목적: 파브리병(Fabry disease)은 alpha-galactosidase A의 결핍으로 인하여 리소좀에 globotriaosylceramide(Gb3)가 축적되어 여러 장기에 이상을 일으키는 질병이다. 본 연구에서는 파브리병의 만성 합병증 중 심장 질환을 주로 보이는 환자들, 그 중에서도 좌심실 비대증을 보이는 한국인 환자들을 대상으로 파브리병의 빈도를 알아보고자 하였다. 방법: 좌심실비대증을 진단받은 환자 257명을 연구대상으로 선정하였고, 남성이 172명(평균 56세, 범위 30-81세), 여성이 84명(평균 66세, 범위 45-85세)이었다. 파브리병 선별을 위하여 고성능액체크로마토그래피-탠덤질량분석기를 이용하여 소변 Gb3 농도를 측정하였다. 확진은 형광분석법에 의한 말초혈액의 alpha-galactosidase A 활성도와 염기서열분석법에 의한 GLA유전자 돌연변이 유무를 검사하여 이루어졌다. 결과: 소변 Gb3 검사에서 cutoff (25 ug/mmoL creatinine)를 초과하는 환자는 4명이었지만, 최종적으로 추가 검사를 통해 진단된 파브리병 환자는 여성 환자 한 명이었다(1/257명, 0.4%). 확진된 환자는 54.3 ug/mmoL creatinine의 Gb3 농도와 15.5 nmole/hr/mg protein (참고범위, $55.2{\pm}12.7nmole/hr/mg$ protein)의 alpha-galactosidase A 활성도를 보였다. GLA 유전자에서는 c.796G>A (p.D266N) 돌연변이가 이형접합체로 관찰되었다. 추가로 시행한 가족검사에서 환자의 딸은 아직 파브리병의 증상을 보이지 않았지만, 엄마와 같은 GLA 돌연변이(c.796G>A)를 가지고 있었으며, alpha-galactosidaseA 활성도는 42.5 nmole/hr/mg protein, 소변 Gb3 농도는 25.5 ug/mmoL creatinine을 나타냈다. 결론: 한국인 좌심실 비대증을 가진 환자들에서 파브리병의 유병율은 0.4%였다. 유병율이 낮아 보임에도 불구하고, 파브리병 진단 전 환자와 가족 구성원을 발견할 수 있는 장점 덕분에 선별검사의 의의가 있는 것으로 사료된다.
목적: 파브리병(Fabry disease)은 alpha-galactosidase A의 결핍으로 인하여 리소좀에 globotriaosylceramide(Gb3)가 축적되어 여러 장기에 이상을 일으키는 질병이다. 본 연구에서는 파브리병의 만성 합병증 중 심장 질환을 주로 보이는 환자들, 그 중에서도 좌심실 비대증을 보이는 한국인 환자들을 대상으로 파브리병의 빈도를 알아보고자 하였다. 방법: 좌심실비대증을 진단받은 환자 257명을 연구대상으로 선정하였고, 남성이 172명(평균 56세, 범위 30-81세), 여성이 84명(평균 66세, 범위 45-85세)이었다. 파브리병 선별을 위하여 고성능액체크로마토그래피-탠덤질량분석기를 이용하여 소변 Gb3 농도를 측정하였다. 확진은 형광분석법에 의한 말초혈액의 alpha-galactosidase A 활성도와 염기서열분석법에 의한 GLA 유전자 돌연변이 유무를 검사하여 이루어졌다. 결과: 소변 Gb3 검사에서 cutoff (25 ug/mmoL creatinine)를 초과하는 환자는 4명이었지만, 최종적으로 추가 검사를 통해 진단된 파브리병 환자는 여성 환자 한 명이었다(1/257명, 0.4%). 확진된 환자는 54.3 ug/mmoL creatinine의 Gb3 농도와 15.5 nmole/hr/mg protein (참고범위, $55.2{\pm}12.7nmole/hr/mg$ protein)의 alpha-galactosidase A 활성도를 보였다. GLA 유전자에서는 c.796G>A (p.D266N) 돌연변이가 이형접합체로 관찰되었다. 추가로 시행한 가족검사에서 환자의 딸은 아직 파브리병의 증상을 보이지 않았지만, 엄마와 같은 GLA 돌연변이(c.796G>A)를 가지고 있었으며, alpha-galactosidaseA 활성도는 42.5 nmole/hr/mg protein, 소변 Gb3 농도는 25.5 ug/mmoL creatinine을 나타냈다. 결론: 한국인 좌심실 비대증을 가진 환자들에서 파브리병의 유병율은 0.4%였다. 유병율이 낮아 보임에도 불구하고, 파브리병 진단 전 환자와 가족 구성원을 발견할 수 있는 장점 덕분에 선별검사의 의의가 있는 것으로 사료된다.
