[논문]박테리오파지 증폭 기법을 활용한 시가 독소 생성 병원성 대장균의 신속 검출

백다윤; 박종현; 조석철; 이영덕

doi:10.9721/kjfst.2020.52.1.103

박테리오파지 증폭 기법을 활용한 시가 독소 생성 병원성 대장균의 신속 검출
Rapid detection of shiga-toxin producing E. coli by bacteriophage amplification assay 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.52 no.1, 2020년, pp.103 - 108

백다윤 (가천대학교 식품생물공학과) , 박종현 (가천대학교 식품생물공학과) , 조석철 (서원대학교 식품공학과) , 이영덕 (서원대학교 식품공학과)

초록
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본 연구는 식품에서 문제가 되는 시가독소생성 대장균(STEC)을 박테리오파지 증폭 기법을 통해 검출하고자 시가독소 생성 대장균에 대한 박테리오파지를 분리하였고 분리된 4종의 파지와 기 분리된 2종의 박테리오파지를 혼합하여 사용하였다. 분리된 박테리오파지는 형태학적 특성 및 제한효소 절단 패턴 등을 통해서 동정하였다. 5종의 파지는 E. coli O157:H7 및 non-O157 시가독소 생성 대장균을 모두 저해하는 특징을 가지는 것으로 나타났다. 박테리오파지 증폭 기법에서 중요한 단계인 세균에 감염되지 않은 박테리오파지를 제거하기 위해 10% (v/v) ferrous ammonium sulfate (FAS)을 사용하였으며 약 7-9 log PFU/mL 수준의 박테리오파지를 10분 내로 제거하는 것을 확인하였다. 시가독소 생성 대장균인 E. coli NCCP 13937을 검출하기 위해서는 약 6 log PFU/mL 이상의 박테리오파지 혼합액의 농도 및 약 4-5 log CFU/mL 이상의 목표 균주가 필요한 것으로 나타났다. 이러한 조건을 바탕으로 실제 판매되고 있는 신선식품에서 시가독소생성 대장균을 검출한 결과, 5시간 이내에 증폭된 약 2-3 log PFU/mL의 plaque를 통해 검출이 가능한 것을 확인하였다. 따라서 본 연구를 통해 박테리오파지 혼합액을 이용한 증폭 기법을 통해 시가독소 생성 대장균의 오염 여부를 보다 효율적으로 확인할 수 있음을 보여주었고 이를 적용한 제품을 개발하여 검출 단계의 간편화가 가능할 것으로 판단된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) is an important pathogenic bacteria and can cause severe foodborne disease. For STEC detection, conventional culture methods have disadvantages in the fact that conventional culture takes a long time to detect and PCR can also detect dead bacteria. To overcome these problems, we suggest a bacteriophage amplification assay, which utilizes the ability of bacteriophages to infect living cells and their high specificity. We used a combination of six bacteriophages infecting E. coli to make the bacteriophage cocktail and added ferrous ammonium sulfate as a virucidal agent to remove free-bacteriophages. When cherry tomato and paprika were artificially inoculated with the cocktail at a final concentration of around 3 log CFU/mL and were enriched for at least 5 h in mTSB broth with Novobiocin, approximately 2-3 log PFU/mL were detected through the bacteriophage amplification assay. Therefore, bacteriophage amplification assay might be convenient and a useful method to detect STEC in a short period of time.

주제어

표/그림 (6)

그림 Fig. 1. Morphological characterization of bacteriophages for shiga-toxin producing E. coli by transmission electron microscopy.
그림 Fig. 2. The pattern of digested DNA by (A) EcoRI and (B) SmaI.
표 Table 1. Host spectrum of bacteriophages on shiga-toxin producing E. coli
표 Table 2. Viability loss of bacteriophages by 10% ferrous ammonium sulfate
표 Table 3. Detection level of E. coli NCCP13930 by bacteriophage amplification assay
표 Table 4. Detection of E. coli NCCP13930 in cherry tomato and paprika by bacteriophage amplification assay

