[논문]저분자 당단백을 함유하는 다마스크 장미추출물의 항노화 효과

한정희; 송지훈; 김영은; 이유희; 이정민; 이지언

doi:10.15230/scsk.2018.44.1.49

저분자 당단백을 함유하는 다마스크 장미추출물의 항노화 효과
Anti-aging Effects of Rosa damascena Extract Containing Low Molecular Glycoprotein 원문보기

大韓化粧品學會誌 = Journal of the society of cosmetic scientists of Korea, v.44 no.1, 2018년, pp.49 - 57

한정희 ((주)모아캠) , 송지훈 ((주)모아캠) , 김영은 ((주)모아캠) , 이유희 ((주)모아캠) , 이정민 ((주)모아캠) , 이지언 ((주)모아캠)

초록
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본 연구에서는 다마스크 장미 내 고분자 당단백을 bioconversion 기술을 이용하여 저분자화한 다마스크 장미추출물(Rosa damascena extract containing low molecular glycoprotein, RELG)의 항노화 효능을 측정하였다. DPPH 라디칼 소거능을 이용한 RELG의 항산화능 평가($IC_{50}$)는 $22.6{\mu}g/mL$으로 양성대조군인 ascorbic acid $21.1{\mu}g/mL$와 비교하여 비슷한 수준의 항산화능을 나타내었고 피부세포실험에서는 $15{\mu}g/mL$에서 자외선과 $H_2O_2$에 의한 활성산소 생성을 28% 억제하였다. 또한 같은 농도에서 자외선에 의한 콜라겐 분해효소(MMP-1)의 생성을 48% 억제하고 $10{\mu}g/mL$에서 대조군 대비 보습인자인 aquaporin 3 (AQP3)의 발현을 44%, 중성지질 생합성을 10% 촉진하여 항주름 효능과 더불어 보습효능까지 나타냈다. 추가적으로 두피 모유두세포에서는 스트레스로 인한 세포사멸을 $15{\mu}g/mL$에서 10% 억제하고 활성산소의 생성을 90% 감소시켰다. 본 연구 결과, RELG는 효과적인 항노화 화장품 소재임을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, we investigated the anti-aging effect of Rosa damascena extract containing low molecular glycoprotein (RELG) converted from the high molecular glycoprotein by bioconversion. Free radical scavenging activities were performed by 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay. Antioxidant activities ($IC_{50}$) of RELG and the positive control ascorbic acid were $22.6{\mu}g/mL$ and $21.1{\mu}g/mL$, respectively. For skin cells, $15{\mu}g/mL$ RELG showed 28% antioxidant activity by inhibiting the production of active oxygen species induced by ultraviolet ray and hydrogen peroxide. $15{\mu}g/mL$ RELG prevented 10% the cell death caused by stress in human hair follicle dermal papilla cells (HDPC) and reduced 90% the production of active oxygen species. In addition, the glycoprotein showed not only anti-wrinkle effect but also moisturizing effect by 48% inhibition of matrix metallo proteinase-1 (MMP-1) production by ultraviolet stress and $10{\mu}g/mL$ RELG enhanced 10% neutral lipid synthesis with 44% aquaporin 3 (AQP3) expression, which is moisture factor. In conclusion, the RELG can be used as an anti-aging cosmetic material.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구는 다마스크 장미에 존재하는 고분자 당단백을 bioconversion 기술을 이용하여 저분자화 시켰으며 이를 함유한 추출물을 이용해 항노화 효과를 확인하여 기능성 화장품 소재로서의 개발 가능성을 확인하였고 다음과 같은 결론을 얻을 수 있었다.
본 연구에서는 효소처리를 통해 고분자물질들을 저분자화 하여 흡수율 증진 및 효능을 증가시키는 bioconversion 기술을 바탕으로 다마스크 장미추출물 내 함유된 고분자 당단백을 저분자화 하였고 그에 따른 변화와 유효성 평가를 진행하여 기능성 화장품 소재로서의 개발 가능성을 확인하고자 하였다.

