[논문]인체적용시험을 통한 홍삼기반 'SSR'이 인체 피로도 감소 및 혈액성분 변화에 미치는 영향분석

신경섭; 이홍기; 박선미

doi:10.9799/ksfan.2021.34.2.196

[국내논문] 인체적용시험을 통한 홍삼기반 'SSR'이 인체 피로도 감소 및 혈액성분 변화에 미치는 영향분석
Analysis of the Effects of Red Ginseng Ingredient-based 'SSR' in Decreasing Fatigue and Inducing Changes in Blood Composition through a Clinical Trial 원문보기

한국식품영양학회지 = The Korean journal of food and nutrition, v.34 no.2, 2021년, pp.196 - 206

신경섭 (효산의료재단 세포유전자치료연구소) , 이홍기 (지샘병원 암센터 혈액종양외과) , 박선미 (서울장신대학교 자연치유선교대학원)

Abstract ▼ AI-Helper

The main purpose of this study was to examine the correlation between the consumption of red ginseng-based 'SSR' for 30 days and the reduction in human fatigue, blood component changes, and immune cell activity in 35 human subjects. 'SSR' is composed of zinc oxide, folic acid, and D-α-tocopherol with red ginseng as the main component. According to the protocol criteria of the study, 35 subjects who understood the purpose of the study and signed an informed consent form were selected. The fatigue survey was conducted through a questionnaire, and after taking 'SSR', a decreased tendency of physical, mental, and neurosensory fatigue was observed. In hematological analysis, no significant changes were observed in the levels of WBC, RBC, and hemoglobin; however, AST (SGOT) and ALT (SGPT) levels were statistically significantly decreased. In immunological analysis, it was observed that the proliferative effect of T cells (CD3+CD4+) was greater than that of NK cells (CD16+CD56+). The collected data were subjected to t-test analysis using the SPSS 25.0 statistical program. The result from this study proposes that 'SSR' can be used as a functional food material as it reduces human fatigue and enhances immune function.

주제어

표/그림 (12)

표 Table 1. Functional food raw materials and main func-tional ingredients of 'SSR'
그림 Fig. 1. SSR composition and manufacturing method process chart. Manufacturing process diagram of 'SSR' and constituent ingredients of SSR.
표 Table 2. CBC analysis: Reference ranges of WBC, RBC, Hb, AST/ALT as biomarkers
표 Table 3. CBC analysis: Reference ranges of Biomarkers (CD3+T cell, CD4+helper T cell, CD16+CD56+NK cell)
그림 Fig. 2. Comparison of fatigue awareness symptoms. Before and after 'SSR' intake, fatigue awareness symptoms were compared by classifying them into physical, mental and neurological and sensory symptoms. The physical symptom mean (standard deviation: SD) before and after 'SSR' intake is 1.75 (.45) and 1.61 (.38), (p=0.018, p<0.05), mental symptoms 1.67 (.43) and 1.52 (.46) and (p=0.027, p< 0.05). The neurosensory symptoms were reduced to 1.61 (.41) and 1.50 (.36), (p=0.009, p<0.05) respectively, and this result was statistically significant. Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~50: n=13 (37.1%), 50~ 60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].
표 Table 4. Demographic and General Characteristics of Clinical trial human subjects (N=35)
그림 Fig. 3. Changes in WBC and RBC before and after 'SSR' intake. Leukocyte and red blood cells had certain levels lowered within the normal range. Leukocyte showed mean 5.94 (SD: 1.81) before ingestion and 5.38 (1.72) after ingestion, which was not statistically significant (p=0.072, p>0.05). Red blood cells showed very slight numerical changes with 4.88 (1.77) and 4.88 (1.76), which were not statistically significant (p=0.880, p>0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~50: n=13 (37.1%), 50~60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].
그림 Fig. 4. Comparison of hemoglobin(Hb) and AST/ALT changes before and after 30 days of 'SSR' intake. As a result of comparing Hb levels before and after 'SSR' intake, it was found to be 14.22 g/dL (1.42) and 14.31 g/dL (1.47), respectively, indicating that Hb levels increased after 'SSR' intake, but were not statistically significant (p=0.360, p> 0.05). The comparison of the AST figures before and after 'SSR' intake showed 29.00 IU/L (10.28) and 26.00 IU/L (9.89) respectively, which were statistically significant(p= 0.048, p<0.05). Measurements of ALT in the same way showed 25.46 IU/L (18.02) before ingestion and 23.20 IU/L (13.43) after ingestion, indicating lower postmortem readings, which were statistically significant (p=0.044, p<0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~50: n=13 (37.1%), 50~60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].
그림 Fig. 5. Comparison of changes in CD16+CD56+NK cells before and after 'SSR' intake. It was found that the levels of CD16+CD56+NK cells decreased after ingestion. The mean percentage and standard deviation of NK cells in the subject's blood before 'SSR' ingestion were 15.47 and 9.13 and after 'SSR' intake were 11.59 and 6.56, respectively. This result was statistically significant (p=0.003, p<0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~ 50: n=13 (37.1%), 50~60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].
그림 Fig. 6. Comparison of changes in NK cell activity before and after 'SSR' intake. NK cell activity before and after ‘SSR’ intake was measured. Mean and standard deviation were 1,358.98, 664.69 before ingestion and 1,195.09, 680.64 after ingestion respectively, indicating that the level of NK cell activity decreased after ingestion, but this result was not statistically significant (p=0.113, p>0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~ 50: n=13 (37.1%), 50~60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].
그림 Fig. 7. Comparison of changes in CD3+T cells before and after 'SSR' intake. The amount of change in CD3+T cells before and after 'SSR' intake for 30 days was measured. Mean and standard deviation were found to be 69.11, 9.89 before ingestion and 78.79, 7.19 after ingestion respectively, indicating that the proliferation level of CD3+ T cells in the blood increased after ingestion of 'SSR' for 30 days, and this result was statistically significant(p=0.000, p<0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~ 50: n=13 (37.1%), 50~60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].
그림 Fig. 8. Comparison of changes in CD4+T cells before and after 'SSR' intake. The measurement of CD4+T cell changes before and after 'SSR' intake showed mean 42.45, standard deviation 8.00 and 50.10 (SD: 8.13) respectively, indicating an increase in the number of CD4+ T cells after 'SSR' intake, which was statistically significant(p=0.000, p< 0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.7%), female: n=12 (34.3%)], Age (year): [≤30~40: n=10 (28.6%), 40~ 50: n=13 (37.1%), 50~60: n=10 (28.6%), ≥60: n=2 (5.7%)].

