[논문]Scopolamine 유발 기억 손상 마우스에서 익모초의 효과

이지혜; 김혜정; 장귀영; 서경혜; 김미려; 최윤희; 정지욱

doi:10.15188/kjopp.2020.04.34.2.81

Scopolamine 유발 기억 손상 마우스에서 익모초의 효과
Effect of Leonurus japonicus Houtt. on Scopolamine-induced Memory Impairment in Mice 원문보기

동의생리병리학회지 = Journal of physiology & pathology in Korean Medicine, v.34 no.2, 2020년, pp.81 - 87

이지혜 (대구한의대학교 약리학연구실) , 김혜정 (대구한의대학교 약리학연구실) , 장귀영 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 인삼특작부) , 서경혜 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 인삼특작부) , 김미려 (대구한의대학교 한의과대학 본초약리학교실) , 최윤희 (원광디지털대학교 한방건강학과) , 정지욱 (대구한의대학교 약리학연구실)

Abstract ▼ AI-Helper

Cognitive impairment is symptoms of dementia, a degenerative brain disease that is drawing attention in a rapidly aging society. This study was conducted to investigate the improvement of cognitive function of Leonurus japonicus on scopolamine-induced memory impairment in mice and the effect and mechanism of memory recovery. In vivo studies were conducted on mice orally pretreated with L. japonicus in doses of 50, 100 and 200 mg/kg (p.o.) and scopolamine (1 mg/kg, i.p.) were injected 30 min before the behavioral task. Antioxidant activity was assessed by 2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl (DPPH) assay and 2,2-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) assay, and acetylcholinesterase (AChE) inhibition activity evaluated by Ellman's method. In behavior studies showed that L. japonicus has an improved the memory of scopolamine-treated mice in Y-maze, passive avoidance and Morris water maze test. In addition, L. japonicus was also exerted free radical scavenging activity and inhibited acetyl cholinesterase activity. These results suggest that L. japonicus improves short-term and long-term memory in scopolamine-induced memory decline model and prevents scopolamine-induced memory impairments through in reduced oxidative stress and acetyl cholinesterase inhibition effect. Thus, L. japonicus is related to functional medicinal materials for prevention and treatment of human dementia patients.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

AD는 치매의 대부분을 차지하고 있는 퇴행성 뇌 질환으로 적 절한 시기에 증상에 맞는 치료가 이루어진다면 환자 삶의 질이나 경제적, 사회적 부담을 경감 시킬 수 있지만 현재 이를 완치시킬 수 있는 결정적 방법은 없으며 FDA에 승인된 약물들도 매우 제한 적인 약효와 다양한 부작용을 가지고 있어 장기적인 치료 및 완치 시킬수 있는 효과적인 천연물을 활용한 신약 개발이 주목되고 있 다. 많은 연구진이 전통의학에서 천연물에 대한 지식을 토대로 연 구를 진행하고 있으며 본 연구에서는 천연 약용 자원 중 익모초 정 유에서 caryophyllene, caryophyllene oxide, hexadecanoic acid 등을 추정하였고 이 성분은 허혈성 뇌질환 보호²⁹⁾, 항우울³⁰⁾, 기억 개선³¹⁾, 결장암 보호³²⁾, 에탄올 섭취 감소³³⁾ 등에 대한 효과가 보고되어 이를 포함하는 익모초 정유가 기억력 및 인지능력을 개선 시킬 것이라 생각되었기에 scopolamine에 의한 기억력 감퇴에 미 치는 영향 및 항산화와 AChE 억제 효과에 대해 조사하였다.
부인병에 많이 사용하는 대표 적인 약재로 활혈조경(活血調經), 이뇨(利尿), 자궁수축(子宮收縮), 지혈, 강심 등의 효과로 고혈압, 신경쇠약, 월경과다, 생리통, 생리 불순, 산후복통 등에 사용한다. 익모초의 지방간 감소 효과²³⁾, 항박 테리아 효과²⁴⁾ 등에 대한 보고가 되었고, 성분은 280개 이상이 밝 혀졌는데 대부분이 monoterpenoids, sesquiterpenoids, diterpenoids, triterpenoids, steroids, alkaloids, flavonoids와 phenylpropanoids이지만²⁵⁾ 생리활성에 대한 보고는 diterpenoids 의 acetylcholinesterase 억제 효과²⁶⁾, alkaloid의 혈관생성 효과 ²⁷⁾가 보고 되었을 뿐 익모초 정유의 기억력 및 인지기능 개선에 대 한 보고가 된 바가 없어 본 연구에서는 in vivo에서 그 효과를 확 인하고자 수행하였다.

