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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 식용곤충인 갈색거저리 유충 추출물의 total phenolics와 total flavonoid 등 산화방지 성분의 함량을 측정하고 여러 방법에 의한 산화방지 활성을 확인하여 갈색거저리 유충을 건강기능식품 소재로 활용하기 위한 가능성을 확인하고자 하였다.
제안 방법
- 2, 2'-Azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical 소거 활성은 Kim 등의 방법을 응용하여 측정하였다. 즉, 7.
- 2) 으로 조정하여 준비한다. ABTS 용액 2.85mL와 추출물 0.15mL를 혼합하고 실온 암소에 30분간 반응시킨 후 UV- vis spectrophotometer (UV-1650PC, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 이용하여 734nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조 구로는 BHT를 사용하였다.
- DPPH 라디칼 소거능은 Braca 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 즉, 시험관에 추출물 1mL와 0.
- 페놀성 화합물은 항산화 효과 등 다양한 기능을 갖는 것으로 알려져 있으며, 함량이 증가할수록 항산화 활성 또한 증가하는 경향을 나타낸다 . 갈색거저리 유충의 ethanol 농도별 추출물을 이용하여 총 phenolic compounds 함량을 측정하였다(Fig. 1). Ethanol (50%) 추출물의 총 phenolic compounds 함량은 459.
- 갈색거저리 유충의 기능성 성분을 추출하기 위해 식품에서 특정한 성분을 추출하는데 사용할 수 있는 물과 ethanol 을 농도별(95%, 70%, 50%, 0%)로 사용하였다. 즉, 동결건조한 갈색거저리 유충 분말 5g에 100mL의 용매를 각각 가한 후 25 C에서 24시간 교반(150 rpm)하여 기능성 성분을 추출하였다.
- 15mM DPPH 용액 3mL를 가하고 혼합하였다. 실온 암소에서 30분 동안 방치하고 UV-vis spectrophotometer (UV-1650PC, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조구로는 2, 6-di-tert-butyl-4-methylphenol (BHT) 를 사용하였다 .
- 즉, 동결건조한 갈색거저리 유충 분말 5g에 100mL의 용매를 각각 가한 후 25 C에서 24시간 교반(150 rpm)하여 기능성 성분을 추출하였다. 추출 후 여과지(Whatman No.
대상 데이터
- 2019년에 MG네츄럴(Damyang, Korea)에서 갈색거저리 유충(약 3.5-4.0 cm 크기)을 구입하여 정제수로 세척하고,o o-80 C에서 24시간 동안 두어 희생하였으며 -45 C에서 동결 건조 후 분쇄하여 -80 C에서 보관하면서 시료로 사용하였다. 시험에 사용한 ethanol, Folin-Denis’s phenol 용액, sodium carbonate, gallic acid, aluminium nitrate, potassium acetate, quercetin, 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, 2, 6-di- tert-butyl-4-methylphenol, potassium persulfate, phosphate buffer, 2, 2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) diammonium salt, potassium ferricyanide, trichloroacetic acid 등은 Sigma-Aldrich Co.
- 여기에 10% trichloroacetic acid 1mL를 첨가하여 혼합한 후 원심분리기 (HA-1000-3, Hanil, Daejeon, Korea)로 13, 500×g에서 15분간 원심분리하였다. 상층액 1mL와 증류수 1mL, ferric acid 1mL를 넣고 혼합한 후 UV-vis spectrophotometer (UV- 1650PC, Shimadzu Co., Kyoto, Japan)를 이용하여 700 nm에서 흡광도를 측정하였고 , 대조구로는 BHT를 사용하였다.
- 0 cm 크기)을 구입하여 정제수로 세척하고,o o-80 C에서 24시간 동안 두어 희생하였으며 -45 C에서 동결 건조 후 분쇄하여 -80 C에서 보관하면서 시료로 사용하였다. 시험에 사용한 ethanol, Folin-Denis’s phenol 용액, sodium carbonate, gallic acid, aluminium nitrate, potassium acetate, quercetin, 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, 2, 6-di- tert-butyl-4-methylphenol, potassium persulfate, phosphate buffer, 2, 2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) diammonium salt, potassium ferricyanide, trichloroacetic acid 등은 Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA) 로부터구입하여 사용하였다.
