Pactobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc)에 의한 무름병은 전세계적으로 문제가 되고 있고 특히 온난 다습한 지역에서 문제가 심각하다. 본 연구는 Pcc에 의해 발생하는 무 무름병에 대한 효율적인 저항성 검정법을 확립하기 위하여 수행되었다. 시판 무 품종 60개의 Pcc에 대한 저항성 정도를 조사하고, 추후 실험을 위해 저항성에 차이를 보이는 6개 품종을 선발하였다. 이들 6개 품종의 접종하는 무의 생육 시기, 접종원 농도, 접종 후 재배 온도 등의 발병 조건에 따른 무름병 발생을 조사하였다. 이들 실험의 결과로부터 무의 무름병에 대한 저항성을 검정하기 위해서는, 무 종자를 파종하고 온실($25^{\circ}C{\pm}5^{\circ}C$)에서 20일 동안 재배한 유묘에 Pcc 균주의 세균현탁액($8{\times}10^5cfu/ml$)을 분무하여 접종하고, 접종한 식물은 $25^{\circ}C$ 습실상에 24시간 동안 배양한 후에 $25^{\circ}C$, 상대습도 80%의 생육상으로 이동하여 재배하는 것을 제안하고자 한다.
Pactobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc)에 의한 무름병은 전세계적으로 문제가 되고 있고 특히 온난 다습한 지역에서 문제가 심각하다. 본 연구는 Pcc에 의해 발생하는 무 무름병에 대한 효율적인 저항성 검정법을 확립하기 위하여 수행되었다. 시판 무 품종 60개의 Pcc에 대한 저항성 정도를 조사하고, 추후 실험을 위해 저항성에 차이를 보이는 6개 품종을 선발하였다. 이들 6개 품종의 접종하는 무의 생육 시기, 접종원 농도, 접종 후 재배 온도 등의 발병 조건에 따른 무름병 발생을 조사하였다. 이들 실험의 결과로부터 무의 무름병에 대한 저항성을 검정하기 위해서는, 무 종자를 파종하고 온실($25^{\circ}C{\pm}5^{\circ}C$)에서 20일 동안 재배한 유묘에 Pcc 균주의 세균현탁액($8{\times}10^5cfu/ml$)을 분무하여 접종하고, 접종한 식물은 $25^{\circ}C$ 습실상에 24시간 동안 배양한 후에 $25^{\circ}C$, 상대습도 80%의 생육상으로 이동하여 재배하는 것을 제안하고자 한다.
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) causes bacterial soft rot on a wide range of crops worldwide, especially in countries with warm and humid climates. This study was conducted to establish an efficient screening method for resistant cultivars of radish (Raphanus sativus) to bacteria...
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) causes bacterial soft rot on a wide range of crops worldwide, especially in countries with warm and humid climates. This study was conducted to establish an efficient screening method for resistant cultivars of radish (Raphanus sativus) to bacterial soft rot. Resistance degrees of 60 commercial radish cultivars to the Pcc KACC 10421 isolate were investigated. For further study, six radish cultivars (Awooriwoldong, YR Championyeolmu, Jeonmuhumu, Bitgoeunyeolmu, Sunbongaltari, Housecheongok) showing different level of resistance to the bacterium were selected. The development of bacterial soft rot on the cultivars was tested according to several conditions such as incubation temperature, seedling stage of radish, inoculum concentration to develop the disease. On the basis of the results, we suggest that an efficient screening method for resistant radish to Pcc is to inoculate twenty-day-old seedlings with a bacterial suspension of Pcc at a concentration of $8{\times}10^5cfu/ml$ and then to cultivate the plants in a growth room at $25^{\circ}C$ and 80% RH with 12-hour light per day.
