초록 ▼

국내 의약품 제제들의 의약품동등성시험을 조속하고 효과적으로 추진하기 위해 성분별로 대조약을 선정하고 이의 생체이용률 시험법을 표준화함으로써 생물학적동등성시험을 효율적이고 경제적으로 추진할 수 있는 기반을 조성할 필요성이 있다. 염산프라조신 정의 대조약인 미니프레스 정 2 mg(한국화이자)의 생체이용률을 측정하기 위한 분석법을 3개 기관이 형광 검출에 의한 액체크로마토그래프법으로 검토하여 검증하고, 각 기관별로 생체이용률시험을 순차로 행하여 염산프라조신 정의 생물학적동등성시험의 표준적인 시험법을 제시하고자 하였다.
각 기관별로

국내 의약품 제제들의 의약품동등성시험을 조속하고 효과적으로 추진하기 위해 성분별로 대조약을 선정하고 이의 생체이용률 시험법을 표준화함으로써 생물학적동등성시험을 효율적이고 경제적으로 추진할 수 있는 기반을 조성할 필요성이 있다. 염산프라조신 정의 대조약인 미니프레스 정 2 mg(한국화이자)의 생체이용률을 측정하기 위한 분석법을 3개 기관이 형광 검출에 의한 액체크로마토그래프법으로 검토하여 검증하고, 각 기관별로 생체이용률시험을 순차로 행하여 염산프라조신 정의 생물학적동등성시험의 표준적인 시험법을 제시하고자 하였다.
각 기관별로 혈중 프라조신 분석법을 형광 검출에 의한 액체크로마토그래프법으로 확립하였다. 최종 선정한 분석조건으로는 역상 C18 칼럼을 가지고 검토한 결과 염산프라조신과 내부표준물질인 염산테라조신이 양호하게 분리되어 특이성이 있었으며, 0.5-50 ng/mL의 농도범위에서 상관계수 0.999 이상의 양호한 직선성을 나타내었다. 정량한계농도(0.5 ng/mL)에서 정밀성이 3개 기관 모두 C.V.(%)가 모두 20% 미만이었으며 일내 정확성과 정밀성의 평균값은 모두 10% 이하이었으며, 일간 정확성과 정밀성의 평균값도 모두 10% 이하로 양호하였다. 감도는 신호대 잡음비를 10으로 하였을 때 0.5 ng/mL로 산출되었다. 역추출법에 의한 프라조신의 회수율은 약 80% 정도로 나타났다.
분석법의 표준지침으로 칼럼으로는 역상 C18 칼럼(10 ㎛, 3.9 × 300 mm)을 쓰고 tert-부틸메칠에텔로 추출하고 0.05% 인산으로 역추출한 검액 (내부표준물질로 염산테라조신 함유) 50 ㎕를 HPLC에 주입하고 이동상으로 물·아세토니트릴·트리에칠아민 혼합액(75 : 25 : 0.1, pH 5.0)을 써서 유속 1.5 mL/min으로 유출시키고 여기파장 250 nm, 형광파장 370 nm에서 내부표준물질과 프라조신을 각각 약 4.8 및 6.2분에서 검출하여 0.5~50 ng/mL의 농도범위에서 작성한 검량선으로부터 혈장 중 프라조신의 농도를 측정한다. 염산프라조신 정의 투여량은 1 정(2 mg)으로 하고 물 240 mL로 경구투여하여 투약 후 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 8, 10 및 12시간째에 채혈하여 혈장을 분리하여 분석시까지 -20℃ 이하에 보존한다.
각 기관별로 건강한 피험자 8인을 대상으로 미니프레스 정 2 mg (염산프라조신 2 mg)을 경구투여하고 투약전과 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 8, 10 및 12 시간째에 채혈한 혈장을 검증된 분석법으로 혈중농도를 측정하여 생체이용률 파라미터를 구하였다. 그 결과 AUC, C$_{max}$, T$_{max}$, Ke 및 t$_{1/2}$값은 각각 82.5 ± 70.9 ng·hr/mL, 17.8 ± 15.4 ng/mL, 2.1 ± 1.1 hr, 0.254 ± 0.111 hr$^{-1}$ 및 1.6 ± 1.2 hr로 나타났다. 이러한 결과는 문헌에 보고된 내용과 유사하였다.
이상의 결과를 볼 때 이 연구에서 확립한 분석법과 생체이용률 시험방법은 프라조신 정의 생물학적동등성 시험의 표준적인 방법으로 활용될 수 있다고 생각된다.