AI 본문요약
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문제 정의

이렇듯 살바이러스제로 FAS는 일반적으로 많이 사용되고 있고 최근에는 추가적으로 차 추출물, 석류추출물, cetyltrimethylammonium bromide(CTAB) 등도 활용이 되고 있는 것으로 보고되고 있다(de Siqueira등, 2006; Ly-chatain 등, 2013; Park 등, 2003; Stewart 등,1998). 따라서, 박테리오파지 증폭 기법에 살바이러스제로서 10% FAS를 사용하여 비감염 박테리오파지 제거에 사용하고자 하였다.
국내에서도 박테리오파지를 이용하여 식중독 세균 검출에 대한 연구가 시도되고 있으나, 박테리오파지 증폭 기법을 활용한 연구 보고는 다소 미흡한 것으로 판단된다. 따라서, 본 연구에서는 시가독소 생성 대장균에 대한 신속 검출을 위해 박테리오파지 증폭 기법을 이용하여 검출하고자 하였다.
coli NCCP 13937가 존재할 경우 plaque가 나타나는 것으로 확인되었다(data not shown). 따라서, 시가독소 생성 대장균의 검출에 사용될 박테리오파지 혼합액은 약 6 log PFU/mL 보다 높은 농도인 약 7-8 log PFU/mL로 수행하고자 하였다. 그리고 약 7-8 log PFU/mL 수준의 박테리오파지 혼합액을 E.
박테리오파지 증폭 기법에 사용될 박테리오파지는 형태학적 특성이 모두 Myoviridae에 속하는 것으로 확인되어 이것들에 대한 차이점을 확인하기 위해 박테리오파지 DNA에 대한 제한효소 처리에 따른 절단 패턴 확인과 시가독소 생성 대장균에 대한 숙주 저해 특성을 확인하고자 하였다. Fig.
살바이러스제(Virucidal agent)로 알려진 Ferrous Ammonium Sulfate (FAS, Sigma Aldrich)를 사용하여 비감염 박테리오파지의 제거에 이용하고자 하였다. FAS 처리는 박테리오파지 용액을 20%로 제조한 FAS 와 1:1 비율로 처리하여 최종농도(v/v)가 10%가 되도록 하였다.

