[논문]배암차즈기(Salvia plebeia R. Br.)의 항산화 활성 및 항염증효과

이영애; 강순아

doi:10.9799/ksfan.2020.33.5.483

배암차즈기(Salvia plebeia R. Br.)의 항산화 활성 및 항염증효과
Antioxidative and Anti-Inflammatory Activities of Salvia plebeia R. Br Extracts 원문보기

한국식품영양학회지 = The Korean journal of food and nutrition, v.33 no.5, 2020년, pp.483 - 492

이영애 (호서대학교 벤처대학원 융합과학기술학과) , 강순아 (호서대학교 벤처대학원 융합과학기술학과)

Abstract ▼ AI-Helper

This study provides data to explore functional medicinal food materials that can prevent adult diseases, and verified antioxidant and anti-inflammatory of each solvent fraction of the methanol extract of Salvia plebeia R. Br. in Korea. In the analysis of total phenol content, DPPH radical scavenging ability, and FRAP reduction ability as indicators of antioxidant activity, the methanol fraction and ethyl acetate fraction of the Salvia plebeia R. Br. group showed high antioxidant activity. Ethyl acetate fraction of Salvia plebeia R. Br. methanol extract also showed excellent antioxidative activity as compared with BHT. In the mouse macrophage line Raw 264.7 cells, the NO production ability by LPS treatment was significantly increased in the LPS treatment group compared to the untreated group. In inflammatory reactions induced by LPS treatment in Raw 264.7 cells, inflammatory cytokines (TNF-α, PGE2, IL-1β) and NO production were decreased in the EtOAc fraction and MeOH fraction of the methanol extract of Salvia plebeia R. Br. compared to the case of LPS treatment alone. The anti-inflammatory effect was proved by significantly inhibiting the production of inflammatory cytokines. The present results suggest that Salvia plebeia R. Br. supplementation is beneficial for the suppression of antioxidant and anti-inflammation.

주제어

표/그림 (8)

표 Table 1. Total phenol contents (μg/g) using Folin-Dennis methods from Salvia plebeia R. Br.
$Table 2. DPPH radical scavenging effects of five different solvent fractions from Salvia plebeia R. Br.$ 표 Table 2. DPPH radical scavenging effects of five different solvent fractions from Salvia plebeia R. Br.
$Table 3. Ferric reducing antioxidant power of the solvent fractions and methanol extracts derived from Salvia plebeia R. Br.$ 표 Table 3. Ferric reducing antioxidant power of the solvent fractions and methanol extracts derived from Salvia plebeia R. Br.
$Fig. 1. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated nitric oxide released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). Cell were co-treated with LPS (75 ng/mL) and various fraction of Salvia plebeia R. Br. (37.5, 70 and 150 ng/mL) for 24hr. LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(+) by t-test.$ 그림 Fig. 1. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated nitric oxide released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). Cell were co-treated with LPS (75 ng/mL) and various fraction of Salvia plebeia R. Br. (37.5, 70 and 150 ng/mL) for 24hr. LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(+) by t-test.
$Fig. 2. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated PGE2 released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(－) by t-test. Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan’s multiple range test.$ 그림 Fig. 2. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated PGE2 released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(－) by t-test. Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan’s multiple range test.
$Fig. 3. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated IL-1β released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(－) by t-test. Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan’s multiple range test.$ 그림 Fig. 3. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated IL-1β released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(－) by t-test. Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan’s multiple range test.
$Fig. 4. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated TNF-α released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(-) by t-test. Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan's multiple range test.$ 그림 Fig. 4. Effects of fraction of Salvia plebeia R. Br. on LPS-activated TNF-α released into the medium by RAW 264.7 cell. Each value is expressed as a mean S.D. (n=3). LPS, lipopolysaccharides; SA, Salvia plebeia R. Br. *p<0.05 compared to LPS(-) by t-test. Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan's multiple range test.
표 Table 4. Correlation coefficient among antioxidant activity and anti-inflammatory activity of Salvia plebeia R. Br.