가설 설정

japonicus. A: DPPH radical scavenging activity. B: ABTS radical scavenging activity.
A: DPPH radical scavenging activity. B: ABTS radical scavenging activity. Each value represents mean±SEM of triplicate measurements.

제안 방법

1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디컬 소거능은 화 학적으로 안정화된 자유 라디컬인 짙은 보라색의 DPPH를 방향족 아민류 등에 의해 환원되어 색이 탈색되는 것을 이용하여 항산화 물질의 활성을 측정하는 것으로 각 시료를 증류수에 녹인 후 0.2 mM DPPH 용액과 100 μL씩 동량으로 혼합하여 암실에서 30분간 반응시킨 후 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
GC-MS 분석은 HP-5MS 컬럼 (30 m × 0.25 mm, 0.25 μm, Agilent Technologies, CA, USA)을 사용하여 80℃에서 5분 동안 유지하 고 240℃까지 10℃/min으로 승온 후 34분 동안 유지하였다.
japonicus은 국내에서 생산된 것을 한국생 약협회(Seoul, Korea)를 통해 검증 후 구입하여 사용하였다. L. japonicus 500 g에 hexane 5 L를 가하여 상온에서 24시간 동안 침출시켰으며, 추출액은 여과지(Advantec No.2)로 여과하여 여액 을 회수하고 걸러진 추재에 다시 동량의 용매를 가하여 총 3회 반 복 추출하였다. 추출물은 감압 농축하여 용매를 제거하고 -20℃에 보관하여 실험에 사용하였다(수득율:2.
많은 연구에서 신경전달 물 질인 아세틸콜린과 무스카린 수용체 간의 결합을 저해하여 일시적 인 정보전달을 차단시킴으로써 인지기능을 손상시키고 dopamine 산화를 증가시키는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 동물모델에 서의 기억력 개선 효과를 확인하고자 scopolamine으로 유도한 인 지기능 손상 mouse 모델을 사용하였다.
본 연구에서는 익모초 정유의 항산화 효과를 평가하고 scopolamine으로 유도한 기억력 감퇴 모델을 이용하여 Y-미로 시 험, 수동 회피 시험, 수중 미로 시험을 수행하였으며 AChE의 억제 능을 조사하였다.
사육기간 중 식이와 물은 자유 섭취시켰으며 사육실 온도는 23±1℃, 습도 50 ± 5%, 조명시간 07:00-19:00(12시간 주기)로 환경을 유지하였 다. 순화기를 거친 실험동물에게 시료인 익모초 또는 양성 대조군 인 donepezil을 단회 경구 투여하고 30분 뒤 scopolamine 1 mg/kg를 복강 투여하여 실험동물의 기억을 손상시키고 30분 뒤 행동 실험을 진행하였다. 본 연구에서 진행된 동물실험 절차는 대 구한의대학교 동물실험윤리위원회의 사전심의와 윤리 규정을 준수 하여 수행하였다(승인번호:DHU2019-044).
대조군으로는 효소를 첨가하지 않고 sodium phosphate buffer를 첨가한 반응액을 사용하였고, ASCh를 첨가 하지 않은 반응액으로 시료와 효소 활성용 시약간의 비특이적 반응 이 일어나지 않았음을 확인하였다. 시료를 첨가하지 않은 반응액을 AChE의 활성도를 100%로 하였을 때 각 시료를 첨가한 반응액의 AChE 활성 저해도를 그래프로 나타내었다.
