글루코실세라마이드 함유 파인애플과실추출물의 경구 투여가 아토피 피부염 동물모델의 피부 장벽기능 개선에 미치는 효과 Effect of Oral Administration of Pineapple Fruit Extract Containing Glucosylceramide on Skin Barrier Function Improvement in Animal Model of Atopic Dermatitis원문보기
본 연구는 PFEG(글루코실세라마이드 4.0% 함유)가 저 미네랄 특수사료(HR-AD)를 섭취시킨 헤어리스 마우스에서 발생하는 피부장벽 붕괴에 대한 억제작용이 있는지를 확인하고자 하였다. 4주간의 투여를 통해 정상군(Rabo MR Stock)과 비교하여 대조군(HR-AD)에서는 경피 수분 손실량(TEWL)이 서서히 상승하여 피부장벽기능의 붕괴가 발생함과 동시에 표피 수분량 및 각층 수분량도 서서히 저하되는 것이 확인되었다. 육안적으로는 깊은 주름 형성이 확인되었으며 조직학적 소견에서는 표피의 비후와 각화 항진이 확인되었다. 그러나 PFEG를 섭취시킨 시험군에서는 대조군에서 유발되는 피부장벽기능 붕괴에 대한 억제 효과가 확인되었다. 즉, 글루코실세라마이드 0.01% 배합군 및 0.1% 배합군에서는 섭취 시작 2주일째 이후 야기되는 TEWL 상승을 완전히 억제하였다. 또한, 저하되는 표피 수분량, 각층 수분량에 대해서도 유의하게 억제하여 피부 보습 기능을 유지하고 있었다. 육안적으로도 깊은 주름 형성은 억제되었으며, 조직학적인 검토에서도 표피의 비후나 각화 항진은 확인되지 않았다. 이러한 결과는 HR-1 마우스의 피부 세라마이드 생산 개선에 기인한 결과라고 예상된다. 즉, HR-AD 섭취에 의해 HR-1 마우스는 세라마이드를 포함한 피부 지질의 함량 및 구성에 이상이 생기고, 피부 수분량이 급격히 줄어들어 피부 보습 능력이 저하된다. 그런데 PFEG의 혼합 투여는 손상된 피부의 세라마이드 함량 및 구성을 정상과 가깝게 만들어, 대조군에서 나타나는 증상의 발현을 억제하는 것으로 판단된다. 이상의 결과로부터 PFEG의 섭취는 피부장벽기능의 손상으로 발생하는 다양한 피부 수분 손실을 억제함으로써 피부 보습 개선에 우수한 효능이 있음을 알 수 있었다. 따라서 PFEG가 피부 보습에 도움을 주는 건강기능성 원료로서 이용 가능성이 높음을 확인할 수 있다.
본 연구는 PFEG(글루코실세라마이드 4.0% 함유)가 저 미네랄 특수사료(HR-AD)를 섭취시킨 헤어리스 마우스에서 발생하는 피부장벽 붕괴에 대한 억제작용이 있는지를 확인하고자 하였다. 4주간의 투여를 통해 정상군(Rabo MR Stock)과 비교하여 대조군(HR-AD)에서는 경피 수분 손실량(TEWL)이 서서히 상승하여 피부장벽기능의 붕괴가 발생함과 동시에 표피 수분량 및 각층 수분량도 서서히 저하되는 것이 확인되었다. 육안적으로는 깊은 주름 형성이 확인되었으며 조직학적 소견에서는 표피의 비후와 각화 항진이 확인되었다. 그러나 PFEG를 섭취시킨 시험군에서는 대조군에서 유발되는 피부장벽기능 붕괴에 대한 억제 효과가 확인되었다. 즉, 글루코실세라마이드 0.01% 배합군 및 0.1% 배합군에서는 섭취 시작 2주일째 이후 야기되는 TEWL 상승을 완전히 억제하였다. 또한, 저하되는 표피 수분량, 각층 수분량에 대해서도 유의하게 억제하여 피부 보습 기능을 유지하고 있었다. 육안적으로도 깊은 주름 형성은 억제되었으며, 조직학적인 검토에서도 표피의 비후나 각화 항진은 확인되지 않았다. 이러한 결과는 HR-1 마우스의 피부 세라마이드 생산 개선에 기인한 결과라고 예상된다. 즉, HR-AD 섭취에 의해 HR-1 마우스는 세라마이드를 포함한 피부 지질의 함량 및 구성에 이상이 생기고, 피부 수분량이 급격히 줄어들어 피부 보습 능력이 저하된다. 그런데 PFEG의 혼합 투여는 손상된 피부의 세라마이드 함량 및 구성을 정상과 가깝게 만들어, 대조군에서 나타나는 증상의 발현을 억제하는 것으로 판단된다. 이상의 결과로부터 PFEG의 섭취는 피부장벽기능의 손상으로 발생하는 다양한 피부 수분 손실을 억제함으로써 피부 보습 개선에 우수한 효능이 있음을 알 수 있었다. 따라서 PFEG가 피부 보습에 도움을 주는 건강기능성 원료로서 이용 가능성이 높음을 확인할 수 있다.