제안 방법

coli NCCP 13937과 plaque assay를 진행하였다. 37℃에서 배양한 후 plaque 형성 여부를 확인하였다. 또한 박테리오파지 혼합액을 약 4, 6, 8 PFU/mL로 조정하여 각각을 약 8log CFU/mL의 E.
살바이러스제(Virucidal agent)로 알려진 Ferrous Ammonium Sulfate (FAS, Sigma Aldrich)를 사용하여 비감염 박테리오파지의 제거에 이용하고자 하였다. FAS 처리는 박테리오파지 용액을 20%로 제조한 FAS 와 1:1 비율로 처리하여 최종농도(v/v)가 10%가 되도록 하였다. 그리고 상온에서 10분, 30분을 처리한 후 LBC agar에 double overlay agar법을 통한 plaque assay법을 수행하였다.
LBC broth에서 계대 배양된 44주의 시가독소 생성 대장균을 LBC soft agar에 분주하고 LBC agar에 중첩한 후, 분리된 대장균 박테리오파지 용액을 10 µL씩 분주하고 37℃에서 24시간 배양하여 plaque 형성을 확인하였다.
37^oC에서 배양하며 시간에 따른E. coli NCCP 13930의 생육 정도를 선택배지인 EMB agar에서10진 희석 후 도말하여 측정하였다. 그리고 증균 시간에 따른 E.
그 후 동량의 2% uranyl acetate로 30초간 염색하고 증류수로 수세하여 실온에서 건조시켰다. 그리고 negative stain을 수행한 후 투과 전자 현미경(H-7600, HITACHI, Tokyo, Japan)을 통하여 80 kV의 전압에서 30,000배율로 관찰하였다.
coli NCCP 13930의 생육 정도를 선택배지인 EMB agar에서10진 희석 후 도말하여 측정하였다. 그리고 증균 시간에 따른 E.coli NCCP 13930에 대해 박테리오파지 증폭 기법을 통해 시가독소 생성 대장균 검출하였다.
Louis, MO, USA)를 이용하여 약 10-11 log PFU/mL 수준으로 농축하여 사용하였다. 농축된 박테리오파지 용액을 25,000 g,1시간 동안 원심분리하여 상층액을 제거하는 방법으로 한번 더 농축하였다. 한번 더 농축된 박테리오파지 용액을 1X SM buffer(10 mM MgSO₄, 100 mM NaCl, 0.
농축된 파지용액을 20 µg/mL의 DNase와 RNase (Sigma Aldrich)를 처리한 후 약 15분 동안 37℃에서 배양하고 10 mg/mL proteinase K (Sigma)와 150 µL lysis buffer (0.5 M EDTA, 10% SDS, 1 M Tris (pH 8.0))을 첨가하였다.
그리고 상온에서 10분, 30분을 처리한 후 LBC agar에 double overlay agar법을 통한 plaque assay법을 수행하였다. 또한 FAS 용액이 숙주균의 생육에 영향을 미치는지 확인하기 위하여 약 7 log CFU/mL의 숙주균을 10% FAS 처리 후 멸균 생리식염수를 이용해 수세를 수행 후 잔여 FAS 제거 과정을 거친 뒤 LBC agar에 도말하여 생육 정도를 확인하였다.
37℃에서 배양한 후 plaque 형성 여부를 확인하였다. 또한 박테리오파지 혼합액을 약 4, 6, 8 PFU/mL로 조정하여 각각을 약 8log CFU/mL의 E. coli NCCP 13937을 위와 동일한 방법으로 수행하여 사용 가능한 박테리오파지 농도를 확인하고자 하였다.
박테리오파지 증폭 기법은 Stewart 등(1998)의 방법을 기반으로 수정하여 진행하였다. 시가독소 생성 대장균의 검출 한계를 평가하기 위해 약 4, 6, 8 log CFU/mL로 각각 배양된 E.
배양액을 8000 g에서 10분 동안 원심분리하고 상층액을 0.22 µm syringe filter (Millipore, MA, USA)를 이용해 제균하였다.
