[논문]애플망고 잎의 추출물의 항산화 및 대식세포(RAW 264.7)에서 iNOS, COX-2 발현 저해 효과

유단희; 이인철

doi:10.5352/jls.2020.30.9.783

애플망고 잎의 추출물의 항산화 및 대식세포(RAW 264.7)에서 iNOS, COX-2 발현 저해 효과
Antioxidant effect and iNOS, COX-2 Expression Inhibition on RAW 264.7 Cell of Mangifera indica L. Leafs 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.30 no.9, 2020년, pp.783 - 790

유단희 (서원대학교 산학협력단) , 이인철 (서원대학교 바이오코스메틱학과)

초록
AI-Helper

본 연구는 애플망고 잎 추출물의 항산화 및 항염증에 활성을 검증하여 연구하였다. 총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis의 방법에 의해 측정하였다. 그 결과 애플망고 잎의 열수와 70% 에탄올 추출물은 각각 440.83±1.02, 475.63±1.3 mg/100 g TAE의 함량을 나타내었다. 항산화 활성을 측정하기위해 전자공여능 측정과 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) 라디칼 소거능 활성을 측정하였으며, 모든 추출물이 우수한 효과를 나타내었다. 대식세포내에서 애플망고 잎 추출물의 세포 생존율을 MTT assay의 방법으로 측정하였다. 세포의 독성이 나타나지 않은 농도구간에서 이하의 세포실험을 진행하였다. 항염증 활성을 효과적으로 측정하기 위해 LPS로 염증반응을 유도시키고 Griess assay를 이용해 nitric oxide를 측정하였다. 그 결과 애플망고 잎 추출물은 농도의존적으로 NO의 생산을 억제함을 나타내었다. LPS로 유도된 RAW 264.7세포에서 iNOS와 COX-2의 염증인자 생성억제를 mRNA발현 억제를 RT-PCR을 통해 확인하였다. 따라서 본 연구에서는 애플망고 잎 추출물의 항산화 및 항염증 활성의 우수한 효과를 확인하였고, 그 결과 천연소재로서의 유용성과 함께 화장품의 기능성소재로서의 활용가능성을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

The present study investigates the antioxidant and anti-inflammatory activities of Mangifera indica L. leaf extract. The total polyphenol content was measured using the Folin-Denis method. Results showed that the M. indica L. leaf extract of water and 70% ethanol showed a content of 440.83±1.02, 475.63±1.3 mg/100 g tannic acid equivalent. To assess antioxidant activity and electron-donating ability, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical scavenging activity were measured, and all extracts were found to be highly efficacious. To assess cell viability of the extract from M. indica L. leaf on macrophage cells (RAW 264.7), a 3-[4,5-dimethyl-thiazol-2- yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium-bromide assay was performed. The following experiments were conducted in section where cells was not shown of toxicity. In order to effectively determine anti-inflammatory activity, inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells was examined using a Griess assay. The result showed that M. indica L. leaf extract concentration-dependently inhibited NO production. M. indica L. leaf extract was measured using Western blot, reverse transcription- polymerase chain reaction (RT-PCR) that to find the production of pro-inflammatory factor on stimulated RAW 264.7 cells of LPS. According to the results of this study, the M. indica L. leaf extract showed excellent effectiveness in antioxidant and anti-inflammatory activity, thus confirming its usability as a natural material and a functional raw material for cosmetics.

주제어

표/그림 (9)

