[논문]한련초 추출물의 치주염 개선 효과에 관한 연구

박준혁; 이해수; 양웅모

doi:10.13048/jkm.18007

한련초 추출물의 치주염 개선 효과에 관한 연구
The effects of Eclipta Prostrata L.(Ecliptae Herba) on periodontitis rats 원문보기

Journal of Korean Medicine = 대한한의학회지, v.39 no.1, 2018년, pp.63 - 74

박준혁 (경희대학교한의과대학) , 이해수 (경희대학교한의과대학) , 양웅모 (경희대학교한의과대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives: Periodontitis is an inflammatory disease with the destruction of periodontal ligament, alveolar bone loss and inflammation of gingva, leading to teeth loss. Eclipta prostrata L. (Ecliptae Herba) has been used to treat the inflammatory disease as a Korean traditional medicine. The aim of this study is to investigate the effects of E. prostrata L. on periodontitis. Methods: E. prostrata L. was extracted with water and lyophilized. The aqueous extract of E. prostrata L. (EP) was topically applied to the periodontal lesion for 2 weeks. To induce the periodontitis, a 3-0 nylon ligature was placed around the cervix of the lower first molar in rat. Rats were divided into 3 groups (n = 7); NL group (non-ligatured and non-treated), L group (ligatured and vehicle-treated) and EP group (ligatured and EP-treated). After sacrifice, the mandibles was dissected and stained with methylene blue solution to analyze the alveolar bone loss. The expression of MMP-9 was determined in gingival tissues. To confirm the effect of EP on recovery of gingiva, mRNA expressions of type I pro-collagen and MMP-9 levels were investigated in LPS-treated HS68 fibroblast cells. In addition, inflammatory mediators were evaluated in LPS-treated RAW264.7 cells. Results: Alveolar bone loss was significantly inhibited by EP treatment. The mRNA expression of MMP-9 was attenuated in rats treated with EP. In addition, treatment with EP increased the expression of type I pro-collagen, while the expression of MMP-9 was decreased in LPS-stimulated HS68 fibroblast cells. Furthermore, EP down-regulated the LPS-induced IL-6, $TNF-{\alpha}$, COX-2 and iNOS production in RAW264.7 cells. Conclusions: These results suggest that EP have ameliorative effects on periodontitis through inhibiting alveolar bone loss and modulating the inflammatory mediators. Therefore, E. prostrata L. may be an alternative on patients with periodontitis.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

따라서 본 연구에서는 치주염을 유발한 동물모델에서 한련초 추출물 처리 후, 치주조직의 재생 능력 및 항염 효능을 통한 치주염 개선 효능과 그에 따른 분자학적 작용 기전을 평가하였다.
치조골 손실 정도는 치주염의 심각도를 측정하는 지표 중 하나이다¹⁸⁾. 본 실험에서는 치주염의 심각도를 측정하기 위해 쥐 어금니의 법랑질-시멘트 경계부(CEJ)에서 치조성까지의 거리를 측정하여 치조골 손실 정도를 조사하였다. 실험 결과, 한련초 추출물 외용 도포 처리는 치주염 유발로 증가된 치조골 손실 정도를 유의하게 회복시켰다.
TNF-α는 치주염 초기 염증성 사이토카인 중 하나로 주로 단핵구나 대식세포에서 분비되며 골 대사를 촉진해 치조골의 손실을 유발한다³²⁾. 본 연구에서 LPS로 활성화된 RAW264.7 대식세포의 인터루킨-6와 TNF-α의 발현을 비교해보았다. 실험결과 LPS군에서 정상군에 비해 유의하게 높은 인터루킨-6와 TNF-α발현이 관찰되었으며, 한련초 처리군에서 유의하게 억제되었다.
따라서 MMP-9의 억제와 같은 요인들은 치주염의 병리기전을 파악하는데 중요하게 작용할 뿐 아니라 치료 전략과도 직접적인 관련이 있다고 할 수 있다²²⁾. 본 연구에서는 랫드의 치은 조직에서 MMP-9의 발현 정도를 비교해보았다. 실험 결과 정상군에 비해 치주염 유발군에서 MMP-9의 발현이 유의하게 증가하였으며, 한련초 외용도포 처리군에서는 치주염 유발군에 비해 MMP-9의 발현이 유의하게 억제되는 것을 확인할 수 있었다.

