[논문]들깨 추출물의 항산화 활성과 암세포 기본 특성에 대한 억제 효과

김시내; 송보람; 주지형

doi:10.3746/jkfn.2015.44.2.208

들깨 추출물의 항산화 활성과 암세포 기본 특성에 대한 억제 효과
Antioxidant Activities of Perilla frutescens Britton Seed Extract and Its Inhibitory Effects against Major Characteristics of Cancer Cells 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.44 no.2, 2015년, pp.208 - 215

김시내 (충북대학교 식품영양학과) , 송보람 (충북대학교 식품영양학과) , 주지형 (충북대학교 식품영양학과)

초록
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본 연구에서는 들깨 에탄올 추출물의 항산화 성분 함량 및 활성을 측정하고 들깨 추출물이 암세포의 주요 특징인 성장, colony 형성, 이동, 부착성 등에 미치는 영향을 in vitro 수준에서 분석하고자 하였다. 들깨의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 각각 222.6 mg gallic acid equivalent/100 g과 285.7 mg quercetin equivalent/100 g으로 측정되었다. 들깨 추출물($87.5{\sim}350{\mu}g/mL$)의 DPPH radical 소거 활성은 24~45%, 철 환원력은 28~62%였다. 한편 $87.5{\sim}350{\mu}g/mL$ 농도의 들깨 추출물은 HCT116 대장암 세포와 H1299 폐암 세포의 성장을 18~94% 억제하는 농도 의존적 활성이 있었다. 또한 $175{\mu}g/mL$ 농도의 들깨 추출물은 HCT116과 H1299 세포에서 모두 colony 형성을 완전히 억제하는 활성이 있었다. 또한 들깨 추출물은 $87.5{\sim}350{\mu}g/mL$ 농도에서 H1299 세포의 이동을 30~37% 억제하였고, 가장 높은 농도인 $350{\mu}g/mL$ 농도에서는 HCT116과 H1299 세포의 부착을 14~16% 억제하였다. 이상의 결과를 통하여 들깨 추출물은 항산화 활성 및 암세포의 주요 특징을 억제하는 활성을 가지는 것으로 생각되며, 향후 이러한 연구 결과가 in vivo 수준에서 재현되는지 여부와 본 활성과 관련된 세부작용기전 또한 규명되어야 할 것으로 생각된다.

Abstract ▼ AI-Helper

The aim of the study was to investigate the antioxidant activities of ethanol extract of perilla seed (PSE) and its inhibitory effects against major characteristics of cancer cells, such as unrestricted growth and activated metastasis in vitro. The total polyphenol and flavonoid levels of PSE were 222.6 mg gallic acid equivalent/100 g and 285.7 mg quercetin equivalent/100 g, respectively. The radical scavenging activity and ferric reducing antioxidant power of PSE at concentration of 87.5 to $350{\mu}g/mL$ were 24~45% and 28~62%, respectively. Treatment of HCT116 colorectal carcinoma cells and H1299 non-small cell lung carcinoma cells with PSE dose-dependently inhibited growth by 18~94% (at concentration range of 87.5 to $350{\mu}g/mL$) and completely abolished colony formation (at concentration of $175{\mu}g/mL$). PSE was also effective in inhibiting migration of H1299 cells (by 30~37% at concentration range of 87.5 to $350{\mu}g/mL$) and adhesion of both HCT116 and H1299 cells (by 14~16% at concentration of $350{\mu}g/mL$). These results indicate that PSE exerts antioxidant and anti-cancer activities in vitro. It needs to be determined whether or not similar effects can be reproduced in vivo.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