그림 Fig. 1. Electron donating ability of Mangifera indica L. leaf extracts. ◻ AMLW : Mangifera indica L. leaf extracted with water, ◼ AMLE : Mangifera indica L. leaf extracted with 70% ethanol. Results are means ± S.D. of triplicate data.
표 Table 1. Sequence of the primers used for RT-PCR
표 Table 2. Content of total phenolic in Mangifera indica L. leaf extracts
그림 Fig. 2. ABTS radical scavenging ability of Mangifera indica L. leaf extracts. ◻ AMLW : Mangifera indica L. leaf extracted with water, ◼ AMLE : Mangifera indica L. leaf extracted with 70% ethanol. Results are means ± S.D. of triplicate data.
그림 Fig. 4. Effect of extracts from Mangifera indica L. leaf on production of nitric oxide in RAW 264.7 cell. Effect of extracts of Mangifera indica L. leaf on NO production in LPS-induced RAW 264.7 cells. RAW 264.7 cells (2×10⁵ cells/well) were treated with extracts of Mangifera indica L. leaf and LPS (1 μg/ml) for 18 hr. Each value represents mean ± SD of three individual experiments. ◻ AMLW : Mangifera indica L. leaf extracted with water (A), ◼ AMLE : Mangifera indica L. leaf extracted with 70% ethanol (B).
그림 Fig. 3. Cell viability of extracts from Mangifera indica L. leaf on macrophage cells (RAW 264.7). After RAW 264.7 cells (1×10⁵ cells/well) were started in medium for 24 hr 4 the cells were treated with 5, 10, 50, 100, 500 and 1,000 μg/ml of extracted Mangifera indica L. leaf for 24 hr. Each value represents mean ± SD of three individual experiments. ◻ AMLW : Mangifera indica L. leaf extracted with water, ◼ AMLE : Mangifera indica L. leaf extracted with 70% ethanol.
그림 Fig. 5. iNOS, COX-2 protein expression rate of water extracts from Mangifera indica L. leaf on macrophage cells (RAW 264.7). A: iNOS protein expression rate of water extracts from Mangifera indica L. leaf. B: COX-2 protein expression rate of water extracts from Mangifera indica L. leaf. After RAW 264.7 cells (1×10⁶ cells/well) were started in LPS for 2 hr, the cells were treated with 5, 10 and 50 μg/ml of water extracts from Mangifera indica L. leaf for 18h. Each values represents mean ± SD of three individual experiments.
그림 Fig. 6. iNOS, COX-2 protein expression rate of 70% ethanol extracts from Mangifera indica L. leaf on macrophage cells (RAW 264.7). A: iNOS protein expression rate of 70% ethanol extracts from Mangifera indica L. leaf. B: COX-2 protein expression rate of 70% ethanol extracts from Mangifera indica L. leaf. After RAW 264.7 cells (1×10⁶ cells/well) were started in LPS for 2 hr, the cells were treated with 5, 10 and 50 μg/ml of water extracts from Mangifera indica L. leaf for 18h. Each values represents mean ± SD of three individual experiments.
그림 Fig. 7. iNOS, COX-2 mRNA expression rate of water extracts from Mangifera indica L. leaf on macrophage cells (RAW 264.7). A: iNOS mRNA expression rate of water extracts from Mangifera indica L. leaf. B: COX-2 mRNA expression rate of water extracts from Mangifera indica L. leaf. After RAW 264.7 cells (1×10⁶ cells/well) were started in LPS for 2 hr, the cells were treated with 5, 10 and 50 μg/ml of water extracts from Mangifera indica L. leaf for 18h. Each values represents mean ± SD of three individual experiments.

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구에서는 애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물이 염증 발현 인자인 iNOS 및 COX-2의 단백질과 mRNA에 미치는 영향을 측정하였다.
본 연구에서는 피부에 안전한 소재인 천연물에 대한 연구가 활발하게 진행됨에 따라 애플망고 잎 추출물을 이용하여 항산화 및 항염증 효능을 검증하여 새로운 기능성 화장품 소재로서의 효능을 검증하였다.
이와 같은 애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물의 염증인자인 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 및 mRNA발현 억제 효과 측정한 결과 우수한 억제 효과를 보임에 따라 항염증 관련 화장품 기능성 소재로서의 가능성을 확인하였다.