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) causes bacterial soft rot on a wide range of crops worldwide, especially in countries with warm and humid climates. This study was conducted to establish an efficient screening method for resistant cultivars of radish (Raphanus sativus) to bacterial soft rot. Resistance degrees of 60 commercial radish cultivars to the Pcc KACC 10421 isolate were investigated. For further study, six radish cultivars (Awooriwoldong, YR Championyeolmu, Jeonmuhumu, Bitgoeunyeolmu, Sunbongaltari, Housecheongok) showing different level of resistance to the bacterium were selected. The development of bacterial soft rot on the cultivars was tested according to several conditions such as incubation temperature, seedling stage of radish, inoculum concentration to develop the disease. On the basis of the results, we suggest that an efficient screening method for resistant radish to Pcc is to inoculate twenty-day-old seedlings with a bacterial suspension of Pcc at a concentration of $8{\times}10^5cfu/ml$ and then to cultivate the plants in a growth room at $25^{\circ}C$ and 80% RH with 12-hour light per day.
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문제 정의
carotovorum (Pcc)에 의한 무름병은 전세계적으로 문제가 되고 있고 특히 온난 다습한 지역에서 문제가 심각하다. 본 연구는 Pcc에 의해 발생하는 무 무름병에 대한 효율적인 저항성 검정법을 확립하기 위하여 수행되었다. 시판 무 품종 60개의 Pcc에 대한 저항성 정도를 조사 하고, 추후 실험을 위해 저항성에 차이를 보이는 6개 품종을 선발하였다.
본 연구에서는 효율적인 무 무름병 저항성 검정법을 확립하기 위해, 시판 중인 60개의 무 품종들의 저항성 정도를 조사하 고, 이 결과로부터 저항성 정도가 다른 무 품종 6개를 선발하여 접종원 농도, 접종하는 무 유묘의 생육 시기, 접종 후 식물체 재배 온도에 따른 무 유묘의 무름병 발생을 조사하였다.
제안 방법
The inoculated plants were incubated in a dew chamber at 20, 25 and 30°C for 24 hours and then transferred to each growth room at 20, 25 and 30°C with 12 hours light a day.
The inoculated plants were incubated in a dew chamber at 25°C for 24 hours and then transferred to a growth room at 25°C and 80% RH with 12 hours light a day. Three, four, and five days after inoculation, disease severity of plants was investigated on a scale of 0-4 and then converted to a percentage value.
The inoculated plants were incubated in a dew chamber at 20, 25 and 30°C for 24 hours and then transferred to each growth room at 20, 25 and 30°C with 12 hours light a day. Three, four, and five days after inoculation, disease severity of plants was investigated on a scale of 0-4 and then converted to a percentage.
AUDPC (area under the disease progress curve)=∑ n i=1 [t(i+1)-ti]×[DS(i+1)+DSi]/2;n=number of assessments, ti=number of days after inoculation on assessment date i, DSi=disease severity on assessment date i. 그리고 가장 감수성이 높은 품종의 AUDPC 값에 대한 각 품종의 상대적 AUDPC (rAUDPC, relative AUDPC)를 계산하였다.
온도에 따른 무름병 발생 실험은 접종한 식물체를 20°C, 25°C, 30°C 습실상에서 암상태로 24시간 배양한 후에 각각 20°C, 25°C, 30°C 생육실로 이동하여 하루에 12시간씩 광을 조사하면서 재배하였다. 그리고 접종 3일, 4일, 5일 후에 무 유묘에 발생한 무름병 발생 정도에 따라 Table 1과 같은 기준으로 발병도를 조사하고 이를 백분율로 환산하였다. 그리고 평균 발병도가 20% 이하이면 저항성으로, 21-40%는 중도저항성으로, 41% 이상은 감수성으로 판정하였다.
그리고 접종하는 무의 생육시기에 따른 무름병 발생 정도를 조사하기 위해서는 앞에서와 동일한 방법으로 파종하고 온실(25°C±5°C)에서 13일, 20일, 27일, 34일 동안 재배한 유묘를 실험에 사용하였다(Fig. 1).
모든 실험은 2회 독립적인 반복을 수행하였고, 반복 당 개체는 10개로 하였다. SAS (SAS 9.
