[논문]침구류 세균에 대한 테르펜의 항균 및 항진드기 효과에 대한 연구

고원진; 서용모

doi:10.5392/jkca.2020.20.04.454

침구류 세균에 대한 테르펜의 항균 및 항진드기 효과에 대한 연구
Study on The Antibacterial and Anti-mite Effects of Terpenes Against Bedding Bacteria 원문보기

한국콘텐츠학회논문지 = The Journal of the Korea Contents Association, v.20 no.4, 2020년, pp.454 - 463

고원진 (대덕고등학교) , 서용모 (한남대학교 LINC+)

초록
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본 연구는 최근 인간의 건강을 위협하는 다양한 원인 중에서 우리 주변에서 흔히 접할 수 있는 대상을 통해 그 원인의 해결을 제안하고자 시도 되었다. 천연물 유래의 테르펜의 경우 기존의 피톤치드와 같은 역할을 하고 있으며 다양한 생리활성 기능을 수행하고 있다. 본 연구에서는 우리주변에서 용이하게 구할 수 있으며 적용이 가능한 생물소재를 통해 오염원을 제거할 수 있는 생리활성을 검증하였다. 본 연구에서는 계피오일과 테르펜을 이용하여 다양한 질병과 오염원이 되고 있는 진드기와 미생물에 대한 효능을 검증하였다. 본 실험에서는 우리가 흔히 사용하는 베개를 이용하여 베게 등과 같은 침구류에서 발생할 수 있는 다양한 미생물과 진드기의 발생에 대한 작용에 대해 그 효능을 검증하였다. 그 결과로 테르펜의 항 미생물 활성은 Pour plate 방법을 사용하여 관찰하였다. 항진드기 효과는 테르펜을 사용하지 않고 첫 번째 테스트에서 베개 4개 중 2개에서 약한 양성(100 미만)으로 감지되었다. 테르펜을 사용한 두 번째 실험에서, 모든 시료들이 20 미만으로 음으로 감소되는 것으로 확인되었으며, 테르펜의 최상의 항진드기 효능은 20%인 것으로 밝혀졌다. 이 연구의 목적은 천연물 유래의 테르펜을 이용한 침구용 항균 및 진드기 방지 제품의 개발 가능성을 제안하는 것이다.

Abstract ▼ AI-Helper

The purpose of this study is to check the antimicrobial activity of terpene, a natural product-derived extract against bedding bacteria, and compare the number of bacteria detected. To this end, the number of mites and microbiological surveys were conducted on the pillows used at home to identify the presence of pathogenic strains that could cause the disease. Also, after two weeks test using pillow with terpene, a natural origin extract, the rate of reduction of fungi before and after the use of the substance and the effect of eradicating mites were evaluated. The antimicrobial activity of the terpene was observed by using the Pour plate method. The anti-mite effect was detected as weak positive (less than 100) in 2 of 4 pillows in the first test without the use of terpene. In the second experiment using a terpene, all were confirmed to be reduced to negative less than 20. The best anti-mite efficacy of terpene was found to be 20%. The purpose of this study is to suggest the possibility of developing antibacterial and anti-mite spray products for bedding using terpene.

주제어

표/그림 (15)

그림 Fig. 1. Antimicrobial Activities for Terpene
표 Table 1. Antimicrobial activity for Terpene (unite : CFU/㎖)
그림 Fig. 2. Antimicrobial Activities for Cinnamon Oil
그림 Fig. 3. Antimicrobial Activities for Cinnamon Oil+Terpene
표 Table 2. Antimicrobial activity for Cinnamon Oil (unite : CFU/㎖)
표 Table 3. Antimicrobial activity for Cinnamon Oil+Terpene (unite : CFU/㎖)
그림 Fig. 4. Mite repellent effect test
표 Table 4. Mite repellent effect
표 Table 5. Mite repellent effect
그림 Fig. 5. 1st capture result in media(without terpene)
그림 Fig. 6. 2nd capture result in media(with terpene)
표 Table 6. 1st Capture (without terpene) (unit : CFU/㎖)
표 Table 7. 2nd Capture (with terpene) (unit : CFU/㎖)
표 Table 8. Identification of strains
표 Table 9. Mite repellent effect in Pillow