제안 방법

DEPC를 처리한 증류수를 50 μl씩 분주하여 녹인 후 96 well plate에 RNA 5 μl와 멸균수 195 μl를 첨가하여 260 nm, 280 nm에서 각각 흡광도를 측정하여 total RNA양을 측정하였다.
PCR tube에 5X green Go Taq flexi buffer, MgCl₂, PCR nucleotide mix (10 mM), primer, Go Taq DNA polymerase, nuclease free water, 합성한 cDNA를 첨가하여 잘 섞은 후 PCR을 실행하였다. GAPDH, iNOS는 96℃에서 2분, 96℃에서 10초, 64℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 10분(30 cycles), COX-2는 96℃에서 2분, 94℃에서 10초, 51℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 10분(35 cycles)을 실행하였다. PCR로 합성시킨 후 0.
Oligo (dT) 15 primer (500 μg/ml) 1 μl, 추출한 RNA (2 μg)와 nuclease free water로 10 μl를 맞추고 75℃에서 5분간 반응시킨 후 5X reaction buffer, MgCl2, PCR nucleotide mix, rnasin inhibitor, reverse transcriptase, nuclease free water를 첨가하여 25℃에서 5분, 42℃에서 60분, 70℃에서 15분간 반응시켜 cDNA를 합성하였다.
실험에 사용한 primer sequences는 Table 1과 같다. PCR tube에 5X green Go Taq flexi buffer, MgCl₂, PCR nucleotide mix (10 mM), primer, Go Taq DNA polymerase, nuclease free water, 합성한 cDNA를 첨가하여 잘 섞은 후 PCR을 실행하였다. GAPDH, iNOS는 96℃에서 2분, 96℃에서 10초, 64℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 10분(30 cycles), COX-2는 96℃에서 2분, 94℃에서 10초, 51℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 10분(35 cycles)을 실행하였다.
GAPDH, iNOS는 96℃에서 2분, 96℃에서 10초, 64℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 10분(30 cycles), COX-2는 96℃에서 2분, 94℃에서 10초, 51℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 10분(35 cycles)을 실행하였다. PCR로 합성시킨 후 0.002% ethidium bromide를 첨가한 1.5% agarose gel을 100 Ｖ에서 30분간 전기영동한 후 LAS 4,000을 이용하여 밴드를 확인하여 분석 정량하였다.
iNOS, COX-2의 mRNA 발현을 알아보기 위하여 PCR을 실시하였다. 실험에 사용한 primer sequences는 Table 1과 같다.
그 후 TBST로 3회 washing한 후 Davinch-Chemi™ Imager CAS-400SM System를 이용하여 밴드 확인 및 정량하였다.
또한 본 연구에서는 애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물이 염증 발현 인자인 iNOS 및 COX-2의 mRNA에 미치는 영향을 알아보기 위해 RAW 264.7 cells에 5, 10, 50 μg/ml의 샘플을 농도별로 처리한 후 18시간 뒤에 PCR으로 mRNA 발현량을 측정하여 Fig. 7, Fig. 8과 같이 나타내었다.
본 실험은 애플망고의 잎을 사용하였으며, 제주도 대동농원에서 구입하여 사용하였다. 시료를 파쇄 후 100 g에 10배의 70% ethanol 가하여 24시간 침지한 후 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였고, 열수 추출물은 시료 파쇄 후 100 g에 10배의 양을 가하여 100℃에서 3시간 환류냉각 추출해 실온에서 24시간 침지하여 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다. 각 시료 추출물은 여과지(Whatman No.
애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물은 50 μg/ml 농도에서 100% 이상의 높은 세포 생존율을 나타내었으며, 이하의 세포 실험에서는 50 μg/ml 농도 이하에서 실험을 진행하였다.
이 때, 세포의 종류나 환경에서도 발현 정도의 차이가 거의 없는 housekeeping gene인 β-actin을 positive control로서 사용하였다.
8과 같이 나타내었다. 이때 세포의 여러 조건에서도 그 발현 정도의 차이가 거의 없는 housekeeping gene인 GAPDH를 positive control로 사용하였다. Fig.
전자공여능(EDA: electron donating abilities) 측정 실험은 Blois의 방법[5]을 변형하여 시행하였다. 에탄올에 용해한 0.
세포 생존율을 확인하기 위하여 사용된 MTT는 담황색의 기질로서 생 세포의 미토콘드리아 내의 호흡연쇄 효소에 의해 환원되어 암적색의 formazan을 생성한다. 죽은 세포에서는 반응이 일어나지 않으므로 이 formazan이 환원되는 정도를 측정하여 세포 생존율을 측정하였다[24].
총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법[9]을 변형하여 측정하였다. 추출물을 증류수에 희석한 다음 2 ml과 50% Folin-ciocalteu reagent 2 ml를 혼합한 후 실온에 3 분간 방치하였다.