무의 생육 정도에 따른 무름병 발생 실험을 제외한 모든 실험에서는 5×8 육묘용 연결포트(70 ml/pot, Bumnong, Jeongup, Korea)에 원예용상토 5호(Punong, Gyeongju, Korea)를 넣고 종자를 1립씩 파종하고 온실(25°C±5°C)에서 18일 동안 재배한 유묘를 사용하였다.
병원균 농도에 따른 무 무름병 발생실험을 위해서는, OD600 =0.2(1×108 cfu/ml)로 조정한 세균 현탁액과 이를 1/10씩 희석하여 1×107 , 1×106 , 1×105 cfu/ml가 되도록 조정한 세균 현탁액을 준비하였다.
온도에 따른 무름병 발생 실험은 접종한 식물체를 20°C, 25°C, 30°C 습실상에서 암상태로 24시간 배양한 후에 각각 20°C, 25°C, 30°C 생육실로 이동하여 하루에 12시간씩 광을 조사하면서 재배하였다.
시판 무 품종 60개의 Pcc에 대한 저항성 정도를 조사 하고, 추후 실험을 위해 저항성에 차이를 보이는 6개 품종을 선발하였다. 이들 6개 품종의 접종하는 무의 생육 시기, 접종원 농도, 접종 후 재배 온도 등의 발병 조건에 따른 무름병 발생을 조사하였다. 이들 실험의 결과로부터 무의 무름병에 대한 저항성을 검정하기 위해서는, 무 종자를 파종하고 온실(25° C±5°C) 에서 20일 동안 재배한 유묘에 Pcc 균주의 세균현탁액(8×105cfu/ml)을 분무하여 접종하고, 접종한 식물은 25°C 습실상에 24시간 동안 배양한 후에 25°C, 상대습도 80%의 생육상으로 이동하여 재배하는 것을 제안하고자 한다.
이들 실험의 결과로부터 무의 무름병에 대한 저항성을 검정하기 위해서는, 무 종자를 파종하고 온실(25° C±5°C) 에서 20일 동안 재배한 유묘에 Pcc 균주의 세균현탁액(8×105cfu/ml)을 분무하여 접종하고, 접종한 식물은 25°C 습실상에 24시간 동안 배양한 후에 25°C, 상대습도 80%의 생육상으로 이동하여 재배하는 것을 제안하고자 한다.
이를 물로 희석하고 UV spectrophotometer (Beckman Coulter Inc., Brea, CA, USA)로 OD600 값을 측정하여 세균 농도를 OD600 =0.2 (1×108 cfu/ml)로 조정하였고, 이 세균현탁액을 멸균수로 희석 하여 1×106 cfu/ml 농도의 세균현탁액을 준비하였다.
이상의 결과로부터 무 무름병의 저항성 검정을 위한 효과적인 방법으로 종자를 파종하고 온실(25°C±5°C)에서 20일 동안 재배한 무 유묘의 기부에 Pcc 세균현탁액(8×10 5 cfu/ml)을 5 ml 씩 관주접종하고, 25°C 습실상에서 24시간동안 습실처리한 후에 25°C의 항온항습실(상대습도 80%)로 식물체를 이동하여 하루 12시간씩 광을 조사하면서 재배하고, 접종 4일 후에 무 무름 병의 발병도(%)를 조사하는 것을 제안하고자 한다.
접종 3일, 4일, 5일 후에 병 발생 조사한 각 품종의 발병도(%)를 아래와 같은 식에 따라 AUDPC (area under the disease progress curve, 병진전곡선하면적)를 계산하였다(Jeger와 Viljanen-Rollinson, 2001; Madden 등, 2007). AUDPC (area under the disease progress curve)=∑ n i=1 [t(i+1)-ti]×[DS(i+1)+DSi]/2;n=number of assessments, ti=number of days after inoculation on assessment date i, DSi=disease severity on assessment date i.