0)를 이용하여 균질화하고, 12,500 rpm, 20분간 원심 분리 후 얻은 상층액을 이용하여 AChE 활성을 측정하는데 효소로 사용하였다. 시료와 양성 대조군으로 사용한 donepezil(Sigma-aldrich, USA)을 단계별 희석하여 사용하였다. Sodium phosphate buffer 134 μL, 75 mM ASCh 1 μL, 10 mM Ellman's 용액(5,5'-dithiobis- 2-nitrobenzoic acid) 5 μL, 시료 또는 donepezil을 50 μL 넣고 25℃에서 10분간 반응 후 효 소원 10 μL를 넣고 25℃에서 5분간 반응 후 405 nm에서 흡광도 를 측정하였다.
실험 마지막 날 도피대를 제 거하고 학습능력을 측정하기 위해 60초간 도피대가 있었던 구역에 머무르는 시간을 측정하였고 모든 실험은 Ethovision program(Noldus, Netherlands)을 이용하여 기록 및 측정하였다.
해마 의존적 공간학습 및 장기 기억력 개선에 대한 실험으로 원형으로 된 지름 90 cm, 높이 45 cm의 수조의 사분면 한 구역 에 지름 9 cm, 높이 25 cm의 도피대를 설치하고 20±2℃ 깨끗한 물을 도피대 보다 1 cm 정도 위로 채운 뒤 실험 동물이 도피대를 찾아가는데 걸리는 시간을 측정하였다. 원형 수조에서 4개의 표지 판을 설치하여 4분면으로 나누어 입수하는 위치를 다르게 하여 하 루 4번씩 반복하여 60초간 진행하였으며 실험 동물이 60초 안에 도피대를 찾으면 실험을 완료하였고 찾지 못한 경우 손으로 위치를 안내해주어 10초간 머무르게 하였다. 실험 마지막 날 도피대를 제 거하고 학습능력을 측정하기 위해 60초간 도피대가 있었던 구역에 머무르는 시간을 측정하였고 모든 실험은 Ethovision program(Noldus, Netherlands)을 이용하여 기록 및 측정하였다.
측정 장비는 세 개의 가지로 구성되어 있으며 각 가지의 길이는 42 cm, 넓이는 3 cm, 높이는 12 cm이고 세 가지가 접히는 각도는 120°이다. 이 장 치는 검정색의 polyvinyl plastic으로 구성되어 있고, 세 개의 가지 를 각각 A, B, C로 정한 뒤에 실험을 진행하였다. 실험동물을 넣고 8분 동안 각 가지에 실험동물의 꼬리까지 가지에 들어갈 때의 횟수 와, 각 가지에 차례로 들어간 경우를 헤아려 1점(실제변경, actual alternation)씩 부여하였다.
익모초 정유의 향기 성분을 분석하고, 항산화 효과 및 경구 투 여가 scopolamine으로 유도한 기억력 및 인지 기능 감퇴 마우스 모델에서의 행동 변화, 뇌내 AChE 억제 효과에 미치는 영향에 대 한 연구를 통하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
5 mA의 전기충격을 가한다. 전기충격을 가한 다음 날 실험동물을 밝은 방에 다시 넣었을 때 어두운 방에서의 전기충격을 기억하여 밝은 방에 머무르게 되는데, 이때 체류하는 시간 (step-through latency)을 측정하여 기억력을 평가하였다.
해마 의존적 공간학습 및 장기 기억력 개선에 대한 실험으로 원형으로 된 지름 90 cm, 높이 45 cm의 수조의 사분면 한 구역 에 지름 9 cm, 높이 25 cm의 도피대를 설치하고 20±2℃ 깨끗한 물을 도피대 보다 1 cm 정도 위로 채운 뒤 실험 동물이 도피대를 찾아가는데 걸리는 시간을 측정하였다.
해마의 조건화된 기억과 변연계와 관련 있는 기억에 관한 영향 및 working memory ability를 평가하기 위해 회피학습상자(JEING DO BIO&PLANT CO., LTD., Seoul, Korea)를 이용하여 실험을 하였다.