AI 본문요약
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문제 정의

일반적으로 동물과 사람은 종간 생리-대사 및 유전적 차이로 인하여 실험적인 측면에서 동일한 결과로 이어지지 않는 사례가 많이 보고 되고 있어 인체적용시험을 통해 식품소재의 다양한 기능성과 유효성을 확인하는 것이 중요하다(Ryu HS 2020). 본 인체적용시험에서는 홍삼기반의 ‘SSR’ 섭취가 인체 내 피로자각 증상 완화와 혈액 성분 및 면역세포 활성 변화에 미치는 영향을 조사하여 건강 증진 관련 식품소재 개발에 기초자료를 제공하고자 하였다. 유효성 평가를 위한 바이오마커로서 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(hemoglobin), 아스파테이트아미노전이효소(Aspartate aminotransferase, AST), 알라닌아미노전이효소(Alanine aminotransferase, ALT)의 변화를 혈액학적 측면에서 분석하였으며, 식품 소재의 배합과 면역세포 활성도와의 상관관계를 T세포, NK세포, NK세포 활성도 조사를 통해 확인하였다.
이와는 달리 눈가림 되지 않는 절차는 공개(open label)시험이다(Jo 등 2018). 본 인체적용시험은 비교약물의 선택과 유효성 평가를 위해 질병치료 효과에 관한 시험대상자의 보호 및 규제 요건을 적절히 통제하는 중재연구(interven- tional study)가 아닌 식품소재를 일정기간 섭취 후 혈액학 및 면역학적 측면에서의 변화를 동일한 피험자에서 관찰하기 위한 시험으로 구성되었다. 본 연구를 진행하기 위해 인체적용시험 자료 참조와 임상시험심의위원회(IRB)의 조언을 참고하여 플래시보 효과 검증을 위한 비교 대조 식품소재 선정의 어려움과 이중맹금이 필요하지 않을 것으로 판단되어 관찰연구(observational study)로 진행하였으며, 추후 인체적용시험 대상자수 확대 및 ‘SSR’ 성분 변화에 관한 시험 시 이중맹검, 플래시보 평가를 수행할 예정이다.
유효성 평가를 위한 바이오마커로서 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(hemoglobin), 아스파테이트아미노전이효소(Aspartate aminotransferase, AST), 알라닌아미노전이효소(Alanine aminotransferase, ALT)의 변화를 혈액학적 측면에서 분석하였으며, 식품 소재의 배합과 면역세포 활성도와의 상관관계를 T세포, NK세포, NK세포 활성도 조사를 통해 확인하였다. 이에 본 연구는 천연식품 소재로부터 조혈작용을 통한 인체 혈액 성분변화와 면역세포 활성에 미치는 영향을 확인함으로써 식품의 기능성 가치를 평가하고 향후 의약품 대체식품의 개발과 제품화를 위한 기초 자료로 활용 하고자 하였다.
홍삼 기반의 식품소재 ‘SSR’ 850 mg을 30일 동안 연구대상자가 섭취한 후 섭취 전과의 변화를 설문지 조사를 통한 피로도 감소효과, 채혈을 통한 혈액 성분 변화 및 면역세포 증식 정도를 확인하는 것으로 ‘SSR’의 섭취가 인체적용시험 참여자의 인체 피로도 감소 및 혈액 내 다양한 성분들과 면역세포들의 변화에 미치는 영향을 조사하기 위한 연구이다. 연구 분류상 본 인체적용시험은 인간대상 연구, 전향적 연구, 기타 관찰연구로 분류되어 진행되었다.

