[논문]자하거 약침이 만성 신체 스트레스 모델 백서의 행동, 체중, 수면 호르몬, 염증 사이토카인, 항산화 효소의 변화에 미치는 영향

하지원; 이유미; 나창수; 사공종원; 김보경

doi:10.7231/jon.2019.30.4.357

자하거 약침이 만성 신체 스트레스 모델 백서의 행동, 체중, 수면 호르몬, 염증 사이토카인, 항산화 효소의 변화에 미치는 영향
Effects of Hominis Placenta Pharmacopucture in a Chronic Physical Stress Rat Model on Changes in Behavior, Weight, Sleep-Related Hormones, Inflammatory Cytokines, and Anti-Oxidant Enzymes 원문보기

동의신경정신과학회지 = Journal of oriental neuropsychiatry, v.30 no.4, 2019년, pp.357 - 369

하지원 (동의대학교 한의과대학원 한방신경정신과) , 이유미 (동신대학교 한의과대학 경혈학교실) , 나창수 (동신대학교 한의과대학 경혈학교실) , 사공종원 (동의대학교 부속한방병원 한방신경정신과) , 김보경 (부산대학교 한의학전문대학원 한방신경정신과)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives: This study was designed to examine the effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on the change in behavior, sleep-related hormones, inflammatory cytokines, anti-oxidants, weight, blood, and serum on rats given chronic physical stress. Methods: Wistar rats older than age 10 weeks were used in this experiment. They were divided into six groups. The normal group was not given stress. The control group was given only chronic physical stress and no treatment. The positive control group was given chronic physical stress and treated with zolpidem. Three Hominis Placenta Pharmacopuncture (HPP) groups were given chronic physical stress, then treated with different concentrations of HPP; HPP-0.5× (0.5 times diluted), HPP-1× (undiluted) and HPP-2× (2 times condensed). The changes of values of Nestlet Shredding results, weight, Melatonin, Gamma-aminobutylic Acid (GABA), Tumor Necrosis Factor Alpha (TNF-α), Interleukin-6 (IL-6), Superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), AST, ALT, BUN, Creatinine, and leukocytes were observed during the experiment. Results: The changes in chronic physical stress of the rat model were as follow. The Nestlet Shredding result increased in the control group compared to the normal group (p<0.05), and decreased in the HPP-1× and HPP-2× compared to the control group (p<0.05). The amount of weight gain showed increasing tendency in the HPP-2× compared to the control group since the second week. The GABA increased (p<0.05) and Melatonin also showed certain increasing tendency in the HPP-1× and HPP-2× compared to the control group. The TNF-α and IL-6 increased in the control group compared to the normal group (p<0.01), and decreased in all the HPPs compared to the control group (p<0.05). The SOD level decreased in the control group compared to the normal group (p<0.01), and increased in all the HPPs compared to the control group (p<0.05). GPx, AST, ALT, Bun, Creatinine and leukocytes showed no noticeable difference among all groups. Conclusions: Hominis Placenta Pharmacopuncture was effective in increasing weight, GABA, Melatonin, SOD, and decreasing Nestlet Shredding and inflammatory cytokines, suggesting that it consequently facilitates in relieving physical stress.

주제어

표/그림 (14)

표 Table 1. Time Table for the CPS Rat Model
그림 Fig. 1. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on Nestlet Shredding in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 2. Changes of weight in rats subjected to CPS.
표 Table 2. Changes of Weight after Hominis Placenta Pharmacopuncture Treatment in Rats subjected to CPS
그림 Fig. 3. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on the secretion of Melatonin in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 4. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on the secretion of GABA (Gamma-aminobutylic Acid) in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 5. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on TNF-a values in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 6. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on IL-6 values in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 7. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on the intensity of SOD level in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 8. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on the intensity of GPx level in rats subjected to CPS.
표 Table 3. Changes on AST, ALT, Bun and Creatinine Values after HPP Treatment in Rats subjected to CPS
그림 Fig. 9. Effect of HPP on AST, ALT, Bun and Creatinine values in rats subjected to CPS.
그림 Fig. 10. Effect of Hominis Placenta Pharmacopuncture on Leukocytes contents in rats subjected to CPS.
표 Table 4. Changes on the Leukocytes Contents after Hominis Placenta Pharmacopuncture Treatment in Rats subjected to CPS

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 자하거 약침의 만성 허로와 소모 상태에 대한 개선 효능이 만성 신체 스트레스로 유발된 스트레스 행동을 감소시키고, 스트레스에 반응한 체중 감소를 줄이며, 불균형해진 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소 등을 정상화하여, 결과적으로 불면증을 개선하는 효과를 가져올 것이라는 가설을 세웠다. 이를 확인하기 위해 백서(白鼠)에 만성 신체 스트레스 모델을 적용한 실험을 설계하고 백서의 Nestlet Shredding, 체중의 증가량, 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소, 혈액과 혈청 등의 변화를 측정해 유의한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.