대상 데이터

4주령 수컷 ICR mouse를 대한바이오링크(Chungbuk, Korea) 로부터 공급받아 1주일 동안 순화 후 실험에 사용하였다. 사육기간 중 식이와 물은 자유 섭취시켰으며 사육실 온도는 23±1℃, 습도 50 ± 5%, 조명시간 07:00-19:00(12시간 주기)로 환경을 유지하였 다.
연구에 사용된 L. japonicus은 국내에서 생산된 것을 한국생 약협회(Seoul, Korea)를 통해 검증 후 구입하여 사용하였다. L.

데이터처리

그룹 간 유의성 검정은 일원배치분산분석(one-way analysis of variance)를 실시 하고 Newman-Keuls test에 의해 유의수준 p<0.05 이상에서 사후 검정을 실시하였다.
모든 결과는 mean±standard error of mean(SEM)으로 표시하였다.
본 연구의 모든 실험 결과는 Prism 5(GraphPad Software, Inc., San Diego, USA)를 사용하여 산출하였다. 그룹 간 유의성 검정은 일원배치분산분석(one-way analysis of variance)를 실시 하고 Newman-Keuls test에 의해 유의수준 p<0.

이론/모형

AChE 활성 억제능을 확인하기 위해서 Ellman GL28) 등의 방 법인 acetylthiocholine iodide(ASCh)를 기질로 사용한 비색분석 법으로 실험하였다. 실험에 사용하지 않은 실험 동물을 경추 탈골 후 전체 뇌를 적출하여 차가운 sodium phosphate buffer(100 mM, pH 8.
단기 기억력을 측정하는 실험으로 순차적으로 행동하는 능력을 평가하기 위한 방법으로 Y-maze test 실시하였다. 측정 장비는 세 개의 가지로 구성되어 있으며 각 가지의 길이는 42 cm, 넓이는 3 cm, 높이는 12 cm이고 세 가지가 접히는 각도는 120°이다.
익모초 추출물의 향기성분 분석은 GC-MS(Gas chromatography-mass spectrometry, GCMS-QP2020, Shimadzu Co., Japan)를 이용하였으며, 시료로부터 휘발성 성분 의 추출은 SPME(Solid phase microextraction, AOC-6000, Shimadzu Co., Japan)를 사용하였다. SPME는 65 μm -PDMS/DVB(Polydimethylsiloxane/divinylbenzene) fiber를 이 용하여 60℃에서 10분 동안 추출, 흡착하였다.

