초록 ▼

1차 년도에는 단백질/펩티드성 호르몬, 고포도당, 스테로이드성 호르몬 및 신경전달물질을 포함한 세포기능 조절인자가 배아줄기세포의 세포막 물질/이온 운반계와 세포 증식에 미치는 영향 및 그 세포신호전달기전을 분자생물학적 그리고 생화학적 기법, 즉 RT-PCR, western blotting, confocal imaging analysis, uptake experiments, immunofluorescence staining 등을 활용하여 조사하였음. 줄기세포 배양 시 고포도당, EGF, insulin 및 ANG II를 첨가하여 이들이

1차 년도에는 단백질/펩티드성 호르몬, 고포도당, 스테로이드성 호르몬 및 신경전달물질을 포함한 세포기능 조절인자가 배아줄기세포의 세포막 물질/이온 운반계와 세포 증식에 미치는 영향 및 그 세포신호전달기전을 분자생물학적 그리고 생화학적 기법, 즉 RT-PCR, western blotting, confocal imaging analysis, uptake experiments, immunofluorescence staining 등을 활용하여 조사하였음. 줄기세포 배양 시 고포도당, EGF, insulin 및 ANG II를 첨가하여 이들이 당, 아미노산 및 이온 운반계에 미치는 영향을 조사하였음. 그리하여 포도당, EGF 및 ANG II에 의한 포도당 운반계 활성 변화와 칼슘 운반계의 변화를 밝혀냄으로써 GLUT가 줄기세포에 기능분화 지표로써 활용될 수 있는 가능성을 보여 주었음. 1차 년도의 연구를 바탕으로 2차년도에는 기능조절인자 및 다양한 사이토카인과 세포 내 기능조절물질을 폭넓게 응용하여 각 조절인자들이 세포 증식을 유도하는 다양한 신호전달체계를 조사하였음. 이러한 연구를 수행하는데 있어서 1차년도 에서 응용되었던 기법과 FACS, luciferase assay system, siRNA transfection 등을 중점적으로 활용하였음. 이들 조절인자들은 EGF receptor tyrosine kinase, E type PGE2 receptor, PI3K/Akt, Ca2+/PKC, p38, p44/42 MAPKs 등을 통해 protooncogenes의 유전자 발현과 세포주기 조절단백질 발현을 증가시켰음. 또한 H2O2는 Ca2+/PKC, MAPKs, NF-kB를 조절하여 포도당 운반계의 활성을 조절하였음. 3차 년도에는 앞선 연구 결과를 토대로 하여 이들 조절인자들이 세포와 세포사이 물질교환 (gap junction)에 미치는 영향 및 배아줄기세포 기능조절에서의 역할을 밝혀내었음. 더불어, 병태생리학적 조건 하에서, 배아줄기세포의 기능 및 증식 조절 기전을 규명하였음. 3차년도 연구를 수행하기 위해 상기 실험 기법 및 hypoxic incubation chamber 및 Lucifer yellow scrapping dye transfer assay등을 활용하였음. 이 연구를 통해 EGF는 gap junction의 인산화를 통해 세포 증식을 촉진하는 것을 규명하였으며, 고포도당과 단시간의 저산소 조건하에서 증식 및 포도당 흡수가 증가되는 것을 확인하였음. 또한 장시간의 저산소 조건하에서는 세포사멸을 유도하였으며, 이는 acetylcholine 전처리에 의해 억제되는 것을 밝혔음.

Abstract ▼

In order to use the embryonic stem cells for cell-based therapy, it is inevitable to analyze the aspect of expression of cell function and functional regulation by means of various functional regulatory factors as well as elucidating of embryonic stem cell specific characteristics. Therefore, this s

In order to use the embryonic stem cells for cell-based therapy, it is inevitable to analyze the aspect of expression of cell function and functional regulation by means of various functional regulatory factors as well as elucidating of embryonic stem cell specific characteristics. Therefore, this study was conducted to find the functional regulatory-specific marker functions through the analyzing of expression patterns, which is regulated by various functional regulating factors in embryonic stem cells.
In order to regulate the function of embryonic stem cells at an objects through the regulation of characteristics of embryonic stem cells, it is necessary to study for elucidation of functional mechanisms and regulatory mechanisms of expression of specific marker function. Thus, this study was carried out to analyze their regulatory mechanisms.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 보고서 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...7
• CONTENTS...10
• 목차...11
• 제1장 연구개발과제의 개요...12
• 제1절 연구과제범위...12
• 제2절 연구개발의 필요성...13
• 제2장 국내외 기술개발 현황...15
• 제1절 현재까지의 연구개발 실적...15
• 제2절 국외 기술개발 현황...15
• 제3절 국내 기술개발 현황...17
• 제4절 현기술 상태의 취약성...18
• 제5절 앞으로의 전망...19
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...20
• 제1절 연구개발 목표 및 내용...20
• 제2절 연구방법...21
• 제3절 연구결과...28
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...54
• 제1절 연구목표 달성도...54
• 제2절 연구개발 실적...55
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...57
• 제1절 기대성과...57
• 제2절 활용방안...57
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...59
• 제1절 해외기관과 협력사업 수행...59
• 제2절 연구결과 공유...60
• 제7장 참고문헌...64