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서 검토된 천연물 유래의 테르펜성분의 집먼지 진드기 등의 해충으로부터 방어적이고 유익한 효능에 대한 생물학적 효능의 실증적 검증을 통해 쾌적하고 건강한 라이프스타일을 지향하는 소재로서의 가능성을 제시하고자 한다.
하지만 상용되고 있는 기존의 제품들은 고농도에서 인체에 유해한 성분들이나 미세플라스틱 등의 성분들로 그 사용을 꺼리게 하는 현상도 나오고 있으며, 향기에 대한 거부감으로 천연물질의 적용에 대한 연구가 필요한 실정이다[9-11]. 따라서 본 연구에서는 기존의 시판되고 있는 제품들의 성분들과는 달리 천연물 유래의 성분의 효능을 평가하고 이를 실제 적용가능한 시사점을 제공하고자 한다.
본 연구는 천연물질로부터 유래한 성분이 집진드기를 비롯하여 일상에서 건강을 위협하는 원인에 대해 대처하고 이를 해결해 보고자 한 내용이다. 많은 천연물 중 테르펜은 피톤치드 역할과 같이 나무가 가지고 있는 특유한 휘발성 물질로서 인체에 쾌적함과 청량감을 제공할 뿐만 아니라 항균, 방충, 소취 등 다양한 기능을 하고 있다.
본 연구에서는 천연물 유래의 추출을 통해 항균력에 대한 평가와 검출되는 균을 평가하여 진드기에 대한 기피 혹은 감소율을 검증하기 위하여 천연물 유래의 테르펜(terpene)을 적용하여 검증하고자 하였다. 테르펜은 피톤치드 정유를 이루는 주요 물질로 식물 스스로가 주위환경과 해충에 대한 방어적 기능을 가지고 있으며, 심신 안정과 같은 효과를 제공한다[12].
본 연구의 주요 목적은 거주공간의 변화에 따른 실내오염으로부터 건강을 지키고 그와 관련된 상업적 제품을 개발하는데 기초적인 자료를 검증하고자 한다. 그중에서 오염된 실내에서 소비하는 시간이 많아지는 가운데 특히, 수면과 휴식시간에 침구류 사용에 대한 증가로 이에 따른 다양한 질병이 야기될 수 있다.