제안 방법

본 실험에서는 항산화 활성 측정방법 중 Blois의 방법에 따라 측정했다[19]. DPPH 라디탈 소거능을 평가하기 위해 시료 0.1 mL에 0.2 mM 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (Sigma, USA) 용액을 0.1 mL 분주하여, 30 min 방치시킨 후 520 nm에서 ELISA reader (Eon, Biotek,USA)를 이용하여 흡광도를 측정하였고 대조구는 시료 대신 용매를 가하여 동일한 방법으로 측정했다. 또한 시료 자체의 색에 대한 흡광도 값을 보정해주기 위해 0.
GPC-RI system (Gel Permeation Chromatographyrefractive index) System (Agilent 1260 series system,Agilent, USA)과 Column (Agilent PL Aquagel Mixed-Mcolumn and Agilent PL Aquagel OH-30 column, Agilent,USA)으로 분자량을 분석하여 효소 처리에 의한 당단백의 저분자화를 확인했다. 증류수를 이동상으로 유속 1 mL/min으로 35 ℃에서 분석하였으며 polysaccharide와 glucose를 표준물질로 검량선을 작성하여 대조하였다.
6 µg/mL를 나타냈으며 이는 효소처리에 의한 저분자화가 항산화능을 높인다는 것을 확인한 결과이다. RELG의 피부세포 내항산화능을 확인하기 위하여 피부 내 활성산소 발생의주 원인이라고 알려진 자외선과 H₂O₂를 이용해 각질형성세포 내에서의 활성산소 제거능을 확인했다. 그 결과RELG 15 µg/mL 처치 시 UV와 H₂O₂에 의해 증가된ROS가 28%씩 감소했다(Figure 6).
ROS 측정은 2’,7’-dichlorofluorescein diacetate(DCF-DA, Sigma, USA)를 사용하여 형광을 측정하는 방법을 사용했다[20,21].
각질형성세포와 섬유아세포에 대한 장미추출물의 독성효과를 측정하였다. 저분자 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물의 세포독성을 평가한 결과 5-15µg/mL의 농도에서 세포 독성이 보이지 않음을 확인하였다(Figure 3, 4).
그 추출물에 펙티나아제(Pectinex Ultra Pulp, Novozymes,Danmark)와 셀룰라아제(Celluclast, Novozymes, Danmark),글루코시다아제(BGL600, Sunson Industry group co.,LTD., China) 효소처리를 통하여 추출물 내 고분자 당단백을 저분자화 하였고 4-8℃의 저온에서 7일간 저온 숙성과 0.45 µm (Whatman, England)필터를 통한 여과 과정으로 불용성 물질들을 제거하여 저분자 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물(Rosa damascena extract containing low molecular glycoprotein, RELG) 704 g을제조했다.
이후 High Capacity RNA-to-cDNA Kit(Thermo Fisher Scientific, USA)방법에 따라 cDNA를 합성했다. 그 후 시험 세포 및 대조군 세포를 Real TimePCR하여 aquaporin 3 유전자 발현 수준을 분석했다.
Bioconversion 기술은 플라보노이드를 aglycone형태로 전환하여 보다 높은 체내 흡수율 및 우수한 생리적 효과를 위해 적용된 기술이다[24]. 당단백은 일반적으로 단백질에 당이 결합된 형태로 단백질의 구조나 결합된 당이 다양하여 넓은 범위의 분자량을 나타내는데[25], bioconversion 기술을 고분자 당단백에 적용시켜 저분자화 하였고 GPC 분석을 통해 이를 확인하였다.
1 mL 분주하여, 30 min 방치시킨 후 520 nm에서 ELISA reader (Eon, Biotek,USA)를 이용하여 흡광도를 측정하였고 대조구는 시료 대신 용매를 가하여 동일한 방법으로 측정했다. 또한 시료 자체의 색에 대한 흡광도 값을 보정해주기 위해 0.2 mM DPPH 대신에 에탄올을 첨가하여 흡광도를 측정한 후 DPPH 라디칼 소거능을 아래와 같이 백분율로나타내었다. 이때, DPPH 라디칼 소거능의 양성대조군으로써 L-ascorbic acid (Sigma, USA)를 사용하여 이의효과를 대비 판단했다.
모유두세포의 항산화 효과를 확인하기 위해 두피의성장과 탈모에 주요한 역할을 하는 모유두세포에서RELG의 활성을 평가했다. 먼저 두피에 작용하는 스트레스로부터 모유두세포 보호능을 확인하기 위해 모유두세포에 UV와 H2O2를 처리하여 모유두세포의 세포사멸을 확인했다. 그 결과, RELG가 모유두세포를 보호하여 15 µg/mL 처치 시 자극 처치군 대비 10%의 세포 사멸 억제를 확인했다(Figure 10).
