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문제 정의
- 또한 이 등15)은 추출조건에 따른 죽엽 분말의 추출 패턴과 수율의 변화를 연구하였다. 그런데, 저자는 현재 죽엽주가 시판되고 있으며, 이 죽엽주를 마시면 술로 인한 숙취로 고생을 덜하며, 죽엽의 성질도 차가우므로, 熱性인 술의 성질을 완화할 수 있을 것으로 생각하여, 장기적인 알콜 투여로 유발된 흰쥐의 고지혈증과 간 손상의 예방에 미치는 영향을 살펴본 바, 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
- 현재 우리는 竹葉을 한약재로는 많이 활용하고는 있지 않으나, 솜대는 우리나라를 비롯한 동남아시아에 광범위하게 분포하고 있어서 그 유용성을 찾을 수 있다면 한약재 자원 활용의 측면에서 많은 도움이 될 것으로 생각된다. 또한 죽엽주가 시중에서 판매되고 있으며, 다른 술 보다는 이 술이 숙취가덜 하다고 인식되어 있어 일반인들에게 널리 이용되어지고 있으며, 약의 성질이 寒性이고 利尿하는 약효를 감안해 볼 때 술독을 예방하는 효과가 竹葉에 있을 것으로 판단되어 이번 연구를 하게 되었다.
- 저자는 알콜을 섭취하면 hyperlipidemia(고지혈증)와 간손상을 일으킨다7,8)는 연구자들의 연구발표에 착안하였고, 8주 동안 장기적으로 알콜을 섭취하게 함으로써 술로 인한 고지혈증과 간 손상을 유발하면서 동시에 죽엽 추출물을 투여하여 술로 인한 문제점을 예방할 수 있는 가를 살펴본 결과, 유의한 성적을 얻었기에 보고하는 바이다.
제안 방법
- 간장의 중량은 rat를 희생시켜서 복부대동맥에서 채혈한 다음, 간장을 적출하여 무게를 측정하였다.
- 실험동물은 마지막 24시간 동안 절식시킨 후 pentobarbital sod.로 0.1 cc/100 g을 복강에 주사하여 마취하였으며, 복부 정중선을 따라 개복하고 복부 대동맥에서 혈액을 채혈하여 원심분리기로 3,300 rpm에서 10분간 원심분리 후 혈청만 분리하여 실험에 사용하였다.
- 먼저, 실험군 간의 알콜 섭취의 편차가 없어야 정확하게 실험을 할 수 있으므로, 알콜의 섭취량을 각 군 간에 비교해보았다. 본 실험에서 알콜의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 죽엽 투여군은 대조군의 1일 알콜 섭취량에 비하여 별다른 변화를 나타내지 않았다(Table Ⅰ).
- 죽엽 추출물(PF group)은 추출된 약액을 rat의 체중 100 g당 1 ㎖씩 매일 하루 한 번씩 6주간 경구 투여하였다. 정상군과 대조군은 同量의 생리식염수를 6주간 같은 방식으로 투여하였다.
- 정상군은 고형사료와 물을 임의로 섭취케 하고, 고지혈증 유발군은 고형사료와 25% 알콜 용액(C2H5OH 순도 99.8%, MERCK(Germany))을 물대신 임의로 8주간 섭취케 하였다.
- 죽엽 100 g에 물 1,000 ㎖를 가하여 대웅약탕기로 2시간 30분간 달인 후 추출하였으며, 여과한 후 최종 100 ㎖로 감압농축 하여 추출물을 얻어서 실험에 이용하였다.
- 실험 rat을 모두 3군으로 나누었으며, 각 군은 6마리씩 배정하여 모두 18마리를 이용하였다. 죽엽 추출물(PF group)은 추출된 약액을 rat의 체중 100 g당 1 ㎖씩 매일 하루 한 번씩 6주간 경구 투여하였다. 정상군과 대조군은 同量의 생리식염수를 6주간 같은 방식으로 투여하였다.
- 체중은 실험하기 직전, 실험 시작 후 4주, 실험 시작 후 8주에 각각 측정하였다.
대상 데이터
- 대한실험동물에서 구입한 200~250 g의 건강한 Sprague Dawley계 rat를 고형사료(rat chow, 삼양사)로 사육하면서 물을 충분히 공급하고 약 2주일간 사육실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
- 사용된 竹葉(한국산)은 계림약업사(대구)에서 구입하였으며, 대구한의대학교 본초학교실에서 감정한 다음 精選하여 실험에 이용하였다.
- 실험 rat을 모두 3군으로 나누었으며, 각 군은 6마리씩 배정하여 모두 18마리를 이용하였다. 죽엽 추출물(PF group)은 추출된 약액을 rat의 체중 100 g당 1 ㎖씩 매일 하루 한 번씩 6주간 경구 투여하였다.
데이터처리
- 각 群間의 실험결과 분석은 Student's t-test를 하여 有意性(P<0.05 수준)을 검증하였다.
이론/모형
- King-King법에 의하여 측정하였는데, 알칼리성포스파타제 측정용 시액(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophtometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚로 분석하였다.