Objectives: Fabry disease (FD) is a lysosomal storage disease caused by the inappropriate accumulation of globotriaosylceramide (Gb3) in tissues due to a deficiency in the enzyme ${\alpha}$-galactosidase A. Hypertrophic cardiomyopathy is one of the chronic complications of FD. We tried to...
Objectives: Fabry disease (FD) is a lysosomal storage disease caused by the inappropriate accumulation of globotriaosylceramide (Gb3) in tissues due to a deficiency in the enzyme ${\alpha}$-galactosidase A. Hypertrophic cardiomyopathy is one of the chronic complications of FD. We tried to evaluate the prevalence of Fabry disease in the Korean patients with left ventricular hypertrophy (LVH). Methods: A total of 257 patients with LVH were recruited and they were 172 males (mean 56 years, range 30-81 years) and 84 females (mean 66 years, range 45-85 years). Urinary Gb3 was used to screen FD by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Confirmatory tests were done by alpha-galactosidaseA activity using fluorometric assay and by GLA mutation analysis using sequencing. Results: Four patients were screening positive by urinary Gb3 analysis (cutoff, 25 ug/mmol creatinine). But, one female patient was diagnosed with FD confirmed by enzyme analysis in leukocytes as well as by genetic analysis (1/257 patients, 0.4%). She showed 54.3 ug/mmoL creatinine of Gb3 and 15.5 nmole/hr/mg protein (reference range, $55.2{\pm}12.7nmole/hr/mg$ protein) of alphagalactosidase A activity. And she had a heterozygous GLA mutation of c.796G>A (p.D266N). Her daughter was found to be a carrier for FD confirmed by GLA mutation analysis. Asymptomatic carrier showed 25.5ug/mmol creatinine of Gb3 and 42.5 nmole/hr/mg protein (reference range, $55.2{\pm}12.7nmole/hr/mg$ protein) of alpha-galactosidase A activity. Conclusions: The prevalence of FD in Koran patients with LVH was detected as 0.4%. Although the prevalence seems to be low, screening studies are of great importance for detecting hidden cases as well as for identifying other effected family members.
Objectives: Fabry disease (FD) is a lysosomal storage disease caused by the inappropriate accumulation of globotriaosylceramide (Gb3) in tissues due to a deficiency in the enzyme ${\alpha}$-galactosidase A. Hypertrophic cardiomyopathy is one of the chronic complications of FD. We tried to evaluate the prevalence of Fabry disease in the Korean patients with left ventricular hypertrophy (LVH). Methods: A total of 257 patients with LVH were recruited and they were 172 males (mean 56 years, range 30-81 years) and 84 females (mean 66 years, range 45-85 years). Urinary Gb3 was used to screen FD by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Confirmatory tests were done by alpha-galactosidaseA activity using fluorometric assay and by GLA mutation analysis using sequencing. Results: Four patients were screening positive by urinary Gb3 analysis (cutoff, 25 ug/mmol creatinine). But, one female patient was diagnosed with FD confirmed by enzyme analysis in leukocytes as well as by genetic analysis (1/257 patients, 0.4%). She showed 54.3 ug/mmoL creatinine of Gb3 and 15.5 nmole/hr/mg protein (reference range, $55.2{\pm}12.7nmole/hr/mg$ protein) of alphagalactosidase A activity. And she had a heterozygous GLA mutation of c.796G>A (p.D266N). Her daughter was found to be a carrier for FD confirmed by GLA mutation analysis. Asymptomatic carrier showed 25.5ug/mmol creatinine of Gb3 and 42.5 nmole/hr/mg protein (reference range, $55.2{\pm}12.7nmole/hr/mg$ protein) of alpha-galactosidase A activity. Conclusions: The prevalence of FD in Koran patients with LVH was detected as 0.4%. Although the prevalence seems to be low, screening studies are of great importance for detecting hidden cases as well as for identifying other effected family members.
