하수오(何首烏)가 알콜 투여로 유발된 흰쥐의 고지혈증과 간 손상의 예방에 미치는 영향 Effects of Polygoni Multiflori Radix on prevention of hyperlipidemia and liver damage induced by alcohol원문보기
Objectives : The Korean medical doctors use PMR(Polygoni Multiflori Radix) for nourishing the liver-kidney, loosing the bowel to relieve constipation, recovering from malaria, and clearing away heat and eliminating toxin, etc. But, this study was performed to investigate the effect of water extracts...
Objectives : The Korean medical doctors use PMR(Polygoni Multiflori Radix) for nourishing the liver-kidney, loosing the bowel to relieve constipation, recovering from malaria, and clearing away heat and eliminating toxin, etc. But, this study was performed to investigate the effect of water extracts from PMR on prevention of hyperlipidemia and liver damage induced by alcohol. Methods ： Except for the normal group, we fed rat on 25% alcohol for 55 days. And the extract was administrated for the same period. We measured the serum components in rat's blood, body weight and weight of liver. Results ： At first, we observed effects of PMR on prevention of hyperlipidemia induced by alcohol. PMR group showed significant decrease of total cholesterol and triglyceride in comparison with those of the control group. PMR group showed significant increase of body weight in comparison with those of the control group in 4weeks and 8weeks. At second, we observed effects of PMR on prevention of liver damage induced by alcohol. PMR group showed significant decrease of GOT, GPT, ALP, and LDH in comparison with those of the control group. PMR group showed significant increase of liver weight in comparison with those of the control group. Conclusions ： Reviewing these experimental results, it appears that water extracts from PMR have pharmaceutical efficacy on prevention of hyperlipidemia and liver damage induced by alcohol. Therefore further additional study should be conducted to elucidate in depth the pharmaceutical efficacy of these.
Objectives : The Korean medical doctors use PMR(Polygoni Multiflori Radix) for nourishing the liver-kidney, loosing the bowel to relieve constipation, recovering from malaria, and clearing away heat and eliminating toxin, etc. But, this study was performed to investigate the effect of water extracts from PMR on prevention of hyperlipidemia and liver damage induced by alcohol. Methods ： Except for the normal group, we fed rat on 25% alcohol for 55 days. And the extract was administrated for the same period. We measured the serum components in rat's blood, body weight and weight of liver. Results ： At first, we observed effects of PMR on prevention of hyperlipidemia induced by alcohol. PMR group showed significant decrease of total cholesterol and triglyceride in comparison with those of the control group. PMR group showed significant increase of body weight in comparison with those of the control group in 4weeks and 8weeks. At second, we observed effects of PMR on prevention of liver damage induced by alcohol. PMR group showed significant decrease of GOT, GPT, ALP, and LDH in comparison with those of the control group. PMR group showed significant increase of liver weight in comparison with those of the control group. Conclusions ： Reviewing these experimental results, it appears that water extracts from PMR have pharmaceutical efficacy on prevention of hyperlipidemia and liver damage induced by alcohol. Therefore further additional study should be conducted to elucidate in depth the pharmaceutical efficacy of these.
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문제 정의
하였다. Liu 등8, 9)에 의하면, 알코올을 장기 투여하면 고지혈증과 간 손상이 유발된다는 연구결과를 발표하였으므로, 저자는 이러한 점에 착안하여 알코올을 장기적으로 투여하여 고지혈증과 간 손상을 유발하면서 何首烏의 高脂血症과 간 손상의 예방 효과를 혈청 분석을 통하여 실험한 결과, 유의한 성적을 얻었기에 보고하는 바이다.
그러나, 何首烏를 이용하여 술로 유발된 高脂血症 치료나 간 손상의 예방에 관한 연구결과가 아직 없으므로, 술로 인한 간 손상의 예방에 何首烏가 어떠한 효과가 있는지를 살펴보고자 하였다. Liu 등8, 9)에 의하면, 알코올을 장기 투여하면 고지혈증과 간 손상이 유발된다는 연구결과를 발표하였으므로, 저자는 이러한 점에 착안하여 알코올을 장기적으로 투여하여 고지혈증과 간 손상을 유발하면서 何首烏의 高脂血症과 간 손상의 예방 효과를 혈청 분석을 통하여 실험한 결과, 유의한 성적을 얻었기에 보고하는 바이다.
그런데, 何首烏를 장기적인 음주로 인한 고지혈증이나 간 손상에 활용한 연구는 없었으므로, 현재 임상에서 補肝腎, 益 精血의 효능으로 주로 이용하고 있는 何首烏를 술로 인한 高 脂血症 치료나 예방에 효과가 있음을 밝힌다면 何首烏를 장기적인 음주 섭취로 인한 비만, 고지혈증이나 간 기능이 좋지 않은 경우에도 활용할 수 있을 것으로 생각되어 이번 연구를 시작하게 되었다.
