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가설 설정
- sp. melonis GR 균주의 접종원인 소형분생포자를 대량 생산하기 위해서는 V8-juice broth 배지에서 약 7일 동안 150rpm으로 진탕배양하는 것이 효율적일 것이다.
제안 방법
- 6개 품종의 종자를 8 × 16 육묘용 연결 포트(포트 당 토양 21mL/pot, 범농사)에 원예용상토 5호(부농사)를 넣고 종자를 1립씩 파종하여 온실(25 ± 5℃) 에서 재배하였다.
- 접종원 대량생산을 위한 최적배지를 선발하기 위하여 GR 균주를 PDA 배지에 접종하고 25℃ incubator에서 7일 동안 전배양 하였다. Fusarium oxysporum의 포자 생산을 위해 많은 연구자들이 사용하고 있는 6종배지, malt extract broth (MEB; Becton, Dickinson and Co.), Czapek-dox broth(CDB; Becton, Dickinson and Co.), potato dextrose broth(PDB; Becton, Dickinson and Co.), V8-juice broth[V8 broth; V8 Juice(Campbell Soup Co.) 200mL, CaCO3 3g(Samchun Chem. Co., LTD), distilled water 1L], Clarified V8 broth(C-V8 broth; V8-juice broth를 4,000rpm에서 15분 동안 원심분리 하여 침전물을 제거한 배지), glucose-peptone-yeast extract broth[GPYB; Glucose(Junsei Chem. Co., Japan) 20g, peptone (Becton, Dickinson and Co.) 5g, yeast extract(Becton, Dickinson and Co.) 5g, distilled water 1L)를 선발하여 125mL 삼각플라스크당 배지를 50mL씩 넣고 멸균하여 준비하였다. 이들 배지에 전배양한 GR 균주의 균총 말단부위로부터 7mm cork borer를 사용하여 떼어낸 균사 조각을 플라스크당 3개씩 접종하고 이들을 shaking incubator(25℃, 150rpm)에서 배양하였다.
- 3 × 106 conidia/mL for 30 minutes. The inoculated plants were incubated in a dew chamber at 20, 25, and 30℃ for 24 hours and then transferred to a growth room at 20, 25, and 30℃, respectively, with 12-hour light a day. After 3 weeks, disease severity of the seedling was investigated.
- sp. melonis의 접종원 대량 생산을 위한 최적배지를 선발하였다. 그리고 멜론의 저항성 품종을 개발하기 위한 효율적인 덩굴쪼김병 저항성 검정 방법을 확립하고자 시판 중인 22개 멜론 품종과 6개 대목 품종의 덩굴쪼김병 저항성 정도를 실험하고, 이들 중 저항성의 정도가 서로 다른 6개 멜론 품종을 선발하여 멜론의 생육 시기, 뿌리 상처, 접종원 농도, 침지시간, 재배 온도등 다양한 발병 조건에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 발생 정도를 조사하였다.
- 각 박과 작물의 종자를 8 × 16육묘용 연결 포트(15mL/pot, 범농사)에 원예용상토 5호(부 농사)를 넣고 1립씩 파종하여 온실(25 ± 5℃)에서 7일 동안 재배하였다.
- 고령 지역의 온실에서 덩굴쪼김병이 발생한 멜론을 채집하고 이로부터 병원균을 단포자 분리하고 GR 균주로 명명 하였다. 분리한 덩굴쪼김병균은 광학현미경 하에서 대형분 생포자와 소형분생포자의 형태, 후막포자 형성 유무, 균총색 등의 형태학적인 관찰(Nelson et al.
- 그 외 뿌리 상처 유무에 따른 6개 멜론 품종의 덩굴쪼김병 발생 실험에서 상처처리구는 앞에서와 같은 방법으로 준비한 멜론 유묘의 뿌리가 2.0-2.5cm 정도 남도록 가위로 잘라서 상처를 낸 후에 앞에서와 동일한 방법으로 GR 균주의 포자현탁액에 침지하여 접종하였다.