가설 설정

본 연구에서는 자하거 약침의 만성 허로와 소모 상태에 대한 개선 효능이 만성 신체 스트레스로 유발된 스트레스 행동을 감소시키고, 스트레스에 반응한 체중 감소를 줄이며, 불균형해진 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소 등을 정상화하여, 결과적으로 불면증을 개선하는 효과를 가져올 것이라는 가설을 세웠다. 이를 확인하기 위해 백서(白鼠)에 만성 신체 스트레스 모델을 적용한 실험을 설계하고 백서의 Nestlet Shredding, 체중의 증가량, 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소, 혈액과 혈청 등의 변화를 측정해 유의한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.

제안 방법

실험동물을 케이지당 1마리씩 Nestlet 용도로 사용될 오아시스(3 g)와 함께 넣고 3시간 동안 방치했다. 3시간 후 실험동물이 갉아 먹고 남은 오아시스의 무게를 mg 단위로 측정해 갉은 양을 구했다.
남은 혈액은 VS-6000CFI (Vision, Korea)를 이용해 3,000 rpm으로 20분간 원심분리해 혈청을 분리했다. AST, ALT, Bun, Cre-atinine 항목은 Dri-chem 4000 I (Fujifilm corp. Japan)를 활용하여 측정했다.
Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit For GABA (Biomatik, USA)를 사용해 GABA를 측정했다. GABA가 코팅된 마이크로 플레이트에 GABA standard 조직 샘플 50 μl를 넣은 후 1× Detection Reagent A 50 μl를 곧바로 넣고, 플레이트 커버로 tapping (cloudy 상태 확인)한 후에 1분간 섞고 37℃에 60분간 incubation 했다.
Rat Melatonin Elisa Kit (Biomatik, USA)를 사용해 Mela-tonin을 측정했다. Melatonin이 코팅된 마이크로 플레이트에 쥐의 Melatonin standard 조직 샘플 50 μl를 넣고, HRP-conjugate를 50 μl를 첨가한 다음, antibody 50 μl를 넣고 플레이트 커버로 tapping한 후에 1분간 섞고 37℃에 60분간 incubation 했다.
Rat TNF-α (Invitrogen, USA)를 사용해 TNF-α를 측정했다.
이 플레이트에 Stop solution 50 μl를 넣어 발색 반응을 중지시킨 다음 마이크로 플레이트 리더(EZ Read 400, Biochrom, USA)로 450 nm에서 OD (Optical density)를 측정했다. stand-ard curve를 만들어 sample의 Melatonin을 assay했다.
이 플레이트에 Stop solution 50 μl를 넣어 발색 반응을 중지시킨 후, 마이크로 플레이트 리더(EZ Read 400, Biochrom, US)로 450 nm에서 OD를 측정했다. standard curve를 만들어 샘플의 GABA를 as-say했다.
저자는 스트레스로 유발된 수면장애에 대한 자하거 약침의 효과를 알아보기 위해 6개의 실험군을 나누어 실험을 진행했다. 먼저 정상군에는 아무 스트레스도 가하지 않았고, 대조군에는 스트레스를 가한 후 아무 처치도 하지 않았으며, 양성 대조군에는 스트레스를 유발한 후 수면제인 졸피뎀을 투여했고, HPP에는 스트레스를 유발한 후 자하거 약침을 각 0.5배 희석액, 1배 원액, 2배 증액량 나누어 투여했다.
본 연구에서는 Alline C. 등의 불안장애와 스트레스의 동물 모델¹⁵⁾을 사용하여 백서에게 만성 신체 스트레스를 주었는데, 스트레스의 내용은 불규칙하게 일주기 리듬 바꾸기, 낮 동안 조명 제거, 온도변화(찬바람, 따뜻한 바람), 트레드밀 위 달리기, 물이 채워진 케이지에 넣어두기, 고 밀집 유발, 케이지 기울이기, 케이지 흔들기이다. 이러한 스트레스를 유발한 후, 이에 대한 자하거 약침의 영향을 알아보기 위해서 백서의 행동학적 관찰(Nestlet Shredding), 체중 증가량, 뇌내 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소, 혈청 및 혈액학적 변화 등을 관찰하였다.