암세포가 정상세포와 구별되는 가장 기본적인 특징은 무제한적인 증식이라 할 수 있다(46). 따라서 본 연구에서 들깨 추출물의 in vitro 항암성을 평가하기 위하여 가장 먼저 들깨 추출물의 암세포 증식 억제 활성을 측정하였으며, 그 결과는 Fig. 2와 같다. HCT116 대장암 세포와 H1299 폐암세포에 87.
이러한 침윤 및 전이 과정에서 암세포가 획득하게 되는 중요한 특성 중 하나가 이동성의 증가이다(46). 따라서 본 연구에서는 들깨 추출물의 암세포 이동성에 대한 억제 활성을 조사하였다(Fig. 4). 예비 실험을 통하여 serum-complete 배지에 함유된 들깨 추출물이 24시간 이내로 처리되었을 때에는 HCT116 및 H1299 세포의 형태 및 증식에 유의적인 변화가 없는 것을 확인한 후(data not shown), 이동성 측정을 위한 세포 처리 시간을 24시간으로 선정하였다.
활성산소종은 여러 세포신호전달경로를 활성화하여 암화과정에 기여하기 때문에 수많은 항산화 성분이 다양한 수준으로 항암 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다(29). 따라서 본 연구에서는 항산화 활성을 가진 들깨 에탄올 추출물이 항암 활성 또한 나타내는지 여부를 in vitro 수준에서 조사하고자 하였다.
본 연구에서는 들깨의 에탄올 추출물을 제조하고 이를 이용하여 항산화 성분의 함량 및 항산화 활성을 분석하고자 하였다. 또한 들깨 에탄올 추출물이 암세포의 기본적인 특성에 미치는 영향에 대하여 인체 유래 암세포주를 이용하여 in vitro 수준에서 조사하고자 하였다. 이러한 연구는 앞으로 들깨가 in vivo 수준에서도 항산화 및 항암 활성을 가지는지 여부와 이러한 활성과 관련된 세부적인 작용기전을 연구하기 위한 기초자료로 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
본 연구에서는 들깨 에탄올 추출물의 항산화 성분 함량 및 활성을 측정하고 들깨 추출물이 암세포의 주요 특징인 성장, colony 형성, 이동, 부착성 등에 미치는 영향을 in vitro 수준에서 분석하고자 하였다. 들깨의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 각각 222.
암세포의 colony 형성 정도는 암세포의 증식력과 함께 암 줄기세포의 중심 특징인 자기 재생력을 반영하는 것으로 알려져 있다(48). 본 연구에서는 들깨 추출물이 colony 형성 정도에 미치는 영향을 조사하기 위하여 적은 수의 HCT116과 H1299 세포에 들깨 추출물을 14일 동안 처리한 후 최종적으로 형성된 colony 수를 대조구에서 형성된 colony 수 대비 %로 나타내었다(Fig. 3). HCT116 세포의 경우에는 87.
본 연구에서는 들깨의 에탄올 추출물을 제조하고 이를 이용하여 항산화 성분의 함량 및 항산화 활성을 분석하고자 하였다. 또한 들깨 에탄올 추출물이 암세포의 기본적인 특성에 미치는 영향에 대하여 인체 유래 암세포주를 이용하여 in vitro 수준에서 조사하고자 하였다.
침윤 단계에서의 암세포는 정상세포에 비하여 세포와 세포간의 부착력은 감소하여 상호 결합력이 떨어지지만 세포와 세포 외 기질 물질 간의 부착력은 증가하는 것으로 알려져 있다(46). 본 연구에서는 세포외 기질(extracellular matrix)에 존재하는 대표적인 세포 부착 물질인 fibronectin(46)이 코팅된 세포 배양용 plate를 이용하여 암세포가 fibronectin에 부착되는 것을 들깨 추출물이 억제하는 정도를 측정하고자 하였으며 그 결과는 Fig. 5와 같다. HCT116세포에서는 들깨 추출물의 가장 높은 처리 농도(350 μg/mL)에서 유의적인 부착 억제 효과가 나타났다(대조구 부착 정도 대비 83.

가설 설정

1)Total polyphenol and flavonoid contents are expressed as gallic acid equivalents (GAE) and quercetin equivalent (QE), respectively.