- 접종 후 재배 온도에 따른 멜론의 덩굴쪼김병 발생 실험을 제외한 모든 실험은 접종한 멜론 유묘를 25℃ 습실상에서 1일 동안 배양한 후에 25℃ 항온항습실로 옮기고 하루에 12시간씩 광을 조사하면서 6일 동안 재배하였다. 그리고 28℃에서 약 2주 동안 더 재배한 후에 덩굴쪼김병 발생을 조사 하였다.
- 그리고 PCR 산물은 Big Dye® terminator v3.1 cycle sequencing kits(Applied Biosystems, USA)로 반응 후 각각의 프라이머로 DNA Engine Tetrad 2 peltier thermal cycler (Bio-Rad, USA)을 이용하여 PCR 반응을 수행하고 ABI Prism 3730xl Analyzer 96 capillary type(Applied Biosystems, USA) 로 염기서열 분석결과를 얻었다.
- melonis의 접종원 대량 생산을 위한 최적배지를 선발하였다. 그리고 멜론의 저항성 품종을 개발하기 위한 효율적인 덩굴쪼김병 저항성 검정 방법을 확립하고자 시판 중인 22개 멜론 품종과 6개 대목 품종의 덩굴쪼김병 저항성 정도를 실험하고, 이들 중 저항성의 정도가 서로 다른 6개 멜론 품종을 선발하여 멜론의 생육 시기, 뿌리 상처, 접종원 농도, 침지시간, 재배 온도등 다양한 발병 조건에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 발생 정도를 조사하였다.
- 두 프라이머 세트를 이용하여 InstaGene Matrix 산물 1µL, 10mM dNTP 1µL, 10 × PCR buffer 3µL, 10pmol의 프라이머 각각 1µL, 2.5unit/µL의 EF-Taq DNA polymerase(Solgent, Korea) 0.2µL을 넣고 멸균수를 첨가하여 최종 30µL의 반응액을 만들어 PCR 증폭 하였다.
- 또한 침지시간에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 발생의 경우에는 준비한 GR 균주 포자현탁액에 각각 0, 0.5, 1, 3및 5시간 동안 침지하여 접종하였다. 0시간 처리를 위해서는 씻어서 준비한 멜론 뿌리를 포자현탁액에 침지한 즉시 꺼내 토양에 이식하였다.
- 멜론의 생육 시기에 따른 덩굴쪼김병 발생 실험을 제외한 모든 실험은 종자를 파종하고 7일 동안 재배한 유묘를 실험에 사용하였다. 멜론의 생육 시기에 따른 발병 실험을 위해서 접종하기 7, 10, 13, 16일 전에 각각 파종하고 온실에서 재배하여 실험에 사용하였다.
- 모든 덩굴쪼김병 발생 실험은 10반복으로 2회 실시하였다. 통계분석은 SAS(SAS Institute, Inc.
- 병조사는 접종 3주일 후에 각 식물체의 덩굴쪼김병 발생 정도(disease severity)를 조사하였다. 발병 정도는 다음과 같은 발병도(disease index)로 조사하였는데, 0 = 건전, 1 = 도관이 갈변되고 생육이 약간 억제된 것, 2 = 도관이 갈변되고 생육이 억제된 것, 3 = 도관이 갈변되고 생육이 심하게 억제 되고 황화된 것, 4 = 고사 등의 5단계로 하였다. 그리고 평균 발병도가 1.
- 병조사는 접종 3주일 후에 각 식물체의 덩굴쪼김병 발생 정도(disease severity)를 조사하였다. 발병 정도는 다음과 같은 발병도(disease index)로 조사하였는데, 0 = 건전, 1 = 도관이 갈변되고 생육이 약간 억제된 것, 2 = 도관이 갈변되고 생육이 억제된 것, 3 = 도관이 갈변되고 생육이 심하게 억제 되고 황화된 것, 4 = 고사 등의 5단계로 하였다.
