본 연구에서는 만성질환의 주요 위험인자인 비만을 예방하기 위한 식품소재로서 3T3-L1세포를 이용하여 탈피한 도토리의 항비만 효과를 알아보고자 하였다. 3T3-L1 세포에서 생존율(MTT assay)을 측정한 결과, AE와 AW 시료 모두 $500{\mu}g/mL$ 농도에서는 다소 생존율의 감소를 보여, $300{\mu}g/mL$를 최종 농도로 정하였다. 3T3-L1 세포의 지질축적 억제 효과를 측정한 결과, 농도 $100{\mu}g/mL$로 처리하였을 때 두 시료 모두 지질축적량의 증가를 보였으나, $200{\mu}g/mL$ 처리농도에서 AE 시료는 82%로, AW 시료는 74%로 감소되다가 $300 {\mu}g/mL$ 농도에서는 두 시료 모두 약 53% 수준까지 지질축적이 억제되었다. 3T3-L1 세포에서 중성지방 억제 효과를 확인한 결과, AE 시료의 경우 $200{\mu}g/mL$ 농도에서 11%의 감소율, $300{\mu}g/mL$ 농도에서 42% 수준의 감소율을 보였다. AW 시료도 $200{\mu}g/mL$ 농도에서 5%의 감소율과 $300{\mu}g/mL$에서 41%의 감소율을 보였다. 3T3-L1 세포의 ROS 생성량을 측정한 결과, 시료 농도 $200{\mu}g/mL$에서 AE는 42%, AW는 33%로 $300{\mu}g/mL$에서는 AE는 58%, AW는 52%로 ROS 생성량의 억제를 보였다. 3T3-L1 세포에서 mRNA 발현에 미치는 영향을 대조군과 비교하였을 때 두 시료(AE와 AW) 모두 $300{\mu}g/mL$ 농도에서 $PPAR-{\gamma}$은 54%와 38%, aP2는 40%와 18% 수준의 발현을 억제시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 탈피한 도토리는 3T3-L1 세포의 분화를 억제함으로써 새로운 항비만 소재로의 가능성이 있는 것으로 판단된다.
본 연구에서는 만성질환의 주요 위험인자인 비만을 예방하기 위한 식품소재로서 3T3-L1세포를 이용하여 탈피한 도토리의 항비만 효과를 알아보고자 하였다. 3T3-L1 세포에서 생존율(MTT assay)을 측정한 결과, AE와 AW 시료 모두 $500{\mu}g/mL$ 농도에서는 다소 생존율의 감소를 보여, $300{\mu}g/mL$를 최종 농도로 정하였다. 3T3-L1 세포의 지질축적 억제 효과를 측정한 결과, 농도 $100{\mu}g/mL$로 처리하였을 때 두 시료 모두 지질축적량의 증가를 보였으나, $200{\mu}g/mL$ 처리농도에서 AE 시료는 82%로, AW 시료는 74%로 감소되다가 $300 {\mu}g/mL$ 농도에서는 두 시료 모두 약 53% 수준까지 지질축적이 억제되었다. 3T3-L1 세포에서 중성지방 억제 효과를 확인한 결과, AE 시료의 경우 $200{\mu}g/mL$ 농도에서 11%의 감소율, $300{\mu}g/mL$ 농도에서 42% 수준의 감소율을 보였다. AW 시료도 $200{\mu}g/mL$ 농도에서 5%의 감소율과 $300{\mu}g/mL$에서 41%의 감소율을 보였다. 3T3-L1 세포의 ROS 생성량을 측정한 결과, 시료 농도 $200{\mu}g/mL$에서 AE는 42%, AW는 33%로 $300{\mu}g/mL$에서는 AE는 58%, AW는 52%로 ROS 생성량의 억제를 보였다. 3T3-L1 세포에서 mRNA 발현에 미치는 영향을 대조군과 비교하였을 때 두 시료(AE와 AW) 모두 $300{\mu}g/mL$ 농도에서 $PPAR-{\gamma}$은 54%와 38%, aP2는 40%와 18% 수준의 발현을 억제시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 탈피한 도토리는 3T3-L1 세포의 분화를 억제함으로써 새로운 항비만 소재로의 가능성이 있는 것으로 판단된다.