제안 방법

본 시험의 주요 바이오마커 NK cell(CD16+CD56+), T cell(CD3+), helper T cell(CD4+)에 대한 분석은 Beckman Coulter, Inc.(Indianapolis, IN, USA) 유세포분석기 Navios EX flow cytometer를 이용하여 진행하였다. 선천성면역능과 종양면역능을 간접적으로 평가할 수 있는 NK세포 활성도 검사는 혈액 내 NK세포를 자극인자를 통해 특이적으로 활성화시킨 후 NK세포로 부터 분비되는 인터페론 감마(IFN-γ)의 양을 효소결합면역흡착검사(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) 방법으로 측정하여 NK세포의 활성도를 정량화하였으며 측정장비로는 Tecan Trading AG.
1차 및 2차 농축 과정 후 80~85℃에서 30~40분간 살균과정을 시행하였으며 두 차례의 분리여과(1차: 40 mesh, 2차: 60 mesh)를 실시한 다음 분무 건조 후 본 시험의 시료로 사용하였다.
본 연구 참여자는 ‘SSR’ 850 mg을 하루 1회, 30일 동안 섭취하였으며, 자가섭취기록서(SSR taking report form)에 일일 섭취 유무 및 특이사항을 기록하도록 하였다. 유효성 평가는 두 번의 채혈 시행과 함께 세 가지 측면에서 비교 분석하였다.
검사항목에 따른 참고치는 연령, 성별, 국가, 거주지역에 따라 달라지고 사용하는 검사장비 또는 검사 방법에 따라서도 차이가 날 수 있으며, 정상치(normal value)도 엄밀히 말해서 하나의 참고치 혹은 범위(reference value/range)로 볼 수 있다(Park SK 2010). 본 연구에서는 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(Hb)을 주요 검사항목으로 정하여 조사하였으며 기타 혈액성분으로 ALT와 AST수치 변화를 검사하였다. 전체 백혈구에서 림프구가 차지하는 기준 비율은 대략 20~45% 정도이며 이들의 수치가 가지는 임상적 의미는 림프구 증가증(lymphocytosis)과 림프구 감소증(lymphocytopenia) 상태를 진단하여 인체 감염증과 특정 질환을 진단하는 지표로 이용되고 있다.
본 인체적용시험에서 진행된 모든 과정들과 행위들은 인간의 존엄과 가치를 침해하지 않는 방식으로 진행하였으며, 연구대상자의 인권과 복지를 우선적으로 고려되도록 하였다. 특히 연구대상자의 자율성을 존중하여 연구에 대한 충분한 정보를 제공함으로써 자발적인 동의를 취득하였으며, 연구대상자 등의 사생활 보호를 위하여 사생활을 침해할 수 있는 개인정보는 당사자가 동의하거나 법률에 특별한 규정이 있는 경우를 제외하고는 비밀로서 보호되었다.
선행연구에서 신뢰도가 검증된 설문지를 사용하여 대면조사방법을 통해 피로도 검사를 진행하였다. 본 인체적용시험에 사용된 피로측정도구는 1988년 일본 산업위생학회 산업피로 연구회(Japan Industrial Hygiene Association Industrial Fatigue Research Committee, 1970)가 표준화시킨 피로 자각증상조사표(subjective symptoms of fatigue test)를 Kim & Sung(1998)이 번역한 번역본을 사용하였다.
첫째, 피로도 감소 효과 검증에는 구조화된 설문지 작성을 통해 시행되었으며, 둘째, 혈액성분 분석의 주요 바이오마커로 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(Hb), 아스파테이트아미노전이효소(AST), 알라닌아미노전이효소(ALT)를 선정하여 CBC분석 기준값과 비교 분석하였다(Table 2). 셋째, 면역학적 분석의 주요 마이오마커는 CD16+CD56+NK cell, NK cell activity, CD3+T cell, CD4+helper T cell로 이들의 활성 변화 정도를 측정하였다.
홍삼 기반의 식품소재 ‘SSR’ 850 mg을 30일 동안 연구대상자가 섭취한 후 섭취 전과의 변화를 설문지 조사를 통한 피로도 감소효과, 채혈을 통한 혈액 성분 변화 및 면역세포 증식 정도를 확인하는 것으로 ‘SSR’의 섭취가 인체적용시험 참여자의 인체 피로도 감소 및 혈액 내 다양한 성분들과 면역세포들의 변화에 미치는 영향을 조사하기 위한 연구이다. 연구 분류상 본 인체적용시험은 인간대상 연구, 전향적 연구, 기타 관찰연구로 분류되어 진행되었다.