제안 방법

샘플 처리 및 대조군 처리는 하루에 한 번씩 2주 동안 처리 되었다. 2 주 후 백서를 희생하여 획득한 치조골에서 조직형태학적, 분자학적 지표를 분석하였다.
1% Tween 20)로 상온에서 2시간 동안 실시하였다. Cyclooxygenase (COX)-2, iNOS의발현량을 측정하기 위해 1차 항체로서 anti-mouseCOX-2, inducible nitric oxide synthase (iNOS), β-actin (1:1000, Santa-Cruz, USA)을 TBST 용액에서 희석하여 4°C에서 overnight 반응시킨 후 TBST로세정하였다. 2차 항체로 horseradish peroxidase가 결합된 anti-mouse IgG (1:2000, Santa-Cruz, USA)를상온에서 2시간 반응시켰다.
HS68 섬유아세포(human foreskin fibroblast)는Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM,Gibco)에 10% Fetal bovine serum (FBS, Gibco)과1% penicillin-streptomycin (Gibco)이 함유된 배지에서 2×105/ml 농도로 6 well plate에 분주 후 24시간 동안 안정화하였다. Serum-free DMEM 배지에 한련초 추출물을 100μg/ml로 하여 처리하고 2시간 후 정상대조군을 제외하고 lipopolysaccharide (LPS) 1μg/ml를 처리하여 24시간 동안 배양하였다.
HS68 섬유아세포에서 LPS 자극 후 세포외 기질을 구성하는 제1형 프로콜라겐 mRNA 및 세포 외 기질을 파괴하는 MMP-9의 발현을 측정하였다. LPS 처리 시 정상군에 비해 제1형 프로콜라겐 mRNA 발현이 유의하게 감소되었으며(^###p<0.
LPS로 유도된 RAW264.7 대식세포에서 한련초 추출물 처리가 iNOS, COX-2의 단백질 발현에 미치는 영향을 측정하였다. iNOS 발현은 정상군에 비해 LPS 처리군에서 약 8배 증가하였으며, 한련초 추출물 처리군에서 LPS로 유도된 iNOS 단백질 발현이 유의적으로 억제되었다(Fig.
PCR PreMix Kit 튜브에 2μl cDNA, 2μl 5'primer와 2μl3'primer, 14μl 증류수 혼합하여 thermal cycler(Perkin Elmer 2400, USA)에서 증폭되었다. MMP-9은 94°C에서 20초, 55°C에서 30초, 72°C에서 2분,35 cycle, 제1형 프로콜라겐은 94°C에서 20초, 51.4°C에서 30초, 72°C에서 2분, 40 cycle, GAPDH는 94°에서 20초, 60°C에서 30초, 72°C에서 2분, 35 cycle으로 실행되었다. Polymerase chain reaction (PCR) 에 사용된 sequences는 Table 1과 같다.
증폭된 cDNA는 1% agarose gel에서 전기영동하고 ethidiumbromide로 염색하여 matrix metalloproteinases(MMP)-9, 제1형 프로콜라겐(Type I pro-collagen),GAPDH band를 확인 하였다. 각각의 mRNA 발현정도는 Image J (NIH, Bethesda, USA)에 의해 측정되었으며, GAPDH를 loading control로 사용하여 정량하였다.
7 cells은 DMEM에 10% FBS와 1% PS가 함유된 배지에서 2×105/ml 농도로 6 well plate에 분주하여 배양하였다. 기존 배지를 제거 후 한련초 추출물 100μg/ml을 serum-free DMEM 배지에 녹여 2시간 처리 후, 정상대조군을 제외한 LPS군과 한련초 추출물군에 1μg/ml LPS를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 정상대조군, LPS 단독처리군, 한련초 추출물과 LPS가 처리군의 각각의 배지를 12,000 rpm에서 3분간 원심 분리한 상층액(cell culture supernatant)에서 인터루킨-6와 TNF-α를 측정하였다.