분리한 total RNA 5 μg과 Oligo (dT), DEPC-treated water 2.5 μl를 RT premix (Bioneer, Korea)에 넣어 Mastercycler gradient (Eppendorf, Germany)를 이용해 cDNA 50 μl를 합성하고, 이를 PCR (Polymerase Chain Reaction) 증폭을 위한 template로 사용했다.
실험 시작 전 실험실 환경에 3일간 적응을 시킨 후, 정상군을 제외한 대조군과 실험군들에서 3주 동안 CPS를 유발하였는데, 첫 1주 동안은 스트레스만 주었고, 이후의 2주간은 스트레스를 주면서 양성 대조군에는 졸피뎀을, 자하거 실험군에는 약침 시술을 시행하였다. 3주의 기간이 종료된 후 각 실험군들의 관찰 지표가 측정되었다.
실험군들의 분리는 CPS (chronic physical stress)를 유발하지 않은 정상군(Nor, Normal group), CPS를 유발한 후 아무 처치도 하지 않은 대조군(Con, Control group), CPS를 유발한 후 졸피뎀을 구강 투여한 양성 대조군(PC, Positive Control group), CPS를 유발한 후 각각 0.5× (1/2 희석, 50 μl), 1× (원액, 50 μl), 2× (2배량, 100 μl)의 자하거 약침 치료를 한 HPP군(Hominis Placenta Pharmacopuncture group)으로 분류했다.
이 플레이트에 Stop solution 100 μl를 넣어 발색 반응을 중지시킨 후 마이크로플레이트 리더(EZ Read 400, Biochrom, USA)로 450 nm에서 OD를 측정하고, stand-ard curve를 만들어 샘플의 TNF-α 양을 assay했다.
등의 불안장애와 스트레스의 동물 모델¹⁵⁾을 사용하여 백서에게 만성 신체 스트레스를 주었는데, 스트레스의 내용은 불규칙하게 일주기 리듬 바꾸기, 낮 동안 조명 제거, 온도변화(찬바람, 따뜻한 바람), 트레드밀 위 달리기, 물이 채워진 케이지에 넣어두기, 고 밀집 유발, 케이지 기울이기, 케이지 흔들기이다. 이러한 스트레스를 유발한 후, 이에 대한 자하거 약침의 영향을 알아보기 위해서 백서의 행동학적 관찰(Nestlet Shredding), 체중 증가량, 뇌내 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소, 혈청 및 혈액학적 변화 등을 관찰하였다.
이렇게 증폭된 SOD, GPx의 DNA를 Greenview nucleic acid gel stain (IO Rodeo, 1:10,000)을 포함한 1.5%의 agarose gel 상에 두고, 0.5× TBE buffer (80 mM Tris-HCL, 80 mM boric acid, 2 mM EDTA, pH 8.3)를 이용해 100 V에서 30분간 전기 영동시켜서 관찰했다.
자하거 약침의 스트레스와 불면에 대한 치료 효과와 그 기전을 확인하기 위해서, 저자는 백서에 만성 신체 스트레스 모델을 적용한 실험을 설계하고, 자하거 약침 실험군(HPP)과 정상군, 대조군, 양성 대조군(졸피뎀 투여군)의 Nestlet Shredding 행동 지표, 체중 증가량, 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소, 혈액과 혈청 등의 지표들을 비교 관찰한 결과 다음의 결론을 얻었다.
저자는 스트레스로 유발된 수면장애에 대한 자하거 약침의 효과를 알아보기 위해 6개의 실험군을 나누어 실험을 진행했다. 먼저 정상군에는 아무 스트레스도 가하지 않았고, 대조군에는 스트레스를 가한 후 아무 처치도 하지 않았으며, 양성 대조군에는 스트레스를 유발한 후 수면제인 졸피뎀을 투여했고, HPP에는 스트레스를 유발한 후 자하거 약침을 각 0.
채혈로 얻은 혈액 중에서 약 100 μl를 EDTA-bottle에넣고 곧바로 Multispecies Hematology Analyser (950, Hemavet, USA)에 넣어 백혈구를 측정했다.
체중은 전자저울 ((주)카스, 중국)을 이용해 측정하였으며 매주 2회 측정했다.
촬영에는 Image Station (Samsung, Korea)을 이용했으며, 측정에는 Alphaease FC StandAlone Software (Alpha Innotech, USA)를 이용했다.