Glucosylceramides (GluCer) are known to play an important role in both water retention and epidermal permeability barrier function in the mammalian stratum corneum. In this study, we investigated the effects of pineapple fruit extract containing glucosylceramides (PFEG) on the maintenance and recove...
Glucosylceramides (GluCer) are known to play an important role in both water retention and epidermal permeability barrier function in the mammalian stratum corneum. In this study, we investigated the effects of pineapple fruit extract containing glucosylceramides (PFEG) on the maintenance and recovery of skin barrier function using atopic dermatitis-induced animal models. Five-week-old male Hos:HR-1 mice were divided into four groups fed on standard diet, unsaturated fatty acids-deficient (HR-AD) diet, and HR-AD diet supplemented with 0.01% or 0.1% pineapple-GluCer. Skin barrier function was evaluated by transepidermal water loss (TEWL), dermal moisture content, moisture content of the stratum corneum and wrinkle formation. The control group (HR-AD administration group) showed increased transepidermal water loss (TEWL), while the epidermal moisture content and the moisture content of the stratum corneum slowly decreased. However, in the PFEG groups (with 0.1% or 0.01% glucosylceramide), the TEWL levels were significantly reduced at 2 weeks. The PFEG also helped maintain skin moisturizing function by significantly suppressing the decrease of the epidermal moisture content and the moisture content of the stratum corneum. These results show that the PFEG is effective for maintaining and improving the function of the skin barrier. Therefore, this study suggests that PFEG is a potential candidate material for skin functional foods.
Glucosylceramides (GluCer) are known to play an important role in both water retention and epidermal permeability barrier function in the mammalian stratum corneum. In this study, we investigated the effects of pineapple fruit extract containing glucosylceramides (PFEG) on the maintenance and recovery of skin barrier function using atopic dermatitis-induced animal models. Five-week-old male Hos:HR-1 mice were divided into four groups fed on standard diet, unsaturated fatty acids-deficient (HR-AD) diet, and HR-AD diet supplemented with 0.01% or 0.1% pineapple-GluCer. Skin barrier function was evaluated by transepidermal water loss (TEWL), dermal moisture content, moisture content of the stratum corneum and wrinkle formation. The control group (HR-AD administration group) showed increased transepidermal water loss (TEWL), while the epidermal moisture content and the moisture content of the stratum corneum slowly decreased. However, in the PFEG groups (with 0.1% or 0.01% glucosylceramide), the TEWL levels were significantly reduced at 2 weeks. The PFEG also helped maintain skin moisturizing function by significantly suppressing the decrease of the epidermal moisture content and the moisture content of the stratum corneum. These results show that the PFEG is effective for maintaining and improving the function of the skin barrier. Therefore, this study suggests that PFEG is a potential candidate material for skin functional foods.
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문제 정의
따라서 본 연구는 글루코실세라마이드 함유 파인애플 과실추출물(PFEG)의 피부보습 개선을 위한 건강식품 원료로서의 가능성을 평가하였다. 이를 확인하기 위해서 저 무기질 사료 사육의 HR-1 헤어리스 마우스 동물모델을 이용하여, 피부의 경피 수분 손실량(TEWL), 각질층 수분량, 피부의 육안적 및 병리조직학적 검사를 지표로 보습작용과 피부장벽 강화 작용에 대하여 평가하였다.