대상 데이터

Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)에 이용한 GoScript™ Reverse Transcription System은 Promega Corporation (Madison, WI, U.S.A)에서 구입하여 사용하였다.
Western blot에 iNOS, Cyclooxygenase (COX)- 2, β-actin의 primary antibody와 goat anti-rabbit 등의 secondary antibody는 Santa Cruz (CA, U.S.A)에서 구입하였다.
본 실험에 이용한 RAW 264.7 세포의 배양을 위하여 10% FBS와 1% penicillin/streptomycin (100 U/ml)을 첨가한 DMEM 배지를 사용하였으며, 37℃, 5% CO₂ incubator에 적응시켜 계대 배양하였다.
본 실험은 애플망고의 잎을 사용하였으며, 제주도 대동농원에서 구입하여 사용하였다. 시료를 파쇄 후 100 g에 10배의 70% ethanol 가하여 24시간 침지한 후 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였고, 열수 추출물은 시료 파쇄 후 100 g에 10배의 양을 가하여 100℃에서 3시간 환류냉각 추출해 실온에서 24시간 침지하여 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다.
생리활성 측정에 사용된 Folin-ciocalteu reagent (Folin), Tannic acid, 1-1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), ascorbic acid, 2,2’-azinobis-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), dimethyl sulfoxide (DMSO) 등은 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, U.S.A)에서 구입하여 사용하였다.
A)에서 구입하여 사용하였다. 세포독성 및 항염증 측정에 사용된 시약인 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl tetrazolium bromide (MTT), lipopolysaccaride (LPS), griess regent 등은 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, U.S.A)에서 구입하여 사용하였다. Western blot에 iNOS, Cyclooxygenase (COX)- 2, β-actin의 primary antibody와 goat anti-rabbit 등의 secondary antibody는 Santa Cruz (CA, U.
실험에 사용한 기기는 rotary vacuum evaporator (EYELA, Japan), microcentrifuge (gyrozen, Korea), ELISA reader (Tecan, Austria), pH meter (Mettler-Toledo AG, Swltzerland), centrifuge (Hanil Science Industrial Co. Korea), autoclave (JS Research Inc, Korea), PCR (C-100, Bio-Rad. U.S.A), Image Quant LAS 4,000 (GE Healthcare Bio-Sciences AB, Uppsala, Sweden) 등을 사용하였다.

이론/모형

ABTS radical을 이용한 항산화력 측정은 ABTS⁺cation decolorization assay의 방법[20]에 의하여 측정하였다. 7 mM 2,2-azino-bis (3-ethyl-benthiazoline-6-sulfonic acid)와 2.
RAW 264.7 세포로부터 생성된 NO의 양은 Green 등의 방법[11]에 따라 griess시약을 이용하여 세포배양액 중에 존재하는 NO₂의 형태로 측정하였다. 6 well plate에 RAW 264.
세포 생존율 측정은 Carmichae 등의 방법[6]에 따라 측정하였다. RAW 264.