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 LPS 자극에 의한 RAW 264.7 대식세포로부터 염증관련 물질인 NO, IL-6 및 TNF-α 등의 생성을 배암차즈기가 억제함으로써 염증성 질환의 예방 혹은 치료에 유효한 효능을 기대해본다.
따라서 항산화 및 항염증 기능을 가지면서 성인병 예방에 도움을 주는 건강기능성 식품 개발에 자료를 제공하고저 배암차즈기의 최적 분리 조건을 확립하여 순수한 물질을 분리하는 것이 필요하므로 본 연구에서는 국내산 배암차즈기로부터 메탄올 추출물의 각각의 용매 분획에 대한 항산화 및 항염증을 검증함으로써 기능성 식품 소재로서의 활용에 도움을 주고자한다.
본 연구는 성인병을 예방하며 항산화 및 항염증 기능을 보이는 건강기능성 식품 소재를 탐구하는데 자료를 제공하고 저 국내산 배암차즈기 메탄올 추출물의 각각의 용매 분획에 대한 항산화 및 항염증 효과를 검증하였다. 항산화 활성능 지표로 총 페놀함량, DPPH 라디칼 소거능 및 FRAP 환원능 분석에서 배암차즈기 메탄올 분획과 에틸아세테이트 분획에서 항산화력이 높은 것으로 나타났다.

가설 설정

1) Concentration of antioxidant required scavenging 50% of free radical (DPPH) in a reaction solution.

제안 방법

96-well plate에 well당 3×105 cell/mL 농도로 24시간 동안 배양한 후 2 μg/mL lipopolysaccharide(LPS, Sigma-Aldrich Co.)를 처리하고 필터(0.2 μm, GVS Filteration Inc., Bloomer, WI, USA)를 통과한 배암차즈기 분획별 시료의 농도를 0.1 mg/mL로 48시간 동안 처리하였다.
대조군은 분획별 시료용액과 동량의 메탄올 용액을 혼합하여 실험 시료와 같은 과정으로 실험하였다. DPPH 라디칼 소거활성능 판정은 대조군이 50% 라디칼을 소거할 수 있는 활성능력에 해당하는 시료의 양 (EC50, effective concentration)으로 산출하였다.
RAW 264.7 대식세포를 96 well plate에 1.5×105 cells/well 농도로 분주하여 6시간 지난 후 배암차즈기 분액별 시료를 농도별(37.5, 75, 150 ng/mL)로 처리하고 LPS(75 ng/mL)로 염증을 유도한 후 18시간 배양하였다.
5 mL를 첨가하여 30분 상온에서 반응하였다. UV-VIS spectrophotometer(Shimadzu, Kyoto, Japan) 725 nm 에서 흡광도를 측정하여, 총 페놀 함량은 tannic acid를 표준물질로 이용하여 작성한 표준곡선에서 tannic acid 당량으로 계산하였다.
2로 여과하여 45℃ 수온을 유지하는 rotary vacuum evaporator를 사용하여 감압농축 하였다. 농축한 80% methanol 추출물을 동결건조한 후 계통 분획하였다. Methanol 추출물을 Hexane:H₂O(1:1) 용매로 3~4회 분획한 후 얻어진 hexane 분획분을 감압 농축하였다.
30분 후에 UV-VIS spectrophotometer로 517 nm에서 측정하였다(Kim 등 2013). 대조군은 분획별 시료용액과 동량의 메탄올 용액을 혼합하여 실험 시료와 같은 과정으로 실험하였다. DPPH 라디칼 소거활성능 판정은 대조군이 50% 라디칼을 소거할 수 있는 활성능력에 해당하는 시료의 양 (EC50, effective concentration)으로 산출하였다.
7 세포에서 LPS 처리에 의한 NO 생성능은 LPS 처리군이 LPS 미처리군에 비해 통계학적으로 유의적으로 증가하였다. 배암차즈기 분획별 활성에서 헥산층을 제외한 모든 분획별에서 LPS에 의한 Raw 264.7 세포의 독성을 감소시켜주는 분획으로 실험시료의 농도를 150 ng/mL로 실험을 하였다. 마우스 대식세포주 Raw 264.
항산화 활성능 지표로 총 페놀함량, DPPH 라디칼 소거능 및 FRAP 환원능 분석에서 배암차즈기 메탄올 분획과 에틸아세테이트 분획에서 항산화력이 높은 것으로 나타났다. 배암차즈기의 항산화능을 활용하여 기능성 식품소재의 항산화 효과 활용가치를 시사하였으며 활성도를 높이기 위해서는 추출물의 분획층을 활용할 수 있는 점을 시사하였다. 마우스 대식세포주 Raw 264.
배양한 후 MTT(3-[4,5-dimethylthiazol 2-yll)-2,5diphenyl tertrazolium bromide) 용액을 50 μL씩 넣고 incubation을 4시간 지속한 후 MTT 용액을 제거한 후 150 μL씩 DimethylSulfoxide(DMSO)를 넣후 ELISA reader로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
세포 배양 상층액을 ELISA kit(BioLegend, San Diego, CA, USA)로 IL-1β, TNF-α의 농도를 측정하였다.
05 mL에 혼합하여 30분간 상온에서 반응 후, UV-VIS spectrophotometer를 이용하여 593 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료의 FRAP 환원능은 ascorbic acid를 표준 물질로사용하여 ascorbic acid 당량으로 결과를 산출하였다.
실험은 제조사에서 제공된 실험방법을 준수하여 실험을 진행하였다(Livak & Schmittgen 2001).