- 분리한 GR 균주의 기주 특이성을 조사하기 위하여 오이 (Cucumis sativus), 멜론(C. melo), 참외(Cucumis melo var. makuwa), 수박(Citrullus lanatus) 등의 박과 작물에 대한 GR 균주의 병원성을 조사하였다. 오이는 ‘아시아청장’(아시아종묘)과 ‘백미백다다기’(동부팜한농), 멜론은 ‘베타리치’(동부팜한농)와 ‘아시아황금’(아시아종묘), 참외는 ‘금제’(아시아종묘)와 ‘조은대’(신젠타종묘) 그리고 수박은 ‘서태자’(아시아종묘)와 ‘꼬꼬마수박’(아시아종묘) 품종을 시중에서 구입하여 실험에 사용하였다.
- , 1983)과 분자생물학적인 방법으로 동정하였다. 분자생물학적 동정을 위해 GR 균주를 potato dextrose agar(PDA; Becton, Dickinson and Co.) 배지에 접종하고 25℃에서 7일 동안 배양한 후에 균사체를 수확하였다. 이것을 InstaGene Matrix #732-6020 solution 20µL에 현탁하여 12,000rpm으로 5분간 원심분리한 후에 상 등액 1µL를 PCR에 사용하였다.
- 뿌리 상처에 따른 멜론 덩굴쪼김병 발생 파종 후 7일 동안 재배한 유묘를 뽑아 물로 씻어 토양을 제거한 후에 가위로 멜론의 뿌리를 자르고 덩굴쪼김병균(F. oxysporum f. sp. melonis GR)을 접종하거나, 뿌리를 자르지 않고 접종하여 가위 상처 유무에 따른 6개 품종 멜론의 덩굴 쪼김병의 저항성 차이를 실험하였다. 가위 상처 유무에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 발생에서 통계적으로 유의성 있는 차이를 보이지 않았지만, 가위로 인한 인위적인 상처 없이 저항성 품종인 ‘레드퀸’과 ‘썸머쿨’, 그리고 감수성 품종인 ‘얼룩파파야’와 ‘아시아황금’이 각각 고도의 저항성과 높은 감수성을 보이며 저항성 특성을 잘 나타내었다(Fig.
- 이들 배지에 전배양한 GR 균주의 균총 말단부위로부터 7mm cork borer를 사용하여 떼어낸 균사 조각을 플라스크당 3개씩 접종하고 이들을 shaking incubator(25℃, 150rpm)에서 배양하였다. 생산된 포자(소형분생포자)의 수를 측정하기 위하여, 접종 2일 후부터 8일 후까지 하루에 한 번 배양액을 1mL씩 수확하여 4겹 거즈로 거르고 hemocytometer를 이용 하여 광학현미경 하에서 포자의 수를 측정하였다. 실험은 배 지당 3개 플라스크씩 그리고 플라스크당 2회씩 조사하였다.
- 생산된 포자(소형분생포자)의 수를 측정하기 위하여, 접종 2일 후부터 8일 후까지 하루에 한 번 배양액을 1mL씩 수확하여 4겹 거즈로 거르고 hemocytometer를 이용 하여 광학현미경 하에서 포자의 수를 측정하였다. 실험은 배 지당 3개 플라스크씩 그리고 플라스크당 2회씩 조사하였다.
- 염기서열 분석을 위하여 ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')와 ITS4(5'-TCCT CCGCTTATTGATATGC-3') 프라이머(White et al., 1990) 그리고 EF-1(5'-ATGGGTAAGGAGGACAAGAC-3') 프라이머와 EF-2(5'-GGAAGTACCAGTGATCATGTT-3') 프라이머(O’Donnell et al., 1998)를 사용하여 PCR을 하였다.
- 온실에서 재배한 멜론 유묘의 뿌리를 물로 세척하여 흙을 제거한 후에 GR 균주의 포자현탁액에 30분 동안 침지하여 접종하였다. 그리고 5 × 8 연결 포트(포트당 토양 80mL/pot, 범농사)에 원예용상토 5호(부농사)를 넣고 접종한 멜론 유묘를 이식하였다.
