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문제 정의
- 따라서, 본 연구에서는 산사 추출물이 고콜레스테롤혈증 흰쥐에 있어 지질 대사에 미치는 영향을 비교 검토한 후, 생활습관병 예방과 기능성 식품 재료 등의 개발 가공을 목적으로 실험을 수행하였다.
- 산사 추출물이 고콜레스테롤혈증으로 유발된 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐에 있어서 혈청 지질 농도 변화에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 본 실험을 행하였다. 식이 섭취량은 실험군 간에 유의적인 차이는 없었으나, 체중 증가량은 고콜레스테롤 혈증 유발군에 산사 추출물을 급여시킨 HH군이 고콜레스테롤혈증 유발 군(HC)에 비하여 유의적으로 낮은 것으로 나타났다.
제안 방법
- 식이조성 및 실험군은 Table 1과 같다. 기본 식이를 섭취시킨 대조군(control)인 정상군(control-nonhypercholesterolemic)의 CN군, 정상 실험군에 산사 추출물을 섭취시킨 실험군(NH군), 고콜레스테롤혈증 유발 실험군(HC군)인 질환 모델 대조군(hypercholesterolemic)과 질환모델 실험군(hypercholesterolemic)에 산사 추출물을 섭취시킨 실험군(HH군)으로 나누었다.
- , Tokyo, Japan)시킨 후 추출하였다. 동결건조시킨 산사 200 g을 취해 1,100 ㎖의 물을 넣고 4시간동안 88℃에서 증숙 한 후 8시간 동안 92℃에서 가열(DWG50000AR, Daewoong, Seoul, Korea)하여 총 12시간 동안 추출 하였다. 그 후 100 ㎖의 물을 추가하고 다시 증숙(4h, 88℃) 및 가열(8h, 92℃)의 12시간 추출 과정을 거친 후 모아진 추출액(1,000 ㎖)을 본 실험의 시료로 사용하였다.
- 실험 사육 최종일에 7시간 동안 절식시키고 에테르 마취하에 심장채혈법으로 혈액을 취하여 4℃에서 1시간 방치한 후 분당 3,000 cycle로 20분간 원심분리하여 혈청을 얻어 실험에 사용하였다. 실험 사육 시작일과 최종일에 체중을 측정하였으며, 사료 섭취량은 매일 사료 잔량을 측정하여 식이 효율을 산출하였다.
- 실험 사육 최종일에 7시간 동안 절식시키고 에테르 마취하에 심장채혈법으로 혈액을 취하여 4℃에서 1시간 방치한 후 분당 3,000 cycle로 20분간 원심분리하여 혈청을 얻어 실험에 사용하였다. 실험 사육 시작일과 최종일에 체중을 측정하였으며, 사료 섭취량은 매일 사료 잔량을 측정하여 식이 효율을 산출하였다.
- 실험 사육실의 온도(20±1℃) 및 습도(50±10%)는 일정하게 유지시켰고, 명암은 12시간(07:00～19:00)주기로 조명하였다.
- 평균 체중이 200±10 g인 7주령된 Sprague Dawley 계 수컷 흰쥐(DAEHAN BIOLINK Co., LTD, Chungcheongbukdo, Korea)를 5% 콩기름(Ottogi, soybean oil, Gyeonggido, Korea)을 함유하는 기초식이로 1주일간 예비사육하여 적응시킨 후 난괴법(Randomized Complete Block Design)에 의해 6마리씩 4군으로 metabolic cage (JD-C-71, Jeongdo, Korea)에 나누어 5주간 실험 사육하였다.
대상 데이터
- 실험에 사용된 시료는 2011년 10월 중하순 강원도 정선군 남면 일대 야산에서 자생하는 산사를 채취하여 진공동결건조(EYELA, FDU-2000, Rikakikai Co., Tokyo, Japan)시킨 후 추출하였다. 동결건조시킨 산사 200 g을 취해 1,100 ㎖의 물을 넣고 4시간동안 88℃에서 증숙 한 후 8시간 동안 92℃에서 가열(DWG50000AR, Daewoong, Seoul, Korea)하여 총 12시간 동안 추출 하였다.
데이터처리
- 분석 결과의 통계 처리는 실험군 당 평균치와 표준편차를 계산하였고 군간의 차이는 one-way analysis of variance (ANOVA, IBM SPSS statistics ver. 21) 분석 후 p<0.05 수준에서 Duncan's multiple range test에 의하여 각 실험군 간의 유의성을 검증하였다.
이론/모형
- 혈청 중의 Total cholesterol 및 HDL-cholesterol 농도는 효소법(enzymatic)에 의해 조제된 시약(Eiken, Tokyo, Japan)을 사용하여 생화학분석기(Hitachi 7150, Tokyo, Japan)로 측정하였다.