대상 데이터

RAW 264.7 cell line의 배지에서 NO 농도는 Griess reagent(Sigma-Aldrich Co.)를 활용하여 측정하였다. 96-well plate에 well당 3×10⁵ cell/mL 농도로 24시간 동안 배양한 후 2 μg/mL lipopolysaccharide(LPS, Sigma-Aldrich Co.
본 연구에 사용된 배암차즈기는 경남 함양군 일원에서 자생하여 함양 약초시험장에서 재배된 것으로 지상부 부위를 채취 후 식물체는 음건하여 보관하면서 사용하였다. 농촌진흥청 조강진박사로부터 받은 배암차즈기(Salvia plebeia R. Br.)의 음건 시료는 50℃ dry oven에서 완전 건조 후, 곱게 분쇄하여 실온에서 80% methanol로 3회 반복하여 추출하며, 여과지 Whatman No. 2로 여과하여 45℃ 수온을 유지하는 rotary vacuum evaporator를 사용하여 감압농축 하였다. 농축한 80% methanol 추출물을 동결건조한 후 계통 분획하였다.
마우스 대식세포 RAW 264.7 세포주를 American Type Culture Collection(ATCC, Rockville, MD, USA)에서 구입하여, 배양은 Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM, SigmaAldrich Co., St. Louis, MO, USA)에 100 U/mL penicillinstreptomyci (PS, Welgene Inc., Gyeongbuk, Korea)와 10% Fetal Bovine Serum(FBS, Sigma-Aldrich Co.)을 혼합하여 배지로 사용하였다.
본 연구에 사용된 배암차즈기는 경남 함양군 일원에서 자생하여 함양 약초시험장에서 재배된 것으로 지상부 부위를 채취 후 식물체는 음건하여 보관하면서 사용하였다. 농촌진흥청 조강진박사로부터 받은 배암차즈기(Salvia plebeia R.

데이터처리

Student t-test 분석과 one-way analysis of variance(ANOVA) 분석으로 검증하여 Duncan's multiple range tests로 군간의 통계적 유의성을 판정하였으며, 유의성의 판단은 p value가 p< 0.05으로 하였다.
Values with different letters above bar graphs are significantly different at the 5% level by one-way ANOVA and Duncan’s multiple range test.
상관관계 분석은 p<0.05와 p<0.01 확률 수준에서 피어슨의 상관계수(pearson’ correlation coefficient)를 구하여 검정하였다.

이론/모형

분획별 시료의 총 페놀 함량은 Folins-Denis(Kim 등 2003)의 방법으로 측정하였다. 분획별 시료 0.