데이터처리
- 모든 실험은 3회 반복 측정하였으며, 결과는 SAS (Statistical analysis system ver. 6, SAS Institute, Cary, NC,25)USA) 통계 package 를 이용하여 평균 및 표준편차를 구했으며, ANOVA 분석 및 Duncan’s multiple rage test로 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- 수분함량은 AOAC법 에 준하여 105 C 상압 가열건조법으로 측정하였고, 조단백질은 semi-Kjeldahl법, 조회분eo 3)550 C 회화법, 조지방은 soxhlet 추출법으로 분석하였다 .
- 총 flavonoid 함량은 질산알루미늄 검사법으로 측정하였 . 즉, 추출물0.
- 총 phenolic compounds는 Folin-Denis’s phenol 방법으로 측정하였다. 즉, 추출물 0.
성능/효과
- 4와 같다. Ethanol (50%) 추출물과 물 추출물의 ABTS radical 소거 활성은 각각 97.57 ± 0.16%와 95.33 ± 0.41%를 나타내 유의적 차이는 없었으며, 그 다음 70% ethanol 추출물이 66.39 ± 3.37%, 95% ethanol 추출물이 50.41 ± 3.51%로써 ethanol 농도가 높아질수록 소거 활성이 감소하였다. 대조 구인 BHT (0.
- 1). Ethanol (50%) 추출물의 총 phenolic compounds 함량은 459.23 ± 1.05 mg%으로 추출물 중 유의적으로 가장 높게 나타났으며, 물 추출물 362.62 ± 3.62mg%, 70% ethanol 추출물 335.75 ± 6.96mg%, 95% ethanol 추출물 103.82 ± 0.84mg% 순이었다.
- 3과 같다. Ethanol (70%) 추출물의 DPPH radical 소거 활성은 82.60 ± 0.00% 로써 대조구인 BHT (0.3 mg/mL) 처리구의 77.95 ± 0.78% 보다 높게 나타났으며, 물 및 50% ethanol 추출물은 각각 74.15 ± 1.54%, 65.00 ± 0.17%를 나타내었다. Ethanol (95%) 추출물은 16.
- 33%이었다(data not shown). 동결건조한 갈색거저리 유충의 일반성분(Table 1)은 수분함량 0.80 ± 0.06%, 조회분 3.29 ± 0.03%, 조단백질 54.07 ± 0.24%, 조지방 36.78 ± 0.66%로 분석되었다. Yoo4)의 연구에서는 국산 갈색거저리 유충의 일반성분이 수등분 2.
- 2와 같다. 물 추출물의 총 flavonoids 함량이 19.86 ± 0.69 mg%으로 가장 높았고, 95% ethanol 추출물 16.85 ± 0.79 mg%, 70% ethanol 추출물 8.44 ± 0.00, 50% ethanol 추출물 8.33 ± 0.15 mg% 순으로 나타났다. Jang 등은 발효한 갈색거저리 물추출물의 총 flavonoid 함량이 2.
- 5와 같다. 물 추출물의 흡광도(OD700nm)는 1.589 ± 0.02로 유의적으로 가장 높은 환원력을 나타내었고, 50% ethanol, 70% ethanol, 95% ethanol 추출물의 흡광도는 각각 1.529 ± 0.01, 1.020 ± 0.02, 0.248 ± 0.00으로 나타나 ethanol 농도가 높을 수록환원력이 감소하여 ABTS radical 소거 활성 시험의 결과와 비슷한 경향을 나타내었다. 물 추출물과 50% ethanol 추출물의 환원력은 대조구(BHT 0.
- 본 연구결과 갈색거저리 유충은 총 phenolic compounds 와 총 flavonoids 등 산화방지 성분을 많이 함유하고 있었으며, 다양한 방법에 의해 측정한 산화방지 활성이 우수함을 확인하였다.
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