This study aimed to investigate the suppressive effect of acorn extracts, by evaluating 70% ethanol extract (AE) and hot water extract (AW) using 3T3-L1 preadipocytes. We applied various levels (0, 100, 200, 300 and $500 {\mu}g/mL$) of AE and AW to 3T3-L1 preadipocytes. The cell viability...
This study aimed to investigate the suppressive effect of acorn extracts, by evaluating 70% ethanol extract (AE) and hot water extract (AW) using 3T3-L1 preadipocytes. We applied various levels (0, 100, 200, 300 and $500 {\mu}g/mL$) of AE and AW to 3T3-L1 preadipocytes. The cell viability of the 3T3-L1 preadipocytes was not affected by up $300 {\mu}g/mL$ of extracts, but was suppressed by level $500{\mu}g/mL$ of both AE and AW by 20% and 9% respectively. The accumulation of lipid droplets in differentiated 3T3-L1 preadipocytes was dose-dependently suppressed by AE and AW. Especially, at high concentrations ($300{\mu}g/mL$), AE (42%) was more effective than AW (41%). Reactive oxygen species (ROS) was also dose-dependently suppressed by treatment with AE (58%) and AW (52%). With regard to the mRNA related to differentiated 3T3-L1 preadipocytes, $PPAR-{\gamma}$ and aP2 were suppressed by treatment with AE (54 and 40%) and AW (38 and 18%). From our results, acorn extract (AE) has more suppressive effects than AW in differentiated 3T3-L1 preadipocytes. We therefore concluded that acorn has suppressive effects against obesity in differentiated 3T3-L1 cells due to antioxidation.
This study aimed to investigate the suppressive effect of acorn extracts, by evaluating 70% ethanol extract (AE) and hot water extract (AW) using 3T3-L1 preadipocytes. We applied various levels (0, 100, 200, 300 and $500 {\mu}g/mL$) of AE and AW to 3T3-L1 preadipocytes. The cell viability of the 3T3-L1 preadipocytes was not affected by up $300 {\mu}g/mL$ of extracts, but was suppressed by level $500{\mu}g/mL$ of both AE and AW by 20% and 9% respectively. The accumulation of lipid droplets in differentiated 3T3-L1 preadipocytes was dose-dependently suppressed by AE and AW. Especially, at high concentrations ($300{\mu}g/mL$), AE (42%) was more effective than AW (41%). Reactive oxygen species (ROS) was also dose-dependently suppressed by treatment with AE (58%) and AW (52%). With regard to the mRNA related to differentiated 3T3-L1 preadipocytes, $PPAR-{\gamma}$ and aP2 were suppressed by treatment with AE (54 and 40%) and AW (38 and 18%). From our results, acorn extract (AE) has more suppressive effects than AW in differentiated 3T3-L1 preadipocytes. We therefore concluded that acorn has suppressive effects against obesity in differentiated 3T3-L1 cells due to antioxidation.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 3T3-L1 세포를 이용하여 탈피한 도토리 추출물(에탄올 및 열수)의 항비만 효과를 규명하고자 하였다.
본 연구에서는 도토리 에탄올 추출물(AE)과 열수 추출물(AW) 시료의 3T3-L1 세포의 분화 억제 효과를 알아보고자총 지질 축적량을 측정하여 Fig. 2에 제시하였다. 도토리 추출물시료의 세포의 생존율 실험결과를 토대로 AE 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리하였다.
본 연구에서는 만성질환의 주요 위험인자인 비만을 예방 하기 위한 식품소재로서 3T3-L1세포를 이용하여 탈피한 도 토리의 항비만 효과를 알아보고자 하였다. 3T3-L1 세포에서 생존율(MTT assay)을 측정한 결과, AE와 AW 시료 모두 500 μg/mL 농도에서는 다소 생존율의 감소를 보여, 300 μg/mL를 최종 농도로 정하였다.