대상 데이터

실험동물은 동신대학교 실험동물위원회 승인(2019-02-02)을 받은 10주령 이상의 Wistar Hannover계의 수컷 백서(체중 300 g 이상)를 사용하였고, 일정한 온도와 습도가 유지되는 사육장(실내 온도 24±1℃, 습도 60±5%) 내에 두고 실험을 진행했다.

데이터처리

모든 측정값은 Excel program (Microsoft Excel 2016, USA)을 이용해 평균치와 표준 오차값(mean±standard error)으로 표시했다.
모든 측정값은 Excel program (Microsoft Excel 2016, USA)을 이용해 평균치와 표준 오차값(mean±standard error)으로 표시했다. 실험군들의 통계분석은 SPSS 21 ver. for windows를 사용하였고, 비모수적인 방법으로 Mann- Whitney U test를 시행했다. 유의성 검정은 각 실험군과 대조군을 비교해 p＜0.

성능/효과

1. Nestlet Shredding 테스트에서 정상군에 비해 대조군에서 유의한 증가를 나타내었고(p＜0.05), 대조군에 비해 HPP-1×군, HPP-2×군에서 유의하게 감소했다(p＜0.05).
1주 차에 정상군에 비교해 대조군을 비롯한 모든 실험군에서 체중 증가량이 적은 경향을 나타냈으며, 2주 차와 3주 차엔 HPP-2×군과 양성 대조군에서 대조군에 비해 체중 증가량이 많은 경향을 나타냈다(Fig. 2, Table 2).
2. 체중의 변화를 관찰한 결과, 1주 차에 체중 증가량의 감소 경향을 나타냈으나, 2주 차와 3주 차에는 대조군에 비해 양성 대조군과 HPP-2×군에서 체중 증가량이 많아지는 경향을 보였다.
3. 수면 관련 호르몬을 측정한 결과, 멜라토닌 함량은 대조군에 비교하여 HPP-2×군에서 증가하는 경향을 나타내었고, GABA 함량은 대조군에 비해 HPP-2×군에서 유의하게 증가했다(p＜0.05).
4. 염증성 사이토카인을 측정한 결과, TNF-α 함량과IL-6 함량은 정상군에 비해 대조군에서 유의한 증가가 나타났고(p＜0.01), 대조군에 비해 모든 실험군에서 유의하게 감소했다(p＜0.05).
5. 항산화 효소를 측정한 결과, SOD 함량은 정상군에 비해 대조군에서 유의한 감소가 나타났고(p＜0.01), 대조군에 비해 모든 실험군에서 유의하게 증가하였고(p＜0.05), GPx 함량은 각 군간 유의한 차이가 없었다.
6. AST, ALT, BUN, CRE, Leukocytes 함량 변화에서 각 군 간에 유의한 차이는 없었다.
그리고 대조군에 비해 HPP-2×군에서 멜라토닌 증가의 경향이 나타났는데, 이를 통해 일정 농도 이상의 자하거 약침을 투여하면 스트레스로 감소된 멜라토닌을 증가시켜 수면 리듬 정상화에 도움을 주어서 불면 장애의 치료에 긍정적인 영향을 미칠 것으로 추정할 수 있다.
본 실험에서 TNF-α와 IL-6 수치는 대조군에서 정상군에 비해 유의하게 증가하였는데(p＜0.01), 선행 연구에서 Ch-ronic Mild Stress를 가한 흰쥐에서 정상군에 비해 TNF-α가 유의하게 증가했고20), 인체를 대상으로 신장성 운동으로 골격근 손상을 유발한 후 안정시에 비해 TNF-α가 유의하게 증가했고31), 마우스를 대상으로 고강도 저항성 운동을 실시했을 때 TNF-α와 IL-6가 유의하게 증가했으며30) 탈진운동 후 타액의 IL-6 농도가 안정시에 비해 유의하게 증가되는32) 등, 신체 스트레스가 TNF-α와 IL-6를 증가시킨다는 본 연구결과와 일치했다.