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문제 정의
하지만, 만성신부전 등의 신장 증상, 뇌경색 등의 신경계 증상, 좌심실비대증 등의 심혈관계 증상은 매우 치명적일 수 있으며, 환자에 따라 이들 세 장기 중 한 개의 증상만을 보일 수도 있기 때문에 이들 질환에서 파브리병을 감별해내는 것은 매우 중요할 수 있다. 본 연구에서는 좌심실비대증을 보이는 한국인 환자들을 대상으로 파브리병의 빈도를 알아보고자 하였으며, 선별검사 후 양성인 환자들을 대상으로 확진검사까지 시행하였다 .
본 연구에서는 파브리병의 만성 합병증 중 심장 질환을 주로 보이는 환자들, 그 중에서도 빈도가 높은 좌심실 비대증 환자들을 대상으로 파브리병의 빈도를 조사하고자 하였다. 기존 문헌과 달리 한국인 좌심실 비대증을 가진 환자들에서 파브리병의 유병율은 상대적으로 낮은 것으로 사료된다.
우리나라에서는 파브리병에 대한 신생아 선별검사가 아직까지 정책적으로 이루어지지 않을 뿐 아니라, 정확한 유병률도 밝혀져 있지 않다. 하지만, 파브리병의 비특이적인 증상으로 인하여 진단되지 못한 환자들이 많을 것으로 추정되며, 파브리병의 선별검사가 환자들의 조기 진단 및 치료에 기여할 수 있을 것으로 생각되어 본 연구를 진행하였다. 좌심실비대증은 파브리병으로 인한 심장의 기능적/해부학적 문제 중 가장 흔한 증상으로 남성 환자들의 60%에서 발현되었다는 보고가 있다7).
제안 방법
말초혈액 백혈구의 alpha-galactosidase A 활성도를 형광분석법(fluorometric assay)으로 측정하였으며, 정상대조군과 선별검사 양성인 환자의 효소활성도를 함께 측정하였다. GLA 유전자의 돌연변이는 말초혈액으로부터 추출한 DNA를 대상으로 중합효소 연쇄반응(Polymerase Chain Reaction, PCR) 후 염기서열분석법(sequencing)으로 확인하였다. PCR과 염기서열분석에 사용된 시발체(primer)는 저자들이 디자인하였으며, 사용된 장비는 각각 thermal cycler (Model 9700; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)와 ABI Prism 3100xl 분석기(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)였다.
말초혈액 백혈구의 alpha-galactosidase A 활성도를 형광분석법(fluorometric assay)으로 측정하였으며, 정상대조군과 선별검사 양성인 환자의 효소활성도를 함께 측정하였다. GLA 유전자의 돌연변이는 말초혈액으로부터 추출한 DNA를 대상으로 중합효소 연쇄반응(Polymerase Chain Reaction, PCR) 후 염기서열분석법(sequencing)으로 확인하였다.
파브리병 여부를 선별 하기 위하여 고성능액체크로마토그래피-탠덤질량분석기(Waters 2,795/Quatro micro, Waters, Milford, MA, USA)를 이용하여 기존 문헌의 방법을 참고하여 소변 Gb3 농도를 측정하였다6). 소변 Gb3 검사의 cutoff는 25 ug/mmoL creatinine이며, 이보다 높게 측정된 환자들은 파브리병을 의심하여 확진검사를 추가로 시행하였다. 확진검사는 alpha-galactosidase A 활성도 측정을 통한 생화학적 검사와 GLA 유전자 돌연변이 유무를 통한 분자유전학적 검사로 이루어졌으며, 리튭헤파린 튜브와 EDTA 튜브에 각각 채혈하여 검사하였다.
추가로, 파브리병으로 진단된 여성 환자의 자녀에 대해 파브리병 관련 검사를 시행하였다. GLA 유전자 검사에서 환자의 딸도 엄마와 같은 GLA 돌연변이(c.
연구 참여에 동의한 피험자들은 동의서 작성 후 3 mL 정도의 채뇨를 시행하였다. 파브리병 여부를 선별 하기 위하여 고성능액체크로마토그래피-탠덤질량분석기(Waters 2,795/Quatro micro, Waters, Milford, MA, USA)를 이용하여 기존 문헌의 방법을 참고하여 소변 Gb3 농도를 측정하였다6). 소변 Gb3 검사의 cutoff는 25 ug/mmoL creatinine이며, 이보다 높게 측정된 환자들은 파브리병을 의심하여 확진검사를 추가로 시행하였다.