제안 방법

1차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 시험물질을 분사하지 않고 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 마지막으로 끝나는 날 세균을 포집 하였다. 2차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 잠들기 2분 전에 여러 번 물질을 흔들어 섞어준 뒤, 20∼30cm 높이에서 베게 상단 얼굴 닿는 부위에 6회 정도 골고루 분사해주고 건조한 뒤 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 위와 같은 방법으로 세균을 포집해 균 감소율을 비교하였다.
2주에 한 번씩 세균 포집을 진행해 육안으로 베개의 오염 정도를 파악하였고, 베개 상단의 총면적 중 5구획을 선정하여 10초간 Rodac plate로 가볍게 눌러준 후 배양기에서 배양하였다. 사용한 Rodac plate로는 일반 미생물로부터 병원성 미생물까지 다양한 미생물을 검출하기 위하여 기본 영양성분으로 구성된 TSA, 황색포도상구균 및 그람 양성균 측정용 배지인 STAPH, 살모넬라 측정용 배지인 SS, 대장균 측정 및 그람 음성균 측정용 배지인 ECG배지를 사용하였으며 배지의 면적은 국제 기준인 표면적 25cm의 크기로 사용하였다.
2차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 잠들기 2분 전에 여러 번 물질을 흔들어 섞어준 뒤, 20∼30cm 높이에서 베게 상단 얼굴 닿는 부위에 6회 정도 골고루 분사해주고 건조한 뒤 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 위와 같은 방법으로 세균을 포집해 균 감소율을 비교하였다.
2차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 잠들기 2분 전에 여러번 물질을 흔들어 섞어준 뒤, 20∼30cm 높이에서 베개 상단 얼굴 닿는 부위에 6회 정도 골고루 분사해주고 건조한 뒤 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 위와 같은 방법으로 진드기를 포집해 진드기 감소율을 비교하였다.
Plate에 대상자의 ID와 날짜를 기록하고 뚜껑이 바닥에 닿도록 뒤집어서 37℃ 배양기에서 20시간 배양하였고, 배양된 미생물 수를 세어 정리하였으며, 계수된 배지에 배양된 균주를 집락의 형태, 색, 주름, 냄새를 통해 하나의 독립된 개체로 분리하여 배양하였다. 분류된 균주를 ㈜마크로젠에 의뢰하여 균 동정 서비스(PCR product와 Plasmid DNA 등을 염기 서열을 분석하는 서비스)를 맡긴 후 얻어진 염기서열 데이터를 BLAST 서비스를 통해 균주를 동정하였다.
2차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 잠들기 2분 전에 여러번 물질을 흔들어 섞어준 뒤, 20∼30cm 높이에서 베개 상단 얼굴 닿는 부위에 6회 정도 골고루 분사해주고 건조한 뒤 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 위와 같은 방법으로 진드기를 포집해 진드기 감소율을 비교하였다. 감소율을 비교하기 위해서 기존 연구를 참고하여 농도를 설정하여 본 연구에 적용하였다[18].
시험물질을 사용한 방법은 시중에 판매되고 있는 침구류 항균 스프레이 제품의 사용법을 참고하여 조건을 설정하였다. 동일한 방법으로 진드기를 포집하여 진드기의 감소율을 비교 및 확인하였다.
Falcon tube에 각 희석 농도에 맞게 물질, 보통 한천 배지인 Nutrien agar 25㎖ 그리고 균액 100μl를 넣은 뒤 Vortexing을 해주었다. 물질, 배지 그리고 균액이 담긴 Falcon tube를 빈 멸균 Petridish에 분주하고 굳힌 뒤 37℃ incubator에서 24시간 배양 후 colony 개수를 측정하였다.
베개에서의 테르펜 사용 전후에 대한 항진드기 효과 실험을 배지의 종류에 따라 각각 5개 구역으로 나누어 1차 포집과 2차 포집 실험으로 실시하였다. [Table 6]에서와 같이 테르펜을 사용하지 않은 1차 포집 실험결과에 따르면 STA배지에 생긴 균 집의 수는 1∼5구역에서 생긴 균 집의 수의 평균값을 구함으로써 알 수 있는데 시료 1∼4는 69, 108, 95, 134 개로 나타났다.
볼펜을 놓아 경사를 준 반대쪽에 쌀벌레 10마리를 풀어 놓고 4시간 동안 쌀벌레가 기피하는 현상의 경향을 관찰하고, 1시간, 4시간 후의 결과를 디지털 사진으로 찍어 데이터와 함께 정리하였다. Filter paper를 사용하는 이유는 거즈를 사용하게 되면 쌀벌레가 거즈의 미세 구멍에 걸려 넘어가지 못하는 경우가 발생해 실험결과에 오차를 야기할 수 있기 때문이다.