본 연구는 PFEG(글루코실세라마이드 4.0% 함유)가 저 미네랄 특수사료(HR-AD)를 섭취시킨 헤어리스 마우스에서 발생하는 피부장벽 붕괴에 대한 억제작용이 있는지를 확인하고자 하였다. 4주간의 투여를 통해 정상군(Rabo MR Stock)과 비교하여 대조군(HR-AD)에서는 경피 수분 손실량(TEWL)이 서서히 상승하여 피부장벽기능의 붕괴가 발생함과 동시에 표피 수분량 및 각층 수분량도 서서히 저하되는 것이 확인되었다.
. 본 연구에서는 사전연구가 진행된 파인애플 유래의 글루코실세라마이드가 함유된 파인애플 과실추출물의 in vitro 연구결과를 토대로 in vivo 실험을 진행하여, 피부보습에 도움을 주는 피부 미용 소재로서의 가능성을 확인하고자 하였다.
아토피 피부의 표피층은 정상 피부보다 두꺼워져 있으며 동시에 피부 자극인자에도 민감한 것으로 보고되고 있다26). 본 연구에서는 아토피 피부염 모델 마우스(HR-1)에서 파인애플 유래 글루코실세라미이드의 효과를 확인하고자 하였다.
피부 장벽기능 이상을 가장 쉽게 측정하는 방법으로는 경피 수분손실량(TEWL)의 증가 및 수분도의 소실이며 이는 여러 가지 피부장벽의 기능 중 가장 중요한 수분 유지의 기능이 손상되었다고 볼 수 있다. 본 연구에서는 피부의 수분을 유지하고 손실량을 최소화하는지를 측정함으로써 시험 군에서의 피부장벽기능이 유지되는지를 확인하였다.
제안 방법
Weight changes by groups. Hairless mice were divided into four groups and were fed a normal diet (Labo MR stock), a control diet (HR-AD), or HR-AD supplemented with 0.01%(w/w), 0.1%(w/w) pineapple glucosylceramide for 4 weeks. At 0, 1, 2, 3, and 4 weeks, the weight of each mouse in groups was
군별로 헤어리스 마우스의 등 쪽을 현미경(DIGITAL MICROSCOPE KE-1300, Hirox Co., Ltd., Tokyo, Japan)을 이용하여 촬영하였다.
비장을 적출하였다. 또 헤어리스 마우스의 등 피부에 대하여는 동물을 희생시킨 후 등 쪽 피부를 떼어내어 (1×1cm), filter paper에 편평하게 부착한 후 10% 중성 포르말린에 고정시킨 다음 일반적인 조직 처리 과정을 거쳐 파라핀 포매하여 4µm 절편을 잘라 H&E (hematoxylin & eosin) 염색을 실시하였다.
본 시험 기간 동안 1일 1회 임상 증상의 변화 및 사망 여부를 관찰하였다. 체중 측정은 시험에 사용된 모든 동물에 대하여 시험 시작 전, 시험 기간 중 주 1회 실시하였다.
피부장벽은 외부로부터 피부를 보호해주고 체내의 수분이 소실되지 않도록 방어하는 역할을 한다. 본 연구에서는 대조군 마우스들에게 HR-AD를 섭취시킴으로써 피부 장벽기능 저하를 유도하였다. 그러나 파인애플 유래 글루코실세라마이드가 0.
체중 측정은 시험에 사용된 모든 동물에 대하여 시험 시작 전, 시험 기간 중 주 1회 실시하였다. 사육 상자별로 당일 사료와 음수의 급여 총량과 익일 잔량을 매주 1회 측정하였다.
실험 기간 중 식이는 4℃에서 보관하였다. 사육실의 온도는 23±3℃, 상대습도 55±15%, 상시 올후레쉬 방식 환기, 오전 6시부터 오후 6시까지 12시간/일 조명하였으며, 플라스틱 케이지에서 4마리씩 사육하였다. 식이 군은 정상군(Normal), 대조군(Control), 시험군1(0.
사육실의 온도는 23±3℃, 상대습도 55±15%, 상시 올후레쉬 방식 환기, 오전 6시부터 오후 6시까지 12시간/일 조명하였으며, 플라스틱 케이지에서 4마리씩 사육하였다. 식이 군은 정상군(Normal), 대조군(Control), 시험군1(0.01% GluCer) 과시험군2(0.1% GluCer)로 총 4군으로 나누어 사육하였다. 정상군은 일반배합사료 Rabo MR Stock, 대조군은 저미네랄식 특수사료 HR-AD (Nosan Co.