소변 Gb3 검사의 cutoff는 25 ug/mmoL creatinine이며, 이보다 높게 측정된 환자들은 파브리병을 의심하여 확진검사를 추가로 시행하였다. 확진검사는 alpha-galactosidase A 활성도 측정을 통한 생화학적 검사와 GLA 유전자 돌연변이 유무를 통한 분자유전학적 검사로 이루어졌으며, 리튭헤파린 튜브와 EDTA 튜브에 각각 채혈하여 검사하였다.
알부민뇨증(albuminuria)은 없었으며, 혈청 creatinine은 증가되지 않았다. 환자는 파브리병으로 진단된 후 더 이상 다른 장기로의 증상 악화를 방지하고 침범된 기관의 기능을 호전시키기 위하여 파브라자임(Fabrazyme) 효소보충요법을 시행중이다. Germain 등의 연구에 의하면, 치료받지 않은 남성 파브리병 환자들은 agalsidase-beta 효소 치료를 받은 그룹에 비하여 3.
GLA 유전자의 돌연변이는 말초혈액으로부터 추출한 DNA를 대상으로 중합효소 연쇄반응(Polymerase Chain Reaction, PCR) 후 염기서열분석법(sequencing)으로 확인하였다. PCR과 염기서열분석에 사용된 시발체(primer)는 저자들이 디자인하였으며, 사용된 장비는 각각 thermal cycler (Model 9700; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)와 ABI Prism 3100xl 분석기(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)였다. 염기서열분석 결과는 sequencher 소프트웨어(version 4.
본 연구에 참여한 환자들은 모두 257명이었으며 그중 남성이 172명(평균 56세, 범위 30-81세), 여성이 84명(평균 66세, 범위 45-85세)이었다. 남성 및 여성 환자들의 평균 소변 Gb 농도는 각각 8.
삼성서울병원과 서울대학교병원 순환기 내과에서 심초음파와 심전도를 통해 좌심실비대증을 진단받은 30세 이상의 남성과 40세 이상의 여성 환자들을 연구 대상으로 선정하였다. 심초음파 검사에서 확장기 말에 측정한 좌심실 심근의 두께가 13 mm 이상인 경우 좌심실비대로 정의하였다.
좌심실비대를 확인할 수 이는 심전도 기준은 Sokolow-Lyon index 4, Cornell voltage criteria 5, Voltage-based criteria (Lead I: R wave>14 mm, Lead aVR: S wave >15 mm, Lead aVL: R wave >12 mm, Lead aVF: R wave >21 mm, Lead V5: R wave >26 mm, Lead V6: R wave >20 mm) 등 3가지 기준 중 2개를 만족시키는 경우로 하였다. 상기 심초음파와 심전도 기준을 모두 충족하는 환자들 중에서 다음의 아홉 가지 사항 중 한 가지 이상에 해당하는 환자를 최종 연구 대상으로 선별하였다; (1) 말기 신부전, 뇌경색, 심실 비대증의 가족력이 성염색체 유전 형태로 있는 경우, (2) 각막 혼탁으로 안과 진료를 받는 환자, (3) 뇌경색의 과거력이 있는 경우, (4) 무작위 소변 검사에서 단백뇨가 있을 경우 24시간 소변의단백을 측정하여 150 mg/day 이상인 경우, (5) 혈청 creatinine이 1.3 mg/dL를 초과하는 경우, (6) 사타구니나 배꼽 주위, 엉덩이 부위에 혈관각화종이 있는 경우, (7) 아세트아미노펜 등 통상적인 진통제에 반응이 없는 급성 발작성 통증을 간헐적으로 경험한 경우, (8) 저한증이나 무한증이 있는 경우, (9) 감각신경성 난청을 진단받은 경우.