접종한 식물체의 재배 온도에 따른 무름병 발생 실험을 제외한 모든 실험은 병원균을 접종한 식물체를 25°C 습실상에서 암상태로 24시간 동안 배양하고, 습실처리한 유묘는 항온항습실(25°C, 상대습도 80%)로 이동하여 하루에 12시간씩 광(55 μmol/m2 ·s)을 조사하면서 재배하였다.
준비한 Pcc KACC 10421 균주의 세균현탁액과 멸균한 glycerol (Duksan Pure Chemicals, Ansan, Korea)을 4:1 비율로 혼합하고 고르게 섞이도록 잘 흔들어준 후에 식물체 기부에 5 ml씩 관주하여 접종하였다. 접종한 식물체의 재배 온도에 따른 무름병 발생 실험을 제외한 모든 실험은 병원균을 접종한 식물체를 25°C 습실상에서 암상태로 24시간 동안 배양하고, 습실처리한 유묘는 항온항습실(25°C, 상대습도 80%)로 이동하여 하루에 12시간씩 광(55 μmol/m2 ·s)을 조사하면서 재배하였다.
대상 데이터
carotovorum subsp. carotovorum KACC 10421 균주를 분양 받아 실험에 사용하였다. Petri dish(직경 8.
그리고 이들 결과로부터 무의 무름병 저항성 검정법 확립을 위한 실험을 수행할 품종으로 저항성 정도에 차이가 있는 다음과 같은 6개 품종을 선발하였다. 저항성 품종으로는 rAUDPC 값이 10미만인 ‘아우리월동’과 ‘YR챔피언열무’를, 중도저항성 품종으로는 각각 33.
발병 조건에 따른 무 품종들의 무름병 발생 실험은, 60개 시판 무 품종의 Pcc에 대한 저항성 정도를 조사한 결과로부터 무무름병에 대하여 저항성 정도가 서로 다른 ‘아우리월동(Koregon Seed, Ansung, Korea)’, ‘YR챔피온열무(Monsanto Korea, Seoul, Korea)’, ‘전무후무(Koregon Seed, Ansung, Korea)’, ‘빛고은열무(Monsanto Korea, Seoul, Korea)’, ‘선봉알타리 (Syngenta Korea, Seoul, Korea)’, ‘하우스청옥(Farm Hannong, Seoul, Korea)’ 여섯 품종을 실험에 사용하였다.
이는 접종 시에 사용하는 mineral oil이 식물조직에 혐기성 조건을 유도하고 수분증발을 억제하기 때문이다(Chung 등, 2003). 본 실험에서는 mineral oil 대신에 glycerol을 사용하였는데, mineral oil은 물에 녹지 않고 세균현탁액과 층이 분리되어 병원균을 고르게 접종하는데 어려운 점이 있다. 따라서 mineral oil 대신에 수분증발은 억제하면서 물에 잘 용해되는 glycerol 을 세균현탁액과 4:1로 혼합하여 무 기부에 접종하는 방법을 사용했는데, 이 방법은 무름병 발생에 효과적인 것으로 생각되었다(Table 2).
본 연구는 Pcc에 의해 발생하는 무 무름병에 대한 효율적인 저항성 검정법을 확립하기 위하여 수행되었다. 시판 무 품종 60개의 Pcc에 대한 저항성 정도를 조사 하고, 추후 실험을 위해 저항성에 차이를 보이는 6개 품종을 선발하였다. 이들 6개 품종의 접종하는 무의 생육 시기, 접종원 농도, 접종 후 재배 온도 등의 발병 조건에 따른 무름병 발생을 조사하였다.
저항성 품종으로는 rAUDPC 값이 10미만인 ‘아우리월동’과 ‘YR챔피언열무’를, 중도저항성 품종으로는 각각 33.0와 37.1의 rAUDPC 값을 나타낸 ‘전무후무’와 ‘빛고은열무’를, 그리고 70이상의 rAUDPC 값을 보인 ‘선봉알타리’와 ‘하우스청옥’을 감수성 품종으로 선정하였다.