실험물질의 유효성 검토는 정상군(Rabo MR Stock)과 대조군(HR-AD)의 분산분석을 통해 피부장벽 붕괴 모델을 검토하였다. 유의한 차이가 있었을 경우, 대조군(HR-AD)와 시험군(PFEG 배합군)에서 Bonfferoni/Dunn의 다중비교 검정을 하고, 이때 P값이 0.
, Kyoto, Japan)에서 구입하여 사용하였다. 실험식이 시작 전 일주일간 일반배합사료 Rabo MR Stock(Nosan Co., Yokohama, Japan)으로 예비 사육한 후 평균 체중이 유사하도록 난괴법(randomized complete block design)에 의해 대조군과 실험군으로 나눈 후 4주간 사육하였다. 실험 기간 중 식이는 4℃에서 보관하였다.
또한 파인애플에서 분리한 순수한 파인애플 글루코실세라마이드(P-GluCer)를 가지고 피부장벽기능 개선에 관한 메커니즘 연구가 수행되었다. 이 연구에서는 헤어리스 마우스에 HR-AD 식이 모델로 표피 수분 손실과 주름을 유도하였으며, 이를 실험군인 P-GluCer을 동시에 투여한 마우스군과 비교하였다. 그 결과로 HR-AD 식이에 P-GluCer을 동시 투여함으로써 소장 내의 사이토카인인 Il23a의 발현이 증가함을 확인하였고15), 피부장벽기능 약화 시 발생하는 TGF-β와 Hydroxy proline (피부 주름 생성의 원인인 콜라겐 생성 지표)이 P-GluCer을 함께 섭취시킴으로써 정상으로 회복되는 것을 확인하였다16).
가능성을 평가하였다. 이를 확인하기 위해서 저 무기질 사료 사육의 HR-1 헤어리스 마우스 동물모델을 이용하여, 피부의 경피 수분 손실량(TEWL), 각질층 수분량, 피부의 육안적 및 병리조직학적 검사를 지표로 보습작용과 피부장벽 강화 작용에 대하여 평가하였다.
조직 준비를 위해 펜토발비탈 마취 하에 채혈하고, 간장과 비장을 적출하였다. 또 헤어리스 마우스의 등 피부에 대하여는 동물을 희생시킨 후 등 쪽 피부를 떼어내어 (1×1cm), filter paper에 편평하게 부착한 후 10% 중성 포르말린에 고정시킨 다음 일반적인 조직 처리 과정을 거쳐 파라핀 포매하여 4µm 절편을 잘라 H&E (hematoxylin & eosin) 염색을 실시하였다.
주름 개선 효과의 판정을 위해 4주간의 주름 선 유발 후 헤어리스 마우스의 등 피부를 육안 관찰하였다. 군별로 헤어리스 마우스의 등 쪽을 현미경(DIGITAL MICROSCOPE KE-1300, Hirox Co.
관찰하였다. 체중 측정은 시험에 사용된 모든 동물에 대하여 시험 시작 전, 시험 기간 중 주 1회 실시하였다. 사육 상자별로 당일 사료와 음수의 급여 총량과 익일 잔량을 매주 1회 측정하였다.
피부의 보습 능력을 판정하기 위해 헤어리스 마우스 등 피부의 경피 수분 손실량(TEWL)을 Tewameter TM300(Courage+Khazaka electronic GmbH, Colongue, Germany)을 이용하여 무마취 구속하에 매주 측정하였다.
피부의 보습 능력을 판정하기 위해 헤어리스 마우스 등 피부의 피부 수분량을 Corneometer CM 825 (Courage + Khazaka electronic GmbH, Colongue, Germany)와 SKICON-200EX (IBS Ltd., Ebina, Japan)을 이용하여 무마취 구속하에 매주 측정하였다.
. 헤어리스 마우스의 피부를 SDS 처리함으로써 마우스 피부의 표피 수분 손실을 유도하고 곤약 유래의 순수한 글루코실세라마이드를 섭취한 마우스와 비교하였다. SDS 처리를 한 마우스에서 마이크로 어레이로 평가된 mRNA의 발현 비율을 확인한 결과, 글루코실세라마이드의 경구 투여가 각질화된 외피 및 밀착연접 형성(cornified envelope and tight junction formation)과 관련된 유전자를 상향 조절하고13), 건조 피부와 SDS 처리 시 증가하는 사이토카인인 IL-1α를 현저히 낮춤으로써 피부장벽기능을 향상시킨다고 보고하였다14).