Abstract ▼

Validated high-performance liquid chromatographic determination of prazosin in human plasma was developed using fluorescence detection, and bioavailability study of Minipress Tablets 2 mg (reference drug: Pfizer) was conducted sequentially in three different institutions. From the plasma prazocin co

Validated high-performance liquid chromatographic determination of prazosin in human plasma was developed using fluorescence detection, and bioavailability study of Minipress Tablets 2 mg (reference drug: Pfizer) was conducted sequentially in three different institutions. From the plasma prazocin concentration vs. time curves of 24 healthy volunteers of the three institutions, the following parameters were obtained: area under the plasma concentration-time curve (AUC), peak plasma concentration (C$_{max}$), time to reach peak plasma concentration (T$_{max}$), and elimination half-life ($t_{1/2{\beta}}$). The AUC, C$_{max}$ and T$_{max}$ values were found to be 82.5 ± 49.6 ng·hr/mL, 17.9 ± 11.0 ng/mL and 2.1 ± 0.05 hour, respectively. The elimination phase followed first order kinetic and the mean elimination rate constant was 0.302 ± 0.07 hr$^{-1}$. The $t_{1/2{\beta}}$ was calculated to be 2.4 ± 0.5 hour.
Based on the evaluation of analytical conditions and assay validation obtained from three different institutions, the protocol for the bioequivalence study of prazosin hydrochloride tablets was suggested as follows. Human plasma samples (1.0 mL) spiked with known concentrations of prazosin hydrochloride and 50 ng of terazosin hydrochloride as an internal standard are alkalinized with 200 ㎕ of 2 N NaOH and extracted with 7 mL of tert-butylmethyl ether for 7 min. Extracts are centrifuged and 5 mL-portions of organic layer are back-extracted with 200 ㎕ of 0.05 % phosphoric acid for 3 min. Fifty microliters of centrifuged aqueous layer are injected into the RP octadecyl column and eluted with a mixture of water, acetonitrile and triethylamine (75 : 25 : 0.1, v/v, pH 5.0 adjusted with phosphoric acid) at a flow rate of 1.5 mL/min. Fluorescence detector is set at 250 nm (excitation) and 370 nm (emission). Using this assay method, bioavailability study is conducted to investigate the pharmacokinetic behavior and bioequivalence of prazosin hydrochloride tablets in 8 healthy Korean volunteers after a single dose ( 2 g) administration. Each volunteer receives one tablet of 2 mg dose with 240 mL of water. Following oral administration, plasma samples are obtained at 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 8 and 12 hour, and prazosin concentrations in plasma samples are determined by above methods using a calibration curve constructed in the concentration range 0.5 ~ 50 ng/mL. Assay results obtained are statistically evaluated according to the bioequivalence guidance of KFDA.

목차 Contents

• 최종보고서 ...1
• 제출문 ...2
• 연구사업 최종보고서 요약문 ...3
• Project Summary ...4
• 요약문 ...4
• 영문요약문 ...6
• 목차 ...8
• 제1장 서론 ...9
• 제2장 국내.외 기술개발 현황 ...11
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ...12
• 제1절 제1세부기관의 염산프라조신의 생체이용률시험 결과보고서 ...15
• 제2절 제2세부기관의 염산프라조신의 생체이용률시험 결과보고서 ...15
• 제3절 제3세부기관의 염산프라조신의 생체이용률시험 결과보고서 ...15
• 제4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ...15
• 제5장 연구개발결과의 활용성과 및 계획 ...16
• 가. 계량적 성과 ...16
• 나. 성과내용기술 ...16
• 다. 활용계획 ...16
• 제6장 기타 중요변경사항 ...16
• 제7장 품목별 표준 생물학적동등성시험 지침작성 ...17
• 가. 서론 ...17
• (1) 약리작용, 효능효과 및 용법용량...17
• (2) 약물동태 ...19
• 나. 생물학적 동등성 시험 ...19
• 다. 참고문헌 ...21
• 제8장 참고문헌 ...21
• 총괄연구과제 요약...23
• [첨부] 기관별 세부기관별 결과보고서 ...25
• 제1절 제1세부기관의 염산프라조신의 생체이용률시험 결과보고서 ...26
• 제2절 제2세부기관의 염산프라조신의 생체이용률시험 결과보고서 ...50
• 제3절 제3세부기관의 염산프라조신의 생체이용률시험 결과보고서 ...69