[논문]향일규 잎의 에탄올 추출물에 대한 주요 성분 동시 정량분석

김은남; 전상용; 정길생

doi:10.22889/kjp.2021.52.2.112

향일규 잎의 에탄올 추출물에 대한 주요 성분 동시 정량분석
Simultaneous Quantitative Analysis of Major Constituent of Ethanol Extract from Leaves of Helianthus annuus L. 원문보기

생약학회지, v.52 no.2, 2021년, pp.112 - 117

김은남 (계명대학교 약학대학) , 전상용 (계명대학교 약학대학) , 정길생 (계명대학교 약학대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Helianthus annuus L. has been reported with various pharmacological activities such as antibacterial, antidiabetic, and antioxidant effects. According to recent studies, H. annuus L. is known to contain components such as phenolic compounds, flavonoids, alkaloids, sesquiterpenoids, and lignans. The seeds of H. annuus L. have been reported to contain chlorogenic acid and di-O-caffeoylquinic acid as major components. However, studies on the main components and content of leaves of H. annuus L. are still incomplete. Therefore, in this study, the contents of four major components of H. annuus L. were evaluated by simultaneous quantitative analysis with high performance liquid chromatography (HPLC)-diode array detector (DAD). The isolated four compounds Caffeoylquinic acid(CQA), 3,4-dicaffeoylquinic acid(3,4-DCQA), 3,5-dicaffeoylquinic acid(3,5-DCQA) and 4,5-dicaffeoylquinic acid(4,5-DCQA) were shown in a large linearity with a correlation coefficient (R2) of 0.99. In addition, as a result of intra-inter day analysis of four major compounds by the analysis method of this study, the accuracy of 88.46% or more and less than 112.85% and excellent precision of less than 3% were shown, the content analysis showed CQA (0.383±0.018 mg/g), 3,4-DCQA (0.282±0.017 mg/g), 3,5-DCQA (1.109±0.068 mg/g), and 4,5-DCQA (0.673±0.020 mg/g).

주제어

표/그림 (7)

표 Table I. HPLC conditions for quantitative analysis
그림 Fig. 1. Structures of CQA (A), 3,4-DCQA (B), 3,5-DCQA (C), and 4,5-DCQA (D).
그림 Fig. 2. HPLC chromatogram of the leaves of Helianthus ann-uus L. ethanol extracts (A), CQA (B), 3,4-DCQA (C), 3,5-DCQA (D), and 4,5-DCQA (E).
그림 Fig. 3. Calibration curve of CQA (A), 3,4-DCQA (B), 3,5-DCQA (C), and 4,5-DCQA (D).
표 Table II. Results of linearity, limit of detection (LOD) and limit of quantitation (LOQ) on four compounds
표 Table III. Precision and accuracy results of compounds CQA, 3,4-DCQA, 3,5-DCQA, and 4,5-DCQA. (n=3)
표 Table IV. The contents of CQA, 3,4-DCQA, 3,5-DCQA, and 4,5-DCQA in ethanol extracts samples (n=3)

AI 본문요약
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제안 방법

검출한계(limit of detection, LOD) 및 정량한계(Limit of Quantitation, LOQ) 측정–CQA, 3, 4-DCQA, 3, 5-DCQA 그리고 4, 5-DCQA의 검출 가능한 최소 농도와 정량 가능한 최소 농도를 확인하기 위해 아래에 표기된 식에 따라 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)를 측정하였다.
정확성(Accuracy) 및 정밀성(Precision) 평가–CQA, 3, 4-DCQA, 3, 5-DCQA 그리고 4, 5-DCQA에 대한 정량분석의 타당성을 검증하기 위해 반복 분석을 진행하였다
표준용액의 조제 – 실험에 사용된 표준용액은 향일규 잎으로부터 분리된 CQA, 3, 4-DCQA, 3, 5-DCQA 그리고 4, 5- DCQA를 1 mg으로 칭량하여 HPLC 등급의 증류수로 각각 1 mg/ml의 농도로 혼합하여 조제한 후 50, 100, 200, 400, 800, 1000 μg/ml으로 계열 희석하여 검량선 표준용액으로 사용하였다.
함량분석–향일규 잎에서 분리한 4종의 phenolic compound에 대해 HPLC-UV를 이용한 함량분석을 실시하였다
정확성(Accuracy) 및 정밀성(Precision) 평가–CQA, 3, 4-DCQA, 3, 5-DCQA 그리고 4, 5-DCQA에 대한 정량분석의 타당성을 검증하기 위해 반복 분석을 진행하였다. Intraday test는 24시간 이내에 3회 반복 측정한 결과를 상대표준 편차를 구해서 평가하였고, Inter-day test도 앞서 설명한 intra-day test와 같이 3개의 농도로 3회 반복 측정한 결과로 상대표준 편차를 구하여 평가하였다. 직선성이 확인된 3개의 농도인 75, 250, 750 μg/ml 3개의 농도에 대한 상대표준 편차(RSD%)를 통해 정밀성을 평가하고, 상대표준편차 값이 3.
함량분석–향일규 잎에서 분리한 4종의 phenolic compound에 대해 HPLC-UV를 이용한 함량분석을 실시하였다. 표준용액의 피크 면적 값으로부터 얻어진 회귀직선 방정을 통해 CQA, 3, 4-DCQA, 3, 5-DCQA 그리고 4, 5-DCQA 의 피크 면적 값을 대입하여 함량을 구하였다.

대상 데이터

실험재료 – 본 실험에서 사용된 향일규의 잎은 전라남도 해남군 마산면 노하리에서 채집하였으며, 계명대학교 약학대학 정길생 교수가 동정하였다

성능/효과

본 연구에서 HPLC-DAD를 이용한 동시 정량 분석법을 바탕으로 향일규 잎의 에탄올 추출물의 혼합물로부터 분리한 4가지 지표물질을 분리하여 함량을 분석하였으며, 그 결과 추출물 1g 당 CQA는 0.383±0.018 mg, 3, 4-DCQA는 0.282±0.017 mg, 3, 5-DCQA는 1.109±0.068 mg, 4, 5-DCQA는 0.673±0.020 mg의 성분 함량을 확인하였다(Table IV)

후속연구

020 mg의 성분 함량을 확인하였다(Table IV). 본 연구에서는 기존에 보고되어있지 않은 향일규 잎의 4종의 주요 성분 분리와 성분을 동시 정량 분석함으로써 향후 향일규 잎을 이용한 소재 개발 또는 성분 연구의 기초자료로서의 활용과 품질관리를 위한 연구자료로 사용될 수 있을 것이라 생각된다.

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