성능/효과
- Total cholesterol의 농도는 고콜레스테롤혈증군인 HC군(179.5±17.6 mg/㎗)에서 유의적으로 높게 나타났고 대조군에 산사추출물을 급여시킨 NH군(98.6±11.9 mg/㎗)은 대조군인 CN군(105.3±12.4 mg/㎗)에 비하여 감소하였으나 유의적인 차이는 없었으며 고콜레스테롤혈증군에 산사 추출물을 섭취시킨 HH군(142.8±15.4 mg/㎗) 또한 이상지질혈증군인 HC군에 비하여 유의적으로 감소하였다.
- 식이 섭취량은 실험군 간에 유의적인 차이는 없었으나, 체중 증가량은 고콜레스테롤 혈증 유발군에 산사 추출물을 급여시킨 HH군이 고콜레스테롤혈증 유발 군(HC)에 비하여 유의적으로 낮은 것으로 나타났다. 간장의 중량은 고콜레스테롤혈증 유발군인 HC군에서 유의적으로 높게 나타났으나, 산사 추출물의 급여로 인하여 유의적으로 감소하는 것으로 관찰되었다. 산사 추출물의 섭취로 혈청 중 total cholesterol 농도는 감소되었으며, HDL-cholesterol 농도 및 HDLcholesterol/total cholesterol 농도의 비는 증가하는 것으로 확인되었다.
- 고콜레스테롤혈증 군인 HC군이 7.12±0.44로 가장 높게 나타났으며 이상지질혈증군에 산사 추출물을 급여시킨 HH군이 4.43±0.41로 HC군에 비하여 유의적인 감소를 나타내었다.
- 고콜레스테롤혈증군인 HC군이 8.12±0.51로 가장 높게 나타났고 고콜레스테롤혈증 유발군에 산사 추출물을 급여시킨 HH군이 5.43±0.50으로 HC군에 비하여 유의적인 감소를 보였다.
- 대조군에 산사 추출물을 급여시킨 NH군은 30.6±1.5 mg/㎗로 대조군과 유의적인 차이는 없었으며 고콜레스테롤혈증군에 산사추출물을 급여시킨 HH군은 26.3±1.9 mg/㎗로 고콜레스테롤혈증군인 HC군에 비하여 유의적으로 감소하였다.
- 대조군인 CN군과 대조군에 산사 추출물을 섭취시킨 NH군은 각각 3.31±0.50, 3.22±0.49로 유의적인 차이는 없는 것으로 나타났다.
- 대조군인 CN군과 대조군에 산사 추출물을 섭취시킨 NH군이 각각 30.2±1.6% 및 31.0±1.6%로 유의적인 차이가 없었으며 고콜레스테롤혈증 유발군인 HC군이 11.7±1.2%로 유의적인 감소를 보였으며 고콜레스테롤혈증군에 산사 추출물을 급여시킨 HH군은 18.4±1.3%를 나타내어 HC군에 비하여 유의적인 증가를 보였다.
- 34로 유의적인 차이는 없었다. 따라서 본 실험 결과 고콜레스테롤혈증에 있어서 산사 추출물의 급여는 동맥경화지수를 감소시켜주는 것으로 나타났다.
- 또한, 동맥경화지수와 심혈관 위험지수를 낮춰 주는 것으로 관찰되었다. 따라서, 본 실험 결과 산사는 체중 조절의 효과가 있으며, 지질대사 개선에 도움을 주고 관상 동맥 질환의 위험률을 감소시켜줄 것으로 사료된다.
- 산사 추출물의 섭취로 혈청 중 total cholesterol 농도는 감소되었으며, HDL-cholesterol 농도 및 HDLcholesterol/total cholesterol 농도의 비는 증가하는 것으로 확인되었다. 또한, 동맥경화지수와 심혈관 위험지수를 낮춰 주는 것으로 관찰되었다. 따라서, 본 실험 결과 산사는 체중 조절의 효과가 있으며, 지질대사 개선에 도움을 주고 관상 동맥 질환의 위험률을 감소시켜줄 것으로 사료된다.
- 산사 추출물을 5주간 섭취시켜 실험 사육한 흰쥐의 각 장기 및 조직의 중량은 Table 3과 같이, 간장의 중량은 대조군(CN군)에 비해 고지방 식이를 급여한 HC 군에서 유의성 있게 높게 나타났으며, 대조군에 산사 추출물을 급여시킨 NH군은 대조군인 CN군에 비하여 낮게 나타났고 고콜레스테롤혈증에 산사 추출물을 급여시킨 HH군 또한 고콜레스테롤혈증군인 HC군에 비하여 유의적으로 감소하였다. 심장, 신장 및 고환의 중량은 실험군간에 유의적인 차이가 없었고 폐의 중량은 대조군인 CN군에 비하여 HH군이 유의적으로 감소하였으며 비장은 HC군이 유의적으로 증가하였는데 이러한 비장 중량의 증가는 고지방 식이 및 식이 섭취량에 의한 것으로 사료된다.