제안 방법
2일 후에는 1 μg/mL insulin 만 포함된 배지로 교환하고, 2일에 한 번씩 4일 동안 10% FBS가 포함된 새로운 DMEM 배지로 갈아주면서 분화를 유도하였다.
3T3-L1 세포를 6-well plate에 7 × 104 cells/mL로 분주하고, 8일 동안 세포를 분화시키면서 각각의 샘플을 처리하였다.
6-well plate에 7 × 104 cells/ mL로 seeding 후 세포가 confluent 하게 증식한 것을 확인 후 2일 후에 DMEM 배지에 1 μg/mL insulin(I9278, Sigma, ST Louis, MO, USA), 0.5 mM 3-isobutyl-1-methylxanthine(I7018, Sigma, ST Louis, MO, USA), 1 μM dexamethasone(D4902, Sigma, ST. Louis, MO, USA)이 첨가된 분화배지(differentiation medium) 를 처리하여 분화를 유도하였다.
3T3-L1 세포를 6-well plate에 7 × 104 cells/mL로 분주하고, 8일 동안 세포를 분화시키면서 각각의 샘플을 처리하였다. 8일 동안 샘플 처리 후 PBS로 세척한 후 scraper(90020, SPL, Pocheon, Korea)를 이용하여 세포를 모아 초음파 분쇄기(Sonifier 450 sonicator, Branson, USA)를 이용하여 세포 내 중성지방을 추출하였다.
PowerWaveTM XS Microplate Spectrophotometer(13030715, VT, Virginia, USA)를 이용하여 total RNA를 정량한 후, DEPC water(95284, Sigma, ST. Louis, MO, USA)와 혼합하여 RNA의 최종 농도는 1 μg, 최종 volume은 10 μL가 되도록 제조하였다.
배양한 세포의 mRNA를 추출한 후 지방전구세포의 분화 과정 중 발현 marker로 알려져 있는 peroxisome proliferatoractivated receptor-γ(PPAR-γ), adipocyte protein 2(aP2) 유전자의 발현 변화를 RT-PCR을 통해 확인하였다. RT-PCR을 위해 사용된 primers sequences와 PCR 조건은 Table 1과 같았으며, 이를 통해 얻어진 PCR 산물을 이용해 2% agarose gel 상에서 전기영동(Mupid-2 plus, Takara, Japan) 후 화상분석기(Kodak Image Station 4000 MM, NY, USA)를 이용하여 분석 정량하였다.
그러므로 이러한 지방세포 분화 유전 인자의 발현 조절은 지방생성기전을 조절할 수 있는 중요한 방법이 된다(Park 등 2014). 그러므로 본 연구에서는 탈피한 도토리 에탄올 추출물(AE)과 열수 추출물(AW) 시료의 세포독성(cytotoxicity)을 확인하기 위해 3T3-L1지방전구세포를 사용하였다.
도토리 추출물시료의 세포의 생존율 실험결과를 토대로 AE 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리하였다.
따라서 본 연구에서는 3T3-L1 세포의 분화과정 중 AW와 AE 시료의 처리 시 mRNA 발현에 미치는 억제 효과를 알아보고자 도토리 추출물의 PPAR-γ와 aP2 유전자 발현 억제 효과를 측정하여 Fig. 5에 제시하였다.
따라서 본 연구에서는 도토리 추출물(AE와 AW)의 3T3-L1지방세포에서 ROS 생성 억제 효과를 측정하여 Fig. 4에 제시하였다. 분화된 3T3-L1 세포에 AE 시료를 100, 200 및 300μg/mL 농도로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100μg/mL 처리 시 10%의 억제율, 200 μg/mL 처리 시 42%의 억제율(p<0.
