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RAW264.7 대식세포에서 Citrus platymamma의 iNOS, COX-2, 염증성 사이토카인 발현 억제 효과
Citrus platymamma inhibits the expression of pro-inflammatory cytokines, inducible nitric oxide synthase, and cyclooxygenase-2 in RAW264.7 macrophage 원문보기

한국식품저장유통학회지 = Korean journal of food preservation, v.23 no.7, 2016년, pp.1026 - 1032  

김상숙 (국립원예특작과학원 감귤연구소) ,  박경진 (국립원예특작과학원 감귤연구소) ,  안현주 (국립원예특작과학원 감귤연구소) ,  최영훈 (국립원예특작과학원 감귤연구소)

초록
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시기별 병귤 추출물의 항산화 활성은 시기적으로 미숙과 시기인 9월에 가장 높았으며, 이 시기에 총 폴리페놀 함량이 가장 높았다. 특히 rutin, hesperidin, nobiletin의 함량이 높았으며, 이는 항염 활성에 영향을 미치는 것으로 여겨진다. 항염 활성에서는 NO의 생성을 억제하였으며 염증성 cytokine인 TNF-${\alpha}$의 생성 억제 활성이 가장 높았다. 또한 NO 생성을 억제하는 단백질로 알려진 iNOS 단백질의 발현 역시 억제하는 것을 확인 할 수 있었다. 항염 활성에 영향을 미칠 것으로 여겨지는 nobiletin 함량의 경우 12월에 70%이상 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 시기별 플라보노이드 함량 분석결과는 병귤을 천연 소재로 활용하기 위한 수확시기를 확립할 수 있을 것으로 여겨진다.

Abstract AI-Helper 아이콘AI-Helper

Citrus platymamma hort. ex Tanaka is widely used in traditional Korean medicine because of its medicinal benefits including an anti-inflammatory effect. This study aimed to evaluate changes in the flavonoid content and anti-inflammatory activities of C. platymamma during its harvest period. Fruit pe...

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

  • 각피성 감귤로 순수한 제주 재래종으로 추정되며, 제주재래 감귤중 향기가 뛰어나고 예로부터 한방요법에 사용될 정도로 기능성 물질을 다량 함유하는 것으로 알려져 있어(10) 본 연구에서는 시기별 병귤 추출물의 유효물질들이 이러한 염증반응을 효과적으로 억제시키는지 검토하고자 lipopolysaccharide(LPS)를 처리하여 RAW264.7 macrophage 세포에 염증을 일으키고 병귤 추출물을 처리하여 세포가 방출하는 NO 생성량과 iNOS 및 COX-2 단백의 발현과 염증성 사이토카인인 tumor necrosis factor-α(TNF-α)와 interleukin-6(IL-6)의 변화를 통해 항 염증성 활성을 알아보고자 하였다.

가설 설정

  • 1)The data represent the mean±SD of three determination.
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질의응답

핵심어 질문 논문에서 추출한 답변
감귤에 포함되어 있는 플라보노이드 중 비 배당체는? 플라보노이드는 자연계에 널리 분포하는 담황색 또는 노란색 계통의 화합물로 flavanones, flavones, flavonols, isoflavones, flavonols과 anthocyanidins으로 구분할 수 있다(2). 감귤에 포함되어 있는 플라보노이드는 narirutin, naringin, hesperidin 등의 배당체와 naringenin과 hesperetin 등의 비배당체 형태로 존재한다. 이들 대부분 플라보노이드는 과피에 집중적으로 존재하며, flavanones은 과피의 안쪽 흰색 부위인 알베도층에 가장 많고, flavones은 과피의 황색부분인 플라베도조직에 많이 분포한다(3).
nitric oxide의 순기능과 역기능은? 생체나 조직에 물리적인 작용이나 화학적 물질, 세균 감염 등의 침습이 가해지면 국소적으로 histamine, serotonine, bradykinin, prostaglandins과 같은 혈관 활성 물질이 유리되고 혈관투과성이 증대되며 유발된 염증은 phospholipase A2의 활성으로 인하여 arachidonic acid가 prostaglandin으로 바뀌는 과정 및 nitric oxide(NO) 형성 과정으로 이어지게 된다. 일반적인 NO의 형성은 박테리아를 죽이거나 종양을 제거시키는 중요한 역할을 하지만, 염증상태에서 iNOS 에의해 과잉 생산된 NO는 혈관 투과성, 부종 등의 염증 반응을 촉진 시킬 뿐만 아니라 염증 매개체의 생합성을 촉진하여 염증을 심화시키는 것으로 알려져 있다(6,7). 이러한 만성염증 질환과 퇴행성 뇌질환 같은 염증 질환을 치료를 위해 염증 매개인자들의 발현을 조절하여 염증 질환의 예방및 치료제로 쓰일 수 있는 천연물 소재 개발 연구가 활발히 이루어지고 있다(8,9)
플라보노이드란? 비타민C, 엽산, 카로티노이드, 리모노 이드 등 다양한 기능성 성분을 함유하는 것으로 알려져 있는 감귤류에는 항산화, 항암, 항염증 등의 효과를 갖는 플라보노이드 60여종이 존재하는 것으로 알려져 있다(1). 플라보노이드는 자연계에 널리 분포하는 담황색 또는 노란색 계통의 화합물로 flavanones, flavones, flavonols, isoflavones, flavonols과 anthocyanidins으로 구분할 수 있다(2). 감귤에 포함되어 있는 플라보노이드는 narirutin, naringin, hesperidin 등의 배당체와 naringenin과 hesperetin 등의 비배당체 형태로 존재한다.
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참고문헌 (24)