- 재배 온도에 따른 발병 실험은 접종한 멜론 유묘를 20, 25 및 30℃ 습실상에서 1일 동안 배양한 후에 각각 20, 25및 30℃ 항온항습실로 이동하고 하루에 12시간씩 광을 조사하면서 약 3주 동안 재배한 후에 병 발생을 조사하였다.
- 접종 후 재배 온도에 따른 멜론의 덩굴쪼김병 발생 실험을 제외한 모든 실험은 접종한 멜론 유묘를 25℃ 습실상에서 1일 동안 배양한 후에 25℃ 항온항습실로 옮기고 하루에 12시간씩 광을 조사하면서 6일 동안 재배하였다. 그리고 28℃에서 약 2주 동안 더 재배한 후에 덩굴쪼김병 발생을 조사 하였다.
- 접종원 대량생산을 위한 최적배지를 선발하기 위하여 GR 균주를 PDA 배지에 접종하고 25℃ incubator에서 7일 동안 전배양 하였다. Fusarium oxysporum의 포자 생산을 위해 많은 연구자들이 사용하고 있는 6종배지, malt extract broth (MEB; Becton, Dickinson and Co.
- ) 배양여액을 제거하였다. 포자 침전물에 멸균수를 넣고 잘 현탁한 후에 hematocytometer를 이용하여 광학현미경하에서 포자(소형 분생포자)의 농도를 측정하였다.
- 한편, 접종원 농도에 따른 발병 실험을 위해서는 1.3 × 104, 4.0 × 104, 1.2 × 105, 3.6× 105, 1.1 × 106conidia/mL로 조정하여 실험에 사용하였다.
대상 데이터
- (1976)의 방법에 따라 감수성인 ‘Charentais T’, Fom-1 저항성 유전자를 가지는 ‘Charentais Fom-1’, Fom-2저항성 유전자가 도입된 ‘Charentais Fom-2’ 그리고 Fom-1과 Fom-2를 지니는 ‘MR-1’ 등 4종의 멜론 품종들을 농업유전자원센터(KACC)로 부터 분양 받아 실험에 사용하였다.
- melonis GR 균주에 대한 저항성을 조사하기 위하여 멜론 22개 품종, ‘아시아황금’(아시아종묘), ‘아세아조춘만 추’(아시아종묘), ‘아시아파파야’(아시아종묘), ‘아시아성하’ (아시아종묘), ‘베타리치’(동부팜한농), ‘얼스엘리제’(신젠타 종묘), ‘얼스골드킹’(코레곤종묘), ‘얼스해피’(코레곤종묘), ‘얼스킹’(코레곤종묘), ‘얼스마운트하계’(아시아종묘), ‘얼스파티’(신젠타종묘), ‘얼스탑원’(아시아종묘), ‘얼스VIP’(농협종묘), ‘얼룩파파야’(아시아종묘), ‘장춘FR파파이야’(장춘종묘), ‘JJ하계’(아시아종묘), ‘JJ원탑’(아시아종묘), ‘레드퀸’(농협종묘), ‘세지오케이’(동부팜한농), ‘썸머쿨’(코레곤종묘), ‘슈퍼세지’(아시아종묘)과 멜론용 대목 6개 품종, ‘강근토좌’(아시아종묘), ‘황제토좌’(코레곤종묘), ‘중토좌’(코레곤종묘), ‘NO.8’(한국다끼이), ‘RS111’(신젠타종묘), ‘신토좌’(아시아종묘)를 시중에서 구입하여 실험에 사용하였다.
- melonis에 대한 저항성 차이를 조사하기 위하여, 실험한 22종 멜론 품종으로부터 GR 균주에 대한 저항성 정도가 서로 다른 6개 품종, 저항성인 ‘레드퀸’, ‘썸머쿨’ 및 ‘슈퍼세지’, 중도저항성인 ‘아시아파파야’, 그리고 감수성인 ‘얼룩파파야’와 ‘아시아황금’ 품종을 선발하였다.