유무 및 특이사항을 기록하도록 하였다. 유효성 평가는 두 번의 채혈 시행과 함께 세 가지 측면에서 비교 분석하였다. 첫째, 피로도 감소 효과 검증에는 구조화된 설문지 작성을 통해 시행되었으며, 둘째, 혈액성분 분석의 주요 바이오마커로 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(Hb), 아스파테이트아미노전이효소(AST), 알라닌아미노전이효소(ALT)를 선정하여 CBC분석 기준값과 비교 분석하였다(Table 2).
본 인체적용시험에서는 홍삼기반의 ‘SSR’ 섭취가 인체 내 피로자각 증상 완화와 혈액 성분 및 면역세포 활성 변화에 미치는 영향을 조사하여 건강 증진 관련 식품소재 개발에 기초자료를 제공하고자 하였다. 유효성 평가를 위한 바이오마커로서 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(hemoglobin), 아스파테이트아미노전이효소(Aspartate aminotransferase, AST), 알라닌아미노전이효소(Alanine aminotransferase, ALT)의 변화를 혈액학적 측면에서 분석하였으며, 식품 소재의 배합과 면역세포 활성도와의 상관관계를 T세포, NK세포, NK세포 활성도 조사를 통해 확인하였다. 이에 본 연구는 천연식품 소재로부터 조혈작용을 통한 인체 혈액 성분변화와 면역세포 활성에 미치는 영향을 확인함으로써 식품의 기능성 가치를 평가하고 향후 의약품 대체식품의 개발과 제품화를 위한 기초 자료로 활용 하고자 하였다.
인체적용시험 참여자들은 1일 1회 850 mg ‘SSR’을 30일간 섭취 전후 각각 설문지 조사 1회, 혈액검사를 위한 채혈 1회씩을 시행하였다. 인체적용시험 기간 중 조사 대상자의 ‘SSR’ 섭취 상황을 1주일 단위로 전화와 문자를 통해 모니터링하였으며, 이후 설문지 자료 및 혈액분석 데이터를 취합하여 분석 작업을 실시하였다.
인체적용시험 참여자 35명을 대상으로 채혈을 통하여 ‘SSR’ 섭취 전과 후의 CD16+CD56+NK cell의 변화에 관하여 분석하였다(Fig. 5). ‘SSR’ 섭취로 인한 NK세포의 증감 변화의 기준이 되는 섭취 전과 비교하여 분석한 결과 NK세포가 감소한 양상을 보여 ‘SSR’의 섭취가 NK세포의 증식 효과에 미치는 유의미한 영향은 관찰되지 않았다.
G2020002) 후 인체적용시험계획서에 따라 진행되었다. 인체적용시험 참여자들은 1일 1회 850 mg ‘SSR’을 30일간 섭취 전후 각각 설문지 조사 1회, 혈액검사를 위한 채혈 1회씩을 시행하였다. 인체적용시험 기간 중 조사 대상자의 ‘SSR’ 섭취 상황을 1주일 단위로 전화와 문자를 통해 모니터링하였으며, 이후 설문지 자료 및 혈액분석 데이터를 취합하여 분석 작업을 실시하였다.
인체적용시험계획서에 따라 인체적용시험 기간 중 연구참여자 35명 대상으로 매일 1회 ‘SSR’ 850 mg을 섭취 하도록 하였으며 30일 후 자각증상조사표를 사용하여 신체적 피로(physical fatigue), 정신적 피로(mental fatigue), 신경 감각적 피로(neuro-sensory fatigue)도를 ‘SSR’ 섭취 전 결과와 비교 분석 하였다(Fig. 2). Kim 등(2020)의 연구에서 방사선 치료 중인 대장암 환자 대상의 홍삼 섭취가 환자의 피로 개선에 유효함을 보고하였다.
유효성 평가는 두 번의 채혈 시행과 함께 세 가지 측면에서 비교 분석하였다. 첫째, 피로도 감소 효과 검증에는 구조화된 설문지 작성을 통해 시행되었으며, 둘째, 혈액성분 분석의 주요 바이오마커로 백혈구(WBC), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(Hb), 아스파테이트아미노전이효소(AST), 알라닌아미노전이효소(ALT)를 선정하여 CBC분석 기준값과 비교 분석하였다(Table 2). 셋째, 면역학적 분석의 주요 마이오마커는 CD16+CD56+NK cell, NK cell activity, CD3+T cell, CD4+helper T cell로 이들의 활성 변화 정도를 측정하였다.
홍삼을 증류수로 3회 세척 후 분쇄 과정을 거친 홍삼 원료는 네 차례의 추출과정(1차 추출: 70% 주정, 2차 추출: 50% 주정, 3차 추출: 30% 주정, 4차 추출: 100% 정제수)을 시행하였다. 1차 및 2차 농축 과정 후 80~85℃에서 30~40분간 살균과정을 시행하였으며 두 차례의 분리여과(1차: 40 mesh, 2차: 60 mesh)를 실시한 다음 분무 건조 후 본 시험의 시료로 사용하였다.