세포가 충분히 안정화된 후 serum-free DMEM에 한련초 추출물 100μl/ml을 처리 하고, 2시간 후 정상대조군을 제외한 LPS군과 한련초 추출물군에 1μg/ml LPS를 4시간 처리하였다. 기존 배지의 제거 후 세포를 ice PBS로 3회 세척한 후,1ml trypsin-EDTA로 부착된 세포를 걷어 내고, 원심분리(15,000rpm, 15min)하여 세포를 수집하였다. 얻어진 세포에 protease inhibitor가 들어간 RIPA buffer [50mM Tris-HCl (pH 7.
TMB(substrate reagent set A: B=1:1) 100μl 씩 분주한 후약 30분 동안 발색 정도를 확인하여 stop solution(2M H2SOP4)으로 반응을 종료하였다. 반응이 종료된 후, 인터루킨-6과 TNF-α cytokine의 농도는 microplate reading instrument (Molecular Devices,PA)를 이용하여 450nm 파장에서 분석되었으며, 표준 흡광도 값으로부터 얻어진 선형 회귀식을 이용하여 계산하였다.
본 실험은 한련초의 치주염 개선 효과를 확인하기 위해, 1번 대구치 치경부에 멸균된 나일론실을 묶어 치주염을 유발한 랫드를 사용하였다. 치실 결찰에 의해 약화된 조직은 세균 증식 및 치태 형성을 촉진해 면역반응을 일으키고 이는 치조골 손실로 이어진다¹⁷⁾.
또한, 치주인대내의 콜라겐 섬유를 용해하여 치주 결합의 손실을 일으키는 MMP-9도 치주염 진행에 관여된다²⁶⁾. 본연구에서는 HS68 섬유아세포를 LPS로 자극하여 제1형 프로콜라겐 단백질과 MMP-9의 발현을 비교하였다. 실험 결과 정상군에 비해 LPS군에서 제1형 프로콜라겐 발현이 유의하게 감소하였으며, 한련초 추출물 처리군에서 LPS군에 비해 제1형 프로콜라겐발현이 유의하게 증가하는 것으로 나타났다.
분리된 잇몸조직(gingiva)과 HS68 섬유아세포의 ribonucleic acid (RNA)추출을 위해 각각의 얻어진 조직에 1ml의 TRIzol (Invitrogen, Carlsbad, CA,USA)을 첨가하여 분쇄하였다. 분쇄된 잇몸 조직과 HS68 섬유아세포는 각각 chloroform 200μl (per 1mlof Trizol)을 넣고 약 15초간 inverting 하였다.
이후 샘플 처리군에는 치주염이 유발된 동일 부위에 한련초 추출물(100mg/ml, in 1% carboxymethyl cellulose)을 100μL씩 도포하였으며, 정상대조군과 음성대조군에는 1% carboxymethylcellulose가 포함된 증류수를 동일하게 100μL씩 도포하였다. 샘플 처리 및 대조군 처리는 하루에 한 번씩 2주 동안 처리 되었다. 2 주 후 백서를 희생하여 획득한 치조골에서 조직형태학적, 분자학적 지표를 분석하였다.
7 cells은 2×105/ml 농도로 6 well plate에 분주하였다. 세포가 충분히 안정화된 후 serum-free DMEM에 한련초 추출물 100μl/ml을 처리 하고, 2시간 후 정상대조군을 제외한 LPS군과 한련초 추출물군에 1μg/ml LPS를 4시간 처리하였다. 기존 배지의 제거 후 세포를 ice PBS로 3회 세척한 후,1ml trypsin-EDTA로 부착된 세포를 걷어 내고, 원심분리(15,000rpm, 15min)하여 세포를 수집하였다.