원심분리를 통해 1X PBS 용액을 제거해주고 LBC 배지로 침전된 세포를 현탁한 뒤 37℃, 150 rpm에서 1시간 동안 박테리오파지가 증폭되도록 하였다. 배양한 용액은 원심분리 후 상층액만 취하여 indicator bacteria인 E. coli NCCP 13937과 plaque assay를 진행하였다. 37℃에서 배양한 후 plaque 형성 여부를 확인하였다.
분리된 시가독소 생성 대장균에 대한 박테리오파지를 대상으로 하여 18주의 E. coli O157과 26주의 non-O157 시가독소 생성 대장균에 대해 숙주저해범위를 spot assay를 수행하여 확인하였다. LBC broth에서 계대 배양된 44주의 시가독소 생성 대장균을 LBC soft agar에 분주하고 LBC agar에 중첩한 후, 분리된 대장균 박테리오파지 용액을 10 µL씩 분주하고 37℃에서 24시간 배양하여 plaque 형성을 확인하였다.
시가독소 생성 대장균에 대해 박테리오파지 혼합액을 활용하여 박테리오파지 증폭 기법을 통해 검출하고자 하였으며, 이를 위해 박테리오파지와 시가독소 생성 대장균인 E. coli NCCP 13937의 농도에 따른 검출 한계를 확인하였다. E.
박테리오파지 증폭 기법은 Stewart 등(1998)의 방법을 기반으로 수정하여 진행하였다. 시가독소 생성 대장균의 검출 한계를 평가하기 위해 약 4, 6, 8 log CFU/mL로 각각 배양된 E. coli NCCP 13937과 약 7-8 log PFU/mL 박테리오파지 혼합 용액을 1:1로 혼합하고 37℃, 150 rpm에서 10분 동안 반응시킨 후 10,000g에서 2분 동안 원심분리를 통해 상층액을 제거하였다. 침전된 세포에 10% (v/v) FAS용액 500 µL로 현탁한 후 상온에서 5분 동안 반응시켰다.
신선식품인 방울토마토, 파프리카를 1X PBS로 세척해주고 각각의 시료에 6 log CFU/mL의 E. coli NCCP 13930을 250 µL씩 골고루 분주하여 점 접종해준 뒤 30분 동안 안정화 시켰다(Elhariry,2011; Patel과 Sharma, 2010).
신선식품인 방울토마토와 파프리카에 약 3 log CFU/mL 수준으로 E. coli NCCP 13930을 접종한 후 박테리오파지 증폭 기법을 통해 검출하고자 하였다(Table 4). 방울토마토의 경우 1시간증균 이후에 약 4 log CFU/mL의 E.
시가독소 생성 대장균의 검출을 위한 박테리오파지 증폭 기법에서 가장 중요한 것은 박테리오파지를 목적 세균에 감염 후에 감염되지 않은 박테리오파지를 효과적으로 제거하는 것이 가장 중요한 것으로 알려져 있다. 이를 위해 살바이러스제로 많이 사용되는 10% ferrous ammonium sulfate (FAS)를 사용하여 비감염 박테리오파지에 대한 제거 효과를 확인하고자 하였다. 약 7-9 logPFU/mL 수준의 박테리오파지와 박테리오파지 혼합액을 10분과 30분 동안 FAS를 처리한 결과 박테리오파지는 검출되지 않았다(Table 2).
그리고 상층액을 취해 chloroform:isoamyl alcohol을 첨가하고 동일하게 원심분리를 수행한 후 상층액을 취해 에탄올로 침전하고 수세한 후 증류수로 현탁하고 80℃에서 보관하며 실험에 사용하였다. 제한효소의 절단 패턴은 제한효소의 특성에 따라 조건을 조정하여 실험을 수행하였으며, 제한효소 처리 후 절단된 DNA의 패턴은 전기영동을 통해 확인하였다.
형태학적 특성을 분석하기 위해서 투과 전자현미경을 이용하였다. 분리된 박테리오파지 용액을 2 M NaCl이 첨가된 20% 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol, PEG) 8000 (Sigma Aldrich,St.