Plate에 대상자의 ID와 날짜를 기록하고 뚜껑이 바닥에 닿도록 뒤집어서 37℃ 배양기에서 20시간 배양하였고, 배양된 미생물 수를 세어 정리하였으며, 계수된 배지에 배양된 균주를 집락의 형태, 색, 주름, 냄새를 통해 하나의 독립된 개체로 분리하여 배양하였다. 분류된 균주를 ㈜마크로젠에 의뢰하여 균 동정 서비스(PCR product와 Plasmid DNA 등을 염기 서열을 분석하는 서비스)를 맡긴 후 얻어진 염기서열 데이터를 BLAST 서비스를 통해 균주를 동정하였다.
2차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 잠들기 2분 전에 여러 번 물질을 흔들어 섞어준 뒤, 20∼30cm 높이에서 베게 상단 얼굴 닿는 부위에 6회 정도 골고루 분사해주고 건조한 뒤 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 위와 같은 방법으로 세균을 포집해 균 감소율을 비교하였다. 시험물질을 사용한 방법은 시중에 판매되고 있는 침구류 항균 스프레이 제품의 사용법을 참고하여 조건을 설정하였다. 동일한 방법으로 진드기를 포집하여 진드기의 감소율을 비교 및 확인하였다.
를 실험에 사용하였다. 이 과정에서 높은 곳으로 올라가려는 쌀벌레의 습성을 고려하여 밀폐용기인 락앤락(LocknLock, 서울) 통 한쪽 바닥에 볼펜을 세로로 놓아 약간 경사지게 하였다. 즉 락앤락 통의 한가운데에 가로 1cm/세로 9cm의 Filter paper를 올려놓고 그 위에 5%, 10%, 20%의 시험물질을 각각 Filter paper에 전체적으로 확산되고, 흐르지 않을 정도의 중량 대비 무게 0.
이것이 신체에 흡수되면 피부를 자극해서 신체의 활성을 높이고 피를 잘 돌게 하며 심리가 안정되며 살균작용도 겸할 수 있는 특성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 생리적 특성을 지닌 식물 유래의 성분인 테르펜을 이용하여 우리주변에서 볼 수 있는 다양한 오염원 및 미생물 유래의 질병을 야기하는 원인에 대해 강력한 작용을 하는 내용을 검증하였다. 이러한 인간에게 유해한 원인으로 작용하는 부분에서 중요한 시사점을 제공할 것으로 기대한다.
즉 락앤락 통의 한가운데에 가로 1cm/세로 9cm의 Filter paper를 올려놓고 그 위에 5%, 10%, 20%의 시험물질을 각각 Filter paper에 전체적으로 확산되고, 흐르지 않을 정도의 중량 대비 무게 0.08g/0.2g(200μl)씩 분주해주었다.
진드기 기피 효과를 검증하기 위하여 쌀벌레를 이용하여 시간 경과에 따른 쌀벌레 상태를 각각 3차에 걸쳐서 테르펜이 없는 경우에서 5%, 10%, 20% 농도에 따라 디지털 카메라를 이용하여 사진으로 측정하고 [Table 4]와 [Fig. 4] 및 [Fig. 5]와 같이 나타내었다. 쌀벌레를 실험에 사용한 것은 집먼지 진드기의 분양이 법적으로 금지되어있고, 쌀벌레가 구하기 쉽고 살충제의 내성이 가장 강한 것으로 알려진 공시충 Sitophilus oryzae L이기 때문이다.
테르펜은 피톤치드 정유를 이루는 주요 물질로 식물 스스로가 주위환경과 해충에 대한 방어적 기능을 가지고 있으며, 심신 안정과 같은 효과를 제공한다[12]. 테르펜 계통의 성분은 천연 계피나무에서 추출하여 적용하였다. 이 테르펜 계통의 방향족 화합물은 휘발성 유기화합물(Volatile Organic Compound, VOCs)로 이루어졌으며, 항균성, 방취성 및 항염성 등의 생물학적 활성이 뛰어나 집먼지 진드기 퇴치 혹은 기피효과에 유의하다고 알려져 있다[12-14,].
테르펜 사용 전과 후를 4개 대상에 대해 진드기 수를 측정하였다. [Table 9]에서 음성은 진드기 수 20마리 미만을 뜻하며, 약양성의 경우 100마리 미만을 의미한다.
테르펜 사용 전후의 균 동정 실험을 1차 포집과 2차 포집 실험으로 구분하여 비교하였다. 1차 균 동정 결과 기회감염성 균주인 staphylococcus epidermidis를 포함하는 기회감염성 균주와 병원성 균주인 staphylococcus aureus를 제외한 나머지 균주는 일반적으로 질병을 유발하지 않는 비 병원성 균 등 10가지가 검출되었다.
테르펜, 계피오일, 계피오일+테르펜 중 본 실험에 사용할 물질을 선정하기 위해 항균력 테스트를 진행 하였다. 아래의 표에서 TNTC(too numerous to count)균 집단이 300개 이상임을 의미하며, (-)는 균집단이 0개임을 의미한다.
폐쇄적이고 밀폐된 공간에서 생활하는 현대인들의 건강을 위협하고, 다양한 환경적 질환을 유발[5]하는 대표적인 균주로 알려진 Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli 균주를 이용해 항균력 평가를 시행하였다. Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Escherichia coli의 독립된 집락을 멸균된 백금으로 채취하여 멸균 생리식염수에 푼 후 탁도계를 사용하여 균액을 0.