대상 데이터

, Ltd.(Kobe, Hyogo, Japan)의 SYSMEX XN 9000 model을 사용하여 분석하였다(Table 2).
, Ltd.(Milford, MA, USA)의 Water HPLC System을 사용하였으며, 분석 컬럼은 ODS column [ACQUITY UPLC BEH C₁₈ column, 100 mm×2.1mm; ODS-2 Hypersil, 250×4.6(mm), particle size(μm) 5, Waters]을 이용하였다. 이동상으로 사용한 유기용매는 Fisher scientific Inc.
선천성면역능과 종양면역능을 간접적으로 평가할 수 있는 NK세포 활성도 검사는 혈액 내 NK세포를 자극인자를 통해 특이적으로 활성화시킨 후 NK세포로 부터 분비되는 인터페론 감마(IFN-γ)의 양을 효소결합면역흡착검사(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) 방법으로 측정하여 NK세포의 활성도를 정량화하였으며 측정장비로는 Tecan Trading AG.(Männedorf, Switzerland)의 TECAN EIA reader를 사용하였다(Table 3).
각 식품 소재를 제조공정상 원료배합 기준에 따라 칭량한 후 혼합한 후 호모믹서기를 사용하여 20~30분간 원료 혼합 균질화를 시킨다. 밀링과정을 거친 ‘SSR’ 혼합물 중 덩어리로 뭉쳐진 원료는 80 mesh로 체과한 후 0.6 mm 하이드로프로필전분의 피막에 원료 850 mg을 주입한 ‘SSR’을 인체적용시험의 식품 소재로 사용하였다.
본 인체적용시험은 35명의 건강한 일반인을 대상으로 시행되었다. 홍삼 기반의 식품소재 ‘SSR’ 850 mg을 30일 동안 연구대상자가 섭취한 후 섭취 전과의 변화를 설문지 조사를 통한 피로도 감소효과, 채혈을 통한 혈액 성분 변화 및 면역세포 증식 정도를 확인하는 것으로 ‘SSR’의 섭취가 인체적용시험 참여자의 인체 피로도 감소 및 혈액 내 다양한 성분들과 면역세포들의 변화에 미치는 영향을 조사하기 위한 연구이다.
본 임상적용시험에 사용된 ‘SSR’의 주요 기능성 식품소재는 한국식품의약품안전처의 식품 및 식품첨가물공전에 따라 분석 시험 후 연구에 사용하였다(Table 1).
산화아연, 엽산, 비티민E 등은 한국식품의약품안전처 식품공전에 식품 첨가물로 등록된 식품소재를 국외 원료회사로부터 수입하여 사용하였으며, 수입식품 등 검사 적용 기준 및 규격에 따라 적합 판정을 받은 후 실험에 사용하였다.
서울, 경기 지역에 위치한 제약회사 및 의료기관 종사자를 대상으로 인체적용시험 참여자를 모집하였으며, 연구대상자 선정기준 및 제외기준은 다음과 같다. 선정기준으로 만 19세 이상 60세 이하 성인 남녀, 3개월 내 기타 인체적용시험에 참여한 경험이 없는 자, 고혈압 기준값(140/90 mmHg) 이내 인자, 본 인체적용시험에 성실히 참여할 의사가 있는 자로 하였다.
6(mm), particle size(μm) 5, Waters]을 이용하였다. 이동상으로 사용한 유기용매는 Fisher scientific Inc. (Hampton, NH, USA)의 Acetonitrile를 구입하여 사용하였으며, 증류수는 영인크로매스(Anyang, Gyeonggi-do, Korea)의 aquapuri5로 증류한 18.2 MΩ/cm 이상의 탈이온수를 사용하였다.
홍삼농축액분말(Hyundai bioland Co., Ltd., Ansan, Gyeonggi-do, Korea), 산화아연(G.H. Chemicals LTD., St. Hyacinthe, Quebec, Canada)은 CR-4 FCC 분말등급을 사용하였으며, 엽산(DMS Nutritional Products LTD., Basel, Basel-Stadt, Switzerland), 비타민 E(BASF Co., Kankakee, IL, USA)을 사용하였다. CBC검사를 포함한 바이오마커 측정 실험에는 Sigma-Ardrich Chemical Co.

데이터처리

대상자의 일반적인 특성, 건강관련특성, 피로자각특성, 혈액성상비교, NK세포 활성도는 빈도와 백분율, 평균 및 표준편차로 분석하였다. ‘SSR’ 섭취 효과를 검증하기 위해 대응표본 t-test를 실시하였으며, 연구도구의 신뢰적 검증은 Cronbach's α로 산출되었다(Cronbach's α=.96).
0 통계프로그램을 이용하여 분석하였으며 (Faul 등 2007) 구체적인 분석 방법은 다음과 같다. 대상자의 일반적인 특성, 건강관련특성, 피로자각특성, 혈액성상비교, NK세포 활성도는 빈도와 백분율, 평균 및 표준편차로 분석하였다. ‘SSR’ 섭취 효과를 검증하기 위해 대응표본 t-test를 실시하였으며, 연구도구의 신뢰적 검증은 Cronbach's α로 산출되었다(Cronbach's α=.

이론/모형

통해 피로도 검사를 진행하였다. 본 인체적용시험에 사용된 피로측정도구는 1988년 일본 산업위생학회 산업피로 연구회(Japan Industrial Hygiene Association Industrial Fatigue Research Committee, 1970)가 표준화시킨 피로 자각증상조사표(subjective symptoms of fatigue test)를 Kim & Sung(1998)이 번역한 번역본을 사용하였다.