따라서 본 연구에서는 분화된 3T3-L1 세포 내에서 도토리 추출물(AE와 AW)의 중성지방 생성 억제 효과를 측정하여 Fig. 3에 제시하였다. AE 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 분화된 3T3-L1 세포 내 중성지방 생성량이 1%의 증가율을 보였으나, 200 μg/mL 처리 시에는 11%의 감소율을 보였고, 300 μg/mL 처리 시에는 42%의 감소율을 보였다(p<0.
배양한 세포의 mRNA를 추출한 후 지방전구세포의 분화 과정 중 발현 marker로 알려져 있는 peroxisome proliferatoractivated receptor-γ(PPAR-γ), adipocyte protein 2(aP2) 유전자의 발현 변화를 RT-PCR을 통해 확인하였다.
세포 생존율을 측정하기 위해 AE와 AW 시료를 각각 농도별(0, 100, 200, 300 및 500 μg/mL)로 처리한 후 생존율을 측정하여 Fig. 1에 제시하였다.
)는 2013년 9월 경기도 평택시 진위면에서 채취 후 탈피한 도토리를 구입하여 시료로 사용하였다. 열수추출은 도토리의 무게 대비 20배 부피의 증류수를 첨가한 후 환류냉각관을 부착한 80℃의 heating mantle(HM250C, Sercrim Lab Tech, Seoul, Korea)에서 2시간 추출하였고, 에탄올추출은 ethanol 70%를 도토리 무게 대비 20배를 첨가한 후 24시간 동안 상온추출 하였다. 이렇게 2, 3차 추출액을 얻어 모두 혼합한 후 여과하여 rotatory vacuum evaporator(HS-2005S-N, Han Shin Scientific Co.
염색이 된 세포는 현미경으로 관찰하였으며, 관찰 후 well 당 200 μL의 2- propanol(I9516, Sigma, ST. Louis, MO, USA)을 넣어 지방세포 내 염색된 염색약을 추출하여 microplate reader(BN02514, Mole- cular Devices, Toronto, Canada)를 이용하여 500 nm에서 흡광도를 측정하였다.
원심분리(12,000 rpm, 15분, 4℃, Micro 200R, Hettich, Germany)하여 중성지방이 포함된 상층액 회수 후 triglyceride kit를 이용하여 중성지방의 함량을 측정하였다.
이후, High capacity cDNA Reverse Transcription Kit (4368814, Applied Biosystems, CT, USA) 10 μL와 혼합하여 25℃10분, 37℃ 120분, 85℃ 5분, 4℃에서 5분 동안 반응시켜 cDNA를 합성하였다.
탈피한 도토리 에탄올 추출물 및 열수 추출물 시료의 total RNA 추출을 위해 3T3-L1 세포를 6-well plate에 7 × 104 cells/mL로 분주하고 분화시키면서 도토리 추출물을 농도별로 처리하였다.
탈피한 도토리 에탄올 추출물 시료(AE) 및 열수 추출물 시료(AW)의 3T3-L1 세포 내 중성지방 축적 억제 여부를 조사 하기 위해 triglyceride assay Kit(10010303, Cayman, Michigan, USA)를 사용하여 중성지방 함량을 측정하였다. 3T3-L1 세포를 6-well plate에 7 × 104 cells/mL로 분주하고, 8일 동안 세포를 분화시키면서 각각의 샘플을 처리하였다.
탈피한 도토리 에탄올 추출물 시료(AE) 및 열수 추출물 시료(AW)의 3T3-L1 세포 내의 ROS 억제 효과는 형광을 발산하는 DCF-DA(2’,7’-dichlorofluorescein diacertate)를 사용하여 모니터링하였다.
5 mL당 100 μL씩 넣고 섞은 후, 4℃에서 12,000 rpm으로 15분 동안 원심분리(Micro 200R, Hettich, Tuttlingen, Germany)하여 상층액을 회수하였다. 회수한 상층액과 total RNA Extraction Kit(17221, Intron biotechnology, Sungnam, Korea)를 이용하여 total RNA를 추출하였다.
대상 데이터
DCF–DA는 Sigma(ST. Louis, MO, USA)에서 구입하였다.