대상 데이터

박테리오파지 증폭 기법에 활용한 시가독소 생성 대장균에 대한 박테리오파지는 Lim 등(2018)이 보고한 ECP33과 NOECP91 박테리오파지와 신규의 박테리오파지를 토양, 오수, 분변 등으로부터 분리된 것을 사용하였다. 기분리된 박테리오파지인 ECP33과 NOECP91의 경우 Myoviridae family에 속하는 것으로 보고하였다.
형태학적 특성을 분석하기 위해서 투과 전자현미경을 이용하였다. 분리된 박테리오파지 용액을 2 M NaCl이 첨가된 20% 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol, PEG) 8000 (Sigma Aldrich,St. Louis, MO, USA)를 이용하여 약 10-11 log PFU/mL 수준으로 농축하여 사용하였다. 농축된 박테리오파지 용액을 25,000 g,1시간 동안 원심분리하여 상층액을 제거하는 방법으로 한번 더 농축하였다.
시가독소 생성 대장균의 박테리오파지를 분리하기 위해 E. coliO157:H7 균주에 속하는 E. coli NCCP 13930, E. coli NCTC12079, E. coli O157:H7 505B 3주와 non-O157 STEC 균주에 속하는 E. coli NCCP 13979 (O104), E. coli NCCP 13934(O179), E. coli NCCP 13937 (O103) 3주를 숙주 균주로 사용하였다. 이 균주들은 EMB agar (Becton, Dickinson and Company,Franklin Lakes, NJ, USA)에 획선 도말하여 37℃에서 24시간 배양하였다.