실험동물은 치주염을 유발하지 않은 정상대조군(NL, non-ligatured and non-treated), 치주염을 유발한 음성대조군(L, ligatured and vehicle-treated), 치주염 유발과 한련초 추출물을 처리한 샘플 처리군(EP, ligatured and Eclipta prostrata-treated)으로 그룹 당 7 마리씩 3개의 군으로 나누었다. 정상대조군을 제외한 모든 그룹의 백서는 tiletamine/zolazepam혼합액(Zoletil 50, Virbac Lab, Carroscedex, France)으로 전신 마취 후 하악 제 1 대구치에 멸균된 봉합사(3-0, nylon thread)로 결찰하여 치주염을 유발하였다(Fig.
분쇄된 잇몸 조직과 HS68 섬유아세포는 각각 chloroform 200μl (per 1mlof Trizol)을 넣고 약 15초간 inverting 하였다. 원심분리(12,000rmp, 5min)하여 상층액을 걷어 isopropanol과 혼합 후, 다시 원심 분리(12,000rmp, 10min)하여 RNA pellet을 모았다. 얻어진 RNA pellet을 75% 에탄올 1ml로 세척하고, 원심분리(12,000rmp, 10min) 후 상층액을 제거 후 최종 RNA pelllet을 얻었다.
또한,LPS에 자극된 섬유아세포에서 정상군에 비해 MMP-9의 발현이 유의하게 증가하였으며, 한련초 추출물 처리에 의해 LPS로 유도된 MMP-9의 발현은 유의하게 감소되었다. 이를 통해, 한련초 추출물의 잇몸 조직분해 억제 및 합성 촉진 효능을 확인하였다.
1). 이후 샘플 처리군에는 치주염이 유발된 동일 부위에 한련초 추출물(100mg/ml, in 1% carboxymethyl cellulose)을 100μL씩 도포하였으며, 정상대조군과 음성대조군에는 1% carboxymethylcellulose가 포함된 증류수를 동일하게 100μL씩 도포하였다. 샘플 처리 및 대조군 처리는 하루에 한 번씩 2주 동안 처리 되었다.
정상대조군, LPS 단독처리군, 한련초 추출물과 LPS가 처리군의 각각의 배지를 12,000 rpm에서 3분간 원심 분리한 상층액(cell culture supernatant)에서 인터루킨-6와 TNF-α를 측정하였다. 인터루킨(interleukin)-6와 tumor necrosis factor(TNF)-α enzyme-linked immunosorbent assay kit(BD Biosciences, Inc., CA)을 이용하여 측정하였다. 인터루킨-6, TNF-α capture antibody를 각각의 coating buffer로 희석하여 분주하고 냉장상태로 overnight 하였다.
잇몸조직 및 HS68 섬유아세포에서 얻어진 총 1μg RNA를 cDNA synthesis kits (Invitrogen Corp.,Carlsbad, CA, USA) 제조사의 지시에 따라 샘플을만들어 45°C에서 60분, 90°C에서 5분의 과정을 거쳐 complementary DNA (cDNA) 합성을 하였다. 합성된 cDNA로부터 MMP-9, 제1형 프로콜라겐과 GAPDH를 증폭시키기 위하여 Maxime PCR PreMix Kit(iNtRON, biotechnology, Korea)를 사용하였다.
기존 배지를 제거 후 한련초 추출물 100μg/ml을 serum-free DMEM 배지에 녹여 2시간 처리 후, 정상대조군을 제외한 LPS군과 한련초 추출물군에 1μg/ml LPS를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 정상대조군, LPS 단독처리군, 한련초 추출물과 LPS가 처리군의 각각의 배지를 12,000 rpm에서 3분간 원심 분리한 상층액(cell culture supernatant)에서 인터루킨-6와 TNF-α를 측정하였다. 인터루킨(interleukin)-6와 tumor necrosis factor(TNF)-α enzyme-linked immunosorbent assay kit(BD Biosciences, Inc.