성능/효과

5). ‘SSR’ 섭취로 인한 NK세포의 증감 변화의 기준이 되는 섭취 전과 비교하여 분석한 결과 NK세포가 감소한 양상을 보여 ‘SSR’의 섭취가 NK세포의 증식 효과에 미치는 유의미한 영향은 관찰되지 않았다. 일반적으로 홍삼은 면역기능을 강화하고 NK세포를 활성화시킨다고 보고를 하였지만(Kang & Min 2012), 본 연구에서는 ‘SSR’이 NK세포의 증식과 활성에는 영향을 미치지 않는 것으로 확인되어 상호 상반되는 결과를 관찰할 수 있었다.
면역세포 변화에 관한 조사결과는 선천성 면역에 관여하는 NK세포는 감소하는 경향이 관찰되었으며 이는 NK세포 활성도 검사 결과와 상호연관성이 있는 것으로 판단되었다. ‘SSR’의 섭취가 인체 면역시스템의 조절-통제 역할을 감당하는 CD3+T cell 및 CD4+ Helper T cell(Th)의 증가에는 유의미한 결과가 관찰되어 ‘SSR’의 식품소재 구성이 후천성면역세포 증식과 활성에 긍정적 영향을 미치는 것으로 판단되었다. 본 연구는 피로도 감소, 혈액분석 및 면역세포 변화에 관한 소규모 인체적용시험의 결과로 이를 바탕으로 인체 혈액 성분의 변화와 전체 면역시스템 균형을 대변하기에는 많은 한계점이 있는 바 추후 인체적용시험 참여자의 수를 확대하여 면역세포들이 분비하는 다양한 사이토카인을 포함한 분석실험을 통하여 식품소재와 인체 면역시스템과의 상관 관계를 규명할 필요가 있을 것으로 판단되었다.
Comparison of hemoglobin(Hb) and AST/ALT changes before and after 30 days of ‘SSR’ intake. As a result of comparing Hb levels before and after ‘SSR’ intake, it was found to be 14.22 g/dL (1.42) and 14.31 g/dL (1.47), respectively, indicating that Hb levels increased after ‘SSR’ intake, but were not statistically significant (p=0.360, p> 0.05). The comparison of the AST figures before and after ‘SSR’ intake showed 29.
Hyun 등(2014)도 홍삼의 분획에 따른 면역활성비교연구에서 홍삼의 특정 분획에 의한 비장의 CD4+T세포뿐 아니라 및 CD8+T세포수가 용량 의존적으로 유의성 있게 증가함을 보고 하였다. Fig. 7의 결과 ‘SSR’ 섭취 후 연구 참여자들의 CD3+T세포수의 유의적 증가는 CD4+T세포의 증가와 밀접한 상관관계가 있는 것으로 판단되어 ‘SSR’이 인체 내 면역시스템을 조절하는 후천성 면역세포인 T세포 계열에 영향을 미치는 것으로 사료되었다(Fig. 8).
NK cell activity before and after ‘SSR’ intake was measured. Mean and standard deviation were 1,358.98, 664.69 before ingestion and 1,195.09, 680.64 after ingestion respectively, indicating that the level of NK cell activity decreased after ingestion, but this result was not statistically significant (p=0.113, p>0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.
The amount of change in CD3+T cells before and after ‘SSR’ intake for 30 days was measured. Mean and standard deviation were found to be 69.11,9.89 before ingestion and 78.79, 7.19 after ingestion respectively, indicating that the proliferation level of CD3+ T cells in the blood increased after ingestion of ‘SSR’ for 30 days, and this result was statistically significant(p=0.000, p<0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.
05). Measurements of ALT in the same way showed 25.46 IU/L (18.02) before ingestion and 23.20 IU/L (13.43) after ingestion, indicating lower postmortem readings, which were statistically significant (p=0.044, p<0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.
