한용재
(제주대학교 해양과학대학 수산생명 의학과 해양 응용 미생물 & 어류질병 제어 연구실)
,
김만철
(제주대학교 해양과학대학 수산생명 의학과 해양 응용 미생물 & 어류질병 제어 연구실)
,
문영건
((주)해이래)
,
허문수
(제주대학교 해양과학대학 수산생명 의학과 해양 응용 미생물 & 어류질병 제어 연구실)
The bacteriological examination of spring water in Seogwipo-city was conducted. A total 11 spring water samples were performed from January to April, 2010. During the study period, the range of temperature was from 0.7 to $15.4^{\circ}C$, and result of the analyses showed that hydrogen io...
The bacteriological examination of spring water in Seogwipo-city was conducted. A total 11 spring water samples were performed from January to April, 2010. During the study period, the range of temperature was from 0.7 to $15.4^{\circ}C$, and result of the analyses showed that hydrogen ion concentrations (pH) for spring water was 0.33 to 7.8. salinity levels for sample average of 0.5 to 1.04‰, as the result of measuring dissolved oxygen (DO) for spring water showed that water dissolved oxygen were 1.02 to 7.14 mg/${\ell}$. The range of total coliform of spring water sample at 11 stations located in the designated spring water were 1,600 MPN/100mL. And the range of geometric mean of total coliform were 1.9~117.1 MPN/100mL, The range of fecal coliform of spring water sample at 11 stations located in the designated spring water were 1,600 MPN/100mL. And the range of geometric mean of fecal coliform were 1.8~68.1 MPN/100mL, respectively. Level of microbial contamination was examined in 11 samples for indication of bacterial contamination such as heterophic bacteria, EscherichiacoliO157;H7, salmonella spp., Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus, Shigella spp. Were frequently detected from the spring water. Salmonella spp., S.aureus were detected in the range of $0{\sim}1.0{\times}10^1$, $0{\sim}3.0{\times}10^1$ CFU/ml, respectively. And the Escherichia coli O157;H7, Vibrio parahaemolyticus, Shigella spp. Were not detected from the examined spring water samples.
The bacteriological examination of spring water in Seogwipo-city was conducted. A total 11 spring water samples were performed from January to April, 2010. During the study period, the range of temperature was from 0.7 to $15.4^{\circ}C$, and result of the analyses showed that hydrogen ion concentrations (pH) for spring water was 0.33 to 7.8. salinity levels for sample average of 0.5 to 1.04‰, as the result of measuring dissolved oxygen (DO) for spring water showed that water dissolved oxygen were 1.02 to 7.14 mg/${\ell}$. The range of total coliform of spring water sample at 11 stations located in the designated spring water were 1,600 MPN/100mL. And the range of geometric mean of total coliform were 1.9~117.1 MPN/100mL, The range of fecal coliform of spring water sample at 11 stations located in the designated spring water were 1,600 MPN/100mL. And the range of geometric mean of fecal coliform were 1.8~68.1 MPN/100mL, respectively. Level of microbial contamination was examined in 11 samples for indication of bacterial contamination such as heterophic bacteria, EscherichiacoliO157;H7, salmonella spp., Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus, Shigella spp. Were frequently detected from the spring water. Salmonella spp., S.aureus were detected in the range of $0{\sim}1.0{\times}10^1$, $0{\sim}3.0{\times}10^1$ CFU/ml, respectively. And the Escherichia coli O157;H7, Vibrio parahaemolyticus, Shigella spp. Were not detected from the examined spring water samples.
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문제 정의
이들은 사람과 환경 내에 많이 분포하고 환경의 변화에 안정하여 지표미생물로의 기본 조건을 충족시키며 오염원에 대한 특이성을 가지고 있어 수질을 평가하는데 널리 이용되고 있다.15,16) 본 연구를 통하여 해안으로 용출되는 서귀포시에 위치한 용천수에서 미생물학적인 수질오염의 평가와 비교를 하여 고찰해보자 한다.
제안 방법
본 실험에 사용된 용천수는 멸균된 250㎖ 채수병에 담아 4℃의 냉장상태를 유지하면서 실험실로 운반하여 미생물 분석실험을 실시하였다. 수온 및 염분, pH, 용존산소(DO)는 YSI 556 MPS의 probe module을 현장에서 그 측정값을 산출하였다.
본 연구에 사용한 대장균 검사는 미국 APHA의 Recommended Procedures for the Examination of Sea Water and Shellfish (1970)에 따랐으며 최확수법(MPN; Most Probable Number Method)에 따라 lauayl tryptose Broth를 사용하여 10ml에 접종 후 35±0.5℃에서 24±2 시간 배양하고 24시간 단위로 가스 생성을 관찰, 가스가 생성된 것은 추정시험 양성으로 기록하고 확정시험을 실시하였다.