제안 방법

이어 plate reader(Imark, Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA)를 이용하여 650 nm에서 흡광도를 측정하였다. Gallic acid(Sigma-Aldrich) 표준검량곡선을 이용하여 시료의 총 폴리페놀 함량(mg gallic acid equivalent/100 g dried leaf)을 산출하였다.
HCT116 세포와 H1299 세포는 McCoy's 5A(Gibco, Rockville, MD, USA) 배지와 RPMI1640(Welgene Inc., Daegu, Korea) 배지를 각각 이용하여 10% FBS(Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) 및 1% penicillin- streptomycin(Welgene Inc.)을 첨가한 후 배양(37℃, 95% 습도, 5% CO2)하였다.
들깨 추출물 30 μL, diethylene glycol 100 μL, 1 N NaOH 50 μL를 혼합하고 실온에서 1시간 반응시킨 후 plate reader(Bio-Rad Laboratories)를 이용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. Quercetin(Sigma-Aldrich) 표준검량곡선을 이용하여 시료의 총 플라보노이드 함량(mg quercetin equivalent/100 g dried leaf)을 산출하였다.
5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 함유한 serum-complete 배지를 처리한 후 대조구 및 각 처리구당 무작위로 9~15 영역을 선정하고, 24시간 후 동일한 영역에서 세포가 wound로 이동된 정도를 위상차현미경(×40; Primo Vert, Carl Zeiss, Oberkochen, Germany)하에서 관찰하였다. Wound의 너비는 iSolution Lite software(IMT i-solution, Burnarby, Canada)를 이용하여 측정하였고, 각 영역에서 관찰되는 wound 너비의 중간 값을 선택하였다. 들깨 추출물이 처리된 세포의 이동 정도는 대조구 세포의 이동 정도 대비 %로 나타내었다.
각 시료의 철 환원력(%)은 시료와 같은 농도의 ascorbic acid(Samchun Pure Chemicals Co. Ltd., Pyeongtaek, Korea)를 대조군으로 하여 (시료 흡광도/ 대조구 흡광도)×100의 식을 이용하여 산출하였다.
)을 첨가한 후 배양(37℃, 95% 습도, 5% CO₂)하였다. 들깨 추출물은 dimethyl sulfoxide(DMSO; Biosesang Inc., Seongnam, Korea)에 녹여 stock을 제조하였고 실험 직전에 배지를 이용하여 희석한 후 세포에 처리하였다.
들깨 추출물의 철 환원력을 평가하기 위하여 Benzie와 Strain(38)의 방법을 일부 변형하여 측정하였다. 먼저 300 mM acetate buffer(pH 3.
들깨는 충북 보은군에 위치한 보은농업협동조합에서 구입하여 사용하였다. 들깨는 분쇄하고(MU5300, TC Angel, Seoul, Korea) 동결건조(PH1316, IlshinBioBase, Yangju, Korea) 한 후 중량 대비 10배 용량의 70% 에탄올과 혼합하여 4시간 동안 교반(SHO-1D, Daihan Scientific Co., Seoul, Korea)하였다. 이어 3,000 rpm에서 3분간 원심분리(A320101, Gyrozen, Daejun, Korea) 하여 얻은 상층액을 감압농축(NB-503CIR, N-biotek, Bucheon, Korea) 한 후 -70℃ deep freezer(DF8514, IlshinBioBase)에 보관하면서 세포 처리에 이용하였다.
세포 배양용 30 mm dish에 세포(1×104 cell/well)를 분주하고 70~80% confluence 시 pipette tip을 이용하여 평행한 세 줄을 긁어서 세포가 없는 빈 공간(wound)을 만들었다.
세포 배양용 6-well plate에 적은 수의 암세포(2×102 cell/well)를 분주하고 24시간 후 87.5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 함유한 serum-complete 배지를 처리하였으며, 1주일 후 같은 농도의 들깨 추출물이 함유된 새로운 배지로 갈아주었다.
세포 배양용 96-well plate(Corning Inc., Corning, NY, USA)에 HCT116 또는 H1299 세포(5×103 cell/well)를 분주하고, 24시간 후 87.5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 함유한 serum-free 배지를 이용하여 72시간 또는 120시간 동안 처리하였다.
4). 예비 실험을 통하여 serum-complete 배지에 함유된 들깨 추출물이 24시간 이내로 처리되었을 때에는 HCT116 및 H1299 세포의 형태 및 증식에 유의적인 변화가 없는 것을 확인한 후(data not shown), 이동성 측정을 위한 세포 처리 시간을 24시간으로 선정하였다. 87.
이어 0.5% BSA로 37°C에서 1시간 동안 blocking 한 후, 세포(1×103 cell/well)를 87.5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 함유한 배지에 넣어 잘 섞어주고 세포 배양용 96-well plate(Corning Inc.)에 분주하였다.
이어 87.5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 함유한 serum-complete 배지를 처리한 후 대조구 및 각 처리구당 무작위로 9~15 영역을 선정하고, 24시간 후 동일한 영역에서 세포가 wound로 이동된 정도를 위상차현미경(×40; Primo Vert, Carl Zeiss, Oberkochen, Germany)하에서 관찰하였다.
5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 함유한 serum-complete 배지를 처리하였으며, 1주일 후 같은 농도의 들깨 추출물이 함유된 새로운 배지로 갈아주었다. 총 14일 처리 후 50% 에탄올 용액을 이용하여 제조한 0.05% methylene blue(Sigma-Aldrich)로 colony를 푸른색으로 염색하고 colony 수를 세었다. 들깨 추출물이 처리된 세포의 colony 수는 대조구 세포의 colony 수 대비 %로 나타내었다.
총 폴리페놀 함량은 Folin-Ciocalteu의 방법(35)을 일부 변형하여 측정하였다. 증류수 100 μL, 7.
총 플라보노이드 함량은 Zhishen 등(36)의 방법을 일부 변형하여 사용하였다. 들깨 추출물 30 μL, diethylene glycol 100 μL, 1 N NaOH 50 μL를 혼합하고 실온에서 1시간 반응시킨 후 plate reader(Bio-Rad Laboratories)를 이용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다.