- 간장의 중량은 고콜레스테롤혈증 유발군인 HC군에서 유의적으로 높게 나타났으나, 산사 추출물의 급여로 인하여 유의적으로 감소하는 것으로 관찰되었다. 산사 추출물의 섭취로 혈청 중 total cholesterol 농도는 감소되었으며, HDL-cholesterol 농도 및 HDLcholesterol/total cholesterol 농도의 비는 증가하는 것으로 확인되었다. 또한, 동맥경화지수와 심혈관 위험지수를 낮춰 주는 것으로 관찰되었다.
- 58 g)은 HC군보다 유의적으로 낮은 체중증가량을 보였다. 식이 섭취량은 CN군에 비하여 HC군이 약간 높았고 NH군 및 HH군이 약간 낮았으나 실험군 간에 유의적인 차이는 보이지 않았다. 식이 섭취량의 유의적인 차이는 없었으나 HC군에서 유의적으로 체중이 증가한 것은 고지방 식이와 식이섭취량에 따른 것으로 생각되며 대조군인 CN군에 비하여 산사 추출물을 섭취시킨 NH군 및 고콜레스테롤혈증 유발군의 HC군에 비하여 산사추출물 급여군인 HH군에 있어서 체중이 감소된 것은 산사의 지방전구세포 분화 억제 및 지방세포 분해 촉진 효과와 분변으로 배설되는 포화지방산의 함량을 증가시키는 효과 등으로 인한 체중 감소 때문인 것으로 판단된다(Chon 등, 2009; Won 등, 2008).
- 산사 추출물이 고콜레스테롤혈증으로 유발된 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐에 있어서 혈청 지질 농도 변화에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 본 실험을 행하였다. 식이 섭취량은 실험군 간에 유의적인 차이는 없었으나, 체중 증가량은 고콜레스테롤 혈증 유발군에 산사 추출물을 급여시킨 HH군이 고콜레스테롤혈증 유발 군(HC)에 비하여 유의적으로 낮은 것으로 나타났다. 간장의 중량은 고콜레스테롤혈증 유발군인 HC군에서 유의적으로 높게 나타났으나, 산사 추출물의 급여로 인하여 유의적으로 감소하는 것으로 관찰되었다.
- 산사 추출물을 5주간 섭취시켜 실험 사육한 흰쥐의 각 장기 및 조직의 중량은 Table 3과 같이, 간장의 중량은 대조군(CN군)에 비해 고지방 식이를 급여한 HC 군에서 유의성 있게 높게 나타났으며, 대조군에 산사 추출물을 급여시킨 NH군은 대조군인 CN군에 비하여 낮게 나타났고 고콜레스테롤혈증에 산사 추출물을 급여시킨 HH군 또한 고콜레스테롤혈증군인 HC군에 비하여 유의적으로 감소하였다. 심장, 신장 및 고환의 중량은 실험군간에 유의적인 차이가 없었고 폐의 중량은 대조군인 CN군에 비하여 HH군이 유의적으로 감소하였으며 비장은 HC군이 유의적으로 증가하였는데 이러한 비장 중량의 증가는 고지방 식이 및 식이 섭취량에 의한 것으로 사료된다. 한편, CN군에 비하여 HC군의 간장 중량이 증가한 것은 고지방식이로 인한 간의 지방 침착때문인 것으로 생각 되며 대조군에 산사 추출물을 급여시킨 NH군과 고콜레스테롤혈증에 산사 추출물을 급여시킨 HH군의 간장 중량이 감소한 것은 산사가 간장의 지방 침착을 억제 시켰기 때문인 것으로 사료된다(Jun, 2013; Kwon과 Kim, 2010).
- 체중 증가량은 CN군의 140.83±3.76 g에 비하여 고콜레스테롤혈증 유발군인 HC군이 152.50±4.18 g으로 유의적으로 높게 나타났으며, 대조군군에 산사 추출물을 섭취시킨 NH군은 119.17±3.76 g으로 CN군에 비하여 유의적으로 체중증가량이 낮게 나타났다.
- 혈청 중의 HDL-cholesterol의 농도는 Fig. 2와 같이, 대조군(CN)이 31.8±1.8 mg/㎗로 가장 높게 나타났으며 고콜레스테롤혈증군인 HC군(22.1±1.8 mg/㎗)에서 유의적으로 감소하였다.
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