본 실험에 사용한 도토리(Quercus acutissima Carr.)는 2013년 9월 경기도 평택시 진위면에서 채취 후 탈피한 도토리를 구입하여 시료로 사용하였다. 열수추출은 도토리의 무게 대비 20배 부피의 증류수를 첨가한 후 환류냉각관을 부착한 80℃의 heating mantle(HM250C, Sercrim Lab Tech, Seoul, Korea)에서 2시간 추출하였고, 에탄올추출은 ethanol 70%를 도토리 무게 대비 20배를 첨가한 후 24시간 동안 상온추출 하였다.
데이터처리
본 연구 자료의 통계분석은 SPSS(Statisitical Package for Social Sciences, SPSS Inc, Chicago, IL, USA, ver. 12.0)를 이용하여 분석하였다. 평균과 표준편차로 산출하여 표시하였으며, 통계적 유의성 검정은 대조군(con)과 탈피한 도토리 에탄올 추출물 및 열수 추출물 시료의 농도별 처리군(100, 200, 300 및 500 μg/mL)의 변수에 대해 p<0.
평균과 표준편차로 산출하여 표시하였으며, 통계적 유의성 검정은 대조군(con)과 탈피한 도토리 에탄올 추출물 및 열수 추출물 시료의 농도별 처리군(100, 200, 300 및 500 μg/mL)의 변수에 대해 p<0.05 수준에서 Student’s t-test를 실시하였다.
이론/모형
탈피한 도토리 에탄올 추출물 시료(AE) 및 열수 추출물 시료(AW)의 3T3-L1 세포에 대한 분화억제 여부를 조사하기 위해 Oil Red O 염색법을 사용하여 총 지질량을 측정하였다. 3T3-L1 세포를 6-well plate에 7 × 104 cells/mL로 분주하고, 시료를 농도별로 처리하면서 분화시킨 세포의 배양액을 제거하고, PBS로 세척하였다.
탈피한 도토리 에탄올 추출물 시료(acorn 70% ethanol extract, AE) 및 열수 추출물 시료(acorn hot water extracts, AW)의 3T3- L1 세포에 대한 세포독성(cytotoxicity) 여부를 조사하기 위해 각 시료를 농도별로 처리한 후 Sladowski D(1992)의 MTT (methylthiazolyldiphenyl tetrazolium bromide) assay법으로 세포 생존률(cell viability)을 측정하였다. 배양시킨 3T3-L1 지방 전구세포를 96-well plate에 1 × 104 cells/mL로 분주하여 24시간 동안 배양하고, 이후 새로운 배지에 시료를 농도별로 처리한 다음 24시간 동안 배양하였다.
성능/효과
3T3-L1 세포에서 mRNA 발현에 미치는 영향을 대조군과 비교하였을 때 두 시료(AE와 AW) 모두 300 μg/mL 농도에서 PPAR-γ은 54%와 38%, aP2는 40%와 18% 수준의 발현을 억제시키는 것으로 나타났다.
3T3-L1 세포에서 생존율(MTT assay)을 측정한 결과, AE와 AW 시료 모두 500 μg/mL 농도에서는 다소 생존율의 감소를 보여, 300 μg/mL를 최종 농도로 정하였다.
3T3-L1 세포에서 중성지방 억제 효과를 확인한 결과, AE 시료의 경우 200 μg/mL 농도에서 11%의 감소율, 300 μg/mL 농도에서 42% 수준의 감소율을 보였다.
3T3-L1 세포의 ROS 생성량을 측정한 결과, 시료 농도 200 μg/mL에서 AE는 42%, AW는 33%로 300 μg/mL에 서는 AE는 58%, AW는 52%로 ROS 생성량의 억제를 보였다.
3T3-L1 세포의 지질축적 억제 효과를 측정한 결과, 농도 100 μg/mL로 처리하였을 때 두 시료 모두 지질축적량의 증가를 보였으나, 200 μg/mL 처리농도에서 AE 시료는 82%로, AW 시료는 74%로 감소되다가 300 μg/mL 농 도에서는 두 시료 모두 약 53% 수준까지 지질축적이 억제되었다.
