초록 ▼

현재의 백신기술의 문제점 및 단점을 대폭 개선하기 위해 경구백신 공학 기술이 연구되 고 있다. 경구 백신 공학 기술의 개발 방향은 현재 백신기술의 문제점 및 단점으로 제시되고 있는 근육,피하투여로 인한 감염원 예방에 직접 작용하는 면역성 유도의 부족,개개의 질병 을 대상으로 제조된 단가(monovalent) 백신의 취약점 그리고 사멸백신, subunit 백신, attenuated 백신의 특이 면역원성 유도의 취약점등의 개선을 목표로 경구투여를 통한 생 백 신을 개발하여 점막면역을 통한 질병의 직접적인 감염지역을 차단함으로 질병 예방

현재의 백신기술의 문제점 및 단점을 대폭 개선하기 위해 경구백신 공학 기술이 연구되 고 있다. 경구 백신 공학 기술의 개발 방향은 현재 백신기술의 문제점 및 단점으로 제시되고 있는 근육,피하투여로 인한 감염원 예방에 직접 작용하는 면역성 유도의 부족,개개의 질병 을 대상으로 제조된 단가(monovalent) 백신의 취약점 그리고 사멸백신, subunit 백신, attenuated 백신의 특이 면역원성 유도의 취약점등의 개선을 목표로 경구투여를 통한 생 백 신을 개발하여 점막면역을 통한 질병의 직접적인 감염지역을 차단함으로 질병 예방효과를 극 대화하고, 특이적으로 또한 다가(multivalent)의 백신을 개발하여 기존의 혼합백신의 단점을 대폭 개선하며 투여에 따른 부작용을 최소화한 차세대 첨단 백신기술을 확립하고자 한다. 다양한 면역증진반응 유도를 통한 경구 백신공학기술의 개발 목표로는 상기에서 언급한 바와 같은 기존 백신기술의 제반 문제점 및 단점을 대폭 개선한 경구 백신공학 기술을 확립 하기 위하여 장점막등 체내 점막을 통해 체내세포에 항원 또는 항원유전자 전달시스템 기술 의 개발, 다가 항원의 세포표면 발현을 통해 항원전달세포에 더욱 효과적인 면역결정기 제시 기술의 개발,숙주세포의 세포내(cytosol)에 직접적인 항원전달을 유도하며 숙주 특이항원과 결합된 특이면역성 유도 기술의 개발 및 대상 항원의 발현극대를 위한 새로운 발현벡터 제조 기술의 개발을 추진하고자 한다.

Abstract ▼

A Bacillus subtilis chungkookjang secreting high viscous poly-glutamic acid (?-PGA) was isolated from the traditional Korean fermented bean-paste, Chung-Kook-Jang. Poly-?-glutamic acid (?-PGA) is a polypeptide that glutamate is polymerized via the?-amide linkage and is synthesized by the poly-?-glut

A Bacillus subtilis chungkookjang secreting high viscous poly-glutamic acid (?-PGA) was isolated from the traditional Korean fermented bean-paste, Chung-Kook-Jang. Poly-?-glutamic acid (?-PGA) is a polypeptide that glutamate is polymerized via the?-amide linkage and is synthesized by the poly-?-glutamate (?-PGA) synthetase complex consisting of pgsB, pgsC, and pgsA (pgsBCA system). The pgsBCA system associated with bacterial cell membranes and is predicted to integrate into the outer membrane of the Bacillus subtilis surface. Thus we designed a new surface display system by introducing cell surface protein pgsBCA into the E.coli-Lactobacillus shuttle vector (pHAT-pgsBCA), which include the high constitutive expression promoter to facilitate high expression of proteins without IPTG induction. We checked the possibility that cell surface protein, pgsBCA is used as an anchor protein by investigating the expression of the S epitope of hepatitis B virus protein fusion to pgsBCA motif and the immunogenicity of surface-displayed eHBs on the recombinant live Lactobacilli was assessed in mice inoculated intranasally and orally. Inoculation resulted in significantly level of eHBs-specific serum IgG and intestinal, bronchoalveolar IgA antibody. Thus, this new Lactobacillus surface display system may provide an effective mean for inducing mucosal and systemic immune response.

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요...27
• 제 1 절 연구개발의 개요...27
• 제 2 절 연구개발의 최종목표...29
• 제 3절 연구개발의 필요성...30
• 1. 연구개발의 경제 사회 기술적 중요성...30
• 제 2 장 국내외 기술 개발 현황...33
• 제 1 절 국외의 기술동향 및 수준...33
• 1. 표면발현 기술이용...33
• 2. 점막면역계...34
• 3. 점막항원 전달계...34
• 제 2 절 국내의 기술동향 및 수준...35
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과...38
• 제 1 절 세포표면 발현 체계 확립 및 경구백신개발을 위한 항원 발현 기술개발...38
• 1. 빙핵활성단백질(INP)를 이용한 세포표면 발현 체계의 최적화...38
• 2. 폴리감마글루탐산 생합성효소계를 이용한 세포표면 발현체계의 확립 및 항원발현 기술을 이용한 경구백신개발...51
• 제 2 절 다가 항원 발현 및 전달 체계 개발...125
• 1. 알파 바이러스를 이용한 3종 이상의 다가 항원 발현 체계 구축...125
• 제 3 절 원형 바이러스 유사입자 발현 체계 구축...137
• 1. 알파 바이러스계 발현 체계를 이용한 HIV 바이러스 유사입자 발현...130
• 2. 영장류 실험을 위한 SHIV-like particle 생산...174
• 3. Yeast에서의 바이러스 항원 발현 및 유사입자 제조...182
• 제 4 장 목표 달성도 및 관련분야에의 기여도...191
• 제 1 절 연구개발목표 및 내용...191
• 1. 연구개발의 최종목표...191
• 2. 단계별/연차별 연구개발 목표 및 내용...191
• 제 2 절 연구평가의 착안점 및 척도...196
• 1. 단계별/연차별 평가의 착안점 및 척도...196
• 제 3 절 연구개발 목표의 달성도...199
• 1. 연구개발 목표의 달성도...199
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...202
• 1. 신규 표면 발현 시스템에 의한 경구투여 제제의 활용성...202
• 2. 다가항원 및 단백질 발현체계의 활용성...207
• 3. 원형 바이러스 유사입자 발현...208
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...209
• 제 7 장 참고문헌...212