. 본 실험에서 멜라토닌은 정상군에 비해 대조군에서 감소의 경향을 나타내었다. 이는 만성 경증 스트레스를 유발한 흰쥐실험에서 멜라토닌 함량이 감소 경향을 나타낸 연구 결과¹⁹⁾와, 동일하게 만성 경증 스트레스를 준 백서 실험에서 멜라토닌이 유의하게 감소한 결과²⁰⁾와 일치하여, 스트레스가 멜라토닌을 감소시킴을 보여준다.
본 연구에서 SOD 함량에 있어서 대조군은 유의하게 감소를 나타내었고(p＜0.01), 대조군에 비해 실험군 모두에서 유의한 증가를 나타냈는데(p＜0.05), 이는 선행 연구에서 백서에 자하거 약침을 투여한 결과 SOD가 유의하게 증가한 것³⁸⁾와 일치한다.
본 연구에서 스트레스만 가한 대조군에서 정상군에 비해 Nestlet Shredding이 유의하게 증가했고(p＜0.05), 스트레스 유발 후 HPP-1×군, HPP-2×군에서는 대조군에 비해 유의하게 감소한 것으로 보아(p＜0.05) 자하거 약침이 스트레스로 인한 행동증상의 완화 효과를 나타낸 것으로 보였다.
실험 3주차에는 대조군에 비해 모든 실험군에서 체중 증가량이 늘었는데, HPP-0.5× 군과 HPP-1×군에서는 체중의 증가량이 대조군과 비슷할 정도로 적었으나, HPP-2×군에서는 다른 HPP군들에 비해서 정상군에 보다 가깝게 체중 증가량이 늘어났다.
3주의 기간이 종료된 후 각 실험군들의 관찰 지표가 측정되었다. 실험 기간 동안 온도, 습도, 등의 사육환경은 일정하게 유지했고 물과 사료는 자유롭게 공급되었다.
양성 대조군과 HPP-0.5×군, HPP-1×군, HPP-2×군 모두에서 TNF-α와 IL-6가 대조군에 비해 유의하게 감소했다(p＜0.05).
이상과 같이, 자하거 약침이 Nestlet Shredding 행동 지표를 감소시키고 체중 증가량을 회복시키고, 염증성 사이토카인을 감소시키고 항산화 효소인 SOD를 증가시키므로 스트레스를 완화하는 효과가 있을 것으로 볼 수 있고, 또한 수면 관련 호르몬인 멜라토닌과 GABA를 증가시키므로 불면 장애의 치료에 효과가 있을 것으로 생각된다.
정상군에 비해 대조군은 감소의 경향을 나타내었고, 대조군에 비해 HPP-2×군에서 유의한 증가를 나타냈다(p＜0.05) (Fig. 4).
정상군에 비해 대조군은 감소의 경향을 나타내었고, 대조군에 비해 HPP-2×군에서 증가의 경향을 나타냈다(Fig. 3).
정상군에 비해 대조군은 유의한 감소를 나타내었고(p＜0.01), 대조군에 비해 실험군 모두 유의한 증가를 나타냈다(p＜0.05) (Fig. 7).
정상군에 비해 대조군은 유의한 증가를 나타내었고(p＜0.01), 대조군에 비해 실험군 모두 유의한 감소를 나타냈다(p＜0.05) (Fig. 5).
정상군에 비해 대조군은 유의한 증가를 나타내었고(p＜0.05), 대조군에 비해 HPP-1×군, HPP-2×군에서 유의한 감소를 나타냈다(p＜0.05) (Fig. 1).
정상적으로 성장하는 백서에서는 꾸준한 체중 증가가 관찰될 것으로 예상되는데, 대조군에서는 체중 증가량이 줄어들어, 스트레스 상황에서는 신체 성장이 정상적으로 이루어지지 못한다는 것을 알 수 있었다. 실험 3주차에는 대조군에 비해 모든 실험군에서 체중 증가량이 늘었는데, HPP-0.
체중 변화에서 스트레스만 가하고 처치를 하지 않은 1주 차에는 모든 실험군에서 정상군에 비해 체중이 적게 증가했고, 2주 차와 3주 차엔 HPP-2×군과 양성대조군에서 대조군에 비해 많은 체중 증가량을 보였으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다.
혈청 생화학적 변화에 미치는 영향에서 AST, ALT, Bun, 크레아티닌 모두 실험군 간에 유의한 차이는 없었다. 혈액학적 변화에 미치는 영향에서도 염증과 관련해 살펴본 백혈구 함량 변화에서 실험군 간에 유의한 차이는 없었다.