대상 데이터

Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Escherichia coli의 독립된 집락을 멸균된 백금으로 채취하여 멸균 생리식염수에 푼 후 탁도계를 사용하여 균액을 0.5 McFarland (1.5×108 CFU/㎖) 준비 하였다.
본 실험에 적용된 시험 물질은 앞선 항균력 평가 및 설문조사를 통해 선정된 테르펜을 사용하였으며, 본 실험에 사용될 농도를 설정하기 위해 실험을 진행하였다. 집먼지 진드기(dermatophagodes farinae)에 대한 기피 효과를 평가하기 위하여 공시충(쌀벌레)으로 Sitophilus oryza L.
2주에 한 번씩 세균 포집을 진행해 육안으로 베개의 오염 정도를 파악하였고, 베개 상단의 총면적 중 5구획을 선정하여 10초간 Rodac plate로 가볍게 눌러준 후 배양기에서 배양하였다. 사용한 Rodac plate로는 일반 미생물로부터 병원성 미생물까지 다양한 미생물을 검출하기 위하여 기본 영양성분으로 구성된 TSA, 황색포도상구균 및 그람 양성균 측정용 배지인 STAPH, 살모넬라 측정용 배지인 SS, 대장균 측정 및 그람 음성균 측정용 배지인 ECG배지를 사용하였으며 배지의 면적은 국제 기준인 표면적 25cm의 크기로 사용하였다.
사용된 배지의 종류에 따른 진드기 기피 실험 결과 TSA배지에 생긴 균 집의 수는 1∼5구역에서 생긴 균집의 수의 평균값을 구함으로써 알 수 있다. 시료1~4는 69, 108, 95, 134개 이다. ECG배지에 생긴 균 집의 수는 1∼5구역에서 생긴 균 집의 수의 평균값을 구함으로써 알 수 있다.
시험 물질은 주 물질인 테르펜과 항균 및 항진드기에 탁월한 효능을 가지고 있다고 밝혀진 테르펜, 계피오일, 계피오일+테르펜 3가지 종류로 사용하였으며, 각각 5%, 10%, 20%로 희석하여 사용하였다. Falcon tube에 각 희석 농도에 맞게 물질, 보통 한천 배지인 Nutrien agar 25㎖ 그리고 균액 100μl를 넣은 뒤 Vortexing을 해주었다.
집먼지 진드기를 포집하기 위하여 총 4회에 걸쳐 SD Kit(아산제약, Korea)를 이용하여 피실험자 4명의 베게로부터 집먼지 진드기를 포집하였다. 2차 시험으로 피실험자 4명이 새로 산 베개에 잠들기 2분 전에 여러번 물질을 흔들어 섞어준 뒤, 20∼30cm 높이에서 베개 상단 얼굴 닿는 부위에 6회 정도 골고루 분사해주고 건조한 뒤 매일 7시간씩 2주 동안 사용하며 위와 같은 방법으로 진드기를 포집해 진드기 감소율을 비교하였다.