대상 데이터

HCT116 인간 대장암 세포주와 H1299 인간 폐암 세포주는 한국세포주은행(Seoul, Korea)에서 분양받아 이용하였다. HCT116 세포와 H1299 세포는 McCoy's 5A(Gibco, Rockville, MD, USA) 배지와 RPMI1640(Welgene Inc.
들깨는 충북 보은군에 위치한 보은농업협동조합에서 구입하여 사용하였다. 들깨는 분쇄하고(MU5300, TC Angel, Seoul, Korea) 동결건조(PH1316, IlshinBioBase, Yangju, Korea) 한 후 중량 대비 10배 용량의 70% 에탄올과 혼합하여 4시간 동안 교반(SHO-1D, Daihan Scientific Co.

데이터처리

단순한 두 군 간의 활성을 비교하기 위해서는 two-tailed Student's t-test를 실시하였다.
들깨 추출물의 처리 농도에 따른 암세포 생존, colony 형성, 이동, 부착 정도의 차이는 one-way ANOVA를 이용하여 분석한 후, P<0.05일 때 사후 분석으로 Tukey's test를 실시하여 유의성을 검증하였다.
암세포의 생존, colony 형성, 이동, 부착에 대한 들깨 추출물의 억제 활성이 들깨 추출물의 농도에 의존적이었는지를 평가하기 위해 선형 및 곡선형 회귀분석을 실시하였고, P<0.05일 때 유의적으로 농도 의존적 활성이 있다고 판단하였다.
통계분석은 SPSS 12.0(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 이용하여 수행하였고, 모든 결과 값은 mean±SEM으로 나타내었다.

이론/모형

들깨 추출물의 radical 소거 활성을 측정하기 위해서 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl; Sigma-Aldrich)법(37)을 이용하였다. 암소에서 준비한 1 mM DPPH와 들깨 추출물 시료(87.
암세포의 colony 형성 정도는 Hou 등(40)이 보고한 방법에 따라 측정하였다. 세포 배양용 6-well plate에 적은 수의 암세포(2×10² cell/well)를 분주하고 24시간 후 87.
암세포의 생존 정도는 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)를 이용하는 방법에 따라 측정하였다(39). 세포 배양용 96-well plate(Corning Inc.
암세포의 이동 정도는 Ju 등(41)이 보고한 방법에 따라 측정하였다. 세포 배양용 30 mm dish에 세포(1×10⁴ cell/well)를 분주하고 70~80% confluence 시 pipette tip을 이용하여 평행한 세 줄을 긁어서 세포가 없는 빈 공간(wound)을 만들었다.