데이터처리
SAS (SAS 9.1, SAS Institute Inc., USA) 프로그램을 이용하여 ANOVA 분석을 하고 처리, 평균간 비교를 위하여 Duncan’s multiple range test (p=0.05)를 실시 하였다.
uValues in the labeled with the same letter within each column are not significantly different based on Duncan’s multiple range test at p=0.05.
vValues in the labeled with the same letter within each column are not significantly different based on Duncan’s multiple range test at p=0.05.
vValues in the labeled with the same letter within each column are not significantly different based on Duncan’s multiple range test at p=0.05.실험한 3가지 접종 농도 중 8×105 cfu/ml로 접종하였을 때, 저항성 품종, 중도저항성, 감수성 2개 품종들의 AUDPC는 각각 39.7과 41.0, 90.3과 88.8, 166.0과 166.3으로 저항성 품종, 중도 저항성, 감수성 품종 간의 무름병 발생(AUDPC)은 통계적으로 유의성 있는 차이를 나타냈다(Table 4).
성능/효과
감수성 품종들은 8×104 , 8×105 , 8×106 cfu/ml로 접종 농도가 증가함에 따라 77.2, 166.2, 176.6의 평균 AUDPC를 보였으며, 저항성 품종들은 41.9, 40.4, 122.2의 평균 AUDPC를 보였다.
그러나 파종하고 13일된 유묘(2엽 완전 전개)와 27일된 유묘 (5엽 완전 전개)는 저항성 품종으로 선발한 ‘아우리월동’과 ‘YR 챔피온열무’, 중도저항성 품종으로 선발한 ‘전무후무’와 ‘빛고은열무’의 AUDPC 값이 각각 6.3, 13.8, 9.4, 23.8과 38.1, 70.0, 63.8, 41.3으로 모두 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다(Table 3).
그리고 ‘만사형통’과 ‘태청’은 각각 37.7과 38.4의 rAUDPC를 보였으며, 나머지 ‘극동’, ‘비바리월동’, ‘강성’, ‘탐스런’ 은 고도로 감수성 반응을 보이는 ‘하우스청옥’과 ‘보석알타리’ 보다는 낮으나 상대적으로 높은 53.8-61.6의 rAUDPC를 보였 다.
그리고 종자회사에서 저항성을 공시하지 않은 53개 품종 중 ‘YR챔피언열무’, ‘슈퍼길조’, ‘명가가을1호’는 각각 6.3, 15.4, 19.2 의 낮은 rAUDPC를 보였다(Table 2).
그리고 접종 3일, 4일, 5일 후에 무 유묘에 발생한 무름병 발생 정도에 따라 Table 1과 같은 기준으로 발병도를 조사하고 이를 백분율로 환산하였다. 그리고 평균 발병도가 20% 이하이면 저항성으로, 21-40%는 중도저항성으로, 41% 이상은 감수성으로 판정하였다.
따라서 mineral oil 대신에 수분증발은 억제하면서 물에 잘 용해되는 glycerol 을 세균현탁액과 4:1로 혼합하여 무 기부에 접종하는 방법을 사용했는데, 이 방법은 무름병 발생에 효과적인 것으로 생각되었다(Table 2).
하지만 접종 3일 후에 조사한 발병도(%) 결과로는 저항성이 9개, 중도 저항성이 32개, 감수성이 19개로 실험한 품종 중 28개(47%)가 rAUDPC와 같은 저항성 반응을 보였으며, 접종 5일 후에는 저항성이 5개, 중도저항성이 6개, 감수성이 49개로 실험한 품종 중 44개(73%)가 같은 반응을 나타냈다. 따라서 대량의 무 식물들에 대하여 무름병 저항성을 검정하기 위해서는 접종 4일 후에 병조사하는 것이 효과적이라고 생각되었다.
따라서 무의 무름병 저항성 검정을 위해서는 Pcc를 접종하고 25°C에서 습실처리하고 재배하는 것이 효과적이라고 생각되었다.