성능/효과

테르펜 사용 전후의 균 동정 실험을 1차 포집과 2차 포집 실험으로 구분하여 비교하였다. 1차 균 동정 결과 기회감염성 균주인 staphylococcus epidermidis를 포함하는 기회감염성 균주와 병원성 균주인 staphylococcus aureus를 제외한 나머지 균주는 일반적으로 질병을 유발하지 않는 비 병원성 균 등 10가지가 검출되었다. 2차 균 동정 실험에서는 staphylococcus aureus등 5개가 검출되었다.
2차 균 포집 실험인 테르펜을 사용한 경우의 실험결과 [Table 6]에서와 같이 STA배지에 생긴 균 집의 수는 1∼5구역에서 생긴 균 집의 수의 평균값을 구함으로써 알 수 있는데 시료1∼4는 77, 45, 23, 0개로 감소된 것으로 나타났다.
계피오일의 Pour plate법을 이용한 항균력 실험결과 Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli에서 무 첨가 시 세균이 TNTC로 300개 이상의 균 집단이 있고 5%의 계피오일을 첨가해도 마찬가지로 균의 수는 감소되지 않았다. 계피오일의 경우 농도가 10%이상이 되어야 균의 수가 줄어든 것으로 나타났다.
2차 균 동정 실험에서는 staphylococcus aureus등 5개가 검출되었다. 그리고 1차와 2차 실험에서 분리된 균주는 staphylococcus aureus를 제외하고 일치되는 결과를 얻었고, 테르펜 사용 유무에 따라 분리된 균종이 10개에서 5개로 절반이 감소한 것을 확인할 수 있었다.
본 항균력 비교 실험결과 계피오일의 항균력보다 테르펜이나 테르펜+계피오일의 항균력이 더 높게 나타났으며, 테르펜과 테르펜+계피오일의 항균력이 비슷하게 측정되었다. 그리고 계피오일은 5%일 때 효과가 거의 없었지만, 10%, 20%일 때 효과가 나타났다. 테르펜과 테르펜+계피오일에 대한 항균력 평가 배지에서 표면에 나타난 하얀 것은 균이 아닌 정유를 사용함으로써 나타나는 물과 섞이지 않는 기름의 지용성 성분으로 확인되었다.
본 연구를 통하여 사전에 연구되지 않았던 테르펜의 항진드기 효과와 항균력을 확인하였으며, 테르펜을 통해 침구류에 존재하는 세균과 진드기를 제거할 수 있음을 확인하였다. 이를 통해 우리가 일상에서 사용하는 다양한 침구류 및 관련 제품들에서 나타날 수 있는 오염원을 제거하고 우수한 항균력 및 항진드기 평가 결과를 통해 추후 테르펜을 이용하여 침구류 항균 및 항진드기 스프레이 등의 제품을 개발할 수 있는 방안을 도출할 수 있었다.
본 항균력 비교 실험결과 계피오일의 항균력보다 테르펜이나 테르펜+계피오일의 항균력이 더 높게 나타났으며, 테르펜과 테르펜+계피오일의 항균력이 비슷하게 측정되었다. 그리고 계피오일은 5%일 때 효과가 거의 없었지만, 10%, 20%일 때 효과가 나타났다.
사용된 배지의 종류에 따른 진드기 기피 실험 결과 TSA배지에 생긴 균 집의 수는 1∼5구역에서 생긴 균집의 수의 평균값을 구함으로써 알 수 있다.
하지만 테르펜을 사용하게 되면 모든 실험대상에서 모두 음성인 진드기 수가 20마리 미만이라는 것으로 나타났다. 상기 결과를 통하여 테르펜을 사용할 경우 진드기 수가 감소하는 것으로 보아 테르펜의 항균효과를 확인하였다.
쌀벌레를 실험에 사용한 것은 집먼지 진드기의 분양이 법적으로 금지되어있고, 쌀벌레가 구하기 쉽고 살충제의 내성이 가장 강한 것으로 알려진 공시충 Sitophilus oryzae L이기 때문이다. 실험결과 1차, 2차, 3차 실험에서는 테르펜을 첨가하기 전에는 죽은 진드기의 수가 1시간이 지나면 3마리, 8마리, 4마리이었고, 4시간 이후에도 동일하였다. 하지만 테르펜 5% 용액을 첨가하자 죽은 진드기의 수가 5마리, 7마리, 5마리로 변한 것을 알 수 있다.