AE 시료를 0, 100, 200, 300 및 500μg/mL로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 129%의 생존율(p<0.05), 200 μg/mL 처리 시에는 150%의 생존율(p<0.01), 300 μg/mL 처리 시에는 161%의 생존율을 보인 반면(p<0.01), 500 μg/mL 처리 시에는 80%의 생존율을 보였다(p<0.05).
AE 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 분화된 3T3-L1 세포 내 중성지방 생성량이 1%의 증가율을 보였으나, 200 μg/mL 처리 시에는 11%의 감소율을 보였고, 300 μg/mL 처리 시에는 42%의 감소율을 보였다(p<0.05).
AW 시료 100, 200 및 300 μg/mL로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 5%의 억제율, 200 μg/mL 처리 시에는 22%의 억제율(p<0.01), 300 μg/ mL 처리 시에는 38%의 억제율을 보였다(p<0.01).
AW 시료도 200 μg/ mL 농도에서 5%의 감소율과 300 μg/mL에서 41%의 감소율을 보였다.
AW 시료를 0, 100, 200, 300 및 500 μg/mL로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 120%의 생존율(p<0.05), 200 μg/mL 처리 시에는 126%의 생존율(p<0.05), 300 μg/mL 처리 시에는 144%의 생존율을 보인 반면(p<0.01), 500 μg/mL 처리 시에는 91%의 생존율을 보였다(p<0.05).
AW 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리하였을 때, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리에는 6%의 증가율을 보였으나, 200 μg/mL 처리 시에는 5%의 감소율을 보였고, 300 μg/mL 처리 시에는 41%의 감소율을 보였다(p<0.05).
AW 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시 4%의 억제율, 200μg/mL 처리 시 33%의 억제율(p<0.01), 300 μg/ mL 처리 시 52%의 억제율을 보였다(p<0.01).
AW 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 총 지질 축적량이 103%의 수준으로 3% 증가를 보이다가 200 μg/mL 처리 시에는 74%의 수준으로 26%의 감소를 보였으며(p<0.01), 300 μg/mL 처리 시에는 53% 수준으로 47%의 총 지질감소를 보였다(p<0.001).
AW 시료를 처리한 결과, 100 μg/mL 처리 시 3%의 억제율(p<0.01), 200 μg/mL 처리 시 10%의 억제율(p<0.01), 300 μg/mL 처리 시 18%의 억제율을 보였다(p<0.01).
고농도(300 μg/mL)에서는 AE와 AW 시료간의 총 지질 축적 억제에 차이가 없었으나, 저농도(100, 200 μg/ mL)에서는 AW가 AE에 비해 총 지질 축적을 억제하는 효과가 더 좋은 것으로 나타났다.
대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100 μg/mL 처리 시에는 총 지질 축적량이 107% 수준으로 7%의 증가를 보이다, 200 μg/mL 처리 시에는 82% 수준으로 18%의 감소를 보이다가, 300 μg/mL 처리 시에는 53%의 수준으로 47%의 감소를 보였다(p<0.001).
도토리 추출물의 aP2 유전자 발현 억제 효과를 알아본 결과, AE 시료를 100, 200 및 300 μg/mL 농도로 처리했을 때 대조군과 비교시 100 μg/mL 처리 시 20%의 억제율(p<0.01), 200 μg/mL 처리 시 26%의 억제율(p<0.01), 300 μg/mL 처리 시 40%의 억제율을 보였다(p<0.01).
분화된 3T3-L1 세포에 AE 시료를 100, 200 및 300μg/mL 농도로 처리한 결과, 대조군(0 μg/mL)과 비교 시 100μg/mL 처리 시 10%의 억제율, 200 μg/mL 처리 시 42%의 억제율(p<0.01), 300 μg/mL 처리 시 58%의 억제율을 보였다(p<0.01).