실험동물은 치주염을 유발하지 않은 정상대조군(NL, non-ligatured and non-treated), 치주염을 유발한 음성대조군(L, ligatured and vehicle-treated), 치주염 유발과 한련초 추출물을 처리한 샘플 처리군(EP, ligatured and Eclipta prostrata-treated)으로 그룹 당 7 마리씩 3개의 군으로 나누었다. 정상대조군을 제외한 모든 그룹의 백서는 tiletamine/zolazepam혼합액(Zoletil 50, Virbac Lab, Carroscedex, France)으로 전신 마취 후 하악 제 1 대구치에 멸균된 봉합사(3-0, nylon thread)로 결찰하여 치주염을 유발하였다(Fig. 1). 이후 샘플 처리군에는 치주염이 유발된 동일 부위에 한련초 추출물(100mg/ml, in 1% carboxymethyl cellulose)을 100μL씩 도포하였으며, 정상대조군과 음성대조군에는 1% carboxymethylcellulose가 포함된 증류수를 동일하게 100μL씩 도포하였다.
Polymerase chain reaction (PCR) 에 사용된 sequences는 Table 1과 같다. 증폭된 cDNA는 1% agarose gel에서 전기영동하고 ethidiumbromide로 염색하여 matrix metalloproteinases(MMP)-9, 제1형 프로콜라겐(Type I pro-collagen),GAPDH band를 확인 하였다. 각각의 mRNA 발현정도는 Image J (NIH, Bethesda, USA)에 의해 측정되었으며, GAPDH를 loading control로 사용하여 정량하였다.
얻어진 RNA pellet을 75% 에탄올 1ml로 세척하고, 원심분리(12,000rmp, 10min) 후 상층액을 제거 후 최종 RNA pelllet을 얻었다. 추출된 각각의 RNA pellet을 diethyl pyrocarbonate 용액에 녹여 microplate reading instrument (Molecular Devices, PA)로 농도와 순도(260nm/280nm)를 측정하였다.
염색된 좌측 하악골은 스마트 현미경(Canon digital camera, 100mm macro lens)에 의해 촬영되었다. 치조골의 손실(alveolar bone loss, ABL)의 평가를 위해 첫 번째 대구치 3개의 뿌리 축을 치아의 시멘트질과 에나멜질의 경계(cementoenamel junction,CEJ)에서 (alveolar bone crest, ABC)까지의 거리를 Image J (NIH, Bethesda, USA)로 측정하였다.
한련초 추출물이 염증 반응에 미치는 영향을 확인하기 위해, RAW264.7 대식세포에 LPS로 자극 후 배양액 내의 전염증성 사이토카인 인터루킨-6 및 TNF-α의 발현을 측정하였다. 인터루킨-6의 경우,LPS 단독 처리군은 169.
,Carlsbad, CA, USA) 제조사의 지시에 따라 샘플을만들어 45°C에서 60분, 90°C에서 5분의 과정을 거쳐 complementary DNA (cDNA) 합성을 하였다. 합성된 cDNA로부터 MMP-9, 제1형 프로콜라겐과 GAPDH를 증폭시키기 위하여 Maxime PCR PreMix Kit(iNtRON, biotechnology, Korea)를 사용하였다. PCR PreMix Kit 튜브에 2μl cDNA, 2μl 5'primer와 2μl3'primer, 14μl 증류수 혼합하여 thermal cycler(Perkin Elmer 2400, USA)에서 증폭되었다.