아래의 표에서 TNTC(too numerous to count)균 집단이 300개 이상임을 의미하며, (-)는 균집단이 0개임을 의미한다. 실험결과 Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli에서 첨가하지 않은 경우 세균이 TNTC로 300개 이상의 균 집단이 있지만 테르펜을 5%로 첨가하면 균 집단의 수가 감소된 것으로 나타났다.
이를 바탕으로 항생 물질인 테르펜의 항균 및 항진드기 시험을 수행한 결과 효능을 직접적으로 확인할 수있었다. 항균력을 가지면서 항진드기 효능을 가장 잘나타내는 적정 농도를 찾기 위해 진드기 기피 실험을하였고 최종적으로 20% 농도에서 가장 좋은 효과를 얻을 수 있었다.
그리고 테르펜의 농도가 20%라면 1시간 이후에는 9마리, 10마리, 8마리가 죽었는데 4시간 경과 이후 9마리, 10마리, 10마리가 죽은 것으로 나타났다. 최종적으로 테르펜 20%가 1차, 2차, 3차에서 가장 효과가 높은 것으로 나타났다. 따라서 침구류에서 집진드기가 검출되고 아토피 질환을 증가시키는 것으로 나타나고 있기 때문에 베개 등 침구류에 테르펜이 함유된 경우 유용하게 활용할 수 있을 것으로 판단된다.
테르펜과 계피오일을 혼합하여 항균력 실험 결과 Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli에서 무 첨가 시 세균이 TNTC로 300개 이상의 균 집단이 있고 5%의 계피오일+테르펜 용액을 첨가하자 균 개체의 수가 줄어든 것으로 나타났다. 이것은 계피오일의 항균력 효과보다는 테르펜에 의한 항균효과로 판단된다.
그리고 계피오일은 5%일 때 효과가 거의 없었지만, 10%, 20%일 때 효과가 나타났다. 테르펜과 테르펜+계피오일에 대한 항균력 평가 배지에서 표면에 나타난 하얀 것은 균이 아닌 정유를 사용함으로써 나타나는 물과 섞이지 않는 기름의 지용성 성분으로 확인되었다.
테르펜을 사용하지 않은 경우의 대상1과 대상2의 경우에서 약양성 즉 100마리 미만의 진드기가 발생했다는 것을 알 수 있다. 하지만 테르펜을 사용하게 되면 모든 실험대상에서 모두 음성인 진드기 수가 20마리 미만이라는 것으로 나타났다. 상기 결과를 통하여 테르펜을 사용할 경우 진드기 수가 감소하는 것으로 보아 테르펜의 항균효과를 확인하였다.
이를 바탕으로 항생 물질인 테르펜의 항균 및 항진드기 시험을 수행한 결과 효능을 직접적으로 확인할 수있었다. 항균력을 가지면서 항진드기 효능을 가장 잘나타내는 적정 농도를 찾기 위해 진드기 기피 실험을하였고 최종적으로 20% 농도에서 가장 좋은 효과를 얻을 수 있었다. 항균효능은 1차 실험 결과와 비교하였을때, 2차 실험에서 포집된 균의 수가 감소하는 경향을보였으며, 동정을 통해 본 균종 또한 줄어든 것을 관찰할 수 있었다.
항균력을 가지면서 항진드기 효능을 가장 잘나타내는 적정 농도를 찾기 위해 진드기 기피 실험을하였고 최종적으로 20% 농도에서 가장 좋은 효과를 얻을 수 있었다. 항균효능은 1차 실험 결과와 비교하였을때, 2차 실험에서 포집된 균의 수가 감소하는 경향을보였으며, 동정을 통해 본 균종 또한 줄어든 것을 관찰할 수 있었다. 일부 실험의 경우 2차에서 오히려 균의 수가 늘어나 TNTC를 보이는 현상이 나타났는데, 이는 주거공간의 환경(온도, 습도, 환기 등)에 따라 균의 생장 조건의 차이에서 발생한 오차라고 생각된다.
항진드기 효능은 테르펜을 사용하지 않은 1차 실험때에는 진드기가 4개 중 2개의 베개에서 약양성(100마리 미만)으로 검출되었지만, 테르펜을 사용한 2차 실험에서는 모두 음성(20마리 미만)으로 줄어든 것을 확인할 수 있었다. 이는 테르펜의 항진드기 효능이 뛰어나다는 것으로 해석할 수 있다.