대상 데이터
본 실험에 사용된 동물은 4주령의 수컷 헤어리스 마우스(Hos: HR-1)를 시미즈 실험재료 주식회사(Shimizu Laboratory Supplies Co., Ltd., Kyoto, Japan)에서 구입하여 사용하였다. 실험식이 시작 전 일주일간 일반배합사료 Rabo MR Stock(Nosan Co.
본 실험에 사용된 파인애플은 태국에서 재배된 파인애플을 사용하였다. 시험물질인 파인애플과실추출물은 파인애플껍질을 제거한 파인애플 과육에 중량 대비 10배의 에탄올을 가하여 80℃에서 2시간 환류 추출하여 얻은 엑기스를 감압 농축하여 건조한 분말이다.
시험물질인 파인애플과실추출물은 파인애플껍질을 제거한 파인애플 과육에 중량 대비 10배의 에탄올을 가하여 80℃에서 2시간 환류 추출하여 얻은 엑기스를 감압 농축하여 건조한 분말이다. 시험에는 4% 글루코실세라마이드를 함유하고 있는 파인애플과실추출물(PFEG)을 사용하였다.
데이터처리
유의한 차이가 있었을 경우, 대조군(HR-AD)와 시험군(PFEG 배합군)에서 Bonfferoni/Dunn의 다중비교 검정을 하고, 이때 P값이 0.05 미만이면 '유의하다'고 판정하였다.
성능/효과
0% 함유)가 저 미네랄 특수사료(HR-AD)를 섭취시킨 헤어리스 마우스에서 발생하는 피부장벽 붕괴에 대한 억제작용이 있는지를 확인하고자 하였다. 4주간의 투여를 통해 정상군(Rabo MR Stock)과 비교하여 대조군(HR-AD)에서는 경피 수분 손실량(TEWL)이 서서히 상승하여 피부장벽기능의 붕괴가 발생함과 동시에 표피 수분량 및 각층 수분량도 서서히 저하되는 것이 확인되었다. 육안적으로는 깊은 주름 형성이 확인되었으며 조직학적 소견에서는 표피의 비후와 각화 항진이 확인되었다.
아토피 피부염은 피부 장벽기능이 손실되었을 때 나타나는 대표적인 증상이다. PFEG가 배합된 시험군을 섭취한 헤어리스 마우스에서는 이러한 증상이 관찰되지 않는 것으로 보아, PFEG가 피부 장벽기능 강화에 우수한 효과가 있는 것으로 사료된다. 이러한 피부 장벽기능이 강화되면 피부의 수분이 유지되고 피부 보습이 개선되어 건강한 피부를 만들 수 있다.
7과 Table 6에 표기하였다. 각질층의 수분량은 대조군(HR-AD 섭취)에서 유의하게 감소되는 것을 확인하였다. 그러나 PFEG가 배합된 시험군에서는 대조군에서 발생한 각질층 수분량 저하를 억제하는 유의한 작용이 확인되었다.
피부 수분량은 2주 후부터 대조군(HR-AD 섭취)에서 감소되는 것이 확인되었다. 그러나 PFEG가 배합된 시험군1 및 2에서는 대조군에서 발생한 피부 수분량 저하를 억제하는 유의한 작용이 확인되었다.
각질층의 수분량은 대조군(HR-AD 섭취)에서 유의하게 감소되는 것을 확인하였다. 그러나 PFEG가 배합된 시험군에서는 대조군에서 발생한 각질층 수분량 저하를 억제하는 유의한 작용이 확인되었다. 특히 파인애플 유래 글루코실세라마이드가 0.
육안적으로는 깊은 주름 형성이 확인되었으며 조직학적 소견에서는 표피의 비후와 각화 항진이 확인되었다. 그러나 PFEG를 섭취시킨 시험 군에서는 대조군에서 유발되는 피부장벽기능 붕괴에 대한 억제 효과가 확인되었다. 즉, 글루코실세라마이드 0.