酒傷病證의 치료는 주로 濕 熱을 제거하기 위하여, 發汗, 利小便하여 그 濕을 제거하는 방법을 위주로 하지만, 이 외에도 寒濕, 氣虛, 瘀血, 痰火 등의 證에 따라 치료한다7). 그런데, 장기적으로 과음하게 되면 고콜레스테롤 혈증을 유발하고4), 간 손상을 일으킬 수 있으므로3), 여기에서는 간을 보하고, 해독하는 효능이 있는 何首烏의 물 추출물을 이용하여 장기적인 알콜 섭취로 인한 간 손상과 고지혈증의 예방효과를 살펴보고자 하였다.
제안 방법
何首烏 추출물은 何首烏 100 g 에 증류수 1,200㎖를 붓고 2시간 30분 동안 대웅약탕기로 煎湯하여 가열, 추출, 여과한 다음, 이 추출액을 다시 100㎖로 減壓濃縮하여 최종 추출물을 얻어서 실험에 이용하였다.
모두 21마리를 이용하였다. 何首烏投與群(PMR group) 은 추출된 약액을 흰쥐의 체중 100g당 1㎖씩 매일 하루 한 번씩 알콜 섭취기간과 동일하게 8주간(55일간) 경구 투여하였다. 정상군과 대조군은 같은 량의 생리식염수를 8주간(55일간) 같은 방식으로 투여하였다.
간장의 중량은 흰쥐를 희생시켜서 복부대동맥에서 채혈한 다음, 肝臟을 摘出하여 무게를 측정하였다.
다음으로 장기적인 알콜 투여로 유발된 간 손상에 미치는 예방효과를 살펴보기 위하여, 혈청성분의 변화와 간장 무게를 위주로 살펴보았다. GOT, GPT 활성의 증가는 간장 장애의 지표가 되며19), 알코올 투여는 GOT, GPT의 함량을 증가시킨다20).
pentobarbital sod.로 0.1㎖/100g을 복강에 주사하여 마취한 후 복부 정중선을 따라 개복하고 복부 대동맥에서 혈액을 채혈하여 원심분리기로 3, 000rpm에서 10분간 원심분리 하여 혈청만 분리하여 실험에 사용하였다.
먼저, 실 험군 간의 알코올섭취의 편차가 없어야 정확하게 실험을 할 수 있으므로, 알코올의 섭취량을 각 군 간에 비교해 보았다. 본 실험에서 알코올의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 何首烏 투여군과 대조군의 1일 알코올 섭취량은 별다른 차이가 없었다.
사육실의 조건은 온도 22℃, 습도 50-60%로 유지시키고, 명암은 12시간(7:00-19:00)을 주기로 자동조절 되었으며, 자유로운 급식으로 식이를 공급하였다.
장기간 알콜 섭취로 유발된 고지혈증에 미치는 효과를 혈청 성분의 분석으로 total cholesterol, HDL-cholesterol, triglyceride 등을 살펴보았다. 알콜을 만성적으로 섭취하면 혈액이나 간장의 조직 중의 지질의 합성을 촉진시키고3), 혈청 중의 total cholesterol의 함량을 증가시킨다16).
何首烏投與群(PMR group) 은 추출된 약액을 흰쥐의 체중 100g당 1㎖씩 매일 하루 한 번씩 알콜 섭취기간과 동일하게 8주간(55일간) 경구 투여하였다. 정상군과 대조군은 같은 량의 생리식염수를 8주간(55일간) 같은 방식으로 투여하였다.
정상군은 고형사료와 물을 임의로 섭취케 하고, 고지혈증 유발군은 고형사료와 25% 알코올 용액(C2H5OH 순도 99.8%, Merck(Ger many))을 물 대신 임의로 8주간 섭취케 하였다.
체중은 실험하기 직전, 실험 시작 후 4주, 실험 시작 후 8 주에 각각 측정하였다.
대상 데이터
실험 흰쥐를 모두 3群으로 나누었으며, 각 군은 7마리씩 배정하여 모두 21마리를 이용하였다. 何首烏投與群(PMR group) 은 추출된 약액을 흰쥐의 체중 100g당 1㎖씩 매일 하루 한 번씩 알콜 섭취기간과 동일하게 8주간(55일간) 경구 투여하였다.
실험동물은 200g내외의 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐(샘 타코, 한국)를 고형사료(rat chow, 삼양사)로 사육하면서 물을 충분히 공급하고 약 2주일간 사육실 환경에 적응시킨 후, 평균체중이 310g 내외인 rat를 실험동물로 사용하였다. 사육실의 조건은 온도 22℃, 습도 50-60%로 유지시키고, 명암은 12시간(7:00-19:00)을 주기로 자동조절 되었으며, 자유로운 급식으로 식이를 공급하였다.