또한 파종 후 34일된 유묘(6엽 완전 전개)에서는 ‘아우리월동’과 ‘선봉알타리’는 각각 높은 저항성과 감수성을 나타냈으나, 나머지 4개 품종들의 무름병 발생은 통계적으로 유의성 있는 차이가 없었다.
무의 무름병 저항성 검정법 확립을 위한 실험에 사용할 저항성 정도가 서로 다른 품종을 선발하고자 60개 시판 품종의 무름병 발생을 실험한 결과, 실험한 모든 품종은 접종 후 재배 기간이 길어짐에 따라 무름병 발생이 증가하였으며, 품종에 따라 5.3부터 100의 rAUDPC를 보여 실험한 품종들은 무름병에 대하여 다양한 저항성을 보였다(Table 2). Mineral oil을 이용한 무름병균 접종법은 기존의 접종법에서 사용한 상처 내기와 접종 후 습실처리 없이도 자연발병과 유사하게 무름병을 유발하며, 세균현탁액과 mineral oil을 4:1로 혼합하고 이를 배추에 관주접종 하였을 때 무름병이 균일하게 발생하였다(Chung 등, 2003; Lee, 2002).
본 연구에서 저항성 품종으로 선발된 ‘아우리월동’과 ‘YR참피온열무’는 접종원 농도, 접종하는 무 유묘의 생육 시기, 접종 후 재배온도에 따라 저항성 정도에 차이를 나타냈다.
감자의 경우에도 접종 후 재배 온도는 무름병 발생에 결정적인 역할을 한다고 알려져 있다(Fox 등, 1971). 본 연구에서도 이들 결과와 마찬가지로 접종 후 재배 온도가 증가함에 따라 무에 무름병 발생도 증가하였다(Table 5).
선발한 6개 품종을 파종하고 13, 20, 27, 34일 동안 재배한 무 유묘에 Pcc를 접종하고 무름병 발생을 조사한 결과, 실험한 4가지 생육 시기 중 파종후 20일된 유묘(4엽 완전 전개)는 저항성 품종인 ‘아우리월동’과 ‘YR챔피온열무’, 중도저항성 품종인 ‘전무후무’와 ‘빛고은열무’, 감수성 품종인 ‘선봉알타리’와 ‘하우스청옥’의 AUDPC 값이 각각 11.9와 22.5, 59.4와 64.4, 106.3과 113.8으로 선발한 품종들의 저항성 정도와 일치하는 무름병 발생을 보였다(Table 3).
선발한 6개 품종의 무 유묘에 Pcc를 접종하고 20°C, 25° C, 30°C에서 습실처리 하고 재배하여 무름병 발생을 조사한 결과, 재배온도가 20°C, 25°C, 30 °C일 때 6개 품종의 평균 AUDPC 값은 각각 49.1, 83.4, 132.3로 재배 온도가 올라갈수록 무름병 발생은 중가하였다 (Table 5).
선발한 6개 품종의 무유묘에 병원균 Pcc를 8×104 , 8×105 , 8×106 cfu/ml의 농도로 접종하고 무름병 발생을 조사한 결과, 실험한 품종들의 평균 AUDPC는 각각 49.1, 98.7, 152.2로 접종 농도가 증가할수록 저항성 및 감수성 품종들의 무름병 발생은 증가하였다(Table 4).
따라서 위의 rAUDPC 값과 접종 3일, 4일, 5일 후에 병조사한 발병도(%) 결과를 비교하여 병조사 시기를 결정하는 것이 필요하다. 시판 품종 60개의 rAUDPC 값에 따른 저항성 결과와 접종 3일, 4일, 5일 후의 발병도(%) 결과에 기반한 각각의 저항성 결과를 비교한 결과, 접종 4일 후에는 저항성이 5개, 중도저항성이 9개, 감수성이 46개로 품종들의 발병도(%) 기준으로 한 저항성 판정과 rAUDPC를 기준으로한 저항성 결과를 비교하면 59개(98%)가 일치하였다. 하지만 접종 3일 후에 조사한 발병도(%) 결과로는 저항성이 9개, 중도 저항성이 32개, 감수성이 19개로 실험한 품종 중 28개(47%)가 rAUDPC와 같은 저항성 반응을 보였으며, 접종 5일 후에는 저항성이 5개, 중도저항성이 6개, 감수성이 49개로 실험한 품종 중 44개(73%)가 같은 반응을 나타냈다.