성능/효과

이 때, 세포의 종류나 환경에서도 발현 정도의 차이가 거의 없는 housekeeping gene인 β-actin을 positive control로서 사용하였다. Fig. 5, Fig. 6에서 보는 바와 같이 애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물을 농도별로 처리한 RAW 264.7에서 iNOS와 COX-2의 단백질 발현이 농도가 높아짐에 따라서 억제됨을 확인하였다. 추출물별로 iNOS와 COX- 2 인자를 확인한 결과, 애플망고 잎의 열수 추출물은 50 μg/ml 농도에서 각각 59.
Fig. 7, Fig. 8에서 보는 바와 같이 애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물을 5, 10, 50 μg/ml의 농도로 처리한 RAW 264.7 cells에서 iNOS 및 COX-2의 mRNA 발현이 농도가 높아짐에 따라서 억제됨을 확인하였으며, 애플망고 잎의 열수 추출물의 50 μg/ml 농도에서 각각 48.29%, 52.56% 발현 억제를 나타냈으며, 애플망고 잎의 에탄올 추출물의 50 μg/ml 농도에서 각각 44.77%, 47.63% 발현 억제를 나타내었다.
4와 같이 나타내었다. LPS 처리군은 LPS 무처리군에 비해 높은 NO 생성량을 보였으며, 애플망고 잎 열수 및 에탄올 추출물을 처리한 군은 NO 발현을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다.
03 mg TAE/100 g의 함량을 나타내었다. 두 추출물을 비교해 봤을 때 큰 차이는 없었지만, 추출용매가 에탄올일 경우 물에 비해 높은 함량을 나타내었다.
애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물에서 농도가 500 μg/ml일 때 각각 80.92±1.38%, 94.48±0.8%의 효과를 나타내어 에탄올 추출물에서 ABTS+ radical 소거능 효과가 우수함을 확인하였다.
애플망고 잎의 열수 및 에탄올 추출물에서 농도가 500 μg/ml일 때 각각 85.37±1.4%, 93.82±0.3%의 효과를 나타내어 에탄올 추출물에서 전자공여능 효과가 우수함을 확인하였다.
63% 발현 억제를 나타내었다. 애플망고 잎의 열수 추출물 보다 에탄올 추출물에서 염증인자의 mRNA 발현을 억제에 효과가 있는 것을 확인하였다.
애플망고 잎의 열수 추출물은 440.83±1.02 mg TAE/100 g을 나타내었고, 애플망고 잎의 에탄올 추출물에서는 475.63±1.03 mg TAE/100 g의 함량을 나타내었다.
8%의 발현 억제를 보여주었다. 이와 같은 결과에 따라 애플망고 잎의 에탄올 추출물이 열수 추출물보다 단백질 발현을 효과적으로 억제됨을 확인하였다.
추출물별로 iNOS와 COX- 2 인자를 확인한 결과, 애플망고 잎의 열수 추출물은 50 μg/ml 농도에서 각각 59.7%, 70.3%의 발현 억제를 확인하였으며, 애플망고 잎의 에탄올 추출물 50 μg/ml 농도를 처리한 결과는 각각 21.1%, 67.8%의 발현 억제를 보여주었다.

참고문헌 (25)

Amasa, W., Santiago, D., Mekonen, S. and Ambelu, A. 2012. Are cosmetics used in developing countries safe? Use and dermal irritation of body care products in Jimma Town, Southwestern Ethiopia. J. Toxicol. 2012, 8-15.
Aniya, Y. and Naito, A. 1993. Oxidative stress-induced activation of microsomal glutathione S-transferase in isolated rat liver. Biochem. Pharmacol. 45, 37-42, 1993.

상세보기
Bae, I. S., Shim, M. J., Lee, J. Y. and Kim, Y. C. 2012. Application tests of phellodendrin cortex water extract as functional cosmetic raw materials. J. Invest. Cosmetol. 8, 1-8.

상세보기
Baek, S., Choi, J. H., Ko, S. H., Lee, Y. J., Cha, D. S., Park, E. Y., Kang, Y. G. and Jeon, H. 2009. Antioxidant and anti-inflammatory effect of Nardostachys Chinensis in IFN- ${\gamma}$ /LPS-stimulated peritoneal macrophage. Kor. J. Ori. Med. Physiol. Pathol. 23, 853-859.
Blois, M. S. 1958. Antioxidant determination by the use of a stable free radical. Nature 26, 1199-1120.
Carmichael, J., DeGraff, W. G., Gazdar, A. F., Minna, J. D. and Mitchell, J. B. 1987. Evaluation of a tetrazolium based semiautomated colorimetric assay: assessment of chemosensitivity testing. Cancer Res. 47, 936-942.

상세보기
Cho, Y. J., Ju, I. S., Kim, B. C., Lee, W. S., Kim, M. J., Lee, B. G., An, B. J., Kim, J. H. and Kwon, O. J. 2007. Biological activity of Omija (Schizandra chinensis Baillon) extracts. J. Kor. Soc. Appl. Biol. Chem. 50, 198-203.
Choi, S. Y., Cho, H. S. and Sung, N. J. 2006. The antioxidative and nitrite scaveng- ing ability of solvent extracts from wild grape (Vitis coignetiea) skin. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 35, 961-966.