성능/효과

SPME-GC-MS를 측정한 결과 향기 성분으로 caryophyllene,caryophyllene oxide 및 hexadecanoic acid 등의 성분을 확인하였다.
따라서 임상 에서는 Ach를 분해하는 AChE를 억제함으로 ACh의 농도를 증가 시켜 신경 전달을 회복시킴으로써 AD의 증상을 개선, 진행을 늦추 고 있는 donepezil을 비롯한 약물들을 주로 사용하고 있다. Scopolamine은 비선택적 muscarinic acetylcholine receptor로 기억력 손상을 일으켜 이 모델에서 효과있는 약물이 AChE를 조절 하는 효능을 나타내는데 ex vivo 실험을 통하여 익모초 정유 역시 AChE의 활성을 억제하는 것을 확인하였다. 익모초의 지상부는 식 품공전에 식품에 제한적으로 사용할 수 있는 원료에 포함되어있고 사용조건이 정해져 있지 않는 원료로 기존 AChE 약물과 비교하여 임상에 적용하기에 안전할 것으로 판단된다.
기억력 및 인지 기능 개선을 평가하기 위하여 수행한 Y-미로 시험은 단기 기억을 평가하는 방법으로 자발적 변경 행동력으로 공 간 작업 기억을 측정한 결과 NOR군에 비하여 CON군에서 변경 행 동력이 감소되어 기억 손상 모델이 잘 확립된 것을 확인할 수 있었 고, 익모초 정유 투여로 인하여 변경 행동력이 증가되어 기억력이 개선 되는 것을 확인할 수 있었으며 익모초 200 mg/kg에서 DNPZ군과 비슷한 수준으로 나타나는 것을 확인하였다. 이는 각 가 지에 들어간 총 입장 횟수가 군간 유의한 차이가 없어 약물이 동물 의 locomotor에 영향을 미치지 않고 인지 및 기억력을 개선시키는 것을 알 수 있었다.
Sodium phosphate buffer 134 μL, 75 mM ASCh 1 μL, 10 mM Ellman's 용액(5,5'-dithiobis- 2-nitrobenzoic acid) 5 μL, 시료 또는 donepezil을 50 μL 넣고 25℃에서 10분간 반응 후 효 소원 10 μL를 넣고 25℃에서 5분간 반응 후 405 nm에서 흡광도 를 측정하였다. 대조군으로는 효소를 첨가하지 않고 sodium phosphate buffer를 첨가한 반응액을 사용하였고, ASCh를 첨가 하지 않은 반응액으로 시료와 효소 활성용 시약간의 비특이적 반응 이 일어나지 않았음을 확인하였다. 시료를 첨가하지 않은 반응액을 AChE의 활성도를 100%로 하였을 때 각 시료를 첨가한 반응액의 AChE 활성 저해도를 그래프로 나타내었다.
도피대를 제거하고 수행한 probe test에서 NOR군은 도피대가 있었던 구역에서 머무른 시간 이 17.9±0.9초인 반면 CON군은 14.0±0.7초로 감소하였고, 익모 초 200 mg/kg 투여군에서 17.1±0.9초로 증가하였으며 donepezil 투여군에서도 17.2±0.9초로 증가하는 것을 확인하였다(Fig. 5B).
이는 각 가 지에 들어간 총 입장 횟수가 군간 유의한 차이가 없어 약물이 동물 의 locomotor에 영향을 미치지 않고 인지 및 기억력을 개선시키는 것을 알 수 있었다. 또한 공포 자극으로 유도된 장기 기억을 수동 회피 시험을 통하여 측정한 NOR군과 비교하여 CON군에서 체류 잠복기가 유의하게 감소하여 기억 손상 모델이 잘 확립된 것을 확 인하였고, 익모초 정유 투여로 인하여 체류 잠복기가 증가되어 기 억력이 농도 의존적으로 개선되는 것을 확인하였다. 이는 학습 기 간에 진행한 체류 잠복기에서는 차이가 없어 약물이 환경에 영향을 미치지 않고 인지 및 기억력을 개선시키는 것을 알 수 있었다.