대상 데이터

경상북도 영천에서 채취하여 완전 건조한 한련초(Eclipta prostrata L.) 지상부를 정도생약국(Seoul,Korea)에서 구입하여 사용하였다. 한련초 50g을 500ml의 증류수에 넣은 후 상온에서 24시간 동안 추출하였다.
실험동물은 7주령 수컷 Sprague-Dawley계 백서를 라온바이오(RaonBio Inc., Yongin, Korea)에서 구입하여 사용하였다. 온도 22.
최종 동결 건조품인 한련초 추출물표본(Voucher specimen: #EPW¹⁰⁰⁾은 –20°C에 보관 하였다. 실험에 사용된 한련초 동결 건조품은 샘플의 점도를 향상시키기 위해 처리 직전 1% carboxymethyl cellulose에 혼합되어 사용되었다¹⁶⁾.
충분히 고정된 하악골을 완전히 건조를 시킨 후, 1% aqueous methylene blue (Sigma, USA)로 5분 동안 염색 하였다. 염색된 좌측 하악골은 스마트 현미경(Canon digital camera, 100mm macro lens)에 의해 촬영되었다. 치조골의 손실(alveolar bone loss, ABL)의 평가를 위해 첫 번째 대구치 3개의 뿌리 축을 치아의 시멘트질과 에나멜질의 경계(cementoenamel junction,CEJ)에서 (alveolar bone crest, ABC)까지의 거리를 Image J (NIH, Bethesda, USA)로 측정하였다.

데이터처리

실험결과의 모든 분석은 각 그룹의 측정값을 평균±표준오차(mean±standard error) 값으로 표시 하였다. 통계적 분석은 ANOVA(analysis of variance)을이용하여 Dunnett's test를 사용하였다.
실험결과의 모든 분석은 각 그룹의 측정값을 평균±표준오차(mean±standard error) 값으로 표시 하였다. 통계적 분석은 ANOVA(analysis of variance)을이용하여 Dunnett's test를 사용하였다. p값이 0.

성능/효과

COX-2 단백질 발현 또한 LPS 처리군에서 정상군에 비해 유의적인 증가를 나타내었으며, LPS로 유도된 COX-2의 과발현은 한련초 추출물 처리에 의해감소된 것을 확인하였다(Fig. 6B, *p<0.05).
LPS 처리 시 정상군에 비해 제1형 프로콜라겐 mRNA 발현이 유의하게 감소되었으며(###p<0.001), 한련초 추출물 처리군에서 감소된 제1형 프로콜라겐 mRNA의 발현은 유의적으로 약 2.6배 증가되었다(Fig. 4A, ***p<0.001).
iNOS 발현은 정상군에 비해 LPS 처리군에서 약 8배 증가하였으며, 한련초 추출물 처리군에서 LPS로 유도된 iNOS 단백질 발현이 유의적으로 억제되었다(Fig. 6A, ***p<0.001).
또한, LPS 처리군에서 MMP-9 mRNA의 발현이증가되었으며(##p<0.01), 한련초 추출물 처리에 의해 MMP-9의 발현이 약 36% 억제되었다(Fig. 4B, *p< 0.05).
실험 결과 정상군에 비해 LPS군에서 제1형 프로콜라겐 발현이 유의하게 감소하였으며, 한련초 추출물 처리군에서 LPS군에 비해 제1형 프로콜라겐발현이 유의하게 증가하는 것으로 나타났다. 또한,LPS에 자극된 섬유아세포에서 정상군에 비해 MMP-9의 발현이 유의하게 증가하였으며, 한련초 추출물 처리에 의해 LPS로 유도된 MMP-9의 발현은 유의하게 감소되었다. 이를 통해, 한련초 추출물의 잇몸 조직분해 억제 및 합성 촉진 효능을 확인하였다.
따라서 iNOS 및 COX-2의 발현 수준은 염증의 정도를 반영하며 염증 과정에 대한 약물의 효과를 평가하는 수단으로 사용할 수 있다. 본 연구의 실험 결과 LPS로 활성화된 RAW264.7 대식 세포에서 정상군에 비해 COX-2와 iNOS 발현이 유의하게 높았으며, 한련초 처리군에서 유의하게 억제되었다.
본연구에서는 HS68 섬유아세포를 LPS로 자극하여 제1형 프로콜라겐 단백질과 MMP-9의 발현을 비교하였다. 실험 결과 정상군에 비해 LPS군에서 제1형 프로콜라겐 발현이 유의하게 감소하였으며, 한련초 추출물 처리군에서 LPS군에 비해 제1형 프로콜라겐발현이 유의하게 증가하는 것으로 나타났다. 또한,LPS에 자극된 섬유아세포에서 정상군에 비해 MMP-9의 발현이 유의하게 증가하였으며, 한련초 추출물 처리에 의해 LPS로 유도된 MMP-9의 발현은 유의하게 감소되었다.
본 연구에서는 랫드의 치은 조직에서 MMP-9의 발현 정도를 비교해보았다. 실험 결과 정상군에 비해 치주염 유발군에서 MMP-9의 발현이 유의하게 증가하였으며, 한련초 외용도포 처리군에서는 치주염 유발군에 비해 MMP-9의 발현이 유의하게 억제되는 것을 확인할 수 있었다.
본 실험에서는 치주염의 심각도를 측정하기 위해 쥐 어금니의 법랑질-시멘트 경계부(CEJ)에서 치조성까지의 거리를 측정하여 치조골 손실 정도를 조사하였다. 실험 결과, 한련초 추출물 외용 도포 처리는 치주염 유발로 증가된 치조골 손실 정도를 유의하게 회복시켰다.
7 대식세포의 인터루킨-6와 TNF-α의 발현을 비교해보았다. 실험결과 LPS군에서 정상군에 비해 유의하게 높은 인터루킨-6와 TNF-α발현이 관찰되었으며, 한련초 처리군에서 유의하게 억제되었다.
, Yongin, Korea)에서 구입하여 사용하였다. 온도 22.2°C, 습도 55∼66%, 명암주기 12시간으로 자동 조절되는 실험 환경에서 일반 실험용 동물 사료와 물을 충분히 공급하였으며. 일주일간의 적응기 후 실험에 사용되었다.
이에 반해, 한련초 추출물(EP) 처리군의 치조골 손상은 1.62± 0.16mm로 치주염 유발한 군(L)에 비해 유의적으로 억제되었다(Fig. 2, **p<0.01)