이론/모형

FAS 처리는 박테리오파지 용액을 20%로 제조한 FAS 와 1:1 비율로 처리하여 최종농도(v/v)가 10%가 되도록 하였다. 그리고 상온에서 10분, 30분을 처리한 후 LBC agar에 double overlay agar법을 통한 plaque assay법을 수행하였다. 또한 FAS 용액이 숙주균의 생육에 영향을 미치는지 확인하기 위하여 약 7 log CFU/mL의 숙주균을 10% FAS 처리 후 멸균 생리식염수를 이용해 수세를 수행 후 잔여 FAS 제거 과정을 거친 뒤 LBC agar에 도말하여 생육 정도를 확인하였다.

성능/효과

기분리된 박테리오파지인 ECP33과 NOECP91의 경우 Myoviridae family에 속하는 것으로 보고하였다. 그리고 시가독소 생성 대장균에 대한 신규의 ECP26, ECP27,ECP32, NOECP32 박테리오파지를 분리하여 전자현미경을 통한 형태학적 특성을 확인한 결과 모두 Myoviridae가 가지고 있는 수축성 꼬리를 가지고 있는 것으로 나타났다(Fig. 1). 일반적으로 자연계에 존재하는 박테리오파지는 약 95% 정도가 이중나선 DNA를 갖는 박테리오파지로 알려져 있으며, 비수축성 꼬리를 갖는Siphoviridae, Myoviridae, 짧은 경직성 꼬리를 가지고 있는Podoviridae 순으로 존재하는 것으로 알려져 있다(Ackermann,2003; Hendrix, 2003).
따라서, 시가독소 생성 대장균의 검출에 사용될 박테리오파지 혼합액은 약 6 log PFU/mL 보다 높은 농도인 약 7-8 log PFU/mL로 수행하고자 하였다. 그리고 약 7-8 log PFU/mL 수준의 박테리오파지 혼합액을 E. coliNCCP13930의 세포양에 따라 검출한계를 비교한 결과 약 4-5 log CFU/mL 수준부터 효과적인 검출이 가능한 것으로 나타났다(Table 3). Derda 등(2013)은 0-5000 CFU/mL의 E.
또한 Kim 등(2016)은 Myoviridae가 Siphoviridae에 비해 숙주 저해 범위가 넓은 것으로 보고하고 있으며, Dini와 Urraza(2010)는 분리된 coliphage 중 non-O157:H7을 숙주균주로 사용하여 분리된 coliphage는 모두 Myoviridae로 나타났다고 보고하였다. 따라서 본 연구에서는 시가독소 생성 대장균의 검출을 위한 박테리오파지 증폭 기법에 사용될 박테리오파지는 Myoviridae에 속하는 것으로 확인되어 Siphoviridae 보다 효율적일 것으로 판단된다.
coli O157:H7 표준 균주에서 약 78%, non-O157 시가독소 생성 대장균 표준 균주는 약 85%로 숙주 저해능이 확인되었다. 또한 E. coli O157:H7 표준 균주와 non-O157 시가독소 생성 대장균 표준 균주에 대해 ECP27은 약 50%와 65%, ECP32는 약 33%와 58%, ECP33은 약 56%와 38%, NOECP32는 약 44%와 73%, NOECP91은 약 44%와 69%로 숙주 감염이 가능한 것으로 나타났다. 또한 본 연구에 사용될 박테리오파지들은 시가독소 생성 대장균 44주에 대해 모두 감염이 가능한 것으로 확인되었다.
약 7-9 logPFU/mL 수준의 박테리오파지와 박테리오파지 혼합액을 10분과 30분 동안 FAS를 처리한 결과 박테리오파지는 검출되지 않았다(Table 2). 또한 FAS를 숙주균에 처리한 후 생육에 미치는 영향을 확인한 결과, 10분, 30분 처리 후에도 초기 균수인 약 7 log CFU/mL로 나타나 균의 생육에 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었다(data not shown). 이를 통해서 10% FAS는 숙주에 영향을 미치지 않는 것으로 판단되며 10% FAS 처리 용액에서 plaque가 형성된 결과(Table 3)를 통해 이미 숙주균에 감염된 박테리오파지는 10% FAS의 영향을 받지 않는 것으로 판단된다.
coli O157:H7 표준 균주와 non-O157 시가독소 생성 대장균 표준 균주에 대해 ECP27은 약 50%와 65%, ECP32는 약 33%와 58%, ECP33은 약 56%와 38%, NOECP32는 약 44%와 73%, NOECP91은 약 44%와 69%로 숙주 감염이 가능한 것으로 나타났다. 또한 본 연구에 사용될 박테리오파지들은 시가독소 생성 대장균 44주에 대해 모두 감염이 가능한 것으로 확인되었다. Raya 등(2006)은 17주의 E.
coli O55, O91, O103, O111,O117 및 O179에서 50% 이상 저해가 가능한 것으로 보고했다. 박테리오파지 증폭 기법에 활용될 박테리오파지들을 혼합액 형태로 사용시에 서로 다른 혈청형을 갖는 시가독소 생성 대장균에 대해 100% 감염이 가능한 것으로 나타났기 때문에 시가독소생성 대장균 검출에 이용이 가능한 것으로 보여진다.
그리고 박테리오파지에 대한 숙주 저해 특성을 확인한 결과는 Table 1과 같다. 시가독소 대장균 이외에 Salmonellaenterica, Cronobacter sakazakii, 황색포도상구균은 감염시키지 못하는 것으로 나타났으며, 시가독소 생성 대장균들에 대한 숙주 저해 특성은 차이가 나타나는 것으로 확인되었다. ECP26의 경우 E.
이를 위해 살바이러스제로 많이 사용되는 10% ferrous ammonium sulfate (FAS)를 사용하여 비감염 박테리오파지에 대한 제거 효과를 확인하고자 하였다. 약 7-9 logPFU/mL 수준의 박테리오파지와 박테리오파지 혼합액을 10분과 30분 동안 FAS를 처리한 결과 박테리오파지는 검출되지 않았다(Table 2). 또한 FAS를 숙주균에 처리한 후 생육에 미치는 영향을 확인한 결과, 10분, 30분 처리 후에도 초기 균수인 약 7 log CFU/mL로 나타나 균의 생육에 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었다(data not shown).
coli NCCP 13930의 세포수가 증가 함에 따라 약 2-3 log PFU/mL 수준로 plaque가 확인되었다. 이는 plaque 형성 유무를 통한 결과이기 때문에 정성적인 검출에 해당하며 기본적으로 이틀 이상 소요되는 전통적인 검출법 보다 빠른 시간 내에 효율적으로 시가독소 생성 대장균을 검출 할 수 있다는 것을 보여주고 있다. 최근에는 본 연구와 같이 배지에서 배양된 균을 검출하는 것에서 그치지 않고 양상추, 닭고기, 소고기,탈지분유 등 다양한 식품 시료에서 식품유래균을 직접 검출한 결과를 통해 박테리오파지를 이용한 검출법의 간편성 및 정확성이 강조되고 있다(Favrin 등, 2003; Garrido-Maestu 등, 2019;Oliveira 등, 2012).
또한 FAS를 숙주균에 처리한 후 생육에 미치는 영향을 확인한 결과, 10분, 30분 처리 후에도 초기 균수인 약 7 log CFU/mL로 나타나 균의 생육에 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었다(data not shown). 이를 통해서 10% FAS는 숙주에 영향을 미치지 않는 것으로 판단되며 10% FAS 처리 용액에서 plaque가 형성된 결과(Table 3)를 통해 이미 숙주균에 감염된 박테리오파지는 10% FAS의 영향을 받지 않는 것으로 판단된다. McNerney등(1998)은 M.