- 멜론의 생육 시기에 따른 덩굴쪼김병 발생 실험을 제외한 모든 실험은 종자를 파종하고 7일 동안 재배한 유묘를 실험에 사용하였다. 멜론의 생육 시기에 따른 발병 실험을 위해서 접종하기 7, 10, 13, 16일 전에 각각 파종하고 온실에서 재배하여 실험에 사용하였다.
- 발병 조건에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 저항성 차이 실험을 위해서는 저항성으로 ‘레드퀸’(농협종묘), ‘썸머쿨’ (코레곤종묘), ‘슈퍼세지’(아시아종묘)를, 중도저항성으로 아시아파파야’(아시아종묘)를, 그리고 감수성으로 ‘얼룩파파야’(아시아종묘)와 ‘아시아황금’(아시아종묘) 등 6개 멜론 품종을 실험에 사용하였다.
- 오이는 ‘아시아청장’(아시아종묘)과 ‘백미백다다기’(동부팜한농), 멜론은 ‘베타리치’(동부팜한농)와 ‘아시아황금’(아시아종묘), 참외는 ‘금제’(아시아종묘)와 ‘조은대’(신젠타종묘) 그리고 수박은 ‘서태자’(아시아종묘)와 ‘꼬꼬마수박’(아시아종묘) 품종을 시중에서 구입하여 실험에 사용하였다.
데이터처리
- gov)에 등록된 ITS 와 TEF영역의 염기서열과 비교하였다. GR 균주와 GenBank 로부터 얻은 염기서열은 CLUSTAL X(Thompson et al., 1994) 와 PHYDIT program(Chun, 1995)을 이용하여 분석하였다. Neighbor-joining tree는 PHYLIP 3.
- 1 cycle sequencing kits(Applied Biosystems, USA)로 반응 후 각각의 프라이머로 DNA Engine Tetrad 2 peltier thermal cycler (Bio-Rad, USA)을 이용하여 PCR 반응을 수행하고 ABI Prism 3730xl Analyzer 96 capillary type(Applied Biosystems, USA) 로 염기서열 분석결과를 얻었다. 분석된 염기서열은 BLAST search에 의해 GenBank(www.ncbi.nlm.nih.gov)에 등록된 ITS 와 TEF영역의 염기서열과 비교하였다. GR 균주와 GenBank 로부터 얻은 염기서열은 CLUSTAL X(Thompson et al.
- 통계분석은 SAS(SAS Institute, Inc., 1989, Cary, NC) 프로그램을 이용하여 ANOVA 분석을 하였으며, 처리 평균간 비교를 위하여 Duncan’s multiple range test(p = 0.05)를 실시하였다.
이론/모형
- 본 연구는 덩굴쪼김병이 발생한 멜론 식물로부터 분리한 균주를 동정하고, Risser et al.(1976)의 방법에 따라 race를 판별하였다. 그리고 F.
- Neighbor-joining tree는 PHYLIP 3.57c package(Felsenstein, 1985)의 Kimura’s 2-parameter distance model(Kimura, 1980) 을 이용하여 작성하였다.
성능/효과
- 1.2 × 105 conidia/mL 농도 접종구에서는 저항성 품종들뿐만 아니라 중도저항성인 ‘아시아파파야’도 고도의 저항성을 보였다.
- GR 균주의 기주 특이성을 조사하기 위하여 오이, 멜론, 수박 그리고 참외의 2개 품종씩에 GR 균주를 접종하고 덩굴쪼김병 발생을 조사한 결과, 멜론(‘베타리치’와 ‘아시아황금’)과 참외(‘금제’와 ‘조은대’)에서는 덩굴쪼김병이 심하게 발생하였다(Table 1).
