초록 ▼

식물체에 내생하는 주요 호르몬인 싸이토키닌류를 토끼에서 길러낸 항체 (polyclonal antibody)를 이용하여 정밀하게 분석하는 기술을 개발코자 하였으며, 대목의 역할이 중요시되는 박과채소에서 목질부 일비액내의 무기성분 및 cytokinins 함량을정밀분석하고자 본실험이 계획-수행되었다. 아울러 채취된 목질부 일비액내에 풍부하게함유되어 있는 cytokinin류를 간편한 방법으로 정제하여 이를 식물생장촉진제로 활용하는방법도 검토코자 하였다. 목질부 일비액내에는 대체적으로 20∼30 m.e. 정도(EC=1.0

식물체에 내생하는 주요 호르몬인 싸이토키닌류를 토끼에서 길러낸 항체 (polyclonal antibody)를 이용하여 정밀하게 분석하는 기술을 개발코자 하였으며, 대목의 역할이 중요시되는 박과채소에서 목질부 일비액내의 무기성분 및 cytokinins 함량을정밀분석하고자 본실험이 계획-수행되었다. 아울러 채취된 목질부 일비액내에 풍부하게함유되어 있는 cytokinin류를 간편한 방법으로 정제하여 이를 식물생장촉진제로 활용하는방법도 검토코자 하였다. 목질부 일비액내에는 대체적으로 20∼30 m.e. 정도(EC=1.0∼1.5mS/cm)의 무기성분이 함유되어 있었는데 흡수이행되는 일비량은 물론 무기성분의 종류와농도는 대목의 종류와 일비액의 채취시각에 따라 상이하였다. 일비액은 채취 직후 전기전도도 (EC) 등을 측정하고 냉동보관하였다가 다시 녹여서 저온원 심분리후에 XAD-2column과 면역친화성 컬럼, 그리고 HPLC를 이용 한 cytokinins 분석을 시도하였다. 일비액내에는 풍부한 cytokinin류가 함유되어 있었는데 오이에서는 cis-zeatin riboside (c-ZR)가 가장 많았고 (33 ng/100 ml) trans-zeatin riboside(t-ZR)과 trans-zeatin(t-Z)도 높은 수준이었다. 오이전용 대목인 '흑종호박' 대목에 서는 t-ZR 과 c-ZR에 추가해서 매우 높은 함량의 isopentenyl-adenine(IPA)이 검출되었는데 (57 ng/100 ml) 이 IPA는 오이에서는검출되지 않는 것임이 특이하였다. 흑종호박에 접목된 오이도 절단하여 일비액을 채취하여 분석하였는데 줄기절단시 대목 하배축의 상부에 남아 있는 오이줄기는 상향 이동하는cytokinin의 조성을 극적으로 변화시켜 주었다. 이러한 사실은 오이줄기가 비록 짧기는하였지만 상향-이동하는 cytokinins 조성에 결정적인 역할을 하는 것을 입증하는 것이었다.본 연구를 통해서 개발된 방법은 대단히 정밀도가 높은 방법임이 입증되었고 실용적인견지에서도 초기의 XAD-2 Amberlite 컬럼에 의한 분리는 생리활성을 유지하는 추출물의초기-다량 정제방법으로 적합하였다. 오이와 기타 박과채소류의 일비액을 초기의 정제과정을 거쳐 원액의 20배 정도의 낮은 수준으로 재희석하여 생검하였을때 cytokinins에 의한전형적인 생육촉진 효과를 얻을 수 있었고 아울러 gibberellins유사물질의 효과도 유지되고있음이 확인되어서 개발된 분석법과 아울러 차후의 실용도 또한 높을 것으로 기대되고 있다.

Abstract ▼

The present study was conducted to develop a fast andreliable methods of cytokinins using the immunoaffinty columns prepared with polyclonalantibodies raised in New Zealand White rabbit and to determine the mineral andcytokinin contents in bleeding xylem sap from various cucurbitaceo

The present study was conducted to develop a fast andreliable methods of cytokinins using the immunoaffinty columns prepared with polyclonalantibodies raised in New Zealand White rabbit and to determine the mineral andcytokinin contents in bleeding xylem sap from various cucurbitaceous crops. Inaddition, the possibility of using the crude extract as plant growth promoters was alsoinvestigated. The xylem sap contained abundant mineral ions (20∼30 me or 1.0∼1.5mS/cm) even though the total amount of xylem sap and its composition was markedinfluenced by the kind of rootstocks and time of sap collection. Cytokinins wereanalyzed using the Immunoaffinity columns and HPLC after the initial purification wiihXAD-2 Amberlite column Zeatin ribosides, both trans- and cis-, were the majorcytokinins in cucumber and significant amount of zeatins were also identified. Xylemsap from 'Heukjong' rootstock also contained significant amount of isopentenyladeninewhich was not identified in cucumber sap. Cucumber scion on the top of therootstock hypocotyl in grafter plant was able to greatly change or modify the cytokinincomposition thus suggesting the highly efficient function of scion on cytokinincomposition.The extraction and purification methods developed throughout this study wereproved to be highly accurate and efficient method of cytokinin analysis. The initialpurification method using XAD-2 column appeared to be a suitable method for initialpurification for larger samples. The biological activity in the crude methanol extractsfrom XAD-2 column can be confirmed through radish cotyledon expansion bioassay thussuggesting the simple practical use of the crude extract for crop production.

목차 Contents

• 1. 서론...8
• 2. 실험재료 및 방법...9
• 3. 실험 결과...16
• 4. 고찰...27
• 5. 적요...30
• 6. 인용문헌...31