초록 ▼

현재 대부분의 체외 진단키트 제조사들은 진단키트의 검정이나 품질관리를 위해 국제표준품이 나 상용화된 표준패널을 사용하고 있다. 이들 물질들은 가격이 고가이고 사용량이 제한적이어서 지속적으로 사용하기에는 어려움이 있다. 특히 HCV 진단키트의 민감도를 평가하기 위해서는 저역가 검체를 사용하는 것이 중요하나 이들 검체를 확보하는 것은 매우 어렵다. 본 연구에서는 HCV 진단키트 품질관리를 위해 저역가의 물질이 포함되고 국내에서 유행하는 HCV genotype과 subtype이 반영된 HCV 표준패널을 확립하고자 하였다.
대한적십자

현재 대부분의 체외 진단키트 제조사들은 진단키트의 검정이나 품질관리를 위해 국제표준품이 나 상용화된 표준패널을 사용하고 있다. 이들 물질들은 가격이 고가이고 사용량이 제한적이어서 지속적으로 사용하기에는 어려움이 있다. 특히 HCV 진단키트의 민감도를 평가하기 위해서는 저역가 검체를 사용하는 것이 중요하나 이들 검체를 확보하는 것은 매우 어렵다. 본 연구에서는 HCV 진단키트 품질관리를 위해 저역가의 물질이 포함되고 국내에서 유행하는 HCV genotype과 subtype이 반영된 HCV 표준패널을 확립하고자 하였다.
대한적십자사 혈액원 선별검사에서 양성 결과를 보인 308개의 양성 혈액을 수집하였다. 모든 혈액에 대하여 EIA 3종, CIA 1종 총 4종의 검사시약을 이용하여 선별검사를 실시하였다. HCV 패널을 제조하기 위하여 선별검사 결과 1종 이상의 검사시약에서 양성 결과를 보인 혈액에 대하여 HCV 항체 확인검사를 실시하였고 모든 혈액에 대해서는 HCV RNA 검사결과를 조회하였다. 선별 검사 및 확인검사 결과를 바탕으로 HCV 저역가 포함된 17개의 양성혈액과 모든 검사에서 음성 결과를 보이는 혈액 2개를 포함하여 최종 19개의 HCV 표준패널 후보물질을 선별하였다. 선별된 후보물질에 대해서는 HCV genotyping과 subtyping을 실시하였다. 표준패널 후보물질은 원료혈장 그대로 분병하였으며 보존제로 Bronidox를 첨가하였다. 표준패널 후보품에 대해서는 국내의료기관 검사실에서 많이 사용하고 있는 CIA 검사시약 3종, EIA 2종 등 총 5종의 검사시약을 사용하여 7 개 검사기관에서 공동연구를 수행하였다. 안정성검사로 보존제 첨가 및 냉동 해동에 따른 HCV 역가변화를 평가하였다. 보존제 첨가에 따른 역가의 변화가 있는 것으로 나타났으나 결과 판정에 는 영향을 주지 않아 분병시 보존제를 첨가하였다. 정동 해동에 따른 변화는 없는 것으로 나타났다.
본 연구결과 HCV의 다양한 역가가 포함되고 국내에서 유행하는 HCV genotype 및 subtype 이 반영된 19개의 HCV 혼합역가 표준패널을 제조하였다.

Abstract ▼

Currently International Standards or commercially available reference panels are used for the validation and quality assessment of in-vitro diagnostic medical devices. However, due to their high cost and limited quantity sustainable use of these materials might get difficult. Sample with a low anti-

Currently International Standards or commercially available reference panels are used for the validation and quality assessment of in-vitro diagnostic medical devices. However, due to their high cost and limited quantity sustainable use of these materials might get difficult. Sample with a low anti-HCV titer are important for validating the sensitivity of HCV diagnostic kits, but it is difficult to obtain these samples. This study was conducted to establish a mixed titer performance panel for quality control of HCV diagnostic kits.
308 plasma units with reactive results on HCV screening were collect from Korean Red Cross blood centers. Anti-HCV was tested using three EIA assays and one CIA assay on all units. Units reactive on more than one assay were subjected to HCV RIBA testing. The HCV RNA test result of all units was also evaluated. Based on the results of screening and confirmatory testing 17 anti-HCV positive units and 2 negative units were selected as candidate materials for the mixed titer performance panel. These candidate materials were subjected to genotyping and subtyping. After addition of Bronidox as a preservative, the candidate materials were distributed into their final containers without further processing. A collaborative study with seven participating laboratories was conducted using three CIA assays and two EIA assays. The reactivity of anti-HCV assays before and after addition of Bronidox was evaluated and found to have an effect on the reactivity. However, because it did not affect interpretation of test results, Bronidox was used as a preservative for the final product. Effect of repeated freeze-thawing was found to be statistically insignificant.
As a result of this study a HCV mixed titer performance panel comprised of 19 samples with varying anti-HCV titers and with HCV genotypes and subtypes that are prevalent in Korea has been established.

목차 Contents

• 용역연구개발과제 최종보고서 ... 1
• 표지 ... 2
• 제출문 ... 4
• 목차 ... 5
• I. 총괄연구개발과제 요약문 ... 7
• 1. 국문 요약문 ... 7
• 2. Summary ... 9
• II. 총괄연구개발과제 연구결과 ... 11
• 제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 ... 11
• 1.1 총괄 연구개발과제의 목표 ... 11
• 1.2 총괄 연구개발과제의 목표달성도 ... 14
• 1.3 총괄 국내·외 기술개발 현황 ... 14
• 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ... 18
• 2.1 HCV 양성혈액 확보 ... 18
• 2.2 HCV 선별 및 확인검사 ... 18
• 2.3 HCV 표준패널 후보물질 선정 ... 19
• 2.4 HCV genotype 및 subtype 분석 ... 19
• 2.5 HCV 표준패널 후보물질 분병 ... 22
• 2.6 HCV 표준패널 후보물질에 대한 공동연구 ... 22
• 2.7 안전성 평가 ... 23
• 2.8 HCV진단키트 품질관리를 위한 표준패널 제조 및 확립 ... 24
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ... 25
• 3.1 HCV 양성혈액 확보 ... 25
• 3.2 HCV 선별 및 확인검사 ... 25
• 3.3 HCV 표준패널 후보물질 선별 ... 30
• 3.4 HCV genotype 및 subtype 분석 ... 30
• 3.5 HCV 표준패널 후보물질 분병 ... 32
• 3.6 HCV표준패널 후보물질에 대한 공동연구결과 ... 32
• 3.7 안전성 평가 ... 34
• 3.8 HCV 진단키트 품질관리를 위한 표준패널 제조 및 확립 ... 37
• 3.9 고찰 ... 38
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 40
• 4.1 총괄활용성과 ... 40
• 4.2 총괄활용계획 ... 41
• 제5장 총괄주요연구 변경사항 ... 41
• 제6장 총괄참고문헌 ... 42
• 제7장 총괄첨부서류 ... 43