성능/효과

DPPH 라디칼 소거능(SC50)은 FRAP 활성(r=－0.6985, p<0.05)과는 유의한 상관성을 보였고, NO 농도(r=－0.7044, p<0.05), PGE2 농도(r= 0.6915, p<0.05) 및 TNF-α 농도(r=0.8983, p<0.01)와는 각각 유의한 상관관계를 나타내었다.
IL-1β 함량은 배암차즈기 H2O와 MeCl2 분획층을 제외한 다른 분획물에서 모두 유의하게 감소하는 것을 볼 수 있었다.
LPS 미처리군에 비하여 LPS를 처리한 군에서 PGE2, IL-1β와 TNF-α가 통계학적으로 유의하게 증가하였다(p<0.05)(Fig. 2).
LPS 미처리군은 0.27±0.06 μg/mL이었고 LPS 처리군은 10.52±0.55 μg/mL로 통계적으로 유의하게 증가하였다(p<0.05).
LPS 처리군(PGE2: 299.9±12.1 pg/mL, IL-1β: 1,799.5±44.2 pg/mL, TNF-α: 1,768.5±101.3 pg/mL)은 LPS 미처리군(PGE2: 48.6±2.9 pg/mL, IL-1β: 126.9±60.7 pg/mL, TNF-α: 106.3±3.0 pg/mL)보다 통계학적으로 유의하게 증가하였다(P<0.05).
PGE2 농도는 NO 농도(r= 0.8493, p<0.01), TNF-α(r=0.8883, p<0.01)와 각각 유의한 상관성을 나타냈고, TNF-α 농도는 NO 함량(r=0.7870, p<0.01), PGE2(r=0.8883, p<0.01)와 유의한 상관관계를 보였으나 IL-1 β 농도와는 유의한 상관관계를 보이지 않았다.
PGE2 함량은 배암차즈기 전 분획층에서 유의하게 감소하는 것을 볼 수 있었으며, 특히 LPS 처리군+EtOAc 분획물(103.8±11.7 μg/mL)과 LPS 처리군+MeOH 분획물(143.7±33.2 μg/mL)에서는 통계학적으로 매우 유의하게 감소하였다(p<0.05)(Fig. 3).
TNF-α 농도는 NO 함량, PGE2와 유의한 상관관계를 보였으나 IL-1 β 농도와는 유의한 상관관계를 보이지 않았다.
TNF-α 함량은 MeCl2 분획층을 제외한 다른 용매 분획에서 모두 유의하게 감소하는 것을 볼 수 있었다.
, IL-1β)의 생성이 유의하게 억제되면서 항염증 효과를 증명하였고 기능성 효능 실험에 분획층의 차이를 보여줌으로써 생리활성의 극대화를 위해서는 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물이 항염증의 생리활성을 증가시키는 것으로 나타났다.
약용작물들에서 항염증 소재를 탐색할 때 지표로 삼는 인자들은 NF-κB 활성을 억제하여 NO, IL-1β, IL-6의 생성을 억제하면서 항염증 효과를 보였다(Lee & Rhee 2015). 따라서 본 연구에서는 배암차즈기 용매별 분획물이 LPS로 자극된 RAW 264.7 식세포에서 농도 의존적으로 NO 생성량이 감소하였다.
DPPH 라디칼 소거능은 에틸아세테이트 분획이 SC₅₀이 67 ug/mL로 나타났고, 메탄올 분획이 SC₅₀은 233 μg/mL로 나타나 에틸아세테이트 분획이 낮은 농도에서 라디칼 소거능을 보였다. 또한 항산화표준물질로 사용하는 BHT보다 높은 free radical 소거능을 보여 줌으로써, BHA와 비교시 거의 동등한 활성이 있음을 보여주었다.
9 μg/mL의 RC₅₀을 나타내었다. 또한, 배암차즈기 메탄올 추출물은 linoleic acid에 대해 우수한 항산화력을 보이면서 기능성 식품소재 및 식품첨가물로써 활용가치가 있음을 시사하였다. Choi 등(2014) 연구에서는 배암차즈기 잎과 뿌리의 에탄올 추출물의 항산화능 지표인 DPPH radical과 ABTS radical 소거능이 시료 추출물 농도에 비례하여 유의적으로 증가함에 따라 활성화 효과가 높은 결과를 보였고, SOD 유사 활성은 잎이 뿌리보다 약 3배 높은 활성을 나타내었다.
배암차즈기의 항산화능을 활용하여 기능성 식품소재의 항산화 효과 활용가치를 시사하였으며 활성도를 높이기 위해서는 추출물의 분획층을 활용할 수 있는 점을 시사하였다. 마우스 대식세포주 Raw 264.7 세포에서 LPS 처리에 의한 NO 생성능은 LPS 처리군이 LPS 미처리군에 비해 통계학적으로 유의적으로 증가하였다. 배암차즈기 분획별 활성에서 헥산층을 제외한 모든 분획별에서 LPS에 의한 Raw 264.
마우스 대식세포주 Raw 264.7 세포에서 LPS 처리에 의해 유도된 염증반응에서 배암차즈기 용매별 분획물 농도를 150ng/mL로 처리한 경우 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물의 염증성 싸이토카인(TNF-α, PGE2, IL-1β)의 생성이 유의하게 억제되면서 항염증 효과를 증명하였다.
모든 실험 결과는 평균±standard deviation(S.D.)로 표현하였고 RT-qPCR은 평균±standard error(S.E.)로 나타내었다.
배암차즈기 분획별 시료 농도(75 ng/mL)로 처리 한 경우 LPS 처리군(10.52±0.55 μg/mL)에 비해 LPS 처리군+MeOH 분획(6.88±0.29 μg/mL), LPS 처리군+MeCl2 분획(5.58±0.50 μg/mL), LPS 처리군+EtOAc 분획(1.77±0.29 μg/mL)은 통계학적으로 유의적인 감소가 있었고(p<0.05), 배암차즈기 분획별 시료 농도(150 ng/mL)로 처리 한 경우 LPS 처리군(10.52±0.55 μg/mL)에 비해 LPS 처리군+ MeOH 분획(2.38±0.04 μg/mL), LPS 처리군+MeCl2 분획(4.99 ±0.13 μg/mL), LPS 처리군+H2O 분획(6.19±0.27 μg/mL), LPS 처리군+EtOAc 분획(2.03±0.31 μg/mL)은 통계학적으로 유의적인 감소가 있었고(p<0.05), 특히 헥산층을 제외한 모든 분획별 배암차즈기 처리에 의해서는 LPS에 의한 세포독성을 감소시켜 주는 분획으로 실험시료의 농도를 150 ng/mL로 실험을 하였다.