후속연구

5배 실험군과 1배 실험군에서는 저조하였으나, 2배 실험군이 되었을 때 증가 경향이 나타나 보다 정상군에 근접하기 시작하였으므로, 3배 이상 용량을 투여시 통계젹으로 유의한 범위의 증가가 나타날 지도 모른다. 그러나 이를 위해서는 보다 개체 체중량이 큰 실험동물을 대상으로 실험을 진행해야 할 것이라는 한계가 있다. 또한, 실험군에 비교할 위약 투여군이 설정되지 않았다는 한계가 있다.
자하거 약침 투여 자체의 침구 치료 효과를 배제하기 위해 증류수를 동일량 투여한 실험군을 설정했어야 하는데 그렇게 하지 못했으므로 나타난 효과가 순수하게 자하거 약침의 효과인지 약침을 찌를 때 생기는 자침효과인지에 대한 명확한 구분을 지을 수 없었다는 한계가 있었다. 동물실험에서는 실험동물의 몸무게가 적어 한정된 용량의 자하거 약침밖에 사용하지 못했는데, 향후의 연구방향에 있어서 임상에서 실제 환자를 대상으로 용량을 증량하여 실험을 진행한다면, 본 실험에서 유의성이 나타나지 않았던 항목들에 있어서도 유의한 증가나 감소가 나타날 것으로 추측해 볼 수 있으므로 임상 시험을 진행함이 의미 있을 것으로 보인다. 또 동물실험에서는 주관적인 스트레스 정도나 피로감의 호소를 알 수 없다는 단점이 있었는데 임상에서 시험을 진행하게 될 시에는 피실험자가 느끼는 스트레스의 완화 정도를 점수로 매겨볼 수 있으므로 더욱 자세한 연구 결과를 얻을 수 있을 것으로 보인다.
동물실험에서는 실험동물의 몸무게가 적어 한정된 용량의 자하거 약침밖에 사용하지 못했는데, 향후의 연구방향에 있어서 임상에서 실제 환자를 대상으로 용량을 증량하여 실험을 진행한다면, 본 실험에서 유의성이 나타나지 않았던 항목들에 있어서도 유의한 증가나 감소가 나타날 것으로 추측해 볼 수 있으므로 임상 시험을 진행함이 의미 있을 것으로 보인다. 또 동물실험에서는 주관적인 스트레스 정도나 피로감의 호소를 알 수 없다는 단점이 있었는데 임상에서 시험을 진행하게 될 시에는 피실험자가 느끼는 스트레스의 완화 정도를 점수로 매겨볼 수 있으므로 더욱 자세한 연구 결과를 얻을 수 있을 것으로 보인다.
백서를 대상으로 한 본 연구의 한계점은 먼저 백서의 중량이 적어 더 많은 양의 자하거 약침을 투약했을 때 일어나는 변화를 보지 못했다는 것이다. 실제로 체중변화와 같은 경우, 0.
5× 군과 HPP-1×군에서는 체중의 증가량이 대조군과 비슷할 정도로 적었으나, HPP-2×군에서는 다른 HPP군들에 비해서 정상군에 보다 가깝게 체중 증가량이 늘어났다. 이를 볼 때, 신체 스트레스를 극복하고 정상 성장하는데 자하거 약침이 영향을 미치는 것으로 추정할 수 있으며, 특히 신체 스트레스 회복을 위해서는 일정 용량 이상의 자하거 약침 투여가 필요할 것으로 보여, 약침 투여량과 효과의 상관관계에 대한추가 연구가 필요할 것으로 생각된다.
또한, 실험군에 비교할 위약 투여군이 설정되지 않았다는 한계가 있다. 자하거 약침 투여 자체의 침구 치료 효과를 배제하기 위해 증류수를 동일량 투여한 실험군을 설정했어야 하는데 그렇게 하지 못했으므로 나타난 효과가 순수하게 자하거 약침의 효과인지 약침을 찌를 때 생기는 자침효과인지에 대한 명확한 구분을 지을 수 없었다는 한계가 있었다. 동물실험에서는 실험동물의 몸무게가 적어 한정된 용량의 자하거 약침밖에 사용하지 못했는데, 향후의 연구방향에 있어서 임상에서 실제 환자를 대상으로 용량을 증량하여 실험을 진행한다면, 본 실험에서 유의성이 나타나지 않았던 항목들에 있어서도 유의한 증가나 감소가 나타날 것으로 추측해 볼 수 있으므로 임상 시험을 진행함이 의미 있을 것으로 보인다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	불면의 주요 원인에는 어떤것이 있는가?	불면의 주요 원인 중 하나인 스트레스는 수면의 질을 나쁘게 하고 수면시간을 단축시키며4-7), 수면 부족 자체가 다시 피로 수준을 높여 스트레스 반응을 일으키는 악순환으로 이어진다8).
	불면증이란?	불면증은 Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders-5 (DSM-5)1) 진단 기준에 의하면 잠들기 어려움, 수면 유지의 어려움, 아침에 너무 일찍 깨서 다시 잠들기 어려움 등의 증상이 주 3회 이상, 3달 이상 지속되는 것으로 정의된다. 이로 인해 심각한 심리적 불편감, 낮 동안의 피로나 졸림 또는 인지장애, 부정적인 기분, 행동장애 등을 초래해 사회적, 직업적 기능에 불편을 느끼게 된다2).
	자하거 약침의 스트레스와 불면에 대한 치료 효과와 그 기전을 확인하기 위해서, 저자는 백서에 만성 신체 스트레스 모델을 적용한 실험을 설계하고, 자하거 약침 실험군(HPP)과 정상군, 대조군, 양성 대조군(졸피뎀 투여군)의 Nestlet Shredding 행동 지표, 체중 증가량, 수면 관련 호르몬, 염증성 사이토카인, 항산화 효소, 혈액과 혈청 등의 지표들을 비교 관찰한 결과는?	1. Nestlet Shredding 테스트에서 정상군에 비해 대조군에서 유의한 증가를 나타내었고(p＜0.05), 대조군에 비해 HPP-1×군, HPP-2×군에서 유의하게 감소했다(p＜0.05). 2. 체중의 변화를 관찰한 결과, 1주 차에 체중 증가량의 감소 경향을 나타냈으나, 2주 차와 3주 차에는 대조군에 비해 양성 대조군과 HPP-2×군에서 체중 증가량이 많아지는 경향을 보였다. 3. 수면 관련 호르몬을 측정한 결과, 멜라토닌 함량은 대조군에 비교하여 HPP-2×군에서 증가하는 경향을 나타내었고, GABA 함량은 대조군에 비해 HPP-2×군에서 유의하게 증가했다(p＜0.05). 4. 염증성 사이토카인을 측정한 결과, TNF-α 함량과IL-6 함량은 정상군에 비해 대조군에서 유의한 증가가 나타났고(p＜0.01), 대조군에 비해 모든 실험군에서 유의하게 감소했다(p＜0.05). 5. 항산화 효소를 측정한 결과, SOD 함량은 정상군에 비해 대조군에서 유의한 감소가 나타났고(p＜0.01), 대조군에 비해 모든 실험군에서 유의하게 증가하였고(p＜0.05), GPx 함량은 각 군간 유의한 차이가 없었다. 6. AST, ALT, BUN, CRE, Leukocytes 함량 변화에서 각 군 간에 유의한 차이는 없었다.

참고문헌 (40)

David A. Kalmbach, PhD, Vivek Pillai, PhD, J. Todd Arnedt, PhD, Christopher L. Drake, PhD. DSM-5 Insomnia and Short Sleep: Comorbidity Landscape and Racial Disparities. Sleep, 2016;39(12):2101-11.