실험에 사용된 何首烏(중국산;Polygoni Multiflori Radix) 한약재는 계림약업사(대구)에서 구입한 다음, 대구한의대 학교 본초학 교실에서 감정한 후 실험에 사용하였다.
데이터처리
각 群間의 실험결과 분석은 Student's t-test를 하여 有意 性(P<0.05수준)을 검증하였다.
이론/모형
King-King법에 의하여 측정하였는데, 알칼리성 포스파타제 측정용 시액(아산제약, 한국)을 사용하여 sequoia-turner model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚ 로 분석하였다.
Sprague Dawley계 흰쥐를 Liu 등8)의 방법에 따라 알코올성 고지혈증을 유발시킨 후 실험에 사용하였다. 정상군은 고형사료와 물을 임의로 섭취케 하고, 고지혈증 유발군은 고형사료와 25% 알코올 용액(C2H5OH 순도 99.
혈청 중 GOT, GPT 함량은 각각 Reit man-Frankel법에 의하여 측정하였는데, 혈청 Transaminase 측정용 시액을 사용하여 sequoia-turner model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 505㎚로 분석하였다.
효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, Cleantech TG-S 試液(아산제약, 한국)을 사용하여 sequoia-turner model-340 spectrophotometer(U.S.A)기기로 파장 550 ㎚로 분석하였다.
효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, HDL-cholestase (아산제약, 한국)을 사용하여 sequoia-turner model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚로 분석하였다.
효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, 총 콜레스테롤 측정용 시액(아산제약, 한국)을 사용하여 sequoia-turner model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚로 분석하였다.
효소법(젖산 기질법)에 의하여 측정하였는데, 젖산탈수소 효소측정용 試液(아산제약, 한국)을 사용하여 sequoia-turner model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 570㎚ 로 분석하였다.
성능/효과
1. 장기적인 알코올 투여로 인한 고지혈증에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 total cholesterol과 triglyceride 의 변화를 보면, 何首烏 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다. 체중의 변화를 보면, 실험 시작 후 4주와 8주의 체중측정에서 모두 何首烏 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 증가하였다.
2. 장기적인 알코올 투여로 인한 간 손상에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 혈청 중 GOT, GPT, ALP, LDH의 변화에서 何首烏 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다. 간의 무게 변화를 보면, 何首烏 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 증가하였다.
보았다. 본 실험에서 알코올의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 何首烏 투여군과 대조군의 1일 알코올 섭취량은 별다른 차이가 없었다.
따라서, 간·담도에 질환이 있으면 혈청 중 ALP가 증가하며10), 알콜을 섭취하는 경우에도 수치가 상승한다21). 본 실험에서 혈청 중 ALP의 변화를 보면, 何首烏 투여군은 3.241± 0.584(IU/ℓ)으로 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다.
또한 장기적으로 알콜을 투여한 경우에도 혈청 중의 젖산탈수소효소(LDH)는 현저하게 상승한다22). 본 실험에서 혈청 중 젖산탈수소효소(LDH)의 변화를 보면, 何首烏 투여군은 400.740±65.763(W-U)으로 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다.
652(g)으로 나타나 대조군에 비하여 유의성 있게 증가되었다. 실험 시작 후 8주의 체중측정에서는 何首烏 투여군은 408.143± 6.216(g)로 나타나 대조군에 비하여 체중이 유의성 있게 증가되었다.
실험시작 후 4주의 체중측정에서는 정상군이 414.429± 2.581(g)이었으나, 대조군의 체중은 310.286±10.674로 나타나 정상군에 비하여 체중이 유의성 있게 감소되었다. 그런데, 何首烏 투여군은 360.
실험시작 후 8주의 체중측정에서는 정상군이 468.714± 2.265(g)이었으나, 대조군의 체중은 366.143±8.773로 나타나 정상군에 비하여 체중이 유의성 있게 감소되었다. 그런데, 何首烏 투여군은 408.
. 이 때문에 혈청 중에서 HDL-cholesterol이 상승하면 고지혈증이 개선되었음을 알 수 있는데, 본 실험에서 혈청 중 HDL-cholesterol의 변화를 보면, 何首烏 투여군은 41.532±3.032(㎎/㎗)로 대조군에 비하여 증가하였으나, 유의성은 인정되지 않았다.
이상의 결과로 보아, 何首烏는 장기적인 알코올 투여로 인한 고지혈증과 간 손상에 대한 예방 효과가 우수한 것으로 생각된다.
이상의 결과로 볼 때, 何首烏 투여군은 장기적인 알코올투여로 인한 고지혈증과 간 손상에 대한 예방 효과가 있는 것으로 판단된다.
장기적인 알코올 투여로 인한 고지혈증에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 total cholesterol과 triglyceride 의 변화를 보면, 何首烏 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다. 체중의 변화를 보면, 실험 시작 후 4주와 8주의 체중측정에서 모두 何首烏 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 증가하였다.
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