배암차즈기 추출물에 대한 ferric reducing ability(FRAP)를 측정한 결과 Table 3에서 보는 바와 같이 배암차즈기 에탄올 추출물의 환원력은 3.11±0.93 μg ascorbic acid/mg extract, 메탄올 추출물의 환원력은 3.01±0.39 μg ascorbic acid/mg extract으로 메탄올과 에탄올 추출물은 강력한 FRAP 환원력을 보였다.
4 μg/g DW의 함량을 보였다(Table 1). 배암차즈기(Salvia plebeia R. Br.)의 메탄올 추출물과 용매 분획별 free radical 소거능력을 측정한 결과는 Table 2에서 보는 바와 같이 배암차즈기의 에틸아세테이트 분획에서 항산화활성이 가장 크다는 것을 알 수 있었다. DPPH 라디칼 소거능은 에틸아세테이트 분획이 SC₅₀이 67 ug/mL로 나타났고, 메탄올 분획이 SC₅₀은 233 μg/mL로 나타나 에틸아세테이트 분획이 낮은 농도에서 라디칼 소거능을 보였다.
배암차즈기(Salvia plebeia R. Br.)의 총 페놀함량을 정량한 결과 303.6±13.4 μg/g DW의 함량을 보였다(Table 1).
배암차즈기의 DPPH 수소공여능을 측정한 결과는 양성대조구인 아스코르븐산은 6.1 μg/mL의 RC50을, 배암차즈기는 16.9 μg/mL의 RC50을 나타내었다.
01)와 유의한 상관관계를 보였으나 IL-1 β 농도와는 유의한 상관관계를 보이지 않았다. 본 연구결과 항산화 활성이 높은 시료일수록 항염증 효능을 보이는 것으로 분석되었다.
본 연구결과에서도 배암차즈기 용매 분획별 시료 중 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물의 염증성 싸이토카인(TNF-α, PGE2, IL-1β)의 생성이 유의하게 억제되면서 항염증 효과를 증명하였고 기능성 효능 실험에 분획층의 차이를 보여줌으로써 생리활성의 극대화를 위해서는 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물이 항염증의 생리활성을 증가시키는 것으로 나타났다.
본 연구에서도 비슷한 경향성을 보였으나 TNF-α 농도와 PGE2는 유의한 상관관계를 보였다.
Choi 등(2014) 연구에서는 배암차즈기 잎과 뿌리의 에탄올 추출물의 항산화능 지표인 DPPH radical과 ABTS radical 소거능이 시료 추출물 농도에 비례하여 유의적으로 증가함에 따라 활성화 효과가 높은 결과를 보였고, SOD 유사 활성은 잎이 뿌리보다 약 3배 높은 활성을 나타내었다. 본 연구의 결과에서도 항산화 활성능 지표로 총페놀함량, DPPH 라디칼 소거능 및 FRAP 환원능 분석에서 배암차즈기 메탄올 분획과 에틸아세테이트 분획에서 항산화력이 높은 것으로 나타났다. 배암차즈기의 항산화능을 활용하여 기능성 식품소재의 활용가치를 시사하였으며 활성도를 높이기 위해서는 추출물의 분획층을 활용할 수 있는 점을 시사하였다.
4). 이 결과는 배암차즈기 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물의 항염증 효과를 증명하였고 시료를 준비할 때 분획층의 차이를 보여줌으로써 효능의 극대화를 위해서는 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물이 항염증 효과를 증가시키는 것으로 나타났다. 대식세포를 활성화할 수 있는 LPS로 자극된 RAW 264.
또한 배암차즈기 유기용매 분획층 모두에서 활성이 높게 나타났다. 이와 같이 항산화능력으로서 라디칼 소거능을 측정할 수 있는 FRAP 환원능 분석에서 배암차즈기 분획별 항산화력이 높은 것으로 나타났다.
특히 LPS 처리군+EtOAc 분획물(814.3±179.4 μg/mL)과 LPS 처리군+MeOH 분획물(1,032.7±128.1 μg/mL)에서는 통계학적으로 매우 유의하게 감소하였다(p<0.05)(Fig. 2).
특히 LPS 처리군+EtOAc 분획물(839.0±88.3 μg/mL)과 LPS 처리군+MeOH 분획물(1,026.7±154.6 μg/mL)에서는 통계학적으로 매우 유의하게 감소하였다 (p<0.05)(Fig. 4).
Choi 등(2014) 연구에서는 배암차즈기 잎과 뿌리의 에탄올 추출물의 항산화능 지표인 DPPH radical과 ABTS radical 소거능이 시료 추출물 농도에 비례하여 유의적으로 증가함에 따라 활성화 효과가 높은 결과를 보였고, SOD 유사 활성은 잎이 뿌리보다 약 3배 높은 활성을 나타내었다. 본 연구의 결과에서도 항산화 활성능 지표로 총페놀함량, DPPH 라디칼 소거능 및 FRAP 환원능 분석에서 배암차즈기 메탄올 분획과 에틸아세테이트 분획에서 항산화력이 높은 것으로 나타났다. 배암차즈기의 항산화능을 활용하여 기능성 식품소재의 활용가치를 시사하였으며 활성도를 높이기 위해서는 추출물의 분획층을 활용할 수 있는 점을 시사하였다.
항산화효능 지표인 DPPH 라디칼 소거능(SC50)은 FRAP 활성, NO 농도, PGE2 농도 및 TNF-α 농도와는 각각 유의한 상관관계를 나타내었다.