모유두세포의 항산화 효과를 확인하기 위해 두피의성장과 탈모에 주요한 역할을 하는 모유두세포에서RELG의 활성을 평가했다. 먼저 두피에 작용하는 스트레스로부터 모유두세포 보호능을 확인하기 위해 모유두세포에 UV와 H2O2를 처리하여 모유두세포의 세포사멸을 확인했다.
보습 유전자 증가와 피부 장벽 강화를 통한 보습효과의 확인을 위하여 보습 유전자인 AQP-3와 피부 장벽 구성 물질인 지질 생합성 증가를 평가했다. 유전자 발현 분석결과 시료 10 µg/mL 처치 시 세포막에서 수분통로를 여는 AQP-3의 발현이 대조군 대비 44% 증가했다(Figure 8).
3. 장미 당단백의 IR-spectrum 분석
분리한 당단백의 주요 반응기 특성 및 당과 단백질 사이의 공유결합을 확인하기 위하여 FT-IR spectrophotometer (Varian 640-IR, Agilent, USA)를 이용하여 분석하였다.
2. 장미 당단백의 IR-spectrum 분석
분리한 당단백의 주요 반응기 특성 및 당과 단백질 사이의 공유결합을 확인하기 위하여 FT-IR을 이용하여 분석하였다(Figure 1). 3,300-3400 cm^-1 부근은 당 고리의 전형적인 O-H stretching frequency, 2,900 cm^-1 부근의 C-H stretching frequency, 1,600^-1 부근은 단백질의 기본구조인 펩타이드의 아미노카보닐기 C=O의 conjugated stretching frequency, 1,100-1,000 cm^-1 부근의 C-O binding frequency 등 일반적인 다당류, 단백질류,당단백류에서 확인되어지는 spectrum 양상을 관찰할 수 있었다[22].
따라서 독성이 없고 피부 투과도가 높은 저분자 물질을 개발하여 피부 내 효능을 높이려는 노력이 계속되고 있다[28]. 이를 바탕으로 저분자 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물의 항산화 효능을 평가하기 위해 ascorbic acid를 양성대조군으로 사용하여 RE와 RELG의 DPPH 억제 활성을 측정했다(Figure 5). IC₅₀ 값을 확인한 결과 ascorbic acid는 21.
2 g의 장미 당단백을 얻었다. 이어서 총 당 함량과 총 단백질 함량을 측정했다. 총 당 함량은 phenol-sulfuric acid 법[17]에 따라 glucose (Sigma, USA)를 표준물질로 사용하여 측정하였고, 총 단백질 함량은 Lowry 등[18]의 방법에 따라 bovine serum albumin (BSA, Sigma, USA)를 대조로 하여 실험하였다.
이후 HBSS에 50 µM로 준비된 자극원(H2O2 100 µM, UVB 50mJ/cm2)을 가한 다음, 형광도를 형광플레이트 리더(tecan plate reader, Switzerland)를 이용해 Excitation =485 nm, Emission = 530 nm로 형광 강도를 측정했다.
에서 24 h 동안 배양했다. 이후 배지를 제거하고 HBSS를 넣어준 후 UVB 비조사 군을 제외한 나머지 세포군에 220 mJ/cm²의 UVB를 조사한 뒤 추출물을 농도별로 첨가하여 72 h 동안 추가로 배양했다. 그 후 human total MMP-1 ELISA KIT(R&D SYSTEMS, USA) 방법대로 MMP-1을 정량했다.
일반적으로 당단백은 당이 차지하는 비율이 다양하기 때문에 장미에 함유된 당단백 중 당과 단백질의 함량을 확인하기 위하여 추출물에서 분리한 당단백의 총당, 단백질 함량을 측정하였다[12]. 당단백을 분리하여 회수한 결과, 건조된 원물 대비 수율 10.
항산화 결과를 바탕으로RELG 처치 시 MMP저해 효과도 있을 것이라고 예상했다. 자외선 조사 후 콜라겐 타입 I, II, III를 분해하여 주름을 형성하는 MMP-1의 발현을 확인했다. RELG 처치군은 자외선 처치로 인하여 증가된 MMP-1의 발현양을 농도 유의적으로 감소했으며, 최대 시료 15µg/mL 처치 시 자외선 처치군 대비 MMP-1 발현양이 48% 감소했다(Figure 7).
인간 각질형성세포를 6-well 플레이트에 접종한 후 24 h 배양하고, 시료와 양성 대조군인 rosiglitazone(Sigma, Korea) 처치했다 처리 후 배지를 교환하며 2주일 동안 배양한다. 지질 염색은 Oil Red O (Sigma,USA)를 이용하여 현미경으로 염색된 세포를 촬영하였고 isopropanol (Sigma, USA)을 이용하여 융해시켜 500nm에서 흡광도를 측정했다.
피부 장벽 강화능은 피부장벽 구성 물질인 지질을 Oil Red O 염색방법으로 염색하여 효능을 확인했다.