- melonis GR 균주(race 1)에 대한 저항성 정도를 조사한 결과, 종자회사에서 덩굴쪼김병 저항성으로 판매하고 있는 멜론 재배용 대목 6개 품종(‘강근토좌’, ‘황제토좌’, ‘중토좌’, ‘NO.8’, ‘RS111’, ‘신토좌’)에서는 덩굴쪼김병이 전혀 발생하지 않았다.
- melonis GR 균주의 race를 확인하기 위하여 4종 판별품종을 사용하여 실험한 결과, 감수성인 ‘Charentais T’ 그리고 Fom-1저항성 유전자를 가진 ‘Charentais Fom-1'에서는 발병도 3.9이상의 높은 덩굴쪼김병 발생이 있었으나, Fom-2 유전자가 도입된 ‘Charentais Fom-2'는 덩굴쪼김병이 발생하지 않았다.
- melonis에 대한 멜론의 저항성 정도는 3 × 105 conidia/mL 농도의 포자현탁액에 침지하여 접종 하는 것이 더 효과적이라 생각되었다.
- sp. melonis의 접종방법 비교 실험 중 11일 이상 키운 유묘는 6일 동안 키운 유묘에 비해 병 발생이 적다고 보고하였으나, 본 실험에서는 유묘의 생육 시기에 따른 덩굴쪼김병 발생의 차이가 저항성 검정에 영향을 미칠 만큼 크지 않음이 확인되었다. 따라서 실험에 사용하는 멜론 유묘가 어릴수록 이식 후 활착 율이 높은 점 등을 고려하여 멜론 덩굴쪼김병의 저항성 검정을 위해서는 멜론을 파종하고 7일 동안 재배한 유묘를 실험에 사용하는 것이 효율적이라 생각되었다.
- sp. melonis임을 알수있었다.
- 가위 상처 유무에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 발생에서 통계적으로 유의성 있는 차이를 보이지 않았지만, 가위로 인한 인위적인 상처 없이 저항성 품종인 ‘레드퀸’과 ‘썸머쿨’, 그리고 감수성 품종인 ‘얼룩파파야’와 ‘아시아황금’이 각각 고도의 저항성과 높은 감수성을 보이며 저항성 특성을 잘 나타내었다(Fig. 4).
- 그 외 덩굴쪼김병 저항성 품종으로 공시되지 않은 17종 품종 중 2개 ‘아시아황금’과 ‘얼룩파파야’에서는 발병도 4.0을 보여 높은 감수성 품종임을 알 수 있었다.
- oxysporum과 일치하였다. 그러므로 이상의 형태적 및 분자생물학적 동정 결과에 따라 GR 균주는 F. oxysporum으로 동정되었다.
- 그리고 저항성 품종들에서는 멜론의 생육 시기에 관계없이 ‘레드퀸’, ‘썸머쿨’, ‘슈퍼세지’는 저항성을, ‘아시아파파야’는 중도저항성을 보였다(Fig. 3).
- 하지만 30℃에서는 이식 후에 유묘들의 활착율이 떨어지는 경우가 많다. 따라서 멜론 덩굴쪼김병의 저항성 검정을 위해서는 접종한 후에 멜론 유묘를 25-28℃에서 재배하는 것이 효율적이라 생각되었다.
- melonis의 접종방법 비교 실험 중 11일 이상 키운 유묘는 6일 동안 키운 유묘에 비해 병 발생이 적다고 보고하였으나, 본 실험에서는 유묘의 생육 시기에 따른 덩굴쪼김병 발생의 차이가 저항성 검정에 영향을 미칠 만큼 크지 않음이 확인되었다. 따라서 실험에 사용하는 멜론 유묘가 어릴수록 이식 후 활착 율이 높은 점 등을 고려하여 멜론 덩굴쪼김병의 저항성 검정을 위해서는 멜론을 파종하고 7일 동안 재배한 유묘를 실험에 사용하는 것이 효율적이라 생각되었다.
