표고(Lentinus edodes) 버섯으로 부터 렉틴을 분리, 정제한 뒤 몇가지 특성을 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 표고 렉틴은 설치류인 생쥐(mouse), 쥐(rat)와 토끼(rabbit)의 적혈구에 응집현상을 나타냈으며, 사람의 적혈구에는 응집현상을 나타내지 않았다. 2. 표고 렉틴의활성은 중성 및 염기성 pH 에서는 안정하였으며, 50℃이상의 온도에서는 비교적 불안정하였고, 시험한 수종의 금속이온에는 영향을 받지 않았다. 3. 표고 렉틴은 ammonium sulfate 침전, DEAE Sephadex A-
표고(Lentinus edodes) 버섯으로 부터 렉틴을 분리, 정제한 뒤 몇가지 특성을 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 표고 렉틴은 설치류인 생쥐(mouse), 쥐(rat)와 토끼(rabbit)의 적혈구에 응집현상을 나타냈으며, 사람의 적혈구에는 응집현상을 나타내지 않았다. 2. 표고 렉틴의활성은 중성 및 염기성 pH 에서는 안정하였으며, 50℃이상의 온도에서는 비교적 불안정하였고, 시험한 수종의 금속이온에는 영향을 받지 않았다. 3. 표고 렉틴은 ammonium sulfate 침전, DEAE Sephadex A-50 column과 hydroxyapatite column으로 거의 순수하게 정제되었고 수율은 1.35%였다. 4.PAGE의 결과 표고 렉틴은 1개의 major band와 3개의 minor band가 나타났다. 5. 당에 의한 응집저해 효과는 N-acetylgalactose와 D-glucosamine에 의해비교적 낮은 농도인 12.5mM과 6.25mM에서 혈구 응집 저해 현상이 나타났으며, 이들 당에 대한 특이성이 있는 것으로 밝혀졌다. 6. 아미노산 분석결과 serine, glutamic acid와 proline은 정제됨에 따라 상대적으로 양이 증가하였고, 염기성 아미노산 lysine과 histidine, 비극성 아미노산 valine과isoleucine 양은 감소하였다. 7. SDS-PAGE에 의한 표고 렉틴의 분자량은 19KD로 확인되었다. 8. 표고 렉틴의 림프구 자극분열 효과는 생쥐, 쥐 및 사람의 림프구를 대상으로 하였을 때 비교 시료로 사용된 Con A보다 더 낮은 농도에서 mitogenic activity가 나타났고, 세포의 증식정도도 더 높게 나타났다. 9. 표고 렉틴은 암세포인 HeLa, L1210 세포에 응집현상을 나타내었다. 10. Hydroxyapatite의 0.05M 분획이 HeLa 세포에 대해서 생장저해 현상을 나타냄으로서 암세포 생장 저해 효과를 입증하였다.
Abstract▼
A new lectin from the edible mushroom, Lentinus edodes, was purified by the following procedures : physiological saline extraction, ammonium sulfate fractionation (0-80%), anion exchange column chromatography on DEAE Sephadex A-50 and hydroxyapatite column chromatography. On polyacrylamide gel elec
A new lectin from the edible mushroom, Lentinus edodes, was purified by the following procedures : physiological saline extraction, ammonium sulfate fractionation (0-80%), anion exchange column chromatography on DEAE Sephadex A-50 and hydroxyapatite column chromatography. On polyacrylamide gel electrophoresis, 0.05M fraction from hydroxyapatite column exhibited one major and three minor bands. The partially purified lectin agglutinated the erythrocytes of rabbit, mouse and rat, but not human erythrocytes and murine splenic lymphocytes. Agglutinability was relatively stable at basic pH, but labile at incresing temperature, but was not affected with various metal ions. By the sugar specificity test, N-acetylgalactose and D-glucosamine inhibited agglutinating activity at a final concentration of 12.5mM and 6.25mM, respectively. The lectin's mitogenic effects were tested by its application to human and murine splenic lymphocytes. The results showed that the 0.05M fraction from hydroxyapatite was mitogenic, and the optimal dose of Lentinus edodes lectin was slightly higher than con A by the culture with murine splenic and hyman peripheral lymphocytes. Meanwhile, its ability to agglutinate transformed cells and cancerostatic activity were tested by its applicaton to continuous cell lines L1210 and HeLa cells. The lectin was found to be an agglutinin of tumor cell lines tested by L1210 and HeLa cells, and inhibited the growth of HeLa cells.
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