대상 데이터

건조된 불가리아산 다마스크 장미(Rosbio bulgariaLTD., Bulgaria) 100 g에 1,000 g 3차 증류수를 가하고 3 h 동안 60℃ 이상으로 열수 추출하여 장미추출물(Rosa damascena extract, RE)을 711 g 얻었다. 그 추출물에 펙티나아제(Pectinex Ultra Pulp, Novozymes,Danmark)와 셀룰라아제(Celluclast, Novozymes, Danmark),글루코시다아제(BGL600, Sunson Industry group co.
인간 각질형성세포주(human keratinocyte, HaCaT)는Dulbecco’s modification of Eagle’s medium (DMEM,Welgene, Korea)에 fetal bovine serum (FBS, Welgene,Korea) 10%, 인간유래섬유아세포(human dermal fibroblast, HDF)는 DMEM (Gibco, USA)에 FBS 10%, 모유두세포(human hair follicle dermal papilla cells, HDPC)는mesenchymal stem cell medium complete kit (MSCM,Sciencecell, USA) 배지를 사용하여 37 ℃, 5% CO2 조건에서 배양했다.

데이터처리

본 연구의 실험 결과는 3회 반복하였으며, 실험결과를 평균값 ± 표준편차로 나타내었다.
통계적 유의성은 Student’s t-test 방법으로 분석하였으며, 유의성 수준은***p < 0.001, **p < 0.01, *p < 0.05로 표시했다.

이론/모형

이후, 시료를 처치했다. 72 h 배양 후, 세포를 phosphate buffer saline (PBS, Welgene,Korea)로 세척하고, 회수하여 PureLink RNA Mini Kit(Thermo Fisher Scientific, USA)방법에 따라 mRNA를 추출했다. 이후 High Capacity RNA-to-cDNA Kit(Thermo Fisher Scientific, USA)방법에 따라 cDNA를 합성했다.
그 후 human total MMP-1 ELISA KIT(R&D SYSTEMS, USA) 방법대로 MMP-1을 정량했다.
DPPH법은 천연물의 수용성 혹은 유기용매 추출물의 항산화 활성 측정법으로 널리 사용하는 방법이다. 본 실험에서는 항산화 활성 측정방법 중 Blois의 방법에 따라 측정했다[19]. DPPH 라디탈 소거능을 평가하기 위해 시료 0.
72 h 배양 후, 세포를 phosphate buffer saline (PBS, Welgene,Korea)로 세척하고, 회수하여 PureLink RNA Mini Kit(Thermo Fisher Scientific, USA)방법에 따라 mRNA를 추출했다. 이후 High Capacity RNA-to-cDNA Kit(Thermo Fisher Scientific, USA)방법에 따라 cDNA를 합성했다. 그 후 시험 세포 및 대조군 세포를 Real TimePCR하여 aquaporin 3 유전자 발현 수준을 분석했다.
이어서 총 당 함량과 총 단백질 함량을 측정했다. 총 당 함량은 phenol-sulfuric acid 법[17]에 따라 glucose (Sigma, USA)를 표준물질로 사용하여 측정하였고, 총 단백질 함량은 Lowry 등[18]의 방법에 따라 bovine serum albumin (BSA, Sigma, USA)를 대조로 하여 실험하였다.