또한 익모초 정유의 ABTS radical 소거능을 측정한 결과 312.5, 625, 1250, 2500, 5000 및 10000 μg/mL 농도에서 5.6±0.9%, 10.2±0.1%, 18.1±0.5%, 30.7±1.1%, 38.9±3.1% 및 54.9±8.3%로 나타났고 양성대조군으 로 사용한 ascorbic acid 100 μg/mL은 99.0±0.1%로 나타났다 (Fig. 2B).
이는 학습 기 간에 진행한 체류 잠복기에서는 차이가 없어 약물이 환경에 영향을 미치지 않고 인지 및 기억력을 개선시키는 것을 알 수 있었다. 모 리스 수중 미로 시험을 통해 공간 학습 및 장기 기억 개선 효과를 확인한 결과 모든 실험군이 학습을 진행할수록 도피대를 찾아가는 데 걸리는 시간이 감소하였으나 CON군에서는 그 시간이 첫날과 비슷한 수준으로 기억 손상 모델이 잘 작성되었고 익모초 정유 투 여로 인한 기억 개선 효과 할 수 있었다. 실험 마지막 날 진행한 probe test에서 NOR군에 비하여 CON군이 도피대가 있었던 구역 에서 머무른 시간이 감소하는 것으로 공간 지각력이 손상 받은 것 을 확인 할 수 있었고, 익모초 정유 투여군이 이를 개선 시키는 것 으로 확인할 수 있었다.
모 리스 수중 미로 시험을 통해 공간 학습 및 장기 기억 개선 효과를 확인한 결과 모든 실험군이 학습을 진행할수록 도피대를 찾아가는 데 걸리는 시간이 감소하였으나 CON군에서는 그 시간이 첫날과 비슷한 수준으로 기억 손상 모델이 잘 작성되었고 익모초 정유 투 여로 인한 기억 개선 효과 할 수 있었다. 실험 마지막 날 진행한 probe test에서 NOR군에 비하여 CON군이 도피대가 있었던 구역 에서 머무른 시간이 감소하는 것으로 공간 지각력이 손상 받은 것 을 확인 할 수 있었고, 익모초 정유 투여군이 이를 개선 시키는 것 으로 확인할 수 있었다.
기억력 및 인지 기능 개선을 평가하기 위하여 수행한 Y-미로 시험은 단기 기억을 평가하는 방법으로 자발적 변경 행동력으로 공 간 작업 기억을 측정한 결과 NOR군에 비하여 CON군에서 변경 행 동력이 감소되어 기억 손상 모델이 잘 확립된 것을 확인할 수 있었 고, 익모초 정유 투여로 인하여 변경 행동력이 증가되어 기억력이 개선 되는 것을 확인할 수 있었으며 익모초 200 mg/kg에서 DNPZ군과 비슷한 수준으로 나타나는 것을 확인하였다. 이는 각 가 지에 들어간 총 입장 횟수가 군간 유의한 차이가 없어 약물이 동물 의 locomotor에 영향을 미치지 않고 인지 및 기억력을 개선시키는 것을 알 수 있었다. 또한 공포 자극으로 유도된 장기 기억을 수동 회피 시험을 통하여 측정한 NOR군과 비교하여 CON군에서 체류 잠복기가 유의하게 감소하여 기억 손상 모델이 잘 확립된 것을 확 인하였고, 익모초 정유 투여로 인하여 체류 잠복기가 증가되어 기 억력이 농도 의존적으로 개선되는 것을 확인하였다.
이상의 결과로 보아 익모초 정유에는 항산화 효과와 AChE의 억제를 통하여 기억 및 인지 기능을 개선시키는 것을 확인할 수 있 었다. 이를 통해 익모초 정유는 AD의 예방 및 치료와 관련한 건강 기능 식품 또는 의약 원료 등 기능성 소재로 응용 가능성이 있는 소재로 사료된다.