원문보기 상세보기
Folin, O. and Dennis, W. 1912. On phosphotungstic-phosphomolybdic compounds as color reagent. J. Biol. Chem. 12, 239-243.
Forstermann, U. and Sessa, W. C. 2012. Nitric oxide synthases: Regulation and function. Eur. Heart J. 33, 829-837.

상세보기
Green, L. C., Wagner, D. A., Glogowski, J., Skipper, P. L., Wishnok, J. S. and Tannenbaum, S. R. 1982. Analysis of nitrate, nitrite, and [15N] nitrate in biological fluids. Anal. Biochem. 126, 131-138.

상세보기
Halliwell, B. and Gutteridge, J. M. C. 1990. Role of free radicals and catalytic metal ions in human disease: an overview. Methods Enzymol. 186, 1-85.
Hogquist, K. A., Baldwin, T. A. and Jameson, S. C. 2005. Central tolence: learning self-control in the thymus. Nat. Rev. Immunol. 5, 772-782.

상세보기
Jeong, S. J., Kim, K. H. and Yook, H. S. 2015. Whitening and antioxidant activities of solvent extracts from hot-air dried Allium hookeri. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 44, 832-839.

원문보기 상세보기
Kader, K. N. and Coyle, C. H. 2007. Reactive oxygen and nitrogen species: implications for cardiovascular device engineering. J. Biomed. Mater Res. B Appl. Biomater. 83, 138-144.
Kumar, M. V., Shimokawa, T., Nagy, T. R. and Lane, M. D. 2002. Differential effects of a centrally acting fatty acid synthase inhibitor in lean and obese mice. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99, 1921-1925.

상세보기
Kwon, Y. R. and Youn, K. S. 2017. Antioxidant and physiological activities of Hijikia fusiforme by extraction methods. Kor. J. Food Preserv. 24, 631-637.

원문보기 상세보기
Manach, C., Williamson, G., Morand, C., Scalbert, A. and Remesy, C. 2005. Bioavailability and bioefficacy of polyphenols in humans. Am. J. Clin. Nutr. 81, 230-242.

상세보기
Park, J. K., An, K. W. and Ahn, Y. S. 2010. Mango. Chonnam National University Press, Gwangju, Korea. 7-24.
Roberta, R., Nicoletta, P., Anna, P., Ananth, P., Min, Y. and Catherine, R. E. 1999. Antioxidant acitivity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radic. Biol. Med. 26, 1231-1237.

상세보기
Ryu, J. H., Ahn, H. N., Kim, J. Y. and Kim, Y. K. 2003. Inhibitory activity of plant extracts on nitric oxide synthesis in LPS-activated macrophage. Phytother. Res. 17, 485-489.

상세보기
Seong, R. C. and Rhee, C. 2007. Humans and Food. Korea University Press, Seoul, Korea. 8-109.
Sujay, R., Souvik, B., Kakali, M., Saha, B. P. and Pulok, K. M. 2007. Oriental medicine mangifera indica. Orient. Pharm. Exp. Med. 7, 1-10.

원문보기 상세보기
Ukeda, H., Maeda, S., Ishii, T. and Sawamura, M. 1997. Spectrophotometric assay for superoxide dismutase based on tetrazolium salt 3'-1-(phenylamino)-carbonyl-3,4-tetrazolium]-bis(4-methoxy-6-nitro) benzenesulfonic acid hydrate reduction by xanthine-xanthine oxidase. Anal. Biochem. 251, 206-209.

상세보기
Zukiewicz-Sobczak, W. A., Adamczuk, P., Wroblewska, P., Zwolinski, J., Chmielewska-Badora, J., Krasowska, E., Galinska, E. M., Cholewa, G., Piatek, J. and Kozlik, J. 2013. Allergy to selected cosmetic ingredients. Postep. Derm. Alergol. 30, 307-310.

상세보기

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증