후속연구

또한 실험 비용이 적어 경제성이 높은 것으로 알려져 있다. 따라서, 해당 기술을 통한 시가독소 대장균에 대한 검출에 적용하기 용이할 것으로 판단된다.
이는 기존에 전통적인 시가독소 생성 대장균에 대한 검사법이나 PCR 등의 기법에 추가적인 검출 방법으로 활용이 가능할 것으로 판단된다. 또한 기존에 박테리오파지 증폭 기법을 활용한 M. tuberculosis의 검출 키트와 유사한 형태의 시가독소 생성 대장균에 대한 신속 검출 키트 개발이 가능할 것으로 판단된다.
본 연구를 통해 박테리오파지 증폭 기법은 시가독소 생성 대장균에 대한 검출에 효과적으로 적용될 수 있을 것으로 보여진다. 이는 기존에 전통적인 시가독소 생성 대장균에 대한 검사법이나 PCR 등의 기법에 추가적인 검출 방법으로 활용이 가능할 것으로 판단된다.
본 연구를 통해 박테리오파지 증폭 기법은 시가독소 생성 대장균에 대한 검출에 효과적으로 적용될 수 있을 것으로 보여진다. 이는 기존에 전통적인 시가독소 생성 대장균에 대한 검사법이나 PCR 등의 기법에 추가적인 검출 방법으로 활용이 가능할 것으로 판단된다. 또한 기존에 박테리오파지 증폭 기법을 활용한 M.
이에 따라 시가독소 생성 대장균에 대한 제어를 위해 다양한 물리적 방법, 화학적 방법, 생물학적 방법, 병행 처리 방법 등 다양하게 연구되고 있으며, 현장에서 사용 가능한 다양한 응용법들이 시도되고 있다(Torres 등, 2018). 하지만 이미 오염된 시가독소 생성 대장균에 대해 물리화학적인 다양한 처리를 통한 제어도 중요하지만, 시가독소 생성 대장균의 관리를 위해서는 오염을 사전에 방지하거나 오염된 식중독 유발 세균의 정확하고 신속한 검출이 필요할 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	세균성 식중독으로 알려진 것들은 무엇이 있는가?	최근 전세계적으로 식품 안전 관리에 대한 중요성에 따라 식중독 세균 제어 기술, 검출 기술 및 식품 안전 관리 기술 등이 발전하고 있으나, 여전히 식중독 사고는 지속적으로 발생하고 있다. 또한 대부분의 식중독 사고의 약 90% 이상이 세균성 식중독으로 병원성 대장균(pathogenic E. coli), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라(Salmonella), 리스테리아(Listeria) 등이 알려져 있으며 몇몇 주요 병원성 미생물에 의한 식중독 사고는 인간의 건강에 치명적인 질병을 야기할 뿐만 아니라 전 세계적으로 다수의 사망 사고 및 큰 경제적 손실을 일으키고 있다. 특히 병원성 대장균인 시가독소 생성 대장균(Shiga-toxin producing E.
	시가독소 생성 대장균은 무엇을 유발하는가?	특히 병원성 대장균인 시가독소 생성 대장균(Shiga-toxin producing E.coli)는 설사증, 출혈성 대장염, 용혈성요독증후군(hemolytic uremic syndrome) 등을 유발하며 매우 중요한 식중독 세균으로 알려져 있다(Nataro와 Kaper, 1988; Lee와 Park, 2015).
	박테리오파지 증폭법이 시가독소 대장균에 대한 검출에 적용하기 용이할 것으로 판단되는 이유는 무엇인가?	하지만 증폭되는 박테리오파지를 유전적으로 변형시켜야 효율적인 검출이 가능하다는 단점이 있다(Jassim과 Griffiths, 2007). 따라서 박테리오파지 증폭 기법은 다른 박테리오파지를 이용한 검출 기법에 비해 상대적으로 간단하며, 유전자 조작 기술 등 특별한 작업을 필요로 하지 않기 때문에 비숙련자도 실험이 가능하다. 또한 실험 비용이 적어 경제성이 높은 것으로 알려져 있다. 따라서, 해당 기술을 통한 시가독소 대장균에 대한 검출에 적용하기 용이할 것으로 판단된다.

참고문헌 (35)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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