실험한 60개 품종 중 종자회사에서 무름병 저항성 품종으로 공시된 7개 품종은 ‘아우리월동’, ‘만사형통’, ‘태청’, ‘극동’, ‘비 바리월동’, ‘강성’, ‘탐스런’ 이었는데 이들의 무름병 저항성 정도는 다양하였다(Table 2).
실험한 세 가지 재배온도 중 25°C와 30°C에서 저항성 품종 (‘아우리월동’과 ‘YR챔피온열무’), 중도저항성 품종(‘전무후무’와 ‘빛고은열무’), 감수성 품종(‘선봉알타리’와 ‘하우스청옥’) 간의 무름병 발생은 모두 통계적으로 유의성 있는 차이를 나타냈다 (Table 5).
이들 결과로부터 rAUDPC를 이용한 무 품종들의 무름병 저항성 기준은 rAUDPC가 0-20%이면 저항성, 21-40%는 중도저항성 그리고 41% 이상의 rAUDPC를 나타내는 품종은 감수성으로 결정하는 것이 적절할 것으로 생각되었다. 이를 기준으로, 실험한 60개 품종의 저항성을 분석하면 실험한 품종 중 저항성 품종은 4개, 중도저항성 품종은 10개 그리고 나머지 46개 품종은 감수성이었다.
이들 중 ‘아우리월동’은 가장 낮은 5.3의 rAUDPC을 보였으며, 실험한 품종 중 가장 저항성이 높은 품종이었다.
이들 결과로부터 rAUDPC를 이용한 무 품종들의 무름병 저항성 기준은 rAUDPC가 0-20%이면 저항성, 21-40%는 중도저항성 그리고 41% 이상의 rAUDPC를 나타내는 품종은 감수성으로 결정하는 것이 적절할 것으로 생각되었다. 이를 기준으로, 실험한 60개 품종의 저항성을 분석하면 실험한 품종 중 저항성 품종은 4개, 중도저항성 품종은 10개 그리고 나머지 46개 품종은 감수성이었다.
이와 달리 본 실험의 경우 에는 감수성 품종으로 선발한 ‘선봉알타리’는 무의 생육 정도와 관계없이 높은 감수성을 보였으며, ‘하우스청록’은 20일, 13일, 34일, 27일 순으로 무름병 발생이 높았다.
저항성 품종을 육성하기 위해서는 신속하게 병리검정하는 것이 중요하고 또한 저항성 품종의 저항성과 감수성 품종의 감수성이 가장 잘 나타나는 무의 생육 시기에 접종해야 하는데, 무 종자를 파종하고 온실(25°C±5°C)에서 20일 정도 재배하여 3-4엽이 완전 전개하였을 때 Pcc를 접종하는 것이 효과적이었다.
즉, 접종 후 25°C에서 재배하였을 때에 저항성 품종과 감수성 품종의 무름병 발생 차이가 더 크고, 저항성 품종들에서 무름병 발생이 가장 적었다.
시판 품종 60개의 rAUDPC 값에 따른 저항성 결과와 접종 3일, 4일, 5일 후의 발병도(%) 결과에 기반한 각각의 저항성 결과를 비교한 결과, 접종 4일 후에는 저항성이 5개, 중도저항성이 9개, 감수성이 46개로 품종들의 발병도(%) 기준으로 한 저항성 판정과 rAUDPC를 기준으로한 저항성 결과를 비교하면 59개(98%)가 일치하였다. 하지만 접종 3일 후에 조사한 발병도(%) 결과로는 저항성이 9개, 중도 저항성이 32개, 감수성이 19개로 실험한 품종 중 28개(47%)가 rAUDPC와 같은 저항성 반응을 보였으며, 접종 5일 후에는 저항성이 5개, 중도저항성이 6개, 감수성이 49개로 실험한 품종 중 44개(73%)가 같은 반응을 나타냈다. 따라서 대량의 무 식물들에 대하여 무름병 저항성을 검정하기 위해서는 접종 4일 후에 병조사하는 것이 효과적이라고 생각되었다.