후속연구

결론적으로 한련초는 치주질환에서 치조골 손실개선 효능을 보였으며, 향후 치주질환에 대한 외용치료 소재로의 활용 가능성을 보였다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	치주염의 증상은?	치주질환은 치은염, 치주염으로 분류되며, 치주염은 치아를 지지하고 있는 주위 조직에 염증이 발생하는 질환으로 염증이 잇몸에 국한된 치은염이 악화되어 발병한다1). 치주염은 오랜 기간에 걸쳐 진행되며, 심각한 치주 조직의 파괴 및 잇몸 염증, 치주낭 깊이 증가, 잇몸 출혈, 치아 흔들림 등의 증상이 나타난다2). 보건복지부 국민건강영양조사에 따르면 치주질환은 2016년 만 19세 이상 성인에게서 29.
	치주질환의 정의는?	치주질환은 치은염, 치주염으로 분류되며, 치주염은 치아를 지지하고 있는 주위 조직에 염증이 발생하는 질환으로 염증이 잇몸에 국한된 치은염이 악화되어 발병한다1). 치주염은 오랜 기간에 걸쳐 진행되며, 심각한 치주 조직의 파괴 및 잇몸 염증, 치주낭 깊이 증가, 잇몸 출혈, 치아 흔들림 등의 증상이 나타난다2).
	치주질환의 치료를 위해 스케일링 등으로 주변의 병원성 세균을 물리적으로 제거하는 방법을 사용하는데 이때의 한계점은?	현재 치주질환의 치료를 위하여 임상에서는 스케일링이나 치근활택술과 같이 치아 주변의 병원성 세균을 물리적으로 제거하는 방법이 사용된다7). 다만,염증반응을 일으키는 일부 세균들은 연조직이나 해부학적으로 접근하기 어려운 곳에 위치하기 때문에 염증반응을 완전히 제거하지 못하는 한계점이 있다8). 따라서 항생제와 항균제가 보조적으로 사용되고 있으나, 장기 사용으로 인한 위장 과민증, 세균의 항생제 내성 증가와 같은 부작용으로 인해 제한적으로 사용된다9,10).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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