초록 ▼

현재 국내에서는 대부분의 체외진단용 제제의 제조자는 자사 기준품을 이용하여 품질관리를 실시하고 있어 품질보증에 대한 객관적 신뢰성이 떨어지게 된다. 그러나 국내 진단키트의 검정이나 검사실의 품질관리를 위해서 국제 표준품이나 다른 나라의 국가표준품을 구입하여 사용하기에는 이들이 매우 고가일 뿐 아니라 지속적이고 안정적인 공급을 보장받을 수 없다. 또한 이들은 국내에서 유행하는 HBV genotype과 subtype을 반영하지 못하는 한계가 있다. 본 연구에서는 이러한 한계를 극복하기 위하여 국내 HBsAg 진단키트 품질관리를 위한 표

현재 국내에서는 대부분의 체외진단용 제제의 제조자는 자사 기준품을 이용하여 품질관리를 실시하고 있어 품질보증에 대한 객관적 신뢰성이 떨어지게 된다. 그러나 국내 진단키트의 검정이나 검사실의 품질관리를 위해서 국제 표준품이나 다른 나라의 국가표준품을 구입하여 사용하기에는 이들이 매우 고가일 뿐 아니라 지속적이고 안정적인 공급을 보장받을 수 없다. 또한 이들은 국내에서 유행하는 HBV genotype과 subtype을 반영하지 못하는 한계가 있다. 본 연구에서는 이러한 한계를 극복하기 위하여 국내 HBsAg 진단키트 품질관리를 위한 표준품과 표준패널을 확립코자 하였다.
표준패널 후보물질은 국내에서 유행하는 HBV genotype과 subtype, HBsAg 역가 그리고 변이형 등이 반영되도록 구성하였다. 표준품 제조를 위해서 HBV genotype과 subtype이 C2, adr과 C1, adw인 2종의 후보물질을 선정하였다. 표준패널 후보물질은 원혈장 그대로 분병하여 표준품을 제조하였으며, 표준품 후보물질은 원혈장을 50IU/mL로 희석 후 다시 계대희석하여 표준품을 제조하였다. 표준패널 후보품에 대하여 국내에서 주로 사용되는 CLIA 3종, MEIA 1종, EIA 3종 등 7종의 시약을 사용하여 4개 기관에서 공동연구를 시행하였다. 표준품 후보품에 대해서는 CLIA 1종, EIA 3종을 사용하여 7개 기관에서 공동연구를 시행하였다. 보존제인 Bronidox와 냉동-해동 반복에 따른 영향을 조사하기 위해 강양성 혈장을 이용한 농도별 희석혈장에서 HBsAg 농도변화를 측정하였다
공동연구결과 표준패널 후보물질은 모든 시약에서 음성결과를 보이는 후보물질 2개와 HBsAg 농도가 다양한 양성 후보물질 16개를 포함하여 표준패널로 선정하였다. 표준품 후보품은 계대희석한 모든 농도에서 직선성을 보여 표준품으로 확립하기에 적합한 것으로 나타났다. Bronidox 첨가나 10회 냉동-해동에 따른 HBsAg 농도 변화를 측정한 결과 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다.
본 연구결과 HBV genotype과 subtype이 C2, adr과 C1, adw인 2종의 표준품을 확립하였으며 다양한 역가가 포함되고 국내 HBV genotype과 subtype이 반영된 18개의 HBsAg 표준패널을 확립하였다.

Abstract ▼

Currently most Korean manufacturers of in-vitro diagnostic medical devices use in-house prepared materials to get approval of in-vitro diagnostic medical devices. However, because International standards or National standards(NS) of other countries are of high cost and a sustainable supply cannot be

Currently most Korean manufacturers of in-vitro diagnostic medical devices use in-house prepared materials to get approval of in-vitro diagnostic medical devices. However, because International standards or National standards(NS) of other countries are of high cost and a sustainable supply cannot be guaranteed, they are not appropriate to be used as materials for National validation or quality control of in-vitro diagnostic medical devices. They also have the limitation that they do not reflect the HBV genotypes and subtypes that are prevalent in Korea. This study was conducted to established NSs and standard panels to be used for quality control of HBsAg diagnostic kits used in Korea.
Candidates for standard panels were selected to reflect the HBV genotypes and subtypes prevalent in Korea, varying HBsAg concentration and if possible also HBV mutants. For the production of NSs 2 candidate materials with C2, adr and C1, adw genotype and subtype were selected. Candidates for standard panels were filled into the final containers in their original plasma state. Candidates for the NSs were first diluted to a HBsAg concentration of 50IU/mL and then further four-diluted to give 5 working standards. Candidates for standard panels were subjected to collaborative study using 7 assays(CLIA 3, MEIA 1, EIA 3) that was performed at 4 laboratories. Candidates for the NSs were further tested with 1 CLIA assay and 3 EIAs by 7 collaborating laboratories. We also evaluated the effect of Bronidox, the preservative used, and the effect of repeated freeze-thawing on the HBsAg concentration in serial diluted plasma.
As a results of a collaborative study, 2 candidate materials that showed negative results for all assays and 16 candidate materials with varing HBsAg concentration were chosen to candidate the standard panel.
Collaborative study showed that candidate materials for NSs maintained linearity at all dilutions and that they were acceptable to be used as NSs. Addition of Bronidox did not have a statistically significant effect on HBsAg concentration. Repeated freeze-thawing up to 10 times also showed no statistically significant effect on HBsAg concentration.
As a result of this project, we have established two NSs with C2, adr and C1, adw genotype and subtype. A standard panel reflecting HBV genotypes and subtypes prevalent in Korea that was composed of plasma with varying levels of HBsAg concentration was also established.

목차 Contents

• 용역연구사업 연구결과보고서...1
• 제 출 문...2
• 목 차...3
• I. 연구개발결과 요약문...4
• 연구결과보고서 요약문...4
• Summary...6
• II. 총괄연구개발과제 연구결과...8
• 제 1 장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표...8
• 제 2 장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법...11
• 제 3 장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과...17
• 제 4 장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...27
• 제 5 장 총괄연구개발과제의 연구성과...30
• 제 6 장 기타 중요변경사항...32
• 제 7 장 참고문헌...33
• III. 총괄 연구과제 요약...34