후속연구
하지만 저항성 품종 육종을 위한 대량 시료의 무름병 저항성 검정을 위해서는 실험한 모든 시료에 대하여 여러 번 무름병 발생조사를 하여 AUDPC을 구하고 rAUDPC를 계산하여 저항성을 조사하는 것은 소요되는 노동력, 비용 및 시간을 고려할 때 효율적이지 않다. 따라서 위의 rAUDPC 값과 접종 3일, 4일, 5일 후에 병조사한 발병도(%) 결과를 비교하여 병조사 시기를 결정하는 것이 필요하다. 시판 품종 60개의 rAUDPC 값에 따른 저항성 결과와 접종 3일, 4일, 5일 후의 발병도(%) 결과에 기반한 각각의 저항성 결과를 비교한 결과, 접종 4일 후에는 저항성이 5개, 중도저항성이 9개, 감수성이 46개로 품종들의 발병도(%) 기준으로 한 저항성 판정과 rAUDPC를 기준으로한 저항성 결과를 비교하면 59개(98%)가 일치하였다.
Pcc는 Brassica 속 작물, 당근, 무, 감자 등 대부분 채소에 발생하는 병으로 재배 기간뿐만 아니라 저장 중에도 발생하여 심각한 피해와 경제적 손실을 초래한다(Aleck과 Harrison, 1978;Ren 등, 2001). Pcc는 기주 식물 잔재물에서 월동하고 환경이 좋아지면 곤충, 다른 병, 농기구, 저온 피해 등으로 생긴 상처를 통해 기주 내로 침입하여 무름병을 일으킨다(Rimmer, 2007).
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum(pcc)에 의한 무름병 발병 기작은?
Pcc는 기주 식물 잔재물에서 월동하고 환경이 좋아지면 곤충, 다른 병, 농기구, 저온 피해 등으로 생긴 상처를 통해 기주 내로 침입하여 무름병을 일으킨다(Rimmer, 2007). Pcc 에 의한 무름병 발병 기작을 살펴보면, 발병에 적합한 습도와 온도 그리고 혐기상태 등이 되면 병원균의 농도가 107 cfu/g으로 증가하게 되고, 정족수 감지 자가유도자(quorum sensing autoinducer)인 N-(3-oxohexanoyl)- L -homoserine lactone이 충분히 축적되면 cellulase, protease, pectate lyase, polygalacturonase와 같이 병원성과 관련된 효소를 생산한다(Collmer 와 Keen, 1986; Eriksson 등, 1998; Jones 등, 1993; Kotoujansky, 1987; Perombelon 등, 1979; Pirhonen 등, 1993). 이러한 효소는 기주의 세포벽을 분해하며, 세포막의 물리적인 강도를 약화시켜 세포막에 손상을 줌으로써 세포 내 전해질이 누출되어 썩는 악취와 함께 식물 조직의 무름 증상을 야기하게 된다(Collmer 와 Keen, 1986; Kotoujansky, 1987).
국내에서 무에 무름 병을 일으키는 병원균은 무엇인가?
marginalis는 브로콜리, 컬리플라워 등에 head rot을 일으킨다고 알려져 있다(Rimmer, 2007). 우리나라에서 무에 무름 병을 일으키는 병원균으로는 Pcc와 P. marginalis pv. marginalis 그리고 Pectobacterium chrysanthemi가 보고되었으나(KSPP, 2009), 무 재배지에서 이들 3종 병원균의 밀도에 대한 보고는 아직 없다.
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