이상의 결과를 토대로 익모초 정유가 scopolamine으로 유도 한 기억력 및 인지 기능 감퇴 마우스 모델에서 항건망 효과가 있다 고 생각되며 이러한 작용은 항산화 및 AChE 억제에 의한 것이라 생각된다. 따라서 익모초 정유가 알츠하이머 질환 치료 및 예방을 위한 기능성 소재로 응용 가능 할 것으로 사료된다.
익모초 정유 50, 100 및 200 mg/kg 투여 후 scopolamine을 투여한 실험군에서는 11.5.5±7.5초, 194.9±5.7초, 260.4±10.4초로 농도 의존적으로 증가하였으며 양성대조군으로 사용한 donepezil 투여군은 264.1±12.1초로 나타났다(Fig. 4).
익모초 정유 50, 100 및 200 mg/kg 투여 후 scopolamine을 투여한 실험군에서는 52.8±1.2%, 55.2±0.9%, 59.5±0.8%로 농도 의존적으로 증가하였으며 양성대조군으로 사용한 donepezil 투여군은 66.9±0.5%로 나타났다(Fig. 3A).
익모초 정유가 Y-미로 시험에서 동물의 행동량 변화 없이 농도 의존적으로 자발적 변경 행동력이 증가하여 단기 기억을 개선시키는 것을 확인하였다.
익모초 정유가 수동 회피 시험에서 환경에 따른 영향 없이 농 도 의존적으로 체류 잠복기가 증가하여 장기 기억을 개선시키는 것 을 확인하였다.
익모초 정유가 수중 미로 시험에서 탈출 잠복기가 감소하였고 probe test에서 도피대가 있었던 구역에 머무른 시간이 증가하여 공간 학습 및 장기 기억을 개선 시키는 것을 확인하였다.
익모초 정유의 AChE 억제 효과를 측정한 결과 농도 의존적으 로 감소하는 것을 확인하였다.
익모초 정유의 DPPH radical 소거능을 측정한 결과 312.5, 625, 1250, 2500, 5000 및 10000 μg/mL 농도에서 2.6±0.2%, 6.6±0.3%, 13.2±0.3%, 27.1±0.7%, 43.4±0.9% 및 64.6±0.3%로 나타났고 양성대조군으로 사용한 ascorbic acid 100 μg/mL은 97.9±0.1%로 나타났다(Fig. 2A).
익모초 정유의 DPPH 및 ABTS radical 소거능을 측정한 결과 농도 의존적으로 항산화 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
생체 내의 대사과정에서 발생하는 활성 산소종은 퇴행성 뇌 질 환뿐만 아니라 염증, 암 등 다양한 질병의 원인 중 하나로 산화적 스트레스를 유발시켜 노화와 관련하여 체내 환경을 변화시키고 신 경세포 및 단백질, 헥산의 변성을 유발한다. 익모초 정유의 항산화 활성 측정을 위해 대표적인 방법인 DPPH와 ABTS를 이용해 radical 소거능을 확인한 결과 양성 대조군으로 사용한 ascorbic acid와 비교하여 낮은 활성을 보였으나 익모초 정유의 농도가 증가 함에 따라 활성이 증가하는 결과를 나타내어 항산화 효과로 산화적 스트레스를 개선할 것으로 확인되었다. 최근 라임³⁴⁾, 가시여지³⁵⁾, 샐러리³⁶⁾, 백합나무³⁷⁾ 등 많은 정유에서 항산화 효과를 비롯한 생 리활성의 효과가 규명되고 있으나 국내 자생 식물의 정유에 대한 연구는 미비하고 익모초 정유가 다른 정유에 비하여 항산화 활성이 낮은 수준이지만 이는 자생 지역, 수확 시기, 추출 조건 등에 따른 차이로 생각된다.
정상군인 NOR군의 밝은 방에 머무른 시간이 277.5±13.9초인 반면 scopolamine 투여한 CON군의 머무른 시간이 83.0±4.2초로 감소하였다.
정상군인 NOR군의 변경 행동력은 69.8±1.2%인 반면 scopolamine 투여한 CON군의 변경 행동력은 49.1±2.3%로 감소 하였다.