후속연구

최종적으로 테르펜 20%가 1차, 2차, 3차에서 가장 효과가 높은 것으로 나타났다. 따라서 침구류에서 집진드기가 검출되고 아토피 질환을 증가시키는 것으로 나타나고 있기 때문에 베개 등 침구류에 테르펜이 함유된 경우 유용하게 활용할 수 있을 것으로 판단된다.
본 실험이 연구자가 직접적으로 규명하고 싶었던 오염원에 대해서 직접 확인하고자 하였으나 사용이 금지된 균주 혹은 미생물로 지정이 되어 다른 미생물을 활용하여 진행하였다는 점이다. 또한, 2주의 사용이라는 짧은 기간에 진드기가 많이 서식하기에는 무리가 있었던 것으로 판단되며, 추후에 사용 시간이 경과한 베개를 이용해 전과 후의 비교를 해본다면 더 명확하게 나타나는 효과를 기대해볼 수 있을 것으로 판단된다. 또한, 다양한 선행연구를 통해 항균효과와 항진드기 효과에 대한 원인과 그에 작용하는 내용을 검증을 확장하여 추후 연구에는 적용하고자 한다.
또한, 2주의 사용이라는 짧은 기간에 진드기가 많이 서식하기에는 무리가 있었던 것으로 판단되며, 추후에 사용 시간이 경과한 베개를 이용해 전과 후의 비교를 해본다면 더 명확하게 나타나는 효과를 기대해볼 수 있을 것으로 판단된다. 또한, 다양한 선행연구를 통해 항균효과와 항진드기 효과에 대한 원인과 그에 작용하는 내용을 검증을 확장하여 추후 연구에는 적용하고자 한다.
본 연구에 대한 한계점이 존재한다. 본 실험이 연구자가 직접적으로 규명하고 싶었던 오염원에 대해서 직접 확인하고자 하였으나 사용이 금지된 균주 혹은 미생물로 지정이 되어 다른 미생물을 활용하여 진행하였다는 점이다.
이러한 생리적 특성을 지닌 식물 유래의 성분인 테르펜을 이용하여 우리주변에서 볼 수 있는 다양한 오염원 및 미생물 유래의 질병을 야기하는 원인에 대해 강력한 작용을 하는 내용을 검증하였다. 이러한 인간에게 유해한 원인으로 작용하는 부분에서 중요한 시사점을 제공할 것으로 기대한다.
본 연구를 통하여 사전에 연구되지 않았던 테르펜의 항진드기 효과와 항균력을 확인하였으며, 테르펜을 통해 침구류에 존재하는 세균과 진드기를 제거할 수 있음을 확인하였다. 이를 통해 우리가 일상에서 사용하는 다양한 침구류 및 관련 제품들에서 나타날 수 있는 오염원을 제거하고 우수한 항균력 및 항진드기 평가 결과를 통해 추후 테르펜을 이용하여 침구류 항균 및 항진드기 스프레이 등의 제품을 개발할 수 있는 방안을 도출할 수 있었다.

참고문헌 (18)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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