상세보기
Su-Yeon Seo. Cognitive-Behavioral Therapy for Insomnia. (Seoul : Sigma Press. 2017) p.4-5.
Seog Ju Kim. Pharmacotherapy of Insomnia. J. Korean Med. Assoc. 2009;52(7):719-26.

상세보기
Cheol-Bum Park, Sung-Keun Wang. The Effects of Melatonin on Sleep. J. Korean Society of Biological Therapies in Psychiatry. 1999;5(2):145-53.
Bok Nam Seo, Inja Kim. Differences of Stress, Sleep Quality and Metabolic Syndrome by Prolonged Fatigue in Early Adulthood. Korean J. Adult Nursing. 2019;31(2):202-10.

상세보기
Hyun-Choul Cho, Suk-Hee Kim, Jong-Shik Kim. Effects of Vitamin Mixed Supplement on Anti-oxidant Related Gene Expressions after Aerobic exercise. J. Spor. and Leisure Studies. 2010;41:975-85.
Hee-Jung Kim, Dong-Hyun Kim. Effect of Different Exercise Intensity on Blood Melatonin Density in Sleep Disorder Rats. J. Korean Soc. Phys. Med. 2014;9(1):45-53.

원문보기 상세보기
Seung-Seop Kim, Sung-Ho Oh, Myoung-Hoon Jeong, Seok-Cheol Cho, Moo-Chang Kook, Seok-Ho Lee, et al. Sleep-Inductive Effect of GABA on the Fermentation of Mono Sodium Glutamate(MSG). Korean J. Food Sci. Technol. 2010;42(2):142-6.
The Textbook Compilation Comittee of Neuropsychiatry of Oriental Medical Scools in Nation. The Neuropsychiatry of Oriental Medicine. Seoul : Jipmoondang. 2011:197-202, 252-5, 531-9.
Eun Hye Jang, Ah Young Kim, Han Young Yu. Relationships of Psychological Factors to Stress and Heart Rate Variability as Stress Responses Induced by Cognitive Stressors. Sci. Emot. Sensib. 2018;21(1):71-82.

원문보기 상세보기
Hyoung-seon Yoon, Jang-hyuk Moon, Kyoung-suk Jeong, Jung-hoon Lee, Jong-yeob Baek, Ho-jin Ahn. A Study on the Effects of the Hominis Placenta-induced Injection on Insomnia Patient. J. Korean Acupuncture & Moxibustion Society. 2004;21(3):99-105.
Hyoun-min Yoon, Chae-woo Lee, Hong-ki Kim. The Effects of the Hominis Placenta Herbal acupuncture on Sleep patter disturbance. J. Korean Institute of Pharmacopuncture. 2005;8(1):5-11.
Hyun-Ho Jang, In-Sun Doo, Dae-Yong Lee, Seung-Hoon Lee, Sang-Jun Min, Tae-Hoon Kim, et al. The Case of Regulation of Insomnia with Jahageo Herbal Acupuncture. J. Oriental Neuropsychiatry. 2003;14(1):155-60.
Su-Sik Kim. Cause of Insomnia. J. Christian Counseling and Missions. 2009;63:55-68.
A. C. Campos, M. V. Fogaca, D. C. Aguiar, F. S. Guimaraes. Animal Models of Anxiety Disorders and Stress. Revista Brasileira de Psiquiatria. 2013;35:S101-S111.

상세보기
J.H. Kim, I.S. Lim The Effects of Overlad Exercise on the Changes of EEG, Blood Growth Hormone, and Melatonin Concentration During Sleep. Exercise Science. 2003;12(2):297-306.
Eun-Kyung Kim. The Effect of Antioxidants Vitamin Supplementation on Activities of GPx and Muscle Fatigue. Korea Sports Research. 2005;16(5):841-52.
Hee-Jung Kim, Dong-Hyun Kim. Effect of Different exercise Intensity on Blood Melatonin Density in Sleep Disorder Rats. J. Korean Soc. Phys. Med. 2014;9(1):45-53.

원문보기 상세보기
Chang-won Choi, Young-su Lee, Young-ho Moon, Kyeongok Kim. The Effects Liquid Stick Packs of Dongshingihyeolyangsubang on Stress and Sleep-Related Substance of Rats Induced by Chronic Mild Stress. J. Oriental Neuropsychiatry. 2017;28(3):231-48.
Ha-na Kim, Kyeong-ok Kim. The Effects of Yunjogyosimtang on Stress and Sleep-related Substance of Rats Induced by Chronic Mild Stress. J. Oriental Neuropsychiatry. 2017;28(1):25-38.