Comparison of changes in CD4+T cells before and after ‘SSR’ intake. The measurement of CD4+T cell changes before and after ‘SSR’ intake showed mean 42.45, standard deviation 8.00 and 50.10 (SD: 8.13) respectively, indicating an increase in the number of CD4+ T cells after ‘SSR’ intake, which was statistically significant(p=0.000, p< 0.05). Total number of subjects (N=35), Gender: [male: n=23 (65.
혈액학적 분석에서 백혈구, 적혈구, 헤모글로빈 수치의 유의미한 증가는 관찰되지 않은 반면 AST/ALT 수치는 유의미하게 감소하는 결과를 확인하여 ‘SSR’의 섭취가 간 기능 개선에 일정부분 효과가 있을 것으로 사료되었다. 면역세포 변화에 관한 조사결과는 선천성 면역에 관여하는 NK세포는 감소하는 경향이 관찰되었으며 이는 NK세포 활성도 검사 결과와 상호연관성이 있는 것으로 판단되었다. ‘SSR’의 섭취가 인체 면역시스템의 조절-통제 역할을 감당하는 CD3+T cell 및 CD4+ Helper T cell(Th)의 증가에는 유의미한 결과가 관찰되어 ‘SSR’의 식품소재 구성이 후천성면역세포 증식과 활성에 긍정적 영향을 미치는 것으로 판단되었다.
증가하였음을 보고 하였다(Kim 등 2002). 본 NK세포 활성도 검사 결과, ‘SSR’ 섭취 전 35명의 인체적용시험 참여자 대상군의 인터페론 감마(IFN-γ) 분비량은 평균 1,358.98 pg/mL(SD: 664.69 pg/mL)로 30일간 ‘SSR’ 섭취 후 1,195.09 pg/mL(SD: 680.64 pg/mL)로 낮아져 Fig. 5의 혈액 내 CD16+CD56+NK cell 변화량에 비례하여 NK세포 활성도도 유사하게 감소하는 경향이 관찰되었다. 여러 선행 연구의 결과에 기초하여 보면 일반적으로 홍삼성분은 자연살해세포(NK cell) 및 대식세포를 활성화시켜 면역조절에 영향을 미친다는 연구 결과(Park 등 2001)가 일반적이지만 본 연구에서 진행한 ‘SSR’의 섭취는 인체적용시험 참여자들의 NK세포 증식 및 활성도 증가에는 유의미한 변화를 유도하지 못하는 것으로 조사되었다.
생체 내 사이토카인 분비에 대한 홍삼의 면역조절효과에 관한 조사에서 홍삼은 비장세포 내의 B세포와 CD3+T세포의 증식에 유의적인 효과를 나타내었으며, T세포, B세포 및 대식세포의 IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-6 및 IL-12의 혈청 내 분비량을 모두 증가시켰다(Sohn 등 2012). 본 연구에서 ‘SSR’ 인체적용시험 참여자들의 CD3+ 림프구 비교분석에서 ‘SSR’ 섭취 전보다 섭취 후수치가 통계적으로 유의미하게 증가하였는데, 이는 ‘SSR’ 복용으로 인해 인체 내 후천성 면역 시스템을 담당하는 면역세포들이 조직적으로 활성화 또는 세포 수가 증가했기 때문으로 판단되었다(Fig. 7).
인체 면역시스템에서 가장 중요한 역할을 하는 면역 세포 중의 하나이다. 본 인체적용시험에서 ‘SSR’ 인체적용시험 참여자들의 CD4+T cell 비교분석에서 ‘SSR’ 섭취 전보다 섭취 후 세포수가 통계학적으로 유의미하게 증가하였는데, 이는 ‘SSR’ 섭취로 인해 인체 내에서 선천성 면역과 후천성 면역을 조절하는 CD4+helper T cell의 증가를 의미하는 것으로 사료된다. Cho 등(1994)은 HIV 감염자에 대한 홍삼의 T세포 증강에 관한 연구에서 홍삼 섭취 전 CD4+T세포수 기준 16.
진단한다. 인체적용시험 참여자들의 헤모글로빈 비교분석에서 ‘SSR’ 섭취 전보다 섭취 후 헤모글로빈 수치가 증가하였지만 통계학적으로는 유의미하지 않은 결과를 보여주었는데 건강한 피험자 대상의 본 인체적용시험에서 ‘SSR’의 섭취와 헤모글로빈 수치 상승과의 연관성은 관찰되지 않았다. Kwak 등(2006)은 홍삼유출액이 급성독성을 유도한 백서의 혈액 내 AST/ALT함량을 감소시켜 혈액 임상화학지수를 유의하게 개선시키는 것으로 보고 하였다.
인체적용시험계획서의 시험 참여 기준에 따라 인체적용시험 동의서에 동의하고 서명한 피험자 35명을 선별하여 30일간 ‘SSR’ 섭취 전후의 시험 결과에서 신체적 증상, 정신적 증상 그리고 신경감각적 증상의 증감 비교 평균(표준편차)은 모두 통계학적으로 유의미한 감소 효과를 보였다. 혈액학적 분석에서 백혈구, 적혈구, 헤모글로빈 수치의 유의미한 증가는 관찰되지 않은 반면 AST/ALT 수치는 유의미하게 감소하는 결과를 확인하여 ‘SSR’의 섭취가 간 기능 개선에 일정부분 효과가 있을 것으로 사료되었다.
특히 연구대상자의 자율성을 존중하여 연구에 대한 충분한 정보를 제공함으로써 자발적인 동의를 취득하였으며, 연구대상자 등의 사생활 보호를 위하여 사생활을 침해할 수 있는 개인정보는 당사자가 동의하거나 법률에 특별한 규정이 있는 경우를 제외하고는 비밀로서 보호되었다. 연구대상자 등의 안전을 충분히 고려하여 인체적용시험 과정 중 발생 가능한 모든 위험은 최소화되도록 하였다.
혈액학적 분석에서 백혈구, 적혈구, 헤모글로빈 수치의 유의미한 증가는 관찰되지 않은 반면 AST/ALT 수치는 유의미하게 감소하는 결과를 확인하여 ‘SSR’의 섭취가 간 기능 개선에 일정부분 효과가 있을 것으로 사료되었다. 면역세포 변화에 관한 조사결과는 선천성 면역에 관여하는 NK세포는 감소하는 경향이 관찰되었으며 이는 NK세포 활성도 검사 결과와 상호연관성이 있는 것으로 판단되었다.