후속연구

Nitric oxide는 iNOS의 생성을 증가시키면서, 염증반응이 활성화되어 reactive oxygen species(ROS)를 생성하게된다(Guzik 등 2003). 염증매개물질이 과량 생성되면 면역반응이 민감하게 일어나면서 질환을 악화시키게 되므로 염증 관련 유전자의 활성도를 억제할 수 있는 소재를 탐구하며 이는 다양한 형태의 질병 양상을 완화시킬 수 있을 것이다. Kim 등(2009)의 연구에서는 길경의 용매분획별 항염증활성을 ethyl acetate층과 butanol층이 항염증 효과가 있음을 보이면서 약성이 강한 분획층을 활용한다면 더욱 향상된 기능성을 보일 것으로 보인다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	배암차즈기 분획물 중 항염증 효능을 보이는 물질은?	본 연구결과 항산화 활성이 높은 시료일수록 항염증 효능을 보이는 것으로 분석되었다. 기능성 효능 실험에 분획층의 차이를 보여줌으로써 생리활성의 극대화를 위해서는 EtOAc 분획물과 MeOH 분획물이 항염증의 생리활성을 증가시키는 것으로 나타났다.
	염증반응의 발병기전은?	염증반응은 면역반응으로, 면역세포가 세균 혹은 바이러스 등에 노출되면 활성화 면역세포에서 염증인자가 발현되면서 염증반응을 보이며(Wang 등 2002), 장기에 영향을 주면서 당뇨, 비만, 암, 심혈관질환, 치매 등에 영향을 준다(Hotamisligil GS 2017). 대식세포가 lipopolysaccharide(LPS) 자극에 의하여 inducible nitric oxide synthase(iNOS)가 발현되면 NO를 생성하면서 염증반응을 보인다(Guzik 등 2003).
	배암차즈기란 무엇인가?	Br.)는 우리나라 전역에 특히, 개울가, 황무지 혹은 길가에 자생하는 꿀풀과(Labiatae)에 속하는 식물이다. 한방에서는 전초를 한약으로 사용하기도 하는데 향이 강하여 여지초, 나인초, 설견초로 명명하며 잎의 모양과 흡사하게 곰보배추 혹은 뱀배추로 불리기도한다(Bae 등 2007; Lim 등 2007).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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