원문보기 상세보기
Chang-Soo Kim, Jong-Bum Lee, Hyun-Mo Sung, Hyun-Seok See, Jing-Seung Kim, Jin-Seung Kim, M.D. The Effects of Repeated Stress on the GABAergic Neurotransmission in Rats. J. Korean Neuropsychiatry. 191-8.
Heon-Gu Kang, Byung-Jo Kang, Jeong-Hee Ha. Effects of Repeated Immobilization Stress on the Modulation of Neuroactive Steroids at the GABAergic Neurotransmission. J. Korean Society of Biological Therapies in Psychiatry. 1999;5(2):89-97.
Young-gil Song, Kyeong-ok Kim. Effect of Resina Dendropanacis Morbiferus on Stress and Sleep Hormone in Chronic Mild Stress-Induced Rats. J. Oriental Neuropsychiatry. 2017;28(3):287-302.
Jeong Kee Kim, Seong Hwan Lim, Wan Gi Kim, Changhui Cho, Jaehyoun Ha, Dae Bang Seo. Beneficial Effect of Collagen-Peptide Mixture with GABA on Improvement Skin and Sleep Quality. J. Soc. Cosmet. Sci. Korea. 2018;44(3):277-84.
Ok Ju Kim, Jeong Kwang Lee, Young Min Woo, Seung Tae Choi, Mi Yeon Park, Andre Kim et al. Sleep-Induction Effects of GABA Coated Rice from Fermentation of Mono Sodium Glutamate. Appl. Chem. Eng. 2013;24(6):605-10.

원문보기 상세보기
Leen Kim. Stress, Sleep Physiology, and Related Insomnia Disorders. J. Korean Med Assoc. 2010;53(8):707-16.

상세보기
Suk Jun Lee and Jinkwan Kim. Inflammation and Insufficient or Disordered Sleep. Korean J. Clin. Lab. Sci. 2015;47(3):97-104.

원문보기 상세보기
Jung-Min Koh, Chang Hyun Byun, Hee Sook Lee, Young-Sun Lee, Ghi Su Kim. $\alpha$ -Lipoic Acid Inhibits TNF- $\alpha$ -Induced Apoptosis in Human Bone Marrow Stromal Cells by Reduction of oxidative Stress. J. Bone Metabolism. 2004;11(2):111-20.
Mustafa Gokhan Ertosun, Gamze Kocak, Osman Nidai Ozes. The regulation of circadian clock by tumor necrosis factor alpha. Cytokine and Growth Factor Reviews. 2019;46:10-6.

상세보기
Eun-Ju Choi, Sung-Cheol Lee, Ae-Kyung Chang. Effects of Tower Climbing Resistance Exercise on Leptin, TNF- $\alpha$ , IL-6 Gene Expression of Colon in Mice. The Korean J. Sports Science. 2016;25(3):1245-55.
Seung-Goo Ra, Tae-Geun Ha, Byung-Ju Kim, Chung-Su Yoon, Dae-Ryoung Park. Effects of Cryotherapy on Blood Pro-inflammatory Cytokines and ED1+ Macrophage Expression Following Eccentric Exercise. Korean J. Sports Science. 2015;24(4):1215-29.
Tae-Beom Seo, Dae Sung Rho, So Yoon Lee, Kwang Kyu Lee. The Effect of Consecutive Exercise to Exhaustion on the Alteration of Salivary Stress and Immunity Hormone. J. the Korean Society of Living Environmental System. 2017;24(5):597-607.
Min-Hee Kim, Sung-Wook Hong. Effect of Short Term Vitamin Supplementation on MDA, SOD, GPx in Ballet. J. the Korean Society of Dance Science. 2012;26:161-71.
An Keun Kim, Ji Hyun Kim. Alterations of Antioxidant Enzymes in Response to Oxidative Stress and Antioxidants. J. Applied Pharmacology. 2001;9:249-57.
Yong-Kyun Jeon. Effects of Resistance Training in the Morning and Evening of Middle-aged Women on Lipid Peroxidation and Antioxidant Enzymes. Korean J. Sports Science. 2015;24(3):1523-32.
Nak-Hun Song. The Influence of Elastic Band exercise of Persons with Spinal Cord Injuries on the Concentration of Lipoperoxide(MDA) and Anti-oxidant Enzyme(SOD and GPx). Korean J. Sports Science. 2013;22(2):921-32.
Hye-Yeon Yeo, Hye-Youn Lee, Ji-Yeon Lee, Sang-Mo Kang. Status Analysis on Fatigue Levels and Substances After a Meridian Massage. J. Kor. Soc. Cosm. 2013;19(5):842-9.
Joonmoo Lee. Effects of Homninis Hominis Placenta Pharmacopuncture on the Blood Picture and Antioxidative Activity in Rats. J. Meridian & Acupoint. 2009;26(2):53-60.
Se-won Lim, Leen Kim. Stress and Sleep. Korean J. Stress Research. 2004;12(4):1-8.
Soon-yee Lee, Cheol-Woong Lee, Jin-Woo Kim, Jin-hyung Cho. A Case Report of the Postpartum Depression with Hominis Placenta Herbal Acupuncture Therapy. J. Oriental Obstetrics & Gynecology. 2006;19(2):282-94.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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