용천수 시료를 Shigella spp. 선택배지인 XLD Agar에 도말 후 24시간 동안 관찰하여 종 특이적인 콜로니를 보이는 집락을 선택하고, 감별 배지인 Triple Sugar Iron Agar에서 확인한 후 API 20E kit으로 동정하였다. 20)
본 실험에 사용된 용천수는 멸균된 250㎖ 채수병에 담아 4℃의 냉장상태를 유지하면서 실험실로 운반하여 미생물 분석실험을 실시하였다. 수온 및 염분, pH, 용존산소(DO)는 YSI 556 MPS의 probe module을 현장에서 그 측정값을 산출하였다.
시료 1 ㎖을 MacConkey agar에 도말하여 37 ℃에서 24시간 배양하여 자란 무색투명한 colony를 선택하여 확인시험을 하였다. 확정 시험은 Triple Sugar Iron Agar를 사용하여 확인하고, API 20E kit으로 동정하였다.
시료를 Tryptic Soy Broth에 접종 후 37℃에서 24시간 배양 후 Mannitol Salt Agar에 도말하여 37℃에서 24시간 배양한 후 mannitol 분해능이 있는 황색불투명 집락과 주변에 혼탁한 백색환이 있는 집락에 대해 확정 시험으로 Gram staining을 실시하였고, catalase test, DNase test로 확인하였다.18,19)
용천수 시료를 EC broth에 접종하여 37℃의 Water base에서 24시간의 증균 과정을 거친 후 E. coli O157:H7의 선택배지인 MacConkey Sobitol agar에 접종하여 도말한 후 37℃에서 배양한 후, Sobitol을 분해하지 못하는 white colony를 선별하여 확정 시험은 Eosin Methylene Blue agar를 사용하여 확인하였다. 최종 분리된 균은 API 20E kit를 사용하여 확정 시험을 측정 실시하였다.
용천수 시료를 선택배지인 TCBS배지에 도말하여 청녹색 단일 집락을 확인한 후 확인시험은 선택배지상에서 의심되는 집락을 선택하여 Triple Sugar Iron Agar에서 확인한 후 API 20NE kit을 이용하여 동정하였다.18,19)
음용수 및 식품 일반에 대한 미생물 규격(수질오염 공정시험기준, 식품공전)에서 정하고 있는 식중독균을 포함한 총 6종의 미생물(일반세균, Salmonella spp., Shigella spp., E. Coli O157:H7, Vibrio parahaemolyticus, Stapylococcus aureus)을 검사하였다. 월별 모니터링을 한 결과를 (Table 3~6)에 나타내었다.
coli O157:H7의 선택배지인 MacConkey Sobitol agar에 접종하여 도말한 후 37℃에서 배양한 후, Sobitol을 분해하지 못하는 white colony를 선별하여 확정 시험은 Eosin Methylene Blue agar를 사용하여 확인하였다. 최종 분리된 균은 API 20E kit를 사용하여 확정 시험을 측정 실시하였다.18,19)
시료 1 ㎖을 MacConkey agar에 도말하여 37 ℃에서 24시간 배양하여 자란 무색투명한 colony를 선택하여 확인시험을 하였다. 확정 시험은 Triple Sugar Iron Agar를 사용하여 확인하고, API 20E kit으로 동정하였다.20)
확정시험은 brilliant green lactose bile broth에 접종하여 35.0±0.5℃의 incubator에서 배양하며 24시간마다 관찰 및 발효관에 가스가 관찰시 에는 확정 판단하였다.
대상 데이터
2010년 1월부터 4월까지 서귀포시의 해안가에 위치한 총 11곳의 용천수 일반수질을 2010년 1월부터 4회 조사한 결과를 정점별로 평균값을 (Table 1)에 나타내었다. 용천수의 모든 정점별 평균 수온 값은 15.
본 연구에서 현장조사 및 시료채취는 2010년 1월, 2월, 3월, 4월에 실시하였으며, 조사 정점은 제주도 내 서귀포시 해안가에 위치한 용천수 지역을 조석간만의 차이에서 간조 시 해수와 혼합이 적고 채집이 용이하고 11개 지점을 선정하였다.
성능/효과
8-]1,600 MPN/100㎖를 나타나는 것으로 조사되었다. 분변계대장균수의 범위를 정점별 평균값을 살펴보면 3, 5, 11의 용천수 정점에서 기하평균치가 14 MPN/100㎖이상의 평균값을 나타냈으며, 그중 3번 정점에서 GM 68.1 MPN/100㎖ 로 가장 높은 값을 나타내었다.
용존산소량은 화학적 산소 요구량과 같이 수질의 유기물 오탁지표로 사용되는 지표로서 조사결과 7.14±1.02 ㎎/ℓ로 대부분의 지점에서 평균 6∼7㎎/ℓ의 용존산소량을 보였다.
용천수의 대장균군과 분변계대장균을 정점별로 검사한 결과를 (Table 2)에 나타내었다. 전체적으로 총대장균군 범위는 [1.8-]1,600 MPN/100㎖로 조사되었으며, 분변계대장균의 경우 [1.8-]1,600 MPN/100㎖를 나타나는 것으로 조사되었다. 분변계대장균수의 범위를 정점별 평균값을 살펴보면 3, 5, 11의 용천수 정점에서 기하평균치가 14 MPN/100㎖이상의 평균값을 나타냈으며, 그중 3번 정점에서 GM 68.
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