후속연구

따라서 익모초 정유가 알츠하이머 질환 치료 및 예방을 위한 기능성 소재로 응용 가능 할 것으로 사료된다.
. 그러나 모 든 환자들이 치료효과를 보이지는 않으며 증상을 일시적으로 개선 시킬 수 있으나 소화기계 장애나 간독성 및 심혈관계 등의 부작용 과 병의 진행을 더디게 할 뿐 완치 할 수 없으므로 이를 극복 할 수 있는 약물 개발에 대한 연구가 필요하다. 이러한 실정으로 예방 및 치료를 위해 부작용이 없고 자연에서 얻을 수 있는 천연 식물의 아세틸콜린저해제에 대한 관심이 증가하고 있는 추세이며 대표적으 로 인삼^13-15), 은행엽¹⁶⁾, 산사¹⁷⁾, 참당귀¹⁸⁾, 율피¹⁹⁾ 등 다양한 연구가 진행되고 있다.
Scopolamine은 비선택적 muscarinic acetylcholine receptor로 기억력 손상을 일으켜 이 모델에서 효과있는 약물이 AChE를 조절 하는 효능을 나타내는데 ex vivo 실험을 통하여 익모초 정유 역시 AChE의 활성을 억제하는 것을 확인하였다. 익모초의 지상부는 식 품공전에 식품에 제한적으로 사용할 수 있는 원료에 포함되어있고 사용조건이 정해져 있지 않는 원료로 기존 AChE 약물과 비교하여 임상에 적용하기에 안전할 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	익모초린?	익모초(益母草, Leonurus japonicus Houtt)22)는 꿀풀과에 속 하는 두해살이풀로 꽃이 피기 전 또는 꽃이 필 때 채취한 지상부로 특유한 냄새가 있으며 성질은 약간 서늘하며 맛은 쓰고 수렴성이 있으며 한국, 일본, 중국에 분포한다. 부인병에 많이 사용하는 대표 적인 약재로 활혈조경(活血調經), 이뇨(利尿), 자궁수축(子宮收縮), 지혈, 강심 등의 효과로 고혈압, 신경쇠약, 월경과다, 생리통, 생리 불순, 산후복통 등에 사용한다.
	익모초의 성질은?	익모초(益母草, Leonurus japonicus Houtt)22)는 꿀풀과에 속 하는 두해살이풀로 꽃이 피기 전 또는 꽃이 필 때 채취한 지상부로 특유한 냄새가 있으며 성질은 약간 서늘하며 맛은 쓰고 수렴성이 있으며 한국, 일본, 중국에 분포한다. 부인병에 많이 사용하는 대표 적인 약재로 활혈조경(活血調經), 이뇨(利尿), 자궁수축(子宮收縮), 지혈, 강심 등의 효과로 고혈압, 신경쇠약, 월경과다, 생리통, 생리 불순, 산후복통 등에 사용한다.
	익모초 정유의 향기 성분을 분석하고, 항산화 효과 및 경구 투 여가 scopolamine으로 유도한 기억력 및 인지 기능 감퇴 마우스 모델에서의 행동 변화, 뇌내 AChE 억제 효과에 미치는 영향에 대 한 연구를 통하여 얻은 결과는?	SPME-GC-MS를 측정한 결과 향기 성분으로 caryophyllene,caryophyllene oxide 및 hexadecanoic acid 등의 성분을 확인하였다. 익모초 정유의 DPPH 및 ABTS radical 소거능을 측정한 결과 농도 의존적으로 항산화 효과를 나타내는 것을 확인하였다. 익모초 정유가 Y-미로 시험에서 동물의 행동량 변화 없이 농도 의존적으로 자발적 변경 행동력이 증가하여 단기 기억을 개선시키는 것을 확인하였다. 익모초 정유가 수동 회피 시험에서 환경에 따른 영향 없이 농 도 의존적으로 체류 잠복기가 증가하여 장기 기억을 개선시키는 것 을 확인하였다. 익모초 정유가 수중 미로 시험에서 탈출 잠복기가 감소하였고 probe test에서 도피대가 있었던 구역에 머무른 시간이 증가하여 공간 학습 및 장기 기억을 개선 시키는 것을 확인하였다. 익모초 정유의 AChE 억제 효과를 측정한 결과 농도 의존적으 로 감소하는 것을 확인하였다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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