒湯은 compound 48/80으로 자극된 RPMCs에서 히스타민의 방출을 농도 의존적으로 억제하였다.
- 3) 黃連解毒湯은 compound 48/80과 히스타민에 의해 유도된 가렴움증을 농도 의존적으로 완화시켰다.
- 4) 黃連解毒湯은 DNFB로 유도된 아토피 피부염 유사모델에서 귀 부종, 피부두께, 피부병변, 염증성 백혈구 침윤 및 혈청의 IL-4와 IgE생성을 농도 의존적으로 억제하는 효과가 있었다.
- Hairless 마우스를 대상으로 DNFB로 아토피 피부염 유사 모델 동물을 유도하여 귀부종에 미치는 黃連解毒湯 추출물의 효과를 알아본 결과 Fig. 5와 같이 DNFB로 유도된 마우스의 피부조직은 극세포증(acanthosis), 각질증식증(hyperkeratosis), 상처 및 출혈 수준이 매우 심각할 뿐만 아니라 백혈구의 침윤이 많이 관찰되었으나, 黃連解毒湯 추출물을 투여한 결과 농도 의존적으로 그 증상과 백혈구 침윤이 현저히 줄어 들었다. 또한 Fig.
- Hairless 마우스를 대상으로 DNFB로 아토피 피부염 유사 모델 동물을 유도하여 귀부종에 미치는黃連解毒湯 추출물의 효과를 알아본 결과 Fig. 4 A과 같이 DNFB만 처리한 대조군은 정상 대조군에 비해서 현저히 귀부종이 유발된 반면, 黃連解毒湯 추출물을 투여한 실험군에서는 농도에 의존적으로 귀 부종이 개선되었다. 즉 Fig.
- 그 결과 Fig. 1과 같이 PMA와 A23187를 처리한 대조군은 정상 대조군에 비해서 TNF-α 생성이 1,012± 125 pg/mL 로 현저히 증가(p<0.001)한 반면, 黃連解毒湯 추출물을 처리한 실험군에서는 의존적으로 TNF-α생성 억제 효과가 있었다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- 그 결과 Fig. 2과 같이 compound 48/80를 처리한 대조군은 아무런 약물을 처리하지 않은 정상 대조군에 비해서 히스타민이 77.25±7.2 ng/mL로 현저히 증가 (p<0.001)한 반면, 黃連解毒湯 추출물을 처리한 실험군에서는 의존적으로 히스타민 방출 억제 효과가 있었다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- 그 결과 Fig. 3A와 같이 compound 48/80으로 유발한 가려움증으로 인한 긁는 횟수가 257.5±20.7로 현저히 증가한 반면(p<0.001), 추출물을 농도별로 처리한 군이 실험 대조군에 비하여 농도 의존적으로 가려움증 억제 효과를 보임을 알 수 있었다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- 그 결과 농도에 의존적으로 TNF-α 및 IL-1β를 억제시키는 유효한 효과가 있었다(Fig. 1).
- 그러나 DNFB로 유도되고 黃連解毒湯 추출물이 처리된 실험군은 농도에 의존적으로 피부두께와 피부병변이 현저히 개선되었는데((p<0.05, p<0.01, p<0.001)), 100 mg/kg 과 200 mg/kg 투여군에서는 정상조직과 유사한 피부조직 소견을 보였다.
- 이상의 실험결과를 종합하여 보면 黃連解毒湯은 활성화된 비만세포의 전염증성 사이토카인과 히스타민을 억제할 뿐만 아니라 가려움증 완화에 유효한 효과가 있었다. 더불어 DNFB로 유도한 아토피 유사 모델동물에서 귀의 부종 완화와 피부 병변을 현저히 개선시켰을 뿐만 아니라 아토피 피부염의 핵심 원인 분자인 IgE와 IL-4를 효과적으로 억제하는 결과를 보여주었다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때 黃連解毒湯이 아토피 피부염 치료 또는 개선에 일정한 효과가 있음을 제시하였고, 앞으로 보다 效果的이고 副作用이 없으면서, 實用性이 높은 黃連解毒湯을 이용한 治療劑 開發에 대한 많은 도움이 될 것으로 생각된다.