- Reitman-Frankel 방법에 따라, 혈청 Transaminase 측정용 시액을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophtometer(U.S.A) 기기로 파장 505㎚로 분석하였다.
- Sprague Dawley계 rat를 Liu 등7)의 방법에 따라 장기적으로 알콜을 투여하면서 알콜성 고지혈증을 유발시키면서 실험에 사용하였다.
- 효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, HDL-CHOLESTASE(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophotometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚로 분석하였다.
- 효소법(5분법)에 의하여 측정하였는데, 총 콜레스테롤 측정 용시액(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model340 spectrophtometer(U.S.A) 기기로 파장 500㎚로 분석하였다.
- 효소법(젖산 기질법)에 의하여 측정하였는데, 젖산탈수소 효소측정용 試液(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophtometer(U.S.A) 기기로 파장 570㎚로 분석하였다.
- 효소법에 의하여 측정하였는데, Cleantech TG-S 試液(아산제약)을 사용하여 SEQUOIA-TURNER model-340 spectrophtometer(U.S.A)기기로 파장 550 ㎚로 분석하였다.
성능/효과
- 1. 장기적인 알콜 투여로 인한 고지혈증에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 total cholesterol의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있는 변화를 나타내지 않았다. 혈청 중 HDL(High-Density lipoprotein) cholesterol의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 증가되었다.
- 2. 장기적인 알콜 투여로 인한 간 손상에 미치는 영향을 살펴보았는데, 혈청 중 GOT, GPT, ALP와 LDH의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다. 간의 무게 변화를 보면, 죽엽 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 증가하였다.
- Total cholesterol의 변화를 보면, 정상군이 57.905 ±1.643 ㎎/㎗인데 비하여, 대조군은 77.400 ± 1.534로 정상군에 비하여 유의성 있게 증가하였다.
- 먼저, 실험군 간의 알콜 섭취의 편차가 없어야 정확하게 실험을 할 수 있으므로, 알콜의 섭취량을 각 군 간에 비교해보았다. 본 실험에서 알콜의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 죽엽 투여군은 대조군의 1일 알콜 섭취량에 비하여 별다른 변화를 나타내지 않았다(Table Ⅰ).
- 본 실험에서 체중의 변화를 보면, 실험시작 후 4주의 체중측정에서는 죽엽 투여군은 373.167 ± 7.880 g으로 대조군에 비하여 유의성 있게 증가되었다.
- 본 실험에서 혈청 중 ALP의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 13.305 ± 1.488로 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다(Table Ⅷ).
- 본 실험에서 혈청 중 HDL(High-Density lipoprotein) cholesterol의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 40.639 ± 3.707(㎎/㎗)로 대조군에 비하여 유의성 있게 증가하였다(Table Ⅲ).
- 본 실험에서 혈청 중 젖산탈 수소효소(LDH)의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 793.821 ±61.001(Wroblewski 단위)로 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다(Table Ⅸ).
- 실험시작 후 4주의 체중측정에서는 정상군이 441.066 ±10.905 g이었으나, 대조군의 체중은 336.034 ± 3.235 g로 나타나 정상군에 비하여 유의성 있게 감소되었다.
- 실험시작 후 8주의 체중측정에서는 정상군이 482.335 ±10.606 g이었으나, 대조군의 체중은 361.333 ± 5.895 g로 나타나 정상군에 비하여 유의성 있게 감소되었다.
- 실험시작 후 8주의 체중측정에서는 죽엽 투여군은 408.833 ± 9.192 g로 대조군에 비하여 유의성 있게 증가되었다(Table Ⅴ).
- 알콜의 섭취는 총 55일 동안 섭취하였으며, 섭취량의 1일 평균값을 측정한 결과, 대조군은 12.250 ± 0.295 (㎖/day)로 나타났다.
- 이상의 결과로 보아, 죽엽은 장기적인 알콜 투여로 인한 고지혈증과 간 손상에 대한 예방효과가 우수한 것으로 생각된다.
- 이상의 결과로 볼 때, 죽엽 투여군은 장기적인 알콜 투여로 인한 고지혈증과 간 손상의 예방에 대하여 효과가 있는 것으로 판단된다.
- 혈청 중 triglyceride의 변화를 보면, 죽엽 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있게 감소되었다. 체중의 변화를 보면, 실험 시작 후 4주와 8주의 체중측정에서 모두 죽엽 투여군은 대조군에 비하여 유의성있게 증가되었다.
후속연구
- 현재 우리는 竹葉을 한약재로는 많이 활용하고는 있지 않으나, 솜대는 우리나라를 비롯한 동남아시아에 광범위하게 분포하고 있어서 그 유용성을 찾을 수 있다면 한약재 자원 활용의 측면에서 많은 도움이 될 것으로 생각된다. 또한 죽엽주가 시중에서 판매되고 있으며, 다른 술 보다는 이 술이 숙취가덜 하다고 인식되어 있어 일반인들에게 널리 이용되어지고 있으며, 약의 성질이 寒性이고 利尿하는 약효를 감안해 볼 때 술독을 예방하는 효과가 竹葉에 있을 것으로 판단되어 이번 연구를 하게 되었다.
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