성능/효과

1. 저분자 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물의 항산화 효능을 확인한 결과 IC50 값이 22.64 µg/mL으로 양성대조군인 ascorbic acid와 비슷한 수준의항산화 효능을 나타내었고, 피부세포에서의 활성산소 제거능 확인결과 스트레스에 의해 증가된 활성산소가 15 µg/mL 처치 시 28% 감소한 것을 확인했다.
2. 콜라겐 분해효소인 MMP-1 발현 저해능을 확인한 결과 15 µg/mL 처치 시 자외선을 처치한 군 대비 MMP-1 발현량이 48% 감소했다.
3. 세포막에서 수분통로를 여는 보습유전자인 aquaporin 3와 피부 장벽 구성물질인 지질 생합성능을 확인한 결과 aquaporin 3는 10 µg/mL 처치 시대조군 대비 44% 증가하였고 지질 생합성능은 대조군 대비 10% 증가하였다.
4. 모유두세포에서의 효능으로는 15 µg/mL 처치 시 스트레스 처치 군 대비 세포사멸을 10% 억제하고 활성산소의 생성을 90% 감소시켰다.
IC50 값을 확인한 결과 ascorbic acid는 21.1µg/mL, RE는 37.0 µg/mL, RELG는 22.6 µg/mL를 나타냈으며 이는 효소처리에 의한 저분자화가 항산화능을 높인다는 것을 확인한 결과이다.
RELG 처치군은 자외선 처치로 인하여 증가된 MMP-1의 발현양을 농도 유의적으로 감소했으며, 최대 시료 15µg/mL 처치 시 자외선 처치군 대비 MMP-1 발현양이 48% 감소했다(Figure 7).
그 결과, RELG가 모유두세포를 보호하여 15 µg/mL 처치 시 자극 처치군 대비 10%의 세포 사멸 억제를 확인했다(Figure 10).
그 결과, 시료를 10 µg/mL 처치한 현미경 사진에서 붉은색으로 염색된 지질이 증가됨을 확인했다(Figure 9A).
그 결과RELG 15 µg/mL 처치 시 UV와 H2O2에 의해 증가된ROS가 28%씩 감소했다(Figure 6).
일반적으로 당단백은 당이 차지하는 비율이 다양하기 때문에 장미에 함유된 당단백 중 당과 단백질의 함량을 확인하기 위하여 추출물에서 분리한 당단백의 총당, 단백질 함량을 측정하였다[12]. 당단백을 분리하여 회수한 결과, 건조된 원물 대비 수율 10.2 wt%를 나타냈으며 당단백질 내 함유된 총 당과 총 단백질 함량을 측정한 결과, 총 당 함량은 31.5 wt%, 총 단백질 함량은 59.2 wt%를 나타냈다(Table 1). 위 결과를 통해 장미 내 함유된 당단백의 경우, 단백질 함량이 당보다 높은 특징을 나타냄을 확인하였다.
또한 모유두세포에 자극 처치 시 ROS가 증가함을 확인하였으며, RELG의 ROS 감소효과를 확인했다. 특히 자외선 처치군에서 RELG 처치 시 15 µg/mL의 농도에서 ROS를 90% 감소시켰다(Figure 11).
분석결과, RE에서 분리한 당단백은 중량평균 분자량 650 kDa의 고분자와 1 kDa의 저분자로 장미와 같은 속인 해당화에서 분리한 당단백의 분자량이 8-150 kDa인 것과 비교하여 더 다양한 분자량 분포를 나타내었다[15]. 반면 RELG에서의 분자량을 측정한 결과 90% 이상이 중량평균 분자량 1 kDa대의 저분자 당단백으로 확인되었으며 장미 고분자 당단백이 효소처리에 의하여 저분자화 됨을 알 수 있었다(Figure 2).
분석결과, RE에서 분리한 당단백은 중량평균 분자량 650 kDa의 고분자와 1 kDa의 저분자로 장미와 같은 속인 해당화에서 분리한 당단백의 분자량이 8-150 kDa인 것과 비교하여 더 다양한 분자량 분포를 나타내었다[15]. 반면 RELG에서의 분자량을 측정한 결과 90% 이상이 중량평균 분자량 1 kDa대의 저분자 당단백으로 확인되었으며 장미 고분자 당단백이 효소처리에 의하여 저분자화 됨을 알 수 있었다(Figure 2).
저분자 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물의 세포독성을 평가한 결과 5-15µg/mL의 농도에서 세포 독성이 보이지 않음을 확인하였다(Figure 3, 4). 세포에 영향을 주지 않는 수준의 시료농도로 이후 실험을 평가하여 장미추출물의 효과가 세포생존율에 관계없이 장미추출물 본연의 효과임을 확인하였다.
위 결과들을 통하여 저분자화된 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물은 피부세포 내에서의 항산화, 항주름, 보습효과를 통한 항노화 효과를 가지며 모유두세포에서 또한 항산화 효능을 나타내어 효과적인 항노화 화장품 소재임을 확인하였다.
2 wt%를 나타냈다(Table 1). 위 결과를 통해 장미 내 함유된 당단백의 경우, 단백질 함량이 당보다 높은 특징을 나타냄을 확인하였다.
염색된 세포를 용해시켜 흡광도를 측정하여 그래프로 나타낸 결과 지질 생합성이 대조군 대비 10% 증가했다(Figure 9B). 이를 통하여 RELG는 AQP-3의 발현을 증가시켜 수분통로를 열고 피부 내 지질의 합성을 증가시켜 피부장벽구조를 견고히 함으로써 피부 내 수분이 증발하는 것을 막아 보습 효능이 있음을 확인하였다.
저분자 당단백을 함유한 다마스크 장미추출물의 세포독성을 평가한 결과 5-15µg/mL의 농도에서 세포 독성이 보이지 않음을 확인하였다(Figure 3, 4).