성능/효과

87.5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물이 보인 DPPH radical 소거 활성은 각각 23.7, 40.0, 45.3%, 철 환원력은 각각 27.8, 36.0, 62.1%로 들깨 추출물의 농도가 증가할수록 활성이 증가하였다(Fig. 1).
87.5~350 μg/mL 농도의 들깨 추출물이 처리되었을 때 HCT116 세포에서는 유의적인 이동 억제 활성이 나타나지 않았으나 H1299 세포에서는 유의적인 억제 활성이 나타났다(대조구 대비 29.6~36.9%, P<0.05).
HCT116 대장암 세포와 H1299 폐암세포에 87.5, 175, 350 μg/mL 농도의 들깨 추출물을 72시간 또는 120시간 동안 처리하였을 때 모든 처리 농도 및 시점에서 유의적인 암세포 증식 억제 활성을 보였다(18.2~94.1%, P<0.05).
HCT116세포에서는 들깨 추출물의 가장 높은 처리 농도(350 μg/mL)에서 유의적인 부착 억제 효과가 나타났다(대조구 부착 정도 대비 83.6%; P<0.05).
001). 들깨 추출물이 HCT116 세포에서 보인 증식 억제 활성은 H1299 세포에서 보인 증식 억제 활성보다 72시간 시점에서는 낮은 경향을 보였으나(18.2~32.4% in HCT116 vs. 51.0~61.9% in H1299), 92시간 시점에서는 오히려 높은 경향을 보였다(73.6~94.1% in HCT116 vs. 53.9~73.1% in H1299). 이와 같은 들깨 추출물의 암세포 증식 억제 활성은 250~500 μg/mL 농도의 호두씨 메탄올 추출물이 48시간 처리되었을 때 Caco-2 대장암 세포에서 보인 증식 억제 활성(약 20~35%)(47)보다 높은 수준이었으나 연구마다 사용된 세포 종류 및 처리조건 등이 다르기 때문에 직접적인 비교는 어려운 것으로 생각된다.
본 연구에서는 들깨 에탄올 추출물의 항산화 성분 함량 및 활성을 측정하고 들깨 추출물이 암세포의 주요 특징인 성장, colony 형성, 이동, 부착성 등에 미치는 영향을 in vitro 수준에서 분석하고자 하였다. 들깨의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 각각 222.6 mg gallic acid equivalent/100 g과 285.7 mg quercetin equivalent/100 g으로 측정되었다. 들깨 추출물(87.
또한 175 μg/mL 농도의 들깨 추출물은 HCT116과 H1299 세포에서 모두 colony 형성을 완전히 억제하는 활성이 있었다.
또한 들깨 추출물은 87.5~350 μg/mL 농도에서 H1299 세포의 이동을 30~37% 억제하였고, 가장 높은 농도인 350 μg/mL 농도에서는 HCT116과 H1299 세포의 부착을 14~16% 억제하였다.
플라보노이드는 식물이 함유하고 있는 노란색을 띠는 물질로 페놀 화합물에 속하면서 C6-C3-C6의 기본 구조를 가지는 화합물의 총칭이다(43). 본 연구 결과 들깨의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 각각 222.6 mg gallic acid equivalent/100 g과 285.7 mg quercetin equivalent/100 g이었다. 본 연구에서 측정된 총 폴리페놀 함량은 농촌진흥청(43)이 보고한 함량(361.
Lee와 Lee(44)는 들깨를 포함하여 총 8종의 종실 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량을 약 120~2,060 mg gallic acid equivalent/100 g으로 보고하였는데, 그중 들깨의 총 폴리페놀 함량(830 mg tannic acid equivalent/100 g)은 호두나 해바라기 씨의 함량(2,020~2,060 mg tannic acid equivalent/100 g)보다는 낮았으나 흰깨나 호박씨 등의 함량(130~270 mg tannic acid equivalent/100 g)보다는 높은 수준이었다. 본 연구에서 측정된 총 플라보노이드 함량은 농촌진흥청(43)이 보고한 함량(198.3 mg rutin equivalent/100 g)보다 높은 수준이었고 Lee 등(45)이 보고한 총 15품종 들깨 메탄올 추출물의 함량(1.8~24.3 mg/100 g)보다는 현저하게 높은 수준이었다. 이와 같은 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량의 차이는 각 연구마다 이용된 들깨의 종류, 재배 조건, 수확 시기, 추출 조건, 표준물질 종류 등이 다르기 때문인 것으로 생각된다.
이어 회귀분석을 실시한 결과 이와 같은 들깨 추출물의 증식 억제 활성은 낮은 농도에서 그 활성이 높고 높은 농도로 갈수록 활성의 큰 차이를 보이지 않는 2차 곡선 유형의 농도 의존성이 있는 것으로 나타났다(R2>0.8, P<0.001).
한편 들깨 추출물의 처리 시간이 길어짐에 따라 암세포의 증식을 억제하는 효과가 크게 증가하는 현상은 HCT116 세포에서 두드러졌는데 들깨 추출물이 120시간 시점에서 보인 증식 억제 활성(51.0~73.1%)은 72시간 시점에서 보인 활성(18.2~32.4%)보다 유의적으로 높았다(P<0.001).
회귀분석을 실시한 결과 H1299 세포에서 나타난 들깨 추출물의 colony 억제 활성은 선형의 농도 의존성이 있는 것으로 나타났다(R2=0.97, P<0.001).

