초록

본 발명에는 오염된 토양 등의 오염물로부터 미생물의 DNA를 급속하게 추출하는 방법이 개시되어 있다. 본 발명에 따르면, 종래의 기계적인 분쇄 방법 대신 효소적인 분쇄방법과 액체질소와 항온조를 이용한 동결-융해처리를 이용함으로써, 오염된 토양 등의 오염물에 존재하는 미생물의 DNA를 거의 대부분 손상되지 않은 형태로 추출할 수 있으며, 보다 효과적으로 추출작업을 수행할 수 있으며, 번거로운 작업도 피할 수 있어 DNA의 추출이 24시간 이내로 급속하게 이루어질 수 있으므로, 환경문제를 해결하는데 있어 산업상 이용범위가 매우 넓다.

대표청구항 ▼

a. 오염물 샘플을 알칼리 완충용액에 넣고 여기에 라이소자임과 도데실설폰산 나트륨을 처리하여 세포를 용해(lysis)시키는 단계, b. a단계에서 형성된 용해물에 대해 동결-융해를 반복 실시한 다음 원심분리를 실시하는 단계, c. b단계에서 생성된 DNA를 포함하는 상등액을 취하여 클로로포름과 이소아밀알콜의 혼합유기용매로 처리하여 이로부터 수층을 분리하는 단계, d. 상기 수층에 대하여 이소프로판올을 처리하여 DNA를 침전시키는 단계, e. 상기 DNA를 완충용액에 현탁시켜 컬럼크로마토그라피를 실시하는 단계를 포함하는, 오염물로부터

a. 오염물 샘플을 알칼리 완충용액에 넣고 여기에 라이소자임과 도데실설폰산 나트륨을 처리하여 세포를 용해(lysis)시키는 단계, b. a단계에서 형성된 용해물에 대해 동결-융해를 반복 실시한 다음 원심분리를 실시하는 단계, c. b단계에서 생성된 DNA를 포함하는 상등액을 취하여 클로로포름과 이소아밀알콜의 혼합유기용매로 처리하여 이로부터 수층을 분리하는 단계, d. 상기 수층에 대하여 이소프로판올을 처리하여 DNA를 침전시키는 단계, e. 상기 DNA를 완충용액에 현탁시켜 컬럼크로마토그라피를 실시하는 단계를 포함하는, 오염물로부터의 급속 DNA 추출방법.