[논문]생체분리 면역세포를 이용한 면역기전 연구

김창환; 박상진

doi:10.9766/kimst.2013.16.3.390

생체분리 면역세포를 이용한 면역기전 연구
Study on the Immune Mechanism using Primary-cultured Immune Cells 원문보기

韓國軍事科學技術學會誌 = Journal of the KIMST, v.16 no.3, 2013년, pp.390 - 397

Abstract ▼ AI-Helper

Primary-cultured immune cells are widely used in research to elucidate the mechanism of inflammation including chemotaxis, production of reactive oxygen species, cytokine release and antigen presenting. Mice are one of the species of experimental animals commonly used for such studies. Immune cells can be isolated and cultured from various organs such as bone marrow, peritoneal cavity, lung, spleen. For elaborated experimental studies, immune cells should be elicited with inflammatory substances or proliferated in vitro with special media. This paper details methods of obtaining immune cells from various organs of mice and investigating immune mechanism using isolated immune cells. It contains standard protocols of isolating and culturing immune cells from bone marrow, peritoneal cavity and lymphoid organs. It also covers the methods of investigating immune mechanism such as ELISA, western blotting, confocal microscopy and ELISPOT assay. With the works in this study, we established the standardized isolation and analysis methods of primary-cultured immune cells.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

8C). 본 그림에서는 FITC로 염색된 시험물질에 488파장의 레이저를 조사하여 발현되는 형광을 관찰한 것이다. 두 개의 사진을 병합할 경우, 면역세포와 시험물질의 위치를 확인할 수 있다 (Fig.
본 논문에서는 다양한 생체조직에서 면역세포를 분리하고 이를 초대배양하여 면역기전 연구에 이용하기 위한 전반적인 시험 및 분석법을 소개하고 이를 이용한 시험결과들을 기술하였다.
본 논문은 다양한 장기에서 초대배양을 통하여 면역 세포들을 분리 및 배양하고 이를 이용하여 면역기 전을 연구하기 위한 방법들을 제시하고 있다.
획득된 면역세포를 이용한 면역기전 연구를 위하여 다양한 시험기법들이 활용된다. 본 파트에서는 면역연구를 위하여 이용되는 ELISA, western blotting, 형광염색 및 ELISPOT 시험법에 대해 소개하고자 한다.

제안 방법

염증반응이 유도되도록 하룻밤기다린 후, 다음날 아침에 1mL의 casein 용액을 다시주사한다. 두 번째를 주사하고 3시간이 경과한 후, 실험동물을 적절한 방법으로 안락사 한다. 복부를 70%알코올로 소독한 후, 가위를 이용하여 복강 정중부에 피부절개선을 만든다.
특히, 면역자극 후 시간에 따른 발현 단백질의 변화량을 관찰함으로써 다양한 면역기전 연구를 수행할 수 있다. 이를 위하여 면역세포를 미생물 혹은 면역유도 물질과 일정시간 반응시킨 후, lysis 용액을 이용하여 시간별로 세포를 용해시켜 목적하는 단백질의 양을 확인하게 된다. 대표적으로 면역활성물질 생성의 주요 전사인자 (transcription factor)인 Nuclear Factor-kappa B(NF-kB), Mitogen Activated Protein Kinase(MAPK)의 활성을 보는 방법을 들 수 있다.

후속연구

본 연구를 통하여 소개 및 확립된 표준화된 시험 및 평가방법은 생화학 작용제의 면역기전 연구 및 효과적인 해독제의 개발과정에 유용하게 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	적응면역계체는 무엇으로 구성되어있는가?	다양한 선천면역체계에도 불구하고 몇몇 병원체들은 선천면역계를 회피하여 체내로 침입할 수 있다. 이런 경우, 적응면역계체(adaptive immunity)가 유도되는데, 이는 침입한 병원체를 특이적으로 인지하여 공격할 있는 B림파구와 T림파구로 구성되어 있다. 적응면역계는 선천면역계와는 달리 충분히 활성화되는 데 1주 이상의 시간이 소요된다.
	선천면역에 관여하는 세포들은 어떻게 면역반응을 매개하는가?	선천면역계(innate immunity)는 병원체 감염 후, 신속하게 활성화되어 작용할 수 있는 방어체계로서 주로 분엽구(호중구, 호산구, 호염기구), 대식세포 및 수지상세포에 의하여 매개된다. 선천면역에 관여하는 세포들은 패턴인식 수용체(PRR : Pattern Recognition Receptor)을 통하여 외부물질을 인지한 후, 직접적으로 공격을 하거나 면역활성물질 등을 분비하여 면역반응을 매개하게 된다[1]. 또한, 항원제시(antigen presenting) 과정을 통하여 적응면역체계를 활성화하기도 한다[2].
	척추동물이 가진 선천면역체계는 어떤 방어체계이며 무엇에 의해 매개되는가?	척추동물은 선천면역계와 적응면역계의 두가지 면역체계를 보유한다. 선천면역계(innate immunity)는 병원체 감염 후, 신속하게 활성화되어 작용할 수 있는 방어체계로서 주로 분엽구(호중구, 호산구, 호염기구), 대식세포 및 수지상세포에 의하여 매개된다. 선천면역에 관여하는 세포들은 패턴인식 수용체(PRR : Pattern Recognition Receptor)을 통하여 외부물질을 인지한 후, 직접적으로 공격을 하거나 면역활성물질 등을 분비하여 면역반응을 매개하게 된다[1].

참고문헌 (12)

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