파브리병(Fabry disease, OMIM 301500)은 리소좀 효소인 alpha-galactosidase A의 결핍으로 인하여 리소좀에 sphingolipidglobotriaosylceramide (Gb3)가 축적되어 여러 장기에 이상을 일으키는 질병이다. 파브리병을 유발하는 GLA 유전자는 염색체 Xq22에 위치하며, 7개의 엑손으로 구성되어 있다. 성염색체 열성유전 양상을 보이지만, 여성 보인자들의 약 70%가 파브리병의 증상을 경험하는데, 일반적으로 남성 환자들보다 발병연령이 늦고 증상이 경미한 것으로 알려져 있다1).
데이터처리
PCR과 염기서열분석에 사용된 시발체(primer)는 저자들이 디자인하였으며, 사용된 장비는 각각 thermal cycler (Model 9700; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)와 ABI Prism 3100xl 분석기(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)였다. 염기서열분석 결과는 sequencher 소프트웨어(version 4.10.1, Gene Codes Corp., Ann Arbor, MI, USA)를 이용하여 분석하였으며, NM_000169.2를 GLA 유전자 분석의 참고염기서열로 하였다.
이론/모형
좌심실비대를 확인할 수 이는 심전도 기준은 Sokolow-Lyon index 4, Cornell voltage criteria 5, Voltage-based criteria (Lead I: R wave>14 mm, Lead aVR: S wave >15 mm, Lead aVL: R wave >12 mm, Lead aVF: R wave >21 mm, Lead V5: R wave >26 mm, Lead V6: R wave >20 mm) 등 3가지 기준 중 2개를 만족시키는 경우로 하였다.
성능/효과
이는 본 연구에서 172명의 남성 좌심실비대증 환자들 중 파브리병으로 진단된 경우가 하나도 없었던 것과 비교되는 결과이다. 84명의 여성 좌심실비대증 환자들에서도 1명만 파브리병으로 진단됨으로써 기존 보고들에 비하여 상대적으로 낮은 환자 빈도(1.2%)를 보였고, 총 257명의 좌심실비대증 환자들 중 오직 1명만 파브리병으로 확인된 것은(0.4%) 한국인에서 좌심실비대증이 파브리병의 주요 증상이 아닐 수도 있다고 할 수 있겠다.
이들 4명의 환자들을 대상으로 GLA 유전자에 대한 염기서열분석 검사를 시행한 결과, 34.6, 38.8, 41.6 ug/mmoL creatinine의 소변 Gb3 농도를 보였던 3명에서는 GLA 유전자 돌연변이가 관찰되지 않았다. 54.
한편, 환자의 말초혈액에서 시행한 alpha-galactosidase A 활성도는 15.5 nmole/hr/mg protein으로 참고범위(55.2±12.7 nmole/hr/mg protein)보다 감소되어 있었으며, 동시에 검사한 정상대조군의 60.4 nmole/hr/mg protein 보다 낮은 결과를 보였다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
파브리병이란 무엇인가?
파브리병(Fabry disease, OMIM 301500)은 리소좀 효소인 alpha-galactosidase A의 결핍으로 인하여 리소좀에 sphingolipidglobotriaosylceramide (Gb3)가 축적되어 여러 장기에 이상을 일으키는 질병이다. 파브리병을 유발하는 GLA 유전자는 염색체 Xq22에 위치하며, 7개의 엑손으로 구성되어 있다.
파브리병이라고 진단을 내리기 힘든 이유는 무엇인가?
성염색체 열성유전 양상을 보이지만, 여성 보인자들의 약 70%가 파브리병의 증상을 경험하는데, 일반적으로 남성 환자들보다 발병연령이 늦고 증상이 경미한 것으로 알려져 있다1). 파브리병은 증상의 발현으로부터 진단까지의 기간이 매우 길고, 증상을 보이는 장기가 한 가지일 수도 있어 진단을 내리기가 쉽지 않다.
파브리병에서 안과적 증상으로 특징적인 것은 무엇인가?
변비와 설사를 반복하여 과민성 대장 증후군으로 오인되기도 하지만, 염증성 변화를 보이지는 않는다. 안과적 증상으로 각막 혼탁(corneal opacities)이 상당히 특징적이며 남자 환자의 90%, 여자 환자의 75%에서 경험한다. 감각신경성 청력장애가 급성으로 일어나 수 시간에서 수 일 동안 지속되다가 회복되는 증상이 환자의 5-30%에서 일어나는데, 대부분의 환자에서 진행되어 남자는 30대, 여자는 50대에 난청이 생기게 된다.
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