- 따라서 예비실험을 통해 선택한 3.3 × 106 conidia/mL의접종원 농도를 사용하여 멜론의 생육 시기, 접종 후 재배온도, 침지 시간 등에 따른 덩굴쪼김병 발생을 실험하였으나, 최종적으로 선정된 멜론의 생육 시기, 접종 후 재배온도, 침지 시간을 이용하여 접종 농도에 따른 덩굴쪼김병 발생을 실험한 결과에서 포자 농도를 1.3 × 104 , 4.0 × 104 , 1.2 ×105 , 3.6 × 105 , 1.1 × 106 conidia/mL로 더 낮추어 실험한 결과, F. oxysporum f.
- 8’, ‘RS111’, ‘신토좌’)에서는 덩굴쪼김병이 전혀 발생하지 않았다. 따라서 이들 대목 품종들은 GR 균주에 대한 고도의 저항성 품종임을 알 수 있었다.
- 따라서 이들 품종에는 ‘Fom-2’ 저항성 유전자가 단독으로 혹은 ‘Fom-1’ 유전자와 함께 도입되어 있을 것으로 생각되었다.
- 0의 덩굴쪼김병 발생을 보였다(Table 3). 따라서 판매되고 있는 멜론 품종들 중 종자회사에서 공시하는 저항성 품종은 5개뿐이나 실험한 시판 멜론품종 대부분은 저항성 정도에 차이는 있지만 race 1에 대한 저항성 품종임을 알 수 있었다.
- 또한 분자생물학적으로도 동정하였는데 GR 균주의 ITS 영역(White et al., 1990)과 translation elongation factor 1-α (TEF) 영역(O'Donnell et al., 1998)의 염기서열을 NCBI에 등록된 Fusarium 종들과 비교한 결과, 두 영역 모두에서 F. oxysporum과 100%의 상동성을 보였다.
- 멜론 유묘의 뿌리를 포자현탁액에 0, 0.5, 1, 3, 5시간 동안 침지하여 접종한 6개 품종들의 덩굴쪼김병 발생 차이를 실험한 결과, 감수성 품종들은 실험한 침지시간에 관계없이 모든 처리구에서 높은 감수성을 보였다(Fig. 5). 그러나 저항성 품종들은 침지시간이 증가함에 따라 덩굴쪼김병 발생이 증가하였다.
- 실험한 22종 멜론 품종 중 종자회사에서 덩굴쪼김병에 대한 저항성 품종으로 판매하고 있는 5개 품종(‘레드퀸’, ‘썸머쿨’, ‘아시아성하’, ‘아세아조춘만추’, ‘장춘FR파파이야’) 중‘아세아조춘만추’와 ‘장춘FR파파이야’를 제외한 나머지 3종은 모두 1.0 이하의 낮은 발병도를 보여 이들은 race 1 균주에 대한 높은 저항성 품종임을 알 수 있었다(Table 3).
- 유묘의 생육 시기에 따른 멜론 품종들의 덩굴쪼김병 발생 정도를 실험하기 위하여 선발한 6개 품종을 파종하고 7, 10, 13, 16일 후에 접종하여 병 발생을 조사한 결과, 감수성 품종인 ‘얼룩파파야’와 ‘아시아황금’은 실험한 모든 생육 시기의 식물에서 덩굴쪼김병이 심하게 발생하였다.
- 준비한 멜론 유묘를 GR 균주의 다섯 가지 농도(1.3 × 104 ,4.0 × 104 , 1.2 × 105 , 3.6 × 105 , 1.1 × 106 conidia/mL)의 포자 현탁액에 침지하고 이식하여 6개 멜론 품종의 덩굴쪼김병 발생 정도를 실험한 결과, ‘얼룩파파야’와 ‘아시아황금’은 접종원 농도와 관계없이 모든 농도에서 높은 감수성을 나타냈다.
- , 2004). 하지만 본 실험의 GR 균주는 두 유전자 영역 모두에서 F. oxysporum과 일치하였다. 그러므로 이상의 형태적 및 분자생물학적 동정 결과에 따라 GR 균주는 F.
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