본 연구에서는 대조군 마우스들에게 HR-AD를 섭취시킴으로써 피부 장벽기능 저하를 유도하였다. 그러나 파인애플 유래 글루코실세라마이드가 0.01% 및 0.1% 배합된 혼합사료를 섭취시킨 시험군은 경피 수분 손실량의 증가억제, 피부 수분량과 각질층 수분량이 정상군과 유사하게 유지되는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 PFEG가 저미네랄식특수사료인 HR-AD에 의해서 유발되는 피부장벽기능 악화를 유효하게 억제한다고 사료된다.
9에 각각 나타냈다. 대조군(HR-AD 섭취군)에서는 표피의 비후나 각화 항진이 나타났으나 파인애플 유래 글루코실세라미드가 0.01%와 0.1% 배합된 시험군에서는 표피의 비후나 각화 항진은 확인되지 않았으며 정상군과 같은 소견을 보였다.
이상의 결과로부터 PFEG의 섭취는 피부장벽기능의 손상으로 발생하는 다양한 피부 수분 손실을 억제함으로써 피부 보습 개선에 우수한 효능이 있음을 알 수 있었다. 따라서 PFEG가 피부 보습에 도움을 주는 건강기능성 원료로서 이용 가능성이 높음을 확인할 수 있다.
1% 배합군에서는 섭취 시작 2주일째 이후 야기되는 TEWL 상승을 완전히 억제하였다. 또한, 저하되는 표피 수분량, 각층 수분량에 대해서도 유의하게 억제하여 피부 보습 기능을 유지하고 있었다. 육안적으로도 깊은 주름 형성은 억제되었으며, 조직학적인 검토에서도 표피의 비후나 각화 항진은 확인되지 않았다.
4에 나타내었다. 모든 실험동물은 시험 기간에 지속적으로 체중이 증가하여 정상적인 체중 변화를 나타내었다. 시험물질을 투여하지 않은 정상군, 대조군과 시험물질을 투여한 시험군1 및 2의 체중은 유의적인 차이를 나타내지 않았다.
1% 배합된 혼합사료를 섭취시킨 시험군은 경피 수분 손실량의 증가억제, 피부 수분량과 각질층 수분량이 정상군과 유사하게 유지되는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 PFEG가 저미네랄식특수사료인 HR-AD에 의해서 유발되는 피부장벽기능 악화를 유효하게 억제한다고 사료된다.
그런데 PFEG의 혼합 투여는 손상된 피부의 세라마이드 함량 및 구성을 정상과 가깝게 만들어, 대조군에서 나타나는 증상의 발현을 억제하는 것으로 판단된다. 이상의 결과로부터 PFEG의 섭취는 피부장벽기능의 손상으로 발생하는 다양한 피부 수분 손실을 억제함으로써 피부 보습 개선에 우수한 효능이 있음을 알 수 있었다. 따라서 PFEG가 피부 보습에 도움을 주는 건강기능성 원료로서 이용 가능성이 높음을 확인할 수 있다.
이상의 실험 결과 PFEG가 아토피 피부염 모델 마우스 (HR-1)에서 발생되는 피부 주름과 피부 두께 증가를 억제함을 확인할 수 있었다. 아토피 피부염은 피부 장벽기능이 손실되었을 때 나타나는 대표적인 증상이다.
그러나 PFEG를 섭취시킨 시험 군에서는 대조군에서 유발되는 피부장벽기능 붕괴에 대한 억제 효과가 확인되었다. 즉, 글루코실세라마이드 0.01% 배합군 및 0.1% 배합군에서는 섭취 시작 2주일째 이후 야기되는 TEWL 상승을 완전히 억제하였다. 또한, 저하되는 표피 수분량, 각층 수분량에 대해서도 유의하게 억제하여 피부 보습 기능을 유지하고 있었다.
6과 Table 5에 나타내었다. 피부 수분량은 2주 후부터 대조군(HR-AD 섭취)에서 감소되는 것이 확인되었다. 그러나 PFEG가 배합된 시험군1 및 2에서는 대조군에서 발생한 피부 수분량 저하를 억제하는 유의한 작용이 확인되었다.
5와 Table 4에 표기하였다. 피부장벽기능의 지표가 되는 경피 수분 손실량(TEWL)은 HR-AD를 섭취시킨 대조군의 경우에 서서히 상승하여 2주째 이후부터 유의하게 수분손실량이 증가되었다. 그러나 PFEG가 혼합된 시험군들은 2주 이후 4주까지도 정상군과 유사한 TEWL이 관찰되었다.
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