후속연구

이와 같은 들깨 추출물의 암세포 부착 억제 활성 또한 이동 억제 활성과 마찬가지로 암세포의 성장이나 colony 형성 억제 활성에 비해서는 다소 낮은 수준이었다. 들깨 추출물이 어떠한 기전으로 암세포의 부착을 억제하는지에 대한 세부적인 후속 연구가 필요할 것으로 생각된다.
이러한 이동 억제 활성은 앞서 기술한 암세포의 성장 억제 활성이나 colony 형성 억제 활성 정도와 비교해보면 다소 낮은 수준이었는데, 이는 실험 방법마다 활성이 측정되는 시점이 다르기 때문인 것과도 부분적으로 관련이 있을 것으로 생각된다. 앞으로 들깨 추출물 처리에 의한 폐암 세포의 이동성 억제와 관련된 기전 연구와 들깨 추출물이 암세포의 침윤에 미치는 영향에 대한 연구 또한 필요할 것으로 생각된다.
또한 들깨 에탄올 추출물이 암세포의 기본적인 특성에 미치는 영향에 대하여 인체 유래 암세포주를 이용하여 in vitro 수준에서 조사하고자 하였다. 이러한 연구는 앞으로 들깨가 in vivo 수준에서도 항산화 및 항암 활성을 가지는지 여부와 이러한 활성과 관련된 세부적인 작용기전을 연구하기 위한 기초자료로 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
5~350 μg/mL 농도에서 H1299 세포의 이동을 30~37% 억제하였고, 가장 높은 농도인 350 μg/mL 농도에서는 HCT116과 H1299 세포의 부착을 14~16% 억제하였다. 이상의 결과를 통하여 들깨 추출물은 항산화 활성 및 암세포의 주요 특징을 억제하는 활성을 가지는 것으로 생각되며, 향후 이러한 연구 결과가 in vivo 수준에서 재현되는지 여부와 본 활성과 관련된 세부작용기전 또한 규명되어야 할 것으로 생각된다.
001). 최근 유방암 줄기세포, 췌장암 줄기세포, 전립선암 줄기세포 등의 특성을 억제하는 활성이 있는 식품성분이 보고되고 있어(49-51), 앞으로 들깨 추출물 및 주요성분이 암 줄기세포에 미치는 영향과 작용기전 등에 대해서 심도 있는 연구가 필요할 것으로 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	활성산소의 생성 원인은 무엇인가?	활성산소는 쌍을 이루지 못한 전자에 의하여 높은 반응성을 가지는 산소 원자나 분자로 정상적인 생리작용 중에 체내에서 발생되거나 방사능, 오염물질, 바이러스, 음주, 흡연, 스트레스 등과 같은 외부적인 요인에 의하여 생성된다(29). 활성산소는 체내 항산화 체계에 의하여 신속히 제거되어야 하는데 이러한 과정이 적절하게 일어나지 못하면 산화스트레스가 유발되어 암, 심혈관계 질환, 퇴행성 질환 등과 같은 만성질환의 원인이 되는 것으로 알려져 있다(29).
	들깨란 무엇인가?	들깨(Perilla frutescens Britton)는 통화식물목 꿀풀과에 속하는 일년생 초본식물로 동남아시아 지역을 중심으로 그 종실이나 잎 그리고 종실을 착유하여 얻은 기름 등이 널리 소비되고 있다(1,2). 특히 들깨 종실의 경우는 한국인의 식생활에서 중요한 위치를 차지하고 있는 식품 중 하나라고 할 수 있는데 제5기 국민건강영양조사 결과에 의하면 종실류 중에서는 유일하게 조섬유 섭취를 위한 주요 급원식품 30위 내에 포함된 바 있으며 그 순위는 들깻잎 또는 배추보다도 높은 것으로 보고되었다(3).
	들깨 추출물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량이 연구마다 다르게 측정되는 이유는?	3 mg/100 g)보다는 현저하게 높은 수준이었다. 이와 같은 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량의 차이는 각 연구마다 이용된 들깨의 종류, 재배 조건, 수확 시기, 추출 조건, 표준물질 종류 등이 다르기 때문인 것으로 생각된다. 한편 Lee 등(45)은 rosmarinic acid와 rosmarinic acid-3-O-glucoside가 들깨 메탄올 추출물에서 발견되는 주요 페놀 성분이고 이들성분의 함량은 약 1.

참고문헌 (51)

Lee CB. 2003. Coloured flora of Korea. 1st ed. Hyang Mun Sa, Seoul, Korea. p 140.
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저자의 다른 논문 :

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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