후속연구

ROS는 피부 내에서 콜라겐을 분해하는 효소인 MMP의 유도를 일으킨다. 항산화 결과를 바탕으로RELG 처치 시 MMP저해 효과도 있을 것이라고 예상했다. 자외선 조사 후 콜라겐 타입 I, II, III를 분해하여 주름을 형성하는 MMP-1의 발현을 확인했다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	피부 스트레스 증가의 주된 요인은 무엇인가?	하지만 현대에 들어 자연스런 피부의 노화보다 외부로부터 오는 스트레스가 피부노화를 가속화 시키는 주요인자로 인식되면서 스트레스로부터 피부를 보호하는 것이 항노화의 주요한 기전으로 인정받고 있다[2]. 피부 스트레스 증가의 주된 요인은 외부로부터 오는 자외선과 피부세포 내 발생하는 활성산소이다. 이들은 피부의 탄력을 부여하는 콜라겐의 생성을 억제하고 matrix metalloproteinase (MMP)를 증가시킴으로써 콜라겐을 분해하여 주름과 노화를 촉진한다[3,4].
	건조피부란 무엇인가?	또 다른 피부 노화의 원인은 피부가 수분을 유지하는 능력이 저하되어 나타난다. 건조피부는 노인층에서 가장 흔한 피부과적 문제로 피부 노화 시 보습 단백질의 감소와 지질 합성 능력의 감소로 노화 피부에서 보습 및 장벽기능이 저하된다. Aquaporin 3는 피부상피세포에 존재하며 세포막에서 수분통로를 열고 닫는 중요한 역할을 한다.
	장미의 주요 영양성분은 어떤 역할을 하는가?	근래에 장미는 당, 단백질, 각종 지방산과 미네랄 등 영양성분이 풍부하여 식품소재로도 검토되고 있다[10]. 그중 70% 이상을 차지하는 영양소인 당과 단백질은 그 사이가 공유결합으로 이어진 당단백의 형태로도 존재하며 세포의 면역시스템이나 세포를 보호하는 등 다양한 역할을 수행한다[11]. 당단백 중 당이 차지하는 비율은 1-80%로 다당류부터 올리고당까지 다양하여 넓은 분자량을 갖는 것이 특징이다[12].

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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