후속연구

관찰되었다. 기준치를 넘어선 각종 혈액성분들의 급격한 변화는 오히려 임상적 질병을 초래할 수 있지만 건강인을 대상으로 진행된 본 인체적용시험에서 백혈구와 적혈구의 미미한 변화는 인체 피로도 자각증상변화의 결과와 연관하여 ‘SSR’의 성분 및 조성변화 등에 대한 후속 연구가 필요할 것으로 보인다. 또한 피험자 관리적인 측면에서 인체적용시험 참여자들은 주기적으로 인체적용시험 기관에 방문하여 임상 시험 기간 중 음주 및 흡연 금지 등 피험자 이행 수칙 여부를 확인받는 형태가 아닌 일상에서 자율적인 자가 점검방식으로 진행되어 임상시험계획서 변경이 시험 결과에 미칠 수 있는 영향도 함께 조사해야 할 것으로 판단되었다(Fig.
본 연구는 피로도 감소, 혈액분석 및 면역세포 변화에 관한 소규모 인체적용시험의 결과로 이를 바탕으로 인체 혈액 성분의 변화와 전체 면역시스템 균형을 대변하기에는 많은 한계점이 있는 바 추후 인체적용시험 참여자의 수를 확대하여 면역세포들이 분비하는 다양한 사이토카인을 포함한 분석실험을 통하여 식품소재와 인체 면역시스템과의 상관 관계를 규명할 필요가 있을 것으로 판단되었다. 또한 ‘SSR’을 구성하는 식품소재의 변화에 따른 인체 내 혈액성분 변화와 면역세포 활성과의 상관관계 연구도 동반하여 진행하는 것이 필요할 것으로 사료되었다. 특정 식품의 섭취가 유전적 변화에 미치는 영향을 연구하는 후성유전학(epigenetics) 측면에서 볼 때 식품 소재의 중요성이 강조되고 있는 시점에서 추후 연구결과는 일반인들의 질병 예방과 인체 면역균형을 조절하기 위한 기능성 식품소재개발에 이용 가능할 것으로 기대한다.
기준치를 넘어선 각종 혈액성분들의 급격한 변화는 오히려 임상적 질병을 초래할 수 있지만 건강인을 대상으로 진행된 본 인체적용시험에서 백혈구와 적혈구의 미미한 변화는 인체 피로도 자각증상변화의 결과와 연관하여 ‘SSR’의 성분 및 조성변화 등에 대한 후속 연구가 필요할 것으로 보인다. 또한 피험자 관리적인 측면에서 인체적용시험 참여자들은 주기적으로 인체적용시험 기관에 방문하여 임상 시험 기간 중 음주 및 흡연 금지 등 피험자 이행 수칙 여부를 확인받는 형태가 아닌 일상에서 자율적인 자가 점검방식으로 진행되어 임상시험계획서 변경이 시험 결과에 미칠 수 있는 영향도 함께 조사해야 할 것으로 판단되었다(Fig. 3).
‘SSR’의 섭취가 인체 면역시스템의 조절-통제 역할을 감당하는 CD3+T cell 및 CD4+ Helper T cell(Th)의 증가에는 유의미한 결과가 관찰되어 ‘SSR’의 식품소재 구성이 후천성면역세포 증식과 활성에 긍정적 영향을 미치는 것으로 판단되었다. 본 연구는 피로도 감소, 혈액분석 및 면역세포 변화에 관한 소규모 인체적용시험의 결과로 이를 바탕으로 인체 혈액 성분의 변화와 전체 면역시스템 균형을 대변하기에는 많은 한계점이 있는 바 추후 인체적용시험 참여자의 수를 확대하여 면역세포들이 분비하는 다양한 사이토카인을 포함한 분석실험을 통하여 식품소재와 인체 면역시스템과의 상관 관계를 규명할 필요가 있을 것으로 판단되었다. 또한 ‘SSR’을 구성하는 식품소재의 변화에 따른 인체 내 혈액성분 변화와 면역세포 활성과의 상관관계 연구도 동반하여 진행하는 것이 필요할 것으로 사료되었다.
본 인체적용시험은 비교약물의 선택과 유효성 평가를 위해 질병치료 효과에 관한 시험대상자의 보호 및 규제 요건을 적절히 통제하는 중재연구(interven- tional study)가 아닌 식품소재를 일정기간 섭취 후 혈액학 및 면역학적 측면에서의 변화를 동일한 피험자에서 관찰하기 위한 시험으로 구성되었다. 본 연구를 진행하기 위해 인체적용시험 자료 참조와 임상시험심의위원회(IRB)의 조언을 참고하여 플래시보 효과 검증을 위한 비교 대조 식품소재 선정의 어려움과 이중맹금이 필요하지 않을 것으로 판단되어 관찰연구(observational study)로 진행하였으며, 추후 인체적용시험 대상자수 확대 및 ‘SSR’ 성분 변화에 관한 시험 시 이중맹검, 플래시보 평가를 수행할 예정이다. 수집된 자료는 SPSS(for WIN) 25.
본 인체적용시험에 모집된 참여자의 성별 및 연령별 차이를 보면 남성이 여성보다 두 배 정도 많으며, 60대 이상 참여자의 수가 상대적으로 적었는데 Mahlknecht & Kaiser(2010)의 연구에서는 연구참여자들의 연령이 말초혈액 분석의 결과에 일정부분 영향을 미치고 있음을 보고하였다. 인체적용시험 참여자 모집 시 연구결과의 객관성 유지와 세밀한 분석을 위하여 성별 및 연령을 고려한 피험자 모집이 필요할 것으로 판단되었다.
여러 선행 연구의 결과에 기초하여 보면 일반적으로 홍삼성분은 자연살해세포(NK cell) 및 대식세포를 활성화시켜 면역조절에 영향을 미친다는 연구 결과(Park 등 2001)가 일반적이지만 본 연구에서 진행한 ‘SSR’의 섭취는 인체적용시험 참여자들의 NK세포 증식 및 활성도 증가에는 유의미한 변화를 유도하지 못하는 것으로 조사되었다. 추후 NK세포 활성도에 긍정적 효과를 미칠 수 있는 ‘SSR’의 성분 함량 및 조성 변화를 통한 추가적인 인체적용시험이 필요할 것으로 판단된다(Fig. 6).
또한 ‘SSR’을 구성하는 식품소재의 변화에 따른 인체 내 혈액성분 변화와 면역세포 활성과의 상관관계 연구도 동반하여 진행하는 것이 필요할 것으로 사료되었다. 특정 식품의 섭취가 유전적 변화에 미치는 영향을 연구하는 후성유전학(epigenetics) 측면에서 볼 때 식품 소재의 중요성이 강조되고 있는 시점에서 추후 연구결과는 일반인들의 질병 예방과 인체 면역균형을 조절하기 위한 기능성 식품소재개발에 이용 가능할 것으로 기대한다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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