분화된 3T3-L1 세포에서 AE와 AW 시료간의 ROS 생성 억제 효과를 비교해 보면, 100μg/mL, 200 μg/mL와 300 μg/mL 농도 처치 시 AE가 AW에 비해 더 효과적으로 ROS 생성을 억제한 것으로 나타났다.
분화된 3T3-L1 세포에서 AE와 AW 시료간의 중성지방 축적 억제 효과를 비교해 보면, 200 μg/mL와 300 μg/mL 농도 처치 시 AE가 AW에 비해 더 효과적으로 중성지방 축적을 억제한 것으로 나타났다.
이러한 결과로 미루어 보아 탈피한 도토리 추출물 처리로 1차적으로 PPAR-γ 발현이 감소되었고, 그 결과로 aP2의 발현 감소를 일으켜, 결과적으로 3T3-L1 세포 내 지질축적 저해 효과를 나타낸 것으로 보여진다.
3T3-L1 세포에서 mRNA 발현에 미치는 영향을 대조군과 비교하였을 때 두 시료(AE와 AW) 모두 300 μg/mL 농도에서 PPAR-γ은 54%와 38%, aP2는 40%와 18% 수준의 발현을 억제시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 탈피한 도토리는 3T3-L1 세포의 분화를 억제함으로써 새로운 항비만 소재로의 가능성이 있는 것으로 판단된다.
즉, AE와 AW 시료 모두 300 μg/mL농도까지는 생존율이 증가하다가 500 μg/mL 농도까지는 세포독성이 없는 것으로 나타났다.
즉, 생존율이 AE 시료 300 μg/mL 농도까지 처치 시 증가하다 500 μg/mL 농도에서 감소되는 결과를 보였다.
후속연구
지방세포 내 ROS 생성 억제는 관련효소의 발현 감소에 의한 것이라고 보고된 바 있다(Lee 등 2012; Seo 등 2013). 따라서 추후 탈피한 도토리 추출물의 항산화 효소의 발현 양상을 확인하는 기전연구가 필요할 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
도토리에 함유된 기능성 성분은?
4%가 함유되어 있다(Kim BN 1995; Yook 등 2002). 또한 도토리에는 기능성 성분인 tannic acid, gallic acid, digallic acid 및 gallotannin이 포함되어 있어서 항산화 작용, 항균 작용, 항종양 및 중금속 제거작용 등이 있다(Yook 등 2002; Lee 등 2005). 도토리의 기능성 성분 가운데 tannic acid의 혈장 지질농도 저하효과 보고되었는데(Park 등 2002), 도토리에는 tannic acid가 4.
도토리의 영양성분 조성은?
도토리에는 전분이 65~69%, 수분이 6.5~13.7%, 조단백질이 5.8~7.8%, 조지방이 1.1~5.0%, 조섬유가 2.1~3.6%, 조회분이 1.9~3.4%가 함유되어 있다(Kim BN 1995; Yook 등 2002). 또한 도토리에는 기능성 성분인 tannic acid, gallic acid, digallic acid 및 gallotannin이 포함되어 있어서 항산화 작용, 항균 작용, 항종양 및 중금속 제거작용 등이 있다(Yook 등 2002; Lee 등 2005).
비만 치료를 위해 출시된 Orlistat, Lorcaserin, Qnexa같은 비만 억제제들의 부작용은?
비만 치료를 위해 1997년에는 지방 흡수 억제제인 Orlistat 가 출시되었고, 2012년에는 Lorcaserin와 Qnexa가 출시되어 비만관리를 위해 사용되어 왔다(You SJ 2008). 이러한 비만 억제제들은 미국 FDA 승인을 받아 그 안전성과 유효성이 검증되었지만, 장기간 복용 시 어지러움, 불면, 두통 및 변비 등의 부작용이 보고되었다(Kang & Park 2012; Kim & Park 2012; Lee CB 2013). 따라서 최근 부작용이 적으면서 지방 분해를 촉진시키거나, 지방 형성(adipogenesis)을 억제시키는 천연물에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다(Wang & Jones 2004).
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