- 더욱이 Fig. 6과 같이 DNFB로 유도된 마우스 혈청에서 IL-4 (790.5±66.7 pg/mL)와 IgE (2,103±314 pg/mL)으로 현저히 증가한(p<0.001) 반면, 黃連解毒湯 추출물이 처리된 실험군은 농도에 의존적으로 IL-4와 IgE 가 현저히 억제되는 효과를 보였다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- 또한 Fig. 3B 와 같이 히스타민으로 유발한 가려움증으로 인한 긁는 횟수가 153.4±15.2로 현저히 증가한 반면 (p<0.001), 추출물을 농도별로 처리한 군이 실험대조군에 비하여 농도 의존적으로 가려움증 억제 효과를 보임을 알 수 있었다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- 또한 Fig. 4 C와 같이 귀조직을 H&E로 염색한 결과 DNFB 처리 실험 대조군은 심한 부종과 함께 백혈구의 침윤이 현저히 유발된 반면, 黃連解毒湯 추출물을 투여한 실험군에서는 농도에 의존적으로 백혈구의 침윤의 억제와 염증현상이 현저히 개선되는 효과가 있었다.
- 1). 또한 黃連解毒湯 추출물이 활성화된 비만세포의 히스타민 방출에 미치는 영향을 조사한 결과 농도에 의존적으로 히스타민 방출을 억제시키는 효과도 있었으며(Fig. 2), 아토피 피부염 증상의 핵심인 가려움증 경감에 미치는 효과를 검증한 결과 가려움증 경감에 유효한 효과가 있었다(Fig. 3). 이번 연구에서는 compound 48/80 또는 히스타민을 마우스 등쪽에 피하주사(subcutaneous injection) 하여 가려움증 유발 물질이 주입 된 부위를 마우스 뒷발로 긁는 횟수를 측정하여 가려움증과 연관된 행위라 간주하고 이를 가려움증 유발 동물모델로 제시하였는데, 이는 黃連解毒湯이 아토피 피부염 치료 또는 개선에 사용할 수 있는 근거로 제시할 수 있으며, 이러한 결과로 Kuraishi 등27)의 보고와 일치한다.
- 또한 대조군은 정상 대조군에 비해서 IL-1β생성이 367± 31 pg/mL로 현저히 증가(p<0.001)한 반면, 黃連解毒湯 추출물을 처리한 실험군에서는 의존적으로 IL-1β-α생성 억제 효과가 있었다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- . 본 연구에도 DNFB 로 아토피 피부염 유사모델에 黃連解毒湯 추출물은 귀의 부종과 피부병변 개선에 우수한 효과가 있었다. 즉, DNFB로 유도된 피부조직의 극세포증(acanthosis), 각질증식증(hyperkeratosis)이나, 상처 및 출혈을 현저히 개선하는 효과가 있었다.
- 또한 梔子는 geniposide, genipin, geniposidic acid, crocetin, crocin 등 생리활성 성분이 함유되어 있고24) , 梔子 유래 iridoids계열의 화합물은 급성 및 만성 염증을 억제하는 효과가 있는 것으로 보고되었다25) . 본 연구의 결과 黃芩, 黃連, 黃柏, 梔子등으로 구성된 黃連解毒湯은 활성화된 RPMCs의 전 염증성 사이토카인과 가려움 유발물질로 유도된 피부 가려움증을 효과적으로 억제하였을 뿐만 아니라 DNFB로 유도된 아토피 유사 모델 마우스에서 피부병변, 염증성 백혈구의 침윤과 과민반응 매개물을 억제하는 우수한 효과가 있었다.
- 4 C와 같이 귀조직을 H&E로 염색한 결과 DNFB 처리 실험 대조군은 심한 부종과 함께 백혈구의 침윤이 현저히 유발된 반면, 黃連解毒湯 추출물을 투여한 실험군에서는 농도에 의존적으로 백혈구의 침윤의 억제와 염증현상이 현저히 개선되는 효과가 있었다. 이러한 결과로 黃連解毒湯이 가려움증 경감뿐만 아니라 귀 부종과 염증반응 억제에도 우수한 효과가 있음을 알 수있었다.