  1. Horowitz RM, Gentili B (1977) Flavonoid constituents of citrus. In: Citrus Science and Technology. Nagy S, Shaw SPE, Veldhuis MK (Editor), AVI Publishing Co., Inc., Westport, CT, USA, p 397-426 

  2. Gattuso G, Barreca D, Gargiulli C, Leuzzi U, Caristi C (2007) Flavonoid composition of citrus juices. Molecules, 12, 1641-1673 

  3. Nogata Y, Sakamoto K, Shiratsuchi H, Ishii T, Yano M, Ohta H (2006) Flavonoid composition of fruit tissues of citrus species. Biosci Biotechnol Biochem, 70, 178-192 

  4. Lee SG, Ra JH, Song JY, Gwak CH, Kwon HJ, Yim SV, Hong SP, Kim JJ, Lee KH, Cho JJ, Park YS, Park CS, Ahn HJ (2011) Extracts from Citrus unshiu promote immune-mediated inhibition of tumor growth in a murine renal cell carcinoma model. J Ethnopharmacol, 133, 973-979 

  5. Li S, Pan MH, Lo CY, Tan D, Wang Y, Shahidi F, Ho CT (2009) Chemistry and health effects of polymethoxyflavones and hydroxylated polymethoxyflavones. J Funct Foods, 1, 2-12 

  6. Shih MF, Cheng YD, Shen CR, Cherng JY (2010) A molecular pharmacology study into the anti-inflammatory actions of Euphorbia hirta L. on the LPS-induced RAW 264.7 cells through selective iNOS protein inhibition. J Nat Med, 64, 330-335 

  7. Tsatsanis C, Androulidaki A, Venihaki M, Margioris AN (2006) Signalling networks regulating cyclooxygenase-2. Int J Biochem Cell Biol, 38, 1654-1661 

  8. Kim MJ, Kim SS, Park KJ, An HJ, Choi YH, Lee NH, Hyun CG (2016) Methyl jasmonate inhibits lipopolysaccharide-induced inflammatory cytokine production via mitogen-activated protein kinase and nuclear factor- ${\kappa}B$ pathways in RAW264.7 cells. Pharmazie, 71, 540-543 

  9. Ham YM, Yoon WJ, Lee WJ, Kim SC, Baik JS, Kim JH, Lee GS, Lee NH, Hyun CG (2015) Anti-inflammatory effects of isoketocharbroic acid from brown alga, Sargassum micracanthum. EXCLI J, 14, 1116-1121 

  10. Koh JS (2001) Citrus Industry. Jeju Munhwasa, Jeju, Korea, p 163-172 

  11. Singleton VL, Orthofer R, Lamuela-Raventos RM (1999) Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of Folin-Ciocalteu reagent. Methods Enzymol, 299, 152-178 

  12. Blois MS (1958) Antioxidant determination by use of a stable free radical. Nature, 181, 1199-1200 

  13. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C (1999) Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radic Biol Med, 26, 1231-1237 

  14. Benzie IFF, Strain JJ (1996) The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of "antioxidant power": The FRAP assay. Anal Biochem, 239, 70-76 

  15. Harborne JB, Williams CA (2000) Advances in flavonoid research since 1992. Phytochemistry, 55, 481-504 

  16. Hertog MGL, Feskens EJM, Hollman PC, Katan MB, Kromhout D (1993) Dietary antioxidant flavonoids and risk of coronary heart disease: the Zutphen Eiderly Study. The Lancet, 342, 1007-1011 

  17. Chae WP, Xing ZC, Kim YJ, Sang HS, Huh MW, Kang IK (2011) Fabrication and biocompatibility of rutincontaining PHBV nanofibrous scaffolds. Polymer (Korea), 35, 210-215 

  18. Guo S, Qiu P, Xu G, Wu X, Dong P, Yang G, Zheng J, McClements DJ, Xiao H (2012) Synergistic anti-inflammatory effects of nobiletin and sulforaphane in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cells. J Agric Food Chem, 60, 2157-2164 

  19. Suzuki M, Sasaki K, Yoshizaki F, Fujisawa M, Oguchi K, Cyong JC (2005) Anti-hepatitis C virus effect of Citrus unshiu peel and its active ingredient nobiletin. Am J Chin Med, 33, 87-94 

  20. Yoshimizu N, Otani Y, Saikawa Y, Kubota T, Yoshida M, Furukawa T, Kumai K, Kameyama K, Fujii M, Yano M, Sato T, Ito A, Kitajima M (2004) Anti-tumour effects of nobiletin, a citrus flavonoid, on gastric cancer include: antiproliferative effects, induction of apoptosis and cell cycle deregulation. Aliment Pharmacol Ther, 20, 95-101 

  21. Morwood CJ, Lappas M (2014) The citrus flavone nobiletin reduces pro-inflammatory and pro-labour mediators in fetal membranes and myometrium: implications for preterm birth. PLoS One, 9, e108390 

  22. Walle T (2007) Methoxylated flavones, a superior cancer chemopreventive flavonoid subclass?. Semin Cancer Biol, 17, 354-362 

  23. Bracke ME, Vyncke BM, Van Larebeke NA, Bruyneel EA, De Bruyne GK, De Pestel GH, De Coster WJ, Espeel MF, Mareel MM (1989) The flavonoid tangeretin inhibits invasion of MO4 mouse cells into embryonic chick heart in vitro. Clin Exp Metastasis, 7, 283-300 

  24. Park YC, Yang YT, Kim JY, Lee CH, Kang SH, Kang JH (2015) Characteristics of flavonoids in juice and cluster analysis of satsuma mandarin germplasms. Korean J Plant Res, 28, 16-25 

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