- 001). 이러한 결과로 黃連解毒湯이 설치류 비만세포의 활성을 억제하여 히스타민 방출을 효과적으로 차단하였음을 알 수 있었다.
- 001). 이러한 결과로 黃連解毒湯이 설치류의 가려움증을 현저히 억제시키는 효과가 있음을 알 수 있었다.
- 001). 이러한 결과로 黃連解毒湯이 피부조직의 부종, 병변, 염증억제 및 과민반응 억제에 에 우수한 효과가 있음을 알 수 있었다.
- 001). 이러한 결과로 설치류 비만세포에서 黃連解毒湯이 전 염증성 사이토카인을 효과적으로 억제함을 알 수 있었다.
- 이와 같이 AD이 급성적으로 진행되면 Th2 사이토카인 뿐만 아니라 CCL17, CCL22와 CCL27과 같은 일련의 Th2 케모카인이 발현됨으로써 염증관련 면역세포가 상처부위로 과다하게 침윤되고 더욱 더 심한 염증반응을 유발하여 피부조직에 부종과 함께 가려움증이 생기며 심각한 피부손상을 일으킨다11-13,15-17) . 이러한 아토피 피부염의 세포생물학적 기전을 감안하여 본 연구는 마지막으로 DNFB로 유도된 아토피 피부염 유사모델에서 혈청의 IL-4와 IgE을 측정한 결과 黃連解毒湯 추출물이 처리된 실험군은 농도에 의존적으로 IL-4와 IgE가 현저히 억제되었다. 이러한 결과는 黃連解毒湯이 Th2와 B세포 반응에 관련된 일정한 작용이 있음을 시사하고 있다.
- 이상의 실험결과를 종합하여 보면 黃連解毒湯은 활성화된 비만세포의 전염증성 사이토카인과 히스타민을 억제할 뿐만 아니라 가려움증 완화에 유효한 효과가 있었다. 더불어 DNFB로 유도한 아토피 유사 모델동물에서 귀의 부종 완화와 피부 병변을 현저히 개선시켰을 뿐만 아니라 아토피 피부염의 핵심 원인 분자인 IgE와 IL-4를 효과적으로 억제하는 결과를 보여주었다.
- 즉 Fig. 4 B와 같이 실험 대조군은 48.9±2.86 mm로 귀 부종이 현저히 증가(p<0.001)한 반면, 추출물을 농도별로 처리한 군은 실험 대조군에 비하여 농도 의존적으로 귀 부종이 현저히 억제되었다(p<0.05, p<0.01, p<0.001).
- 본 연구에도 DNFB 로 아토피 피부염 유사모델에 黃連解毒湯 추출물은 귀의 부종과 피부병변 개선에 우수한 효과가 있었다. 즉, DNFB로 유도된 피부조직의 극세포증(acanthosis), 각질증식증(hyperkeratosis)이나, 상처 및 출혈을 현저히 개선하는 효과가 있었다. 특히 100 mg/kg과 200 mg/kg 투여군에서는 정상조직과 거의 유사한 피부조직 소견을 보 였다.
후속연구
- 이러한 결과를 종합하여 볼 때 黃連解毒湯은 아토피 피부염 치료 또는 개선에 우수한 효과가 있어 實用性이 높은 治療劑 開發에 대한 많은 도움이 될 것으로 생각된다.
- 더불어 DNFB로 유도한 아토피 유사 모델동물에서 귀의 부종 완화와 피부 병변을 현저히 개선시켰을 뿐만 아니라 아토피 피부염의 핵심 원인 분자인 IgE와 IL-4를 효과적으로 억제하는 결과를 보여주었다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때 黃連解毒湯이 아토피 피부염 치료 또는 개선에 일정한 효과가 있음을 제시하였고, 앞으로 보다 效果的이고 副作用이 없으면서, 實用性이 높은 黃連解毒湯을 이용한 治療劑 開